目的了解临床分离大肠埃希菌对临床常用抗菌药物的耐药情况,并探讨其外膜蛋白与耐药性的相关性。方法收集2013年全年宁夏医科大学总医院及其分院患者标本中分离的大肠埃希菌共1058株,统计分析其标本来源和科室构成,纸片扩散法测定6种常用抗菌药物(头孢曲松、氨曲南、左氧氟沙星、环丙沙星、庆大霉素、阿米卡星)的药敏性,荧光定量PCR法检测Omp A、Omp F、Omp C m RNA表达水平,蛋白垂直电泳检测Omp A、Omp F和Omp C蛋白的表达水平。结果 1058株大肠埃希菌耐药情况为头孢曲松(67%)、环丙沙星(65.9%)、左氧氟沙星(61.9%)、庆大霉素(50.3%)、氨曲南(48.1%)、阿米卡星(3.7%)、单药耐药(31.0%)、双药耐药(30.9%)和多重耐药(27.9%),在多重耐药株中呈现Omp C m RNA和Omp C蛋白的高表达。结论大肠埃希菌外膜蛋白Omp C表达的强弱与细菌耐药有关,可能是导致细菌耐药的原因之一。
目的观察正常人肝细胞系LO_2和肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p的表达,研究去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达及其基因启动子区Cp G岛甲基化水平的影响。方法用不同浓度(0、5和10μmol/L)去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷处理SMMC-7721细胞,用甲基化特异性PCR法检测miR-1247-5p基因启动子区甲基化水平;用SYBR Green qReal Time PCR法检测miR-1247-5p的表达。结果与正常人肝细胞系LO_2相比,肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达降低(P<0.05)且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平高;经去甲基化药物干预后miR-1247-5p的表达较对照组有明显上调(P<0.01),且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平降低。结论 miR-1247-5p基因甲基化调控可能参与了肝癌的发生。
目的分析大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫RH株的基因表达谱差异。方法以弓形虫RH株速殖子感染SD大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞0h、6h后提取细胞总RNA,采用NimbleGen 12x135K微阵列基因表达分析芯片检测差异表达基因,并对部分表达变化的基因进行Real time PCR验证。结果表达分析芯片涵盖大鼠26 419个基因,对差异表达基因(Fold Change≥4.0)进行聚类分析显示,经弓形虫RH株作用6h和0h的RNA表达谱相比,大鼠肺泡巨噬细胞上调的基因有49个(主要包括Zfp90,Map4k4,Mrpl42等),下调的基因有130个(主要包括Pitx1,Chpt1,Chd6等)。大鼠腹腔巨噬细胞上调的基因有136个(主要包括Map2k3,Il17b,Phka2等),下调的272个(主要包括Tlr2,Tgfb2,Wnt2等)。GO、Pathway分析差异表达的基因,大鼠腹腔巨噬细胞能够引发更多和弓形虫有关的信号通路变化,其肺泡巨噬细胞则不能引起这一效应。Real time PCR和基因芯片检测结果一致。结论大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫不同的表现型,可能和其基因表达差异引起的信号通路变化有关。
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