检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2019年第12期39卷 1-8页

作者：郭乐王淑娥何萌张帆刘宏鹏刘昆梅宁夏医科大学总医院临床病原微生物省级重点实验室银川750021 宁夏医科大学颅脑疾病国家重点实验室培育基地银川750021 宁夏医科大学临床医学院银川750021

目的:利用生物信息学软件评价幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)多价表位疫苗CWAE的抗原结构,经原核表达获得高纯度CWAE蛋白,进而鉴定多价表位疫苗CWAE的免疫学性质。方法:通过生物信息学软件分析H. pylori多价表位疫苗CWAE的抗原结构;... 详细信息

目的:利用生物信息学软件评价幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)多价表位疫苗CWAE的抗原结构,经原核表达获得高纯度CWAE蛋白,进而鉴定多价表位疫苗CWAE的免疫学性质。方法:通过生物信息学软件分析H. pylori多价表位疫苗CWAE的抗原结构;用人工合成的H. pylori多价表位肽融合基因WAE替换重组质粒pET28a-CUE中的UE基因,构建重组质粒pET28aCWAE。然后,将pET28a-CWAE转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,并通过Ni-NTP镍离子亲和层析纯化抗原蛋白CWAE;利用GM1-ELISA鉴定CWAE中CTB组分的黏膜免疫佐剂活性。最后,通过ELISA和小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验检测CWAE激发BALB/c小鼠产生抗***抗体体液免疫和淋巴细胞免疫应答的能力。结果:通过生物信息学软件证实H. pylori多价表位疫苗CWAE具有科学合理的结构;重组表达质粒pET28a-CWAE经PCR、双酶切和基因测序鉴定,融合基因CWAE与设计序列完全一致;重组基因工程菌株pET28a-CWAE/BL21(DE3)经IPTG诱导表达,抗原蛋白CWAE主要以包涵体形式存在,经Ni-NTP镍离子亲和层析纯化,纯度约达93. 2%;GM1-ELISA实验证实,CWAE中CTB组分依旧保持有较好的黏膜佐剂活性;ELISA结果证实CWAE能够激发BALB/c小鼠产生H. pylori特异性抗体,而小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验进一步证实CWAE能够激发针对H. pylori多种致病因子的淋巴细胞免疫反应。结论:H. pylori多价表位疫苗CWAE具有科学合理的抗原结构,经原核表达可获得高纯度抗原蛋白,能够激发BALB/c小鼠产生H. pylori特异性抗体体液免疫和淋巴细胞免疫应答。为研发防治H. pylori感染的多价表位疫苗奠定实验基础。

关键词：幽门螺杆菌多价表位疫苗特异性抗体

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刚地弓形虫Ⅰ/Ⅱ型棒状体蛋白16对小鼠肺泡巨噬细胞极化及炎性反应的影响

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中国血吸虫病防治杂志 2025年第2期 127-135页

作者：李佳铭党甜甜赵志军宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏回族自治区临床病原微生物重点实验室宁夏回族自治区医学检验临床研究中心

目的分析刚地弓形虫Ⅰ、Ⅱ型棒状体蛋白16（rhoptry protein 16,ROP16）对小鼠肺泡巨噬细胞极化状态及炎性反应的影响，为揭示弓形虫感染宿主细胞后机体免疫调节机制及肺弓形虫病临床诊治提供科学依据。方法以小鼠肺泡巨噬细胞为空白... 详细信息

