检索结果-内蒙古大学图书馆

胎盘间充质干细胞通过TGF-β/Smad通路抑制LPS诱导的大鼠星形胶质细胞活化

神经解剖学杂志 2025年第2期41卷 187-193页

作者：刘宁梅武桃娟陈冬梅刘婷马晓娜马海滨梁雪云宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室银川750001

目的:探讨胎盘间充质干细胞(PMSCs)对脂多糖(LPS)处理后星形胶质细胞的作用机制。方法:从新生大鼠脑皮质分离、培养星形胶质细胞,采用免疫荧光染色鉴定纯化培养的星形胶质细胞神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。将PMSCs与经LPS处理的P3... 详细信息

目的:探讨胎盘间充质干细胞(PMSCs)对脂多糖(LPS)处理后星形胶质细胞的作用机制。方法:从新生大鼠脑皮质分离、培养星形胶质细胞,采用免疫荧光染色鉴定纯化培养的星形胶质细胞神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。将PMSCs与经LPS处理的P3代星形胶质细胞共培养后,通过real time RT-PCR或Western blot技术检测各组星形胶质细胞炎症相关因子白细胞介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、精氨酸酶-1(Arg-1)、S100钙结合蛋白A10(S100A10)以及TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达水平。结果:80%的P3代星形胶质细胞GFAP表达阳性。星形胶质细胞经10μg/ml LPS处理后,其GFAP、IL-1β、iNOS、TNF-α及IL-6的表达水平明显升高(P<0.05),抗炎因子Arg-1、S100A10表达水平下降(P<0.05);同时其TGF-β/Smad信号通路相关蛋白转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子-βI型受体(TβRI)、转化生长因子-βⅡ型受体(TβRⅡ)、磷酸化Smad2和磷酸化Smad3(p-Smad2,p-Smad3)表达水平上调(P<0.05)。将PMSCs与经LPS处理的星形胶质细胞共培养后,星形胶质细胞GFAP、IL-1β、iNOS、TNF-α及IL-6表达水平明显下降(P<0.05),抗炎因子Arg-1、S100A10表达水平升高(P<0.05);同时其TGF-β/Smad信号通路相关蛋白TGF-β1、TβRI、TβRⅡ、p-Smad2和p-Smad3表达水平下调(P<0.05)。结论:胎盘间充质干细胞能够通过TGF-β/Smad信号通路抑制A1型星形胶质细胞的活化。

关键词：胎盘间充质干细胞脂多糖神经炎症 TGF-β/Smad信号通路大鼠

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枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响

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中国药理学通报 2024年第3期40卷 490-498页

作者：田瑞莹邢莎莎虎娜马文欣刘畅刘自钰马彪李佳阳刘虎军白长财陈冬梅马会明宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学药学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室宁夏银川750004

目的探索枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响。方法将60只8周龄♂SD大鼠中的50只(空白组10只)颈部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg^(-1),持续8周建立亚急性衰老大鼠模型,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal... 详细信息

目的探索枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响。方法将60只8周龄♂SD大鼠中的50只(空白组10只)颈部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg^(-1),持续8周建立亚急性衰老大鼠模型,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)观察衰老细胞,HE观察睾丸形态,ELISA检测血清中睾酮(testosterone,T)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平,免疫组化和Western blot检测衰老、氧化损伤和Nrf2/ARE通路相关因子表达。结果模型鉴定成功后,经枸杞籽油干预,改善了睾丸形态,下调β-gal和γH2AX表达;升高血清中SOD、GSH以及T、FSH水平及降低MDA和LH水平(P<0.05);上调睾丸组织Nrf2、GCLC、NQO1和SOD2蛋白表达水平(P<0.05)以及支持细胞中Nrf2核表达。结论枸杞籽油激活亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE信号通路表达,降低其氧化损伤,改善其激素水平。

关键词：枸杞籽油 Nrf2/ARE信号通路亚急性衰老氧化应激生殖激素睾丸

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针刺联合脐带间充质干细胞改善卵巢早衰大鼠卵巢储备功能研究

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北京中医药大学学报 2023年第3期46卷 435-444页

作者：刘文钊陈冬梅陈苗虎娜邢莎莎罗嘉琦田瑞莹王静杨丽何瑞杨桦马会明宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室宁夏医科大学基础医学院宁夏医科大学实验动物中心宁夏医科大学中医学院

