检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第5期40卷 579-586页

作者：李佳铭王艺璇杨宁爱马慧慧兰敏刘春兰赵志军宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏病原微生物重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心银川750004

目的探究刚地弓形虫棒状体蛋白16 (ROP16)在小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)中的表达及其对细胞极化和凋亡的影响和相关机制。方法利用携带绿色荧光标签的ROP16过表达慢病毒转染MH-S细胞,构建稳定表达ROP16的ROP16-MH-S细胞株(过表达组),... 详细信息

目的探究刚地弓形虫棒状体蛋白16 (ROP16)在小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)中的表达及其对细胞极化和凋亡的影响和相关机制。方法利用携带绿色荧光标签的ROP16过表达慢病毒转染MH-S细胞,构建稳定表达ROP16的ROP16-MH-S细胞株(过表达组),同时设空载体慢病毒转染对照组(空载体组)和无转染对照组(对照组)。转染72 h后免疫荧光法检测ROP16-MH-S中ROP16的表达及其在细胞中的定位。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的转录水平为内参照,RT-qPCR检测ROP16-MH-S细胞中促炎(M1)因子白细胞介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、 IL-18、 IL-6、 IL-12和抗炎(M2)因子IL-10、转化生长因子-β(TGF-β),以及抑凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)和促凋亡基因Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3 (Caspase 3)、 Caspase 9等mRNA的相对转录水平;Western blotting检测ROP16-MH-S细胞中极化蛋白精氨酸酶1 (Arg-1)、信号转导和转录激活因子3 (STAT3)、 705位点磷酸化(pTyr705)-STAT3、 STAT6、 pTyr641-STAT6和凋亡蛋白Caspase 9、 Caspase 3、 Bcl-2、 Bax蛋白的相对表达水平;流式细胞术检测ROP16-MH-S细胞的凋亡情况。组间比较采用单因素方差分析。结果转染后72 h,空载体组和过表达组90%以上的细胞可见较强的绿色荧光,过表达组细胞中可见明显红色荧光聚集在ROP16-MH-S细胞核及其周围。RT-qPCR结果显示,过表达组ROP16 mRNA的相对转录水平为8 023.459±39.325,高于空载体组(5.540±0.001)(F=83 188, P <0.01);Western blotting检测结果显示,过表达组ROP16蛋白的相对表达水平为16.349±0.746,高于空载体组(1.291±0.333)(F=831.7, P <0.01)。RT-qPCR结果显示,过表达组促炎(M1)因子IL-1β、 TNF-α、 IL-18、IL-6、 IL-12 m RNA的相对转录水平分别为0.495±0.002、 0.337±0.007、 0.378±0.014、 0.474±0.035和0.730±0.021,均低于空载体组(0.994±0.043、 1.165±0.034、 0.943±0.005、 1.153±0.028、 0.926±0.031)(F=261.7、 536.5、 1 682.0、 225.0、 78.5, P <0.01);抗炎(M2)因子IL-10、 TGF-β mRNA的相对转录水平分别为7.013±0.032和1.608±0.024,均高于空载体组(0.790±0.031、 1.091±0.027)(F=23 835.0、 200.1, P <0.01)。Western blotting检测结果显示,过表达组Arg-1、 pTyr705-STAT3、 pTyr641-STAT6蛋白相对表达水平分别为2.337±0.089、 3.471±0.046、 3.905±0.045,均高于空载体组(0.871±0.014、 1.482±0.071、 1.514±0.050)(F=640.8、 1 608.0、 3 528.0, P <0.01)。流式细胞术检测结果显示,过表达组细胞凋亡率为(2.990±0.042)%,低于对照组(6.480±0.071)%和空载体组(5.655±0.290)%(F=219.7, P <0.01)。Western blotting检测结果显示,过表达组促凋亡蛋白Bax、 Caspase 3、 Caspase 9的相对表达水平分别为0.558±0.005、 0.640±0.011、0.593±0.026, Bax/Bcl-2为0.453±0.011,均低于空载体组(0.991±0.010、 0.926±0.006、 0.963±0.012、0.834±0.008)(F=2 850.0、 1 200.0、 359.3、 2 337.0, P <0.01)。RT-qPCR检测结果显示,过表达组促凋亡基因Bax、 Caspase 3、 Caspase 9 mRNA的相对转录水平分别为0.588±0.086、 0.563±0.025和0.403±0.014, Bax/Bcl-2为0.158±0.008,均低于空载体组(0.924±0.016、 0.937±0.041、 0.807±0.032、 0.779±0.014)(F=24.7、 78.6、 154.9、 26