目的分析刚地弓形虫Ⅰ、Ⅱ型棒状体蛋白16（rhoptry protein 16,ROP16）对小鼠肺泡巨噬细胞极化状态及炎性反应的影响，为揭示弓形虫感染宿主细胞后机体免疫调节机制及肺弓形虫病临床诊治提供科学依据。方法以小鼠肺泡巨噬细胞为空白对照组，转染空载体慢病毒的小鼠肺泡巨噬细胞为阴性对照组，转染Ⅰ、Ⅱ型ROP16过表达慢病毒的小鼠肺泡巨噬细胞为Ⅰ、Ⅱ型ROP16过表达组。经嘌呤霉素筛选获得稳定表达Ⅰ、Ⅱ型ROP16的过表达稳转细胞株，在荧光显微镜下观察细胞绿色荧光表达，并通过PCR、Western blotting以及实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,RT-qPCR）进行验证。利用Western blotting检测各组细胞ROP16、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iN OS）、精氨酸酶（arginase,Arg）-1、甘露糖受体（mannose receptor,CD206）、分化簇86（cluster of differentiation 86,CD86）、抗NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3）、半胱天冬酶（caspase）-1、凋亡相关斑点蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC）、白细胞介素（interleukin,IL）-1β蛋白表达水平，采用RT-qPCR检测各组ROP16、iN OS、IL-1β、IL-4、IL-12、IL-18、Arg-1、IL-10、IL-6、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α和转化生长因子（transforming growth factor,TGF）-β mRNA水平。结果弓形虫Ⅰ、Ⅱ型ROP16过表达组及阴性对照组细胞均可观察到90%的细胞表达绿色荧光，空白对照组、阴性对照组及Ⅰ、Ⅱ型ROP16过表达组细胞中ROP16蛋白相对表达量分别为1.000±0.000、1.003±0.020、1.349±0.055、1.376±0.080,ROP16 mRNA相对表达量分别为1.007±0.172、2.030±0.356、1 409.579±75.960、1 413.581±27.712，差异均有统计学意义（F=35.30、811.00,P均<0.01）；两两比较结果显示，Ⅰ、Ⅱ型ROP16过表达组细胞中ROP16蛋白及mRNA表达水平均较空白对照组显著升高（P均<0.01）。Western blotting检测结果显示，4组细胞中iN OS、Arg-1、CD86、CD206、NLRP3、caspase-1、ASC和IL-1β蛋白表达水平差异均有统计学意义（F=124.70、82.40、79.82、919.40、84.74、39.85、2 354.00、65.96,P均<0.05）；两两比较结果显示，Ⅰ型ROP16过表达组细胞中Arg-1、CD206、NLRP3、caspase-1、ASC和IL-1β蛋白表达水平均较空白对照组显著上调（P均<0.001）；Ⅱ型ROP16过表达组细胞中iN OS、CD86、NLRP3、caspase-1、ASC和IL-1β蛋白表达水平均较空白对照组显著上调（P均<0.001）。RT-qPCR检测结果显示，4组iN OS、IL-1β、IL-4、IL-12、IL-18、Arg-1、IL-10、IL-6、TNF-α、TGF-β mRNA表达水平差异均有统计学意义（F=407.00、1 528.00、833.10、267.90、989.80、161.80、461.10、5 529.00、849.60、8 836.00,P均<0.05）；两两比较结果显示，Ⅰ型ROP16过表达组细胞中Arg-1、IL-4、IL-10、TGF-β mRNA表达水平均较空白对照组显著上调（P均<0.001），Ⅱ型ROP16过表达组细胞中iN OS、IL-1β、IL-12、IL-18、IL-6、TNF-α mRNA表达水平均较空白对照组显著上调（P均<0.001）。结论刚地弓形虫Ⅰ型ROP16蛋白可诱导小鼠肺泡巨噬细胞极化为M2为主的表型、Ⅱ型ROP16蛋白可诱导小鼠肺泡巨噬细胞极化为M1为主的表型；Ⅰ、Ⅱ型ROP16蛋白均可激活NLRP3，介导ASC、caspase-1和IL-1β活化，促进炎症反应发生。

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白16 小鼠肺泡巨噬细胞极化炎症

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青年与老年女性乳腺非特殊型浸润性癌临床病理特征分析

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宁夏医科大学学报 2020年第7期42卷 669-672页

作者：王瑞肖王亚鹏乔霞黄凌燕宁夏医科大学总医院肿瘤医院病理科银川750004 宁夏医科大学银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏临床病原微生物重点实验室银川750004

目的探讨青年与老年女性乳腺非特殊型浸润性癌患者的临床病理学特征差异的临床应用价值。方法收集2018—2019年我院212例女性乳腺非特殊型浸润性癌患者临床病理资料,根据年龄分为青年组(≤35岁)、老年组(≥60岁),回顾性分析两组患者的... 详细信息

目的探讨青年与老年女性乳腺非特殊型浸润性癌患者的临床病理学特征差异的临床应用价值。方法收集2018—2019年我院212例女性乳腺非特殊型浸润性癌患者临床病理资料,根据年龄分为青年组(≤35岁)、老年组(≥60岁),回顾性分析两组患者的临床病理特征差异。结果两组患者的癌灶位置、癌灶大小、病理分级、病理分期及淋巴结转移方面差异均无统计学意义(P均>0.05)。老年组ER阳性率(76.3%)比青年组(59.0%)增高(P<0.05);青年组HER2阳性率(66.7%)及Ki67高表达率(76.9%)则高于老年组(47.4%,56.1%,P<0.05);在分子分型方面老年组以Luminal A型居多(39.9%),青年组以HER2亚型为主(41.0%)(P<0.05)。结论青年女性乳腺非特殊型浸润性癌比老年者具有更高侵袭力、增殖活性。

