检索结果-内蒙古大学图书馆

海马与新皮质组织特异性GABRG2基因敲除小鼠模型的构建及其在遗传性癫痫伴热性惊厥附加症中的初步研究

中国生物工程杂志 2020年第3期40卷 9-20页

作者：郭胜楠李信晓王峰刘昆梅丁娜扈启宽孙涛宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学宁夏颅脑疾病重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院银川750004

建立基于Cre/loxp重组酶系统调控的海马和新皮质特异性GABAA受体γ2亚基(GABRG2)基因条件基因敲除小鼠模型,为深入研究海马区和新皮质GABRG2在癫痫发生中的功能作用提供动物模型。将引进的GABRG2fl/wt转基因小鼠与海马和新皮质特异性表... 详细信息

建立基于Cre/loxp重组酶系统调控的海马和新皮质特异性GABAA受体γ2亚基(GABRG2)基因条件基因敲除小鼠模型,为深入研究海马区和新皮质GABRG2在癫痫发生中的功能作用提供动物模型。将引进的GABRG2fl/wt转基因小鼠与海马和新皮质特异性表达Cre+/+重组酶工具鼠分别进行繁配和鉴定,然后再将2种小鼠进行杂交并对其子代小鼠的基因型进行鉴定,其子代基因型为GABRG2^fl/wtCre+的小鼠为构建的海马区和新皮质特异性GABRG2基因条件性敲除小鼠。利用PCR技术鉴定小鼠基因型,Real-Time PCR和Western blot技术检测GABRG2基因在小鼠海马和新皮质中的mRNA水平和蛋白质水平的表达情况。PCR结果显示子代小鼠基因型符合GABRG2fl/wtCre^+;海马与新皮质特异性GABRG2基因敲除小鼠海马和新皮质中GABRG2的mRNA水平和蛋白质水平显著低于对照组;热造模过程中,实验组小鼠癫痫发作更明显。利用Cre/Loxp技术成功构建了海马与新皮质GABRG2基因敲除小鼠,可为进一步研究GABRG2在癫痫发生中的作用机制奠定基础。

关键词： GABRG2基因遗传性癫痫伴热性惊厥附加症海马与新皮质 Cre-Loxp重组酶系统基因敲除

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BOLD—fMRI在脑胶质瘤术后IMRT中视觉功能区保护价值

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中华放射肿瘤学杂志 2017年第12期26卷 1370-1375页

作者：高文奇赵超云王明磊夏新舍郭艳红石亚男黄雪莹马辉王晓东郭玉林夏鹤春宁夏医科大学银川750004 宁夏医科大学总医院放射科宁夏医科大学总医院放疗科宁夏医科大学总医院神经外科宁夏颅脑疾病重点实验室

目的评价血氧水平依赖功能MRI （BOLD-fMRI）在枕叶脑胶质瘤术后放疗视觉功能区保护中的临床应用价值。方法选取2014—2016年间枕叶区脑胶质瘤术后拟行放疗病例28例。所有患者放疗前行定位CT、常规MRI及BOLD-fMRI检查,获得在3DT1解剖... 详细信息

目的评价血氧水平依赖功能MRI （BOLD-fMRI）在枕叶脑胶质瘤术后放疗视觉功能区保护中的临床应用价值。方法选取2014—2016年间枕叶区脑胶质瘤术后拟行放疗病例28例。所有患者放疗前行定位CT、常规MRI及BOLD-fMRI检查,获得在3DT1解剖图像上显示的视皮质激活图,并以此为指导在定位CT图像上标记视皮质区,采用IMRT技术分别制定视觉功能区保护性放疗计划和未考虑视觉功能区的常规放疗计划。通过比较PTV的CI、HI、Dmax、Dmean以及视皮质区所受Dmax、Dmean,评价视觉功能区保护性方案的可行性。结果常规放疗计划及视觉功能区保护性放疗计划在确保靶区有效治疗剂量及常规OAR剂量限制在安全可接受范围前提下,PTV的CI及HI差异无统计学意义（P=0.874、0.602）。视觉功