目的观察针刺联合脐带间充质干细胞对卵巢早衰大鼠卵巢储备功能的影响。方法70只雌性SD大鼠随意分为造模组和正常组。造模组大鼠给予去氧乙烯基环己烯(80 mg/kg)腹腔注射,制备卵巢早衰大鼠模型。造模成功后,再将其随意分为模型组、针刺... 详细信息

目的观察针刺联合脐带间充质干细胞对卵巢早衰大鼠卵巢储备功能的影响。方法70只雌性SD大鼠随意分为造模组和正常组。造模组大鼠给予去氧乙烯基环己烯(80 mg/kg)腹腔注射,制备卵巢早衰大鼠模型。造模成功后,再将其随意分为模型组、针刺组、干细胞组、联合治疗组,每组12只,剩余12只正常大鼠为空白组。针刺组针刺“关元”“气海”“足三里”;干细胞组在干预的第1、8天,经大鼠尾静脉注入人类脐带间充质干细胞液0.5 mL(细胞数为2.5×106个);联合治疗组进行针刺和尾静脉注入人类脐带间充质干细胞液。干预后,检测大鼠卵巢湿重和卵巢指数;酶联免疫吸附测定检测血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)和抗米勒管激素(AMH)水平及抗氧化指标丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;HE染色检测各组大鼠卵巢形态结构变化;免疫组织化学法及蛋白质印迹法检测卵巢组织中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠卵巢湿重、卵巢指数降低(P<0.01);血清LH、T、FSH、MDA水平上升(P<0.05,P<0.01),E2、AMH、GSH、SOD水平下降(P<0.05,P<0.01);HE染色显示卵巢内成熟卵泡减少,闭锁卵泡增多;卵巢组织中Akt、p-Akt、Bcl-2相对表达量下降(P<0.05,P<0.01),Bax相对表达量上升(P<0.01)。与模型组比较,针刺组、干细胞组、联合治疗组大鼠卵巢湿重、卵巢指数上升(P<0.05,P<0.01);血清中的T、FSH水平下降(P<0.05,P<0.01);血清中E2、AMH、GSH、SOD水平上升(P<0.05,P<0.01);HE染色显示卵巢异常情况减少;卵巢组织中p-Akt、Bcl-2阳性表达与蛋白相对表达量上升(P<0.05,P<0.01),Bax阳性表达与蛋白相对表达量下降(P<0.05,P<0.01)。与针刺组和干细胞组比较,联合治疗组卵巢湿重上升(P<0.05),血清T、FSH水平下降(P<0.05,P<0.01),AMH水平上升(P<0.05,P<0.01),Akt阳性表达上升(P<0.05)。与针刺组比较,联合治疗组SOD、GSH水平上升(P<0.01),Bax蛋白相对表达量下降(P<0.01)。与干细胞组比较,联合治疗组血清MDA水平下降(P<0.05)。结论针刺、干细胞和联合治疗对卵巢早衰大鼠均能起到积极治疗作用,均能改善卵巢早衰大鼠卵巢储备功能,促进卵巢颗粒细胞增殖,抑制卵泡凋亡;且联合治疗效果优于单纯针刺和干细胞治疗。

关键词：针刺脐带间充质干细胞卵巢早衰干细胞移植大鼠

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枸杞糖肽激活CAMKK2/AMPK/MCU信号通路改善大鼠卵巢颗粒细胞衰老

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中国药理学通报 2025年第6期41卷 1116-1125页

作者：刘晓丹凌晨刘璐蒲静马海滨马会明张文萍陈冬梅宁夏医科大学总医院宁夏回族自治区干细胞与再生医学重点实验室宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏医科大学总医院药物临床试验机构办公室宁夏银川750004

目的探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGP)改善大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老的作用机制。方法大鼠原代卵巢颗粒细胞分为正常组,DOX组及DOX加入4种不同浓度的LbGP治疗组干预后,通过CCK-8、EDU和Ki67检测细胞增殖情况、免疫荧光... 详细信息