关键词：青年老年乳腺非特殊型浸润性癌临床病理特征

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肺炎克雷伯菌致血流感染的临床特点与耐药性分析

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健康必读 2020年第19期 47-48页

作者：马红王琦宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川 750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川 750004 宁夏医科大学宁夏银川 750004

目的:对肺炎克雷伯菌致血流感染的临床特点与耐药性进行分析.方法:回顾性分析我医院2018年7月至2019年6月自收诊患者血流感染中肺炎克雷伯菌的分布和耐药性,采用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定和药敏试验,部分药敏采... 详细信息

目的:对肺炎克雷伯菌致血流感染的临床特点与耐药性进行分析.方法:回顾性分析我医院2018年7月至2019年6月自收诊患者血流感染中肺炎克雷伯菌的分布和耐药性,采用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定和药敏试验,部分药敏采用纸片扩散法,药敏结果参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)标准,对结果进行判定.使用WHONET5.6软件进行统计分析.结果:肺炎克雷伯菌对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南和阿米卡星比较敏感.结论:患者免疫功能低下是肺炎克雷伯菌感染的主要原因,血流感染中分离的肺炎克雷伯菌耐药性需引临床起高度重视.

关键词：肺炎克雷伯菌临床特点耐药性

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2018年宁夏某院血培养病原菌分布与报警时间分析

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检验医学与临床 2020年第21期17卷 3126-3129页

作者：马红姚瑶赵梅伏慧王琦宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学宁夏银川750004

目的了解血培养病原菌的分布与报警时间的关系,及时指导临床医生准确合理选择抗菌药物。方法采用回顾性调查方法,对宁夏医科大学总医院2018年1-12月门诊及住院患者的1161株血培养阳性菌株的分布和报警时间进行分析。结果1161株血培养阳... 详细信息

目的了解血培养病原菌的分布与报警时间的关系,及时指导临床医生准确合理选择抗菌药物。方法采用回顾性调查方法,对宁夏医科大学总医院2018年1-12月门诊及住院患者的1161株血培养阳性菌株的分布和报警时间进行分析。结果1161株血培养阳性菌株中革兰阴性菌563株(48.49%),革兰阳性菌223株(19.21%),厌氧菌55株(4.74%),真菌23株(1.98%),污染菌297株(25.58%)。位列前5位的菌种分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、布鲁菌及屎肠球菌。血培养阳性主要分布在急诊科、重症监护病房、感染疾病科、儿科和肿瘤科。主要检出菌中<18 h阳性报警的有586株,检出率为50.5%;18~24 h阳性报警的有159株,检出率为13.7%;>24~48 h阳性报警的有247株,检出率为21.3%;>48 h阳性报警的有169株,检出率为14.6%。297株污染菌中89.5%的阳性报警时间≥18 h。结论宁夏医科大学总医院菌种分布有明显的区域特点,布鲁菌为主要血流感染菌。病原菌阳性报警时间短,污染菌株阳性报警时间绝大多数≥18 h。

关键词：血培养报警时间病原菌布鲁菌

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ROP16过表达对THP-1诱导分化巨噬细胞极化的影响

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宁夏医科大学学报 2020年第5期42卷 445-451页

作者：杨宁爱苏雅静贾伟杨红康佳周云花刘学雷康宇婷赵志军宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏医科大学临床病原微生物重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心银川750004

目的探讨弓形虫棒状体蛋白(ROP16)对人外周血单核细胞(THP-1)诱导分化巨噬细胞极化的影响。方法构建ROP16过表达慢病毒载体转染THP-1细胞,筛选得到稳转细胞系,使用佛波脂诱导分化为巨噬细胞,RT-PCR和Western blot分别检测相关mRNA及蛋... 详细信息

目的探讨弓形虫棒状体蛋白(ROP16)对人外周血单核细胞(THP-1)诱导分化巨噬细胞极化的影响。方法构建ROP16过表达慢病毒载体转染THP-1细胞,筛选得到稳转细胞系,使用佛波脂诱导分化为巨噬细胞,RT-PCR和Western blot分别检测相关mRNA及蛋白的表达情况。结果构建ROP16过表达载体,并转染THP-1筛选得到稳定过表达细胞系,佛波脂诱导分化为THP-1源性巨噬细胞。Western blot结果显示,M1型巨噬细胞的标志性蛋白一氧化氮合酶(iNOS)表达量升高,M2型巨噬细胞的标志型蛋白精氨酸酶-1(Arg-1)表达量降低(P均<0.05)。RT-PCR的结果显示,ROP16过表达组iNOS、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达均高于空载体组和阴性对照组(P均<0.05);Arg-1、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA表达均低于空载体组和阴性对照组(P均<0.05)。结论弓形虫ROP16在THP-1分化巨噬细胞内过表达后可诱导细胞向M1型巨噬细胞方向极化。