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白16 小鼠肺泡巨噬细胞凋亡信号转导和转录激活因子3/6

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不同基因型弓形虫ROP16对人肺上皮细胞凋亡及细胞周期的影响

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中国兽医科学 2024年第12期54卷 1674-1682页

作者：李光琪田梅周毓宁马少寒马珊妮赵志军宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医学检验临床研究中心宁夏银川750004 宁夏医科大学第一临床医学院宁夏银川750004

为探讨弓形虫Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型ROP16对人肺上皮细胞凋亡及细胞周期的影响及分子机制,本研究构建过表达Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ROP16慢病毒载体并转染至人肺上皮细胞BEAS-2B细胞中,经嘌呤霉素筛选获得稳定过表达3种不同基因型ROP16细胞株,培养细胞... 详细信息

为探讨弓形虫Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型ROP16对人肺上皮细胞凋亡及细胞周期的影响及分子机制,本研究构建过表达Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ROP16慢病毒载体并转染至人肺上皮细胞BEAS-2B细胞中,经嘌呤霉素筛选获得稳定过表达3种不同基因型ROP16细胞株,培养细胞并提取全蛋白及总RNA,通过RT-qPCR及Western-blot检测Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型ROP16对细胞凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Caspase9(CAS9)、P53及细胞周期相关蛋白CDK6、P21、Cyclin D1在m RNA和蛋白水平表达量的影响,并进一步探究不同基因型ROP16对细胞STAT3磷酸化水平的影响。Western-blot及RT-qPCR检测结果显示,3种不同基因型慢病毒过表达载体转染BEAS-2B细胞后其ROP16 m RNA和蛋白均明显表达,提示细胞模型构建成功;针对细胞凋亡及细胞周期相关蛋白的检测结果显示,与空白对照组及阴性对照组相比3种基因型ROP16均可引起细胞凋亡相关蛋白BAX和BCL-2下调,Ⅰ型和Ⅲ型ROP16可以引起CAS9及P53表达水平降低,且有统计学差异;Western-blot结果显示,Ⅰ型和Ⅲ型ROP16均可引起细胞周期相关蛋白P21、Cyclin D1及CDK6表达下调,并有统计学差异;此外,Ⅰ型和Ⅲ型ROP16过表达组BEAS-2B细胞中STAT3表达下调,而在Ⅱ型ROP16的BEAS-2B细胞中P-STAT3表达下调,且均有统计学意义。综上所述,Ⅰ型和Ⅲ型弓形虫ROP16相比于Ⅱ型可更显著的调节BEAS-2B细胞凋亡和细胞周期相关因子的表达及细胞STAT3磷酸化程度。

关键词：刚地弓形虫 ROP16 肺上皮细胞细胞周期凋亡

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一株杀白细胞素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子分型及肠毒素检测

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中国病原生物学杂志 2022年第6期17卷 649-653,659页

作者：苏雅静乔霞康宇婷汪澎涛杨宁爱贾伟赵志军宁夏医科大学总医院宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心

目的对宁夏某医院临床分离的1株杀白细胞素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(PVL^(+) MRSA)菌株进行分子分型和肠毒素检测分析,以了解该菌株的遗传学特征。方法按AxyPrep质粒小量制备试剂盒说明书提取细菌DNA,利用葡萄球菌染色体基因... 详细信息