目的探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGP)改善大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老的作用机制。方法大鼠原代卵巢颗粒细胞分为正常组,DOX组及DOX加入4种不同浓度的LbGP治疗组干预后,通过CCK-8、EDU和Ki67检测细胞增殖情况、免疫荧光法、蛋白免疫印迹法检测衰老标志和线粒体功能相关因子。结果CCK-8、EDU、Ki67与DOX组相比,经LbGP治疗可明显提高细胞活力(P<0.05),促进增殖(P<0.05);与DOX组相比,LbGP治疗后细胞中β-半乳糖苷酶阳性面明显减少(P<0.05);免疫荧光结果显示:与DOX组相比,LbGP治疗后p21、γH2A.X下降(P<0.05)、pRB升高(P<0.05);Western blot结果显示,与DOX组相比,LbGP治疗组衰老表型蛋白p21、p53明显减少(P<0.05),pRB升高(P<0.05);线粒体释放到胞质中的cyt C和活化的caspase-9明显减少(P<0.05);CAMKK2、pAMPK和线粒体钙稳态调节蛋白MCU水平升高(P<0.05);细胞核中能量代谢相关蛋白SIRT1、PGC1α/β和ATP5A1明显升高(P<0.05);与DOX组相比,LbGP治疗后ROS水平明显下降(P<0.05)。结论LbGP可改善DOX诱导的大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老,其机制可能是通过上调CAMKK2/AMPK信号通路,进而改善线粒体钙稳态,提高细胞能量代谢相关调节蛋白的表达水平实现的。为LbGP能够辅助改善卵巢功能提供了实验基础。

关键词：枸杞糖肽衰老 CAMKK2/AMPK信号通路线粒体钙稳态能量代谢大鼠原代卵巢颗粒细胞

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枸杞糖肽对D-半乳糖致衰老大鼠睾丸的影响

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中国兽医学报 2025年

作者：马文欣刘畅蒲静李红梅杨丽朱向东陈冬梅马会明宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏医科大学实验动物中心宁夏医科大学中医学院宁夏医科大学总医院干细胞与再生医学重点实验室

为探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGp)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导的衰老大鼠的睾丸损伤的保护作用,本研究将雄性SD大鼠随机分为6组,包括空白对照组(Control)、衰老模型组(Model)、阳性对照组(β-烟酰胺单核苷酸,N... 详细信息

为探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGp)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导的衰老大鼠的睾丸损伤的保护作用,本研究将雄性SD大鼠随机分为6组,包括空白对照组(Control)、衰老模型组(Model)、阳性对照组(β-烟酰胺单核苷酸,NMN)、低剂量LbGp组(LLbGp)、中剂量LbGp组(MLbGp)和高剂量LbGp组(HLbGp)。统计大鼠睾丸质量并计算睾丸系数,通过苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠睾丸组织的形态学变化,利用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法检测大鼠睾丸组织的衰老情况,测定大鼠血清中睾酮(T)、促黄体生成素(LH)和促卵泡生成素(FSH)等生殖激素水平,检测大鼠睾丸组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)等氧化因子的水平以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)等炎症因子的水平。此外,通过TUNEL染色检测大鼠睾丸组织细胞的凋亡情况,评估大鼠附睾精子的质量,以及睾丸组织中Keap1、Nrf2和Nqo1 mRNA的相对表达量变化。结果显示,与衰老模型组相比,中、高剂量LbGp组的大鼠睾丸系数显著升高(P<0.01),血清中T水平和精子质量也显著提高(P<0.05),睾丸组织的结构变性和衰老程度减轻、抗氧化因子水平显著升高(P<0.01)、炎症因子和细胞凋亡水平显著下降(P<0.05)。Keap1mRNA的相对表达量显著下降(P<0.01),而Nrf2和Nqo1 mRNA的相对表达量则显著上升(P<0.05)。本研究表明,LbGp可通过Keap1-Nrf2信号通路改善D-gal诱导的大鼠睾丸衰老,减轻氧化应激,降低炎症反应,减少细胞凋亡,从而发挥护作用,减轻因衰老导致的大鼠睾丸损伤。

关键词：枸杞糖肽衰老 Keap1-Nrf2信号通路睾丸大鼠

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基于网络药理学探讨月见草油改善多囊卵巢综合征大鼠主动脉内皮损伤的机制研究

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中国实验动物学报 2025年第3期33卷 324-341页

作者：刘自钰惠亮马文欣刘畅虎娜赵帅陈冬梅杨丽蒲静穆胜马会明宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学中医学院银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室银川750003 宁夏医科大学实验动物中心银川750004

目的基于网络药理学和体内实验探究月见草油(evening primrose oil,EPO)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠主动脉血管内皮损伤的改善作用机制。方法通过网络药理学技术预测EPO改善PCOS大鼠主动脉内皮损伤可能的靶点... 详细信息