关键词： THP-1 ROP16 巨噬细胞极化

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单核细胞增生李斯特菌感染的临床分析

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中国感染与化疗杂志 2019年第4期19卷 392-395页

作者：陶佳杨佰虎马红殷国民杨丹顾常梅李刚宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏临床病原微生物重点实验室银川750004 宁夏回族自治区宁东医院检验科

目的了解单核细胞增生李斯特菌感染的临床特点,为完善诊断及经验治疗提供理论依据。方法回顾性分析2015年1月-2017年12月宁夏医科大学总医院单核细胞增生李斯特菌感染患者的临床特点。结果共收集19例患者,女性多于男性,且主要为50岁以... 详细信息

目的了解单核细胞增生李斯特菌感染的临床特点,为完善诊断及经验治疗提供理论依据。方法回顾性分析2015年1月-2017年12月宁夏医科大学总医院单核细胞增生李斯特菌感染患者的临床特点。结果共收集19例患者,女性多于男性,且主要为50岁以上中老年人和10岁以下儿童。标本来源以脑脊液和血液为主,分别占46.2%和42.3%。患者主要临床表现为发热,11例有菌血症。所有送检标本中共收集26株单核细胞增生李斯特菌,取患者第一株菌做药敏试验,19株菌对青霉素、氨苄西林、甲氧苄啶-磺胺甲唑、美罗培南100%敏感。结论单核细胞增生李斯特菌主要引起血流感染和脑膜炎等,若抗生素使用不当,感染的预后不佳。该组患者中分离的单核细胞增生李斯特菌对青霉素、氨苄西林、甲氧苄啶-磺胺甲唑、美罗培南均有较高的敏感率,提示这些药可作为治疗单核细胞增生李斯特菌感染的经验用药。

关键词：单核细胞增生李斯特菌临床表现经验治疗

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宁夏某医院225例非小细胞肺癌患者EGFR基因突变检测结果分析

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检验医学与临床 2020年第10期17卷 1324-1327页

作者：师志云郭雅琪江海峰张玉英赵玥赵倩颖何学虎梁小燕董洁贾伟宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院病理科宁夏银川750004

目的分析宁夏某医院非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测结果。方法选择2014年1月至2017年12月在宁夏医科大学总医院住院的NSCLC患者225例进行回顾性分析,用扩增阻滞突变系统-聚合酶链反应(ARMS-PCR)检测EGFR基... 详细信息

目的分析宁夏某医院非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测结果。方法选择2014年1月至2017年12月在宁夏医科大学总医院住院的NSCLC患者225例进行回顾性分析,用扩增阻滞突变系统-聚合酶链反应(ARMS-PCR)检测EGFR基因突变情况。结果 EGFR基因总突变率50.22%(113/225),最常见突变位点为19外显子19-del及21外显子L858R,突变率分别为21.33%及17.78%,20外显子T790M耐药突变率及20-Ins插入突变(非敏感突变)的突变率分别为3.56%及1.33%;EGFR各外显子双突变共10例;EGFR基因突变率在性别、年龄、民族、季节、标本类型之间差异无统计学意义(P>0.05),在年份、病理类型之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ARMS-PCR可有效应用于临床病理石蜡标本基因突变检测,EGFR基因在19和21外显子存在较高的突变率,其突变亚型能指导小分子表皮生长因子酪氨酸酶抑制剂(EGFR-TKI)的肿瘤靶向治疗。

关键词：非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变扩增阻滞突变系统

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弓形虫RH株调节JAK1-STAT6信号通路诱导人原代肺泡巨噬细胞极化的研究

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中国病原生物学杂志 2019年第9期14卷 1005-1009页

作者：刘学雷杨宁爱康宇婷杨红康佳周云花苏雅静赵志军宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750000 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏医科大学总院医学实验中心

目的探讨弓形虫感染人原代肺泡巨噬细胞的特点以及调节JAK1-STAT6信号通路对人肺泡巨噬细胞极化的影响。方法收集肺癌患者肺泡灌洗液,分离纯化肺泡巨噬细胞并作细胞爬片处理,体外选择1∶1的比例感染弓形虫并设置不同感染时间,Diff染色... 详细信息