目的对宁夏某医院临床分离的1株杀白细胞素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(PVL^(+) MRSA)菌株进行分子分型和肠毒素检测分析,以了解该菌株的遗传学特征。方法按AxyPrep质粒小量制备试剂盒说明书提取细菌DNA,利用葡萄球菌染色体基因盒mec(staphylococcal cassette chromosome mec,SCCmec)分型、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)以及金黄色葡萄球菌表面蛋白A基因多态性分型(staphylococcus protein A,Spa)技术对PVL^(+) MRSA分离株进行分子分型。采用PCR法检测金黄色葡萄球菌7个管家基因(arcC,aroE,tpi,pta,glpF,gmk和yqiL),将测序结果与MLST数据库进行比对。采用微孔板酶联免疫法(ELISA)检测PVL^(+) MRSA分离株中5种传统肠毒素(staphylococcal enterotoxins A-E,SEA-SEE)的表达情况。结果对PVL^(+) MRSA分离株进行SCCmec基因的多重PCR扩增,扩增产物经测序比对分析,确定该菌株为SCCmecⅣa型。PCR扩增金黄色葡萄球菌7个管家基因后测序比对,获得PVL^(+) MRSA分离株的序列型(sequence types,STs)为ST 3191。PCR扩增spa基因并测序,测序结果与Spa Serve数据库比对,未检出PVL^(+) MRSA分离株的Spa型别(non-typeable,NT)。ELISA检测PVL^(+) MRSA分离株产B和C混合型葡萄球菌肠毒素。结论 PVL^(+) MRSA分离株的分子型为ST 3191-MRSA-SCCmecⅣa型,且产B和C混合型葡萄球菌肠毒素,属于社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型 PCR 肠毒素

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2015-2021年宁夏某三甲医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性变迁

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中华医院感染学杂志 2023年第10期33卷 1468-1472页

作者：王良方李刚侯晓慧尹晓丽王文李莎莎陶佳赵梅胡瑞贾伟师志云宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004

目的了解某医院7年间肺炎克雷伯菌(KP)及耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床分布和抗菌药物耐药性的变化和趋势,为临床医生和决策部门对抗菌药物的合理使用提供支持。方法收集2015-2021年某医院临床分离的KP及CRKP菌株,采用WHONET 5.... 详细信息

目的了解某医院7年间肺炎克雷伯菌(KP)及耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床分布和抗菌药物耐药性的变化和趋势,为临床医生和决策部门对抗菌药物的合理使用提供支持。方法收集2015-2021年某医院临床分离的KP及CRKP菌株,采用WHONET 5.6和SPSS 26.0软件对标本来源、科室来源、药敏试验结果及常用抗菌药物的耐药性变迁进行回顾性分析。结果2015-2021年共分离非重复KP 8181株,急诊科检出率最高(15.69%);主要分离自痰液(51.83%)。KP对头孢唑林、亚胺培南和阿米卡星的平均耐药率分别为64.36%、3.97%和3.31%。2015-2018年肺炎克雷伯菌对常见抗菌药物的耐药性有明显上升,从2018年开始,近两年肺炎克雷伯菌对常见抗菌药物及亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类抗菌药物的耐药性出现下降。2015-2021年共分离CRKP 327株,检出率呈上升趋势,近两年检出率有所下降。CRKP对头孢菌素类等临床常用抗菌药物均表现为高度耐药,对庆大霉素、左氧氟沙星等抗菌药物耐药性出现下降,对多黏菌素B、替加环素敏感。结论2015-2021年间该医院临床分离KP和CRKP菌株对多数抗菌药物的耐药率总体呈先上升后下降的趋势。耐药率总体趋势呈上升趋势,定期进行细菌耐药性监测有助于了解细菌耐药性变化,预防和控制CRKP的产生和传播。

关键词：耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床分布耐药变迁耐药性

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弓形虫Ⅱ型ROP16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞增殖凋亡迁移和侵袭的影响

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中国兽医科学 2023年第3期53卷 396-402页

作者：马慧慧汪鹏涛刘春兰李佳铭王艺璇兰敏赵志军宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总院医学实验中心宁夏银川750004

为探讨弓形虫Ⅱ型(ME49)ROP16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,利用Ⅱ型ROP16(MCF-7-ROP16Ⅱ)和空载体(MCF-7-HBLV)慢病毒载体分别感染MCF-7细胞,用实时荧光PCR、Western-blot验证ROP16蛋白在MCF-7细胞的表达,用CC... 详细信息