目的基于网络药理学和体内实验探究月见草油(evening primrose oil,EPO)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠主动脉血管内皮损伤的改善作用机制。方法通过网络药理学技术预测EPO改善PCOS大鼠主动脉内皮损伤可能的靶点,并且通过实验对筛选出的核心靶点及通路进行验证。58只雌性SD大鼠随机分为:空白对照组(10只)、造模组(48只);空白对照组给予正常饮食,造模组给予高脂饮食8周,第6周联合来曲唑(1 mg/(kg·d))灌胃21 d进行PCOS模型制备,造模结束尾静脉取血,收集血清检测激素水平后,模型大鼠随机分为4组,给予相应药物灌胃治疗6周。给药结束后收集大鼠血液、血管及卵巢组织。苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态,ELISA检测血清中促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、促卵泡激素(FSH)、内皮素(ET-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,分光光度法测定大鼠血清中一氧化氮(NO)水平。Western Blot及免疫组织化学法(IHC)分别检测核心靶点与RAS通路相关因子等蛋白表达水平。结果网络药理学分析得到EPO与PCOS交集靶点25个,KEGG结果显示EPO通过肾素-血管紧张素通路(renin-angiotensin signaling,RAS)等多条通路改善PCOS大鼠血管损伤。与模型组相比,EPO低、高剂量组血清中TNF-α、FSH、LH以及T含量均有所下降,差异具有显著性(P<0.01);EPO低、高剂量组主动脉AngⅠ、VEGF-B、AT_(2)R、ET-1和TNF-α蛋白表达量显著降低(P<0.01),AngⅡ、CD31蛋白显著升高,差异具有显著性(P<0.01),EPO高剂量组eNOS蛋白显著升高,差异具有显著性(P<0.01)。结论EPO可能通过抑制RAS信号通路ACE/AngⅡ/AT_1轴过度活化改善PCOS模型大鼠血管内皮损伤。

关键词：多囊卵巢综合征肾素-血管紧张素通路主动脉内皮损伤月见草油网络药理学

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短链脂肪酸抑制M1型肺泡巨噬细胞极化的作用机制研究

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中华急诊医学杂志 2024年第4期33卷 522-528页

作者：陈健周卫东马金兰马立兵杨晓军宁夏医科大学第一临床医学院银川750004 宁夏回族自治区干细胞与再生医学重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院重症医学科银川750004

目的探讨短链脂肪酸(Short-chain fatty acid,SCFA)丁酸钠(Sodium butyrate,NaB)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导M1型肺泡巨噬细胞极化的影响及其作用机制。方法小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)随机(随机数字法)分为对照组(Control组)、丁酸钠组(NaB组)、LPS组、LPS+NaB组(LB组)、LPS+NaB+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(Compound C)组(LC组)。通过qRT-PCR检测MH-S细胞中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞分化抗原86(CD86)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和小鼠肺上皮细胞(MLE-12)中闭锁小带蛋白1(ZO-1)、紧密连接蛋白4(Claudin-4)、闭合蛋白(Occludin)的mRNA表达水平;ELISA检测MH-S细胞培养基上清液IL-6、IL-1β、TNF-α蛋白含量;Western blot测定MH-S细胞AMPK、P-AMPK、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白表达;流式细胞术测定M1型巨噬细胞相关标记物CD86和iNOS的表达。结果(1)qRTPCR和ELISA结果一致,与LPS组相比,LB组加入NaB后M1型巨噬细胞相关促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α显著降低(均P<0.05);(2)qRT-PCR和流式细胞术的结果一致,与LPS组相比,LB组加入NaB后M1型巨噬细胞相关极化指标CD86、iNOS显著降低(均P<0.05);(3)Western blot检测AMPK/Nrf2/HO-1信号通路的表达,与LPS相比,LB组加入NaB后增强了P-AMPK/AMPK、Nrf2(nucleus)、HO-1的表达(均P<0.05);与LB组相比,LC组降低了P-AMPK/AMPK、Nrf2(nucleus)、HO-1的表达(均P<0.05);流式细胞术结果显示,与LPS组相比,LB组加入NaB后iNOS+表达水平显著降低(P<0.05);与LB组相比,LC组加入Compound C逆转了NaB对iNOS+的抑制作用(P<0.05);(4)MLE-12细胞qRT-PCR结果显示,与LPS组相比,LB组加入NaB后Z0-1、Claudin-4、Occludin明显增高(均P<0.05)。结论SCFA通过激活AMPK/Nrf2/HO-1信号通路,抑制LPS诱导的M1型肺泡巨噬细胞极化,改善了炎症反应。