目的探讨弓形虫感染人原代肺泡巨噬细胞的特点以及调节JAK1-STAT6信号通路对人肺泡巨噬细胞极化的影响。方法收集肺癌患者肺泡灌洗液,分离纯化肺泡巨噬细胞并作细胞爬片处理,体外选择1∶1的比例感染弓形虫并设置不同感染时间,Diff染色分析巨噬细胞内弓形虫的增殖情况。分别在不同感染时间收集细胞,提取全蛋白,Western blot检测信号通路蛋白的表达;Trizol法提取mRNA,反转录为cDNA后采用Real-time PCR检测相关mRNA的表达。结果成功分离并纯化得到肺泡巨噬细胞并感染弓形虫。Diff染色显示弓形虫可在肺泡巨噬细胞生存繁殖,从24 h开始弓形虫繁殖力较为明显增强,36 h时弓形虫数量显著增多并且从细胞内释放到细胞外。Western blot检测M1型巨噬细胞信号通路蛋白STAT1、P-STAT1和P-NF-κB呈先增高后降低的趋势,以P-NF-κB先升高后增加的趋势尤为明显;M2型巨噬细胞信号通路JAK1、STAT6和P-STAT6信号通路蛋白也呈现逐渐升高的趋势,iNOS的表达呈显著降低的趋势,Arg-1的表达量在6 h时较高(t=9.35,P<0.05)。Real-time PCR检测TNF mRNA相对表达量逐渐降低,iNOS mRNA相对表达量在6 h时升高,之后降低;Arg-1 mRNA相对表达量的相对表达量逐渐升高,48 h时表达量升高尤为显著(t=4.27,P<0.05)。结论弓形虫感染能诱导巨噬细胞表达M2型细胞炎性因子,并抑制M1型细胞因子的表达,可通过JAK1-STAT6信号通路调节人原代肺泡巨噬细胞向M2型巨噬细胞偏移。

关键词： JAK1-STAT6信号通路巨噬细胞极化弓形虫

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宁夏某医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌临床分布及分子机制研究

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检验医学与临床 2020年第18期17卷 2615-2619页

作者：茆永娟伏慧赵梅贾伟宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004

目的分析宁夏地区某三甲综合医院临床标本分离耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的分布及耐药情况,了解该院CRE耐药基因的主要流行现状,为临床抗感染治疗及医院感染防控提供参考。方法收集2017年1月1日至2018年12月31日住院患者临床分离的... 详细信息

目的分析宁夏地区某三甲综合医院临床标本分离耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的分布及耐药情况,了解该院CRE耐药基因的主要流行现状,为临床抗感染治疗及医院感染防控提供参考。方法收集2017年1月1日至2018年12月31日住院患者临床分离的CRE菌株,利用自动化仪器进行细菌鉴定和药物敏感性试验(简称药敏试验)检测,利用改良碳青霉烯酶灭活(mCIM)试验联合乙二胺四乙酸-碳青霉烯酶灭活(eCIM)试验检测耐药菌的表型,并采用PCR检测ESBLs(blaSHV、blaTEM)、碳青霉烯酶(blaKPC、blaNDM、blaVIM、blaIMP、blaOXA-48)共7种主要的耐药基因,最后对数据进行统计分析。结果临床标本共收集CRE菌株77株,主要为肺炎克雷伯菌52株、大肠埃希菌25株;标本来源主要为痰液、无菌中段尿及血液等;标本来源科室主要为肝胆外科、重症监护室(ICU)和急诊科;药敏试验表明77株耐药菌对β-内酰胺类药物的耐药率均大于95.00%,对喹诺酮类抗菌药物耐药率均为75.00%左右;mCIM试验阳性有58株,eCIM试验阳性有35株、阴性有23株。应用PCR检测耐药基因,ESBLs以blaTEM为主,检出率为49.35%,blaSHV检出率为23.38%;碳青霉烯酶基因以blaNDM为主,检出率为36.36%,其余blaKPC、blaOXA-48阳性率分别为24.68%、15.58%,未检测到blaVIM和blaIMP基因。测序发现28株blaNDM阳性菌中有10株为blaNDM-1,18株为blaNDM-5。结论宁夏某医院CRE耐药基因检出率较高,CRE对常用抗菌药物耐药率高,应多部门联动加强对CRE的监测与防控,合理应用抗菌药物。

关键词：耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药性 NDM mCIM eCIM

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