为探讨弓形虫Ⅱ型(ME49)ROP16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,利用Ⅱ型ROP16(MCF-7-ROP16Ⅱ)和空载体(MCF-7-HBLV)慢病毒载体分别感染MCF-7细胞,用实时荧光PCR、Western-blot验证ROP16蛋白在MCF-7细胞的表达,用CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡,用细胞划痕试验和Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,用Western-blot检测凋亡相关因子Bax、p53、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3的表达。结果显示:相比MCF-7-HBLV(空载体组)和MCF-7细胞组(空白组),过表达组(MCF-7-ROP16Ⅱ)中ROP16 m RNA和蛋白表达显著升高;过表达组的细胞增殖率、侵袭率和迁移率显著降低(P<0.05);而细胞凋亡率显著升高(P<0.05);促凋亡因子Bax、p53、Caspase-3、Caspase-9高表达(P<0.05),而抗凋亡因子Bcl-2低表达(P<0.05)。结果表明,弓形虫Ⅱ型ROP16蛋白抑制MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭,且诱导细胞凋亡。

关键词：乳腺癌 ROP16蛋白 MCF-7细胞增殖凋亡迁移侵袭

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慢性阻塞性肺疾病患者肠道微生物组成及基因功能分析

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中国微生态学杂志 2022年第10期34卷 1122-1128页

作者：康宇婷苏雅静乔霞汪澎涛杨宁爱赵志军贾伟宁夏医科大学总医院宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750000 宁夏医科大学总医院医学实验中心

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肠道微生物组成、丰度及差异基因功能变化。方法收集我院呼吸科10例确诊COPD患者(COPD组)和10例对照受试者(对照组)粪便样品进行宏基因组高通量测序分析。结果PCA分析组间比较发现2组研究对象粪便样... 详细信息

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肠道微生物组成、丰度及差异基因功能变化。方法收集我院呼吸科10例确诊COPD患者(COPD组)和10例对照受试者(对照组)粪便样品进行宏基因组高通量测序分析。结果PCA分析组间比较发现2组研究对象粪便样品微生物群落差异大,具有可比性。物种组成分析显示:对照组粪便样品中高度富集的菌科主要包括毛螺菌科、理研菌科、韦荣球菌科、优杆菌科、臭杆菌科、氨基酸球菌科、乳杆菌科等,属层面富集的主要包括罗斯菌属、胃瘤球菌属、小杆菌属、真杆菌属、拟杆菌属、粪球菌属、双歧杆菌属等;COPD组粪便样品富集菌群主要包括紫单胞菌科、Selenomonadaceae、巨单胞菌属和韦荣球菌属。物种多样性分析与对照组相比,COPD组多样性更低,差异有统计学意义(W=87,P=0.0039)。物种相关性网络图分析显示与其他门类菌群相比,拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门与其他物种的关联性最强(size=52.07、18.87、14.01)。组间差异基因进行GO功能显著性富集分析,差异基因均富集在如细胞学过程、刺激应答、生物学黏附及调节、代谢过程及信号通路等。KEGG功能显著性富集分析显示差异基因主要富集途径包括代谢途径、次生代谢物合成、淀粉和蔗糖的合成、抗生素的合成等。结论COPD患者肠道内存在菌群及基因功能失调。

关键词：肠道微生物组慢性阻塞性肺疾病宏基因组测序

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过表达碳青霉烯酶OXA-48对菌株耐药性、适应性及宿主细胞Toll样受体信号通路的影响

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中国生物制品学杂志 2023年第9期36卷 1032-1038页

作者：潘亚菲赵志军党甜甜康宇婷贾伟宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院医学科学研究院宁夏银川750004