关键词：短链脂肪酸巨噬细胞极化 AMPK/Nrf2/HO-1信号通路炎症

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黄芪苷甲Ⅳ协同人胎盘间充质干细胞移植对卵巢功能不全大鼠卵巢功能的保护作用

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中药材 2024年第6期47卷 1505-1511页

作者：杨丽邢莎莎虎娜马文欣马会明陈冬梅宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室宁夏银川750004

目的:探讨黄芪甲苷Ⅳ对hPMSCs移植治疗POI大鼠疗效的影响。方法:50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、黄芪甲苷Ⅳ组、hPMSCs组及黄芪甲苷Ⅳ+hPMSCs组,每组10只。按50 mg/kg腹腔连续注射环磷酰胺(CTX)15 d建立POI大鼠模型;黄芪甲苷Ⅳ... 详细信息

目的:探讨黄芪甲苷Ⅳ对hPMSCs移植治疗POI大鼠疗效的影响。方法:50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、黄芪甲苷Ⅳ组、hPMSCs组及黄芪甲苷Ⅳ+hPMSCs组,每组10只。按50 mg/kg腹腔连续注射环磷酰胺(CTX)15 d建立POI大鼠模型;黄芪甲苷Ⅳ组和黄芪甲苷Ⅳ+hPMSCs组于造模第10天开始以40 mg/kg连续灌胃黄芪甲苷Ⅳ;hPMSCs组和黄芪甲苷Ⅳ+hPMSCs组分别于造模第15、22天尾静脉注射2.5×10^(6)hPMSCs。ELISA法检测各组大鼠血清性激素、抗氧化酶和促炎因子水平,HE染色观察卵巢组织结构,TUNEL法检测卵巢细胞凋亡情况,Western Blot法和免疫组化法检测卵巢功能标志物及细胞凋亡标志物的表达。结果:CTX诱导后大鼠动情周期紊乱,成功建立了POI大鼠模型。与模型组比较,各治疗组大鼠血清FSH、IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低,AMH、E_(2)、SOD、GSH-Px水平升高,卵巢组织病理学明显改善,卵巢细胞凋亡减少,卵巢组织C/EBP-β、ERK、Bcl-2蛋白表达升高,Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达降低。黄芪甲苷Ⅳ+hPMSCs的作用优于黄芪甲苷Ⅳ和hPMSCs移植。结论:黄芪甲苷Ⅳ具有抗氧化和抗炎症作用,能通过改善损伤卵巢组织内的微环境增强hPMSCs移植治疗POI的效果。

关键词：早发性卵巢功能不全黄芪甲苷Ⅳ 人胎盘间充质干细胞移植抗氧化作用抗炎作用

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黄芪甲苷减轻环磷酰胺诱导的早发性卵巢功能不全模型大鼠卵巢炎症反应

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中国病理生理杂志 2023年第4期39卷 684-693页

作者：邢莎莎虎娜田瑞莹罗斌锁小娟刘文钊罗嘉琦陈苗杨丽陈冬梅马会明宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学中医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学实验动物中心宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室宁夏银川750004

目的:研究黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AS-IV)是否通过抑制核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路降低环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导的早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)模型大鼠炎症反应。方法:动情周期正常的雌性SD大鼠80只,选取12只为正常对照组,其余68只大鼠用CTX腹腔注射诱导建立POI模型。将模型制备成功的60只大鼠随机分为5组,每组12只,分别为POI模型组、芬吗通组、低剂量AS-IV组、中剂量AS-IV组和高剂量AS-IV组,干预28 d后取样。采用ELISA法测定血清中17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)、抗缪勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平;转录组测序筛选差异表达基因及功能富集;HE染色法观察卵巢组织病理变化并进行卵泡计数;免疫组织化学染色法和Western blot法分别进行p65(胞核)、p-p65和p-IκBα及下游促炎因子IL-6、IL-1β、TNF-α及IL-8的定位表达和相对表达水平检测。结果:用CTX诱导15 d建立的POI模型大鼠动情周期紊乱;与正常对照组相比,POI模型大鼠血清17β-E2和AMH显著降低、FSH和LH显著升高(P<0.01)。经各组相应干预28 d后,与POI模型组相比,中剂量AS-IV组大鼠血清17β-E2和AMH水平升高、FSH和LH水平降低,差异显著(P<0.01)。基于转录组测序结果发现,POI模型组与中剂量AS-IV组有274个差异表达基因,富集在炎症相关功能基因簇。HE染色显示,与正常对照组相比,POI模型组大鼠卵巢组织结构紊乱,初级卵泡和成熟卵泡数目减少,闭锁卵泡数目增多(P<0.01);与POI模型组相比,中剂量AS-IV组大鼠卵巢组织初级卵泡和成熟卵泡数目增多(P<0.01)。芬吗通治疗后初级卵泡数量较模型组没有差异,可见的有腔卵泡数量较模型组增多,但多为闭锁卵泡。与正常对照组相比,POI模型组p65(胞核)、p-p65、p-IκBα、IL-6、IL-1β、TNF-α及IL-8的蛋白表达量显著升高(P<0.05);与POI模型组相比,芬吗通组和中剂量AS-IV组p65(胞核)、p-p65/p65、p-IκBα、IL-6、IL-1β、TNF-α及IL-8的蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:AS-IV可能通过介导NF-κB信号通路抑制卵巢炎症反应,从而改善CTX诱导的POI模型大鼠的卵巢形态结构和功能。

关键词：早发性卵巢功能不全黄芪甲苷核因子κB 环磷酰胺

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基于Nrf2/HO-1信号通路探讨浓缩当归丸对缓解卵巢功能不全大鼠卵巢氧化应激损伤的影响

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中国实验方剂学杂志 2023年第13期29卷 1-9页

作者：罗嘉琦杜小利陈冬梅陈苗虎娜邢莎莎刘文钊田瑞莹杨丽王静何瑞马会明宁夏医科大学银川750004 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室银川750004 宁夏区域高发病中西医结合防治研究重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室银川750004 宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学实验动物中心银川750004

目的:探讨浓缩当归丸改善卵巢功能不全大鼠卵巢氧化应激损伤的作用及机制。方法:36只成年雌性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、雌二醇(E2)/地屈孕酮片组、浓缩当归丸高、中、低剂量组,每组6只。除正常组外,其余各组大鼠每日腹腔注射乙... 详细信息

目的:探讨浓缩当归丸改善卵巢功能不全大鼠卵巢氧化应激损伤的作用及机制。方法:36只成年雌性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、雌二醇(E2)/地屈孕酮片组、浓缩当归丸高、中、低剂量组,每组6只。除正常组外,其余各组大鼠每日腹腔注射乙烯基环己烯(VCD)80 mg·kg^(-1)造模,连续14 d。从第15天起,模型组灌胃生理盐水2 mL·kg^(-1);雌二醇/地屈孕酮片组灌胃芬吗通0.3 mg·kg^(-1);浓缩当归丸高、中、低剂量组灌胃浓缩当归丸2.08、4.16、8.32 g·kg^(-1),每日1次,连续给药28 d。测定大鼠卵巢指数;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中相关激素E2、促卵泡激素(FSH)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)和抗缪勒管激素(AMH)水平,以及血清过氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量;硫代巴比妥酸(TAB)法检测血清丙二醛(MDA)含量;苏木素-伊红(HE)染色法观察卵巢形态学变化;免疫组化法(IHC)检测卵巢组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶^(-1)(HO^(-1))、SOD2、SOD1的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织中Nrf2、HO^(-1)、SOD2、SOD1蛋白的相对表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠卵巢中生长卵泡明显减少、卵泡颗粒层排列松散;大鼠体质量、卵巢指数和血清AMH、E2水平显著下降,LH、FSH水平均显著升高(P<0.01);SOD和GSH水平显著下降(P<0.01),MDA水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,E2/地屈孕酮片组和浓缩当归丸各组卵巢指数均明显增加(P<0.05,P<0.01),血清中E2水平明显升高(P<0.05,P<0.01),FSH、AMH、LH水平明显降低(P<0.05,P<0.01);卵巢内生长卵泡数量增多;血清中SOD活性增强,GSH含量升高,MDA含量明显下降(P<0.05,P<0.01);卵巢组织中Nrf2、HO^(-1)、SOD2、SOD1蛋白表达水平明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论:浓缩当归丸能够调节血清激素水平,且增加卵巢组织中Nrf2、HO^(-1)、SOD2、SOD1因子的表达,提高卵巢组织抗氧化能力抵抗氧化应激损伤,从而改善卵巢储备功能。

关键词：浓缩当归丸卵巢功能不全性激素活性氧

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