目的探讨过表达OXA-48对菌株耐药性、适应性及宿主细胞Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路的影响。方法将重组质粒pET32a(+)-OXA-48转化至*** BL21(DE3)中,获得的重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)进行菌落PCR及测序鉴定。以A_(600)(0.3、0.5、0.7)、IPTG终浓度(0.4、0.6、0.8 mmol/L)及诱导时间(2、4、6 h)为变量,mRNA转录水平为响应值,设计3因素3水平正交试验,优化质粒的诱导表达条件。纸片扩散法检测重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)对亚胺培南(Imipenem,IPM)、美罗培南(Meropenem,MEM)、头孢曲松(Ceftriaxone,CRO)、头孢吡肟(Cefepime,FEP)的耐药性;通过生物膜形成试验和血清抵抗力试验检测重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)的适应性。将pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)、pET32a(+)-BL21(DE3)和*** BL21(DE3)菌株分别感染小鼠肺泡巨噬细胞MH-S,qRT-PCR法检测细胞中TLR2、TLR4和NF-кB(p65)基因mRNA转录水平,ELISA法检测细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达情况。结果经菌落PCR及测序鉴定,重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)构建正确。最佳诱导条件:A_(600)为0.3,IPTG终浓度为0.6 mmol/L,诱导时间为2 h。与pET32a(+)-BL21(DE3)菌株比较,重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)对IPM、MEM、CRO和FEP 4种抗生素的耐药性明显降低(t=7.14~22.32,P均<0.05),形成的生物膜明显增多(t=15.69,P<0.05),在血清中的存活率显著升高(P<0.05);pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)感染MH-S细胞24 h后,TLR2基因mRNA转录水平显著增加(t=5.77,P<0.05),感染12及24 h后,TLR4、NF-кB(p65)基因mRNA转录水平显著增加(t=3.71~10.06,P<0.05)。与正常细胞组相比较,pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)感染MH-S细胞6、12和24 h后,IL-6及TNF-α的表达水平显著升高(t分别为7.90~13.44及5.40~6.32,P均<0.01),IL-10表达水平显著下降(t=3.15~4.08,P均<0.05),TGF-β的表达水平差异无统计学意义(t=0.013~1.41,P均>0.05);感染12和24 h时,IL-6表达水平显著高于pET32a(+)-BL21(DE3)组(t分别为2.92和3.79,P均<0.05)。结论过表达OXA-48可降低细菌的耐药性,提高适应性及宿主细胞TLRs信号通路相关因子的转录水平,还可影响宿主细胞下游细胞因子的表达水平。

关键词：碳青霉烯酶OXA-48 耐药性适应性 Toll样受体细胞因子

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弓形虫ROP16蛋白在人白血病细胞THP-1表达及对其细胞增殖与凋亡的影响

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中国人兽共患病学报 2022年第4期38卷 277-284页

作者：陈梅贾伟党甜甜潘亚菲杨宁爱苏雅静赵志军宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室银川750004 宁夏医科大学总院医学实验中心银川750004

目的探讨弓形虫Ⅱ型(Me49)ROP16蛋白在急性单核细胞白血病细胞株THP-1中的表达及其对THP-1细胞增殖与凋亡的影响。方法构建过表达ROP16(overExp-ROP16)和空载体(overExp-NC)慢病毒,通过转染THP-1细胞,72 h后观察荧光表达情况,采用PCR与W... 详细信息

目的探讨弓形虫Ⅱ型(Me49)ROP16蛋白在急性单核细胞白血病细胞株THP-1中的表达及其对THP-1细胞增殖与凋亡的影响。方法构建过表达ROP16(overExp-ROP16)和空载体(overExp-NC)慢病毒,通过转染THP-1细胞,72 h后观察荧光表达情况,采用PCR与Western blot验证ROP16在THP-1细胞中的表达。免疫荧光技术检测ROP16蛋白在THP-1细胞中的定位。CCK-8与流式细胞术检测细胞增殖及凋亡。采用qRT-PCR检测细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA相对表达水平。Western blot检测Bax、Bcl-2、Pro-Caspase-3和Cleaved-Caspase-3蛋白的表达变化。结果构建的过表达ROP16重组慢病毒转染到THP-1细胞后,可观察强荧光信号,ROP16蛋白在THP-1细胞中成功表达。免疫荧光结果表明ROP16蛋白定位于THP-1细胞核。CCK-8与流式细胞术证实ROP16蛋白抑制THP-1细胞的增殖并促进其凋亡(均P<0.05)。与对照组相比,过表达组促凋亡因子Bax、Caspase-3 mRNA高表达(P<0.05),抗凋亡因子Bcl-2 mRNA低表达(P<0.01),Bax与Cleaved-Caspase-3蛋白水平上调(P<0.01),Bcl-2与Pro-Caspase-3蛋白水平下调(P<0.01)。结论构建的慢病毒表达质粒overExp-ROP16可在急性单核细胞白血病细胞株THP-1中表达且通过入核调节凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3而抑制THP-1细胞增殖,促进其凋亡。

关键词：刚地弓形虫 ROP16 THP-1细胞增殖凋亡

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鲍曼不动杆菌abaI基因的克隆表达分析、同源建模及分子对接分析

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化学研究与应用 2022年第12期34卷 2886-2893页

作者：乔霞苏雅静康宇婷汪澎涛贾伟宁夏医科大学总医院宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004

高丝氨酸内脂合成酶(homoserine lactone synthase,abaI)是导致鲍曼不动杆菌生物被膜形成的关键酶之一,对其结构功能的研究有助于我们对抑制生物被膜形成有很大帮助。本研究通过Genebank查找abaI(A1S_0109)蛋白序列,运用分子技术对其进... 详细信息

高丝氨酸内脂合成酶(homoserine lactone synthase,abaI)是导致鲍曼不动杆菌生物被膜形成的关键酶之一,对其结构功能的研究有助于我们对抑制生物被膜形成有很大帮助。本研究通过Genebank查找abaI(A1S_0109)蛋白序列,运用分子技术对其进行表达分析,应用生物分析软件ExPASy、ESPript、MEG5.0、SWISS-MODEL等对其进行结构分析,使用分子对接软件分析抑制剂的关键结合位点。结果显示,在含有pET28a-abaI重组质粒BL21菌株与野生BL21菌株相比生物被膜形成能力以及运动性显著增高。从生成生物膜被膜的定义上,BL21从不产生物被膜菌株,变成了产膜菌株。预测其结构蛋白与TofI蛋白高度相似,通过分子对接首次揭示abaI蛋白抑制剂与abaI蛋白相互作用关系。研究结果显示abaI在BL21中能够促使生物被膜的形成和增强细菌的运动,分子对接揭示了abaI蛋白的相互作用位点,为进一步研究其活性以及抑制剂提供了重要的参考信息。

关键词：鲍曼不动杆菌 abaI 生物被膜克隆与表达分子对接

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耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌分子流行病学特征及耐药性

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中国感染控制杂志 2022年第11期21卷 1053-1059页

作者：兰敏赵志军康宇婷王艺璇李佳铭刘春兰马慧慧贾伟宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏病原微生物重点实验室宁夏银川750004

目的探讨耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)的分子流行病学特征,研究CRE耐药特点及同源性。方法收集宁夏某医院2018年1月—2021年5月临床分离的158株非重复CRE,采用聚合酶链式反应(PCR)检测耐药基因,应用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)联合EDT... 详细信息

目的探讨耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)的分子流行病学特征,研究CRE耐药特点及同源性。方法收集宁夏某医院2018年1月—2021年5月临床分离的158株非重复CRE,采用聚合酶链式反应(PCR)检测耐药基因,应用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)联合EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)进行表型确证,采用质粒接合试验分析bla_(NDM)水平转移情况,运用多位点序列分型(MLST)进行同源性分析。结果158株CRE主要为肺炎克雷伯菌(61株,38.61%),其次是阴沟肠杆菌(37株,23.42%)和大肠埃希菌(23株,14.56%),检出CRE最多的科室为ICU和烧伤整形科,CRE标本来源排名前四的分别是痰、脓性分泌物、引流液和无菌中段尿,检出耐药基因以新德里金属-β-内酰胺酶(NDM)为主。23株大肠埃希菌mCIM联合eCIM试验阳性率达95.65%,质粒接合试验成功将20株大肠埃希菌中15株菌株的bla_(NDM)基因转移到大肠埃希菌J53AZ^(R),接合子菌株对亚胺培南、美罗培南和头孢菌素类抗生素的耐药性较受体菌增强。MLST结果显示,23株大肠埃希菌中检出14种ST型,以ST10和ST410为主。结论该院CRE多来源于ICU,以携带bla_(NDM)基因为主,对临床常用抗菌药物具较高耐药性,医院应当加大抗菌药物使用监管力度,指导临床合理用药。该地区NDM酶亚型逐渐变化,应持续监测以及时发现新亚型。

关键词：耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌分布耐药性大肠埃希菌新德里金属β-内酰胺酶质粒接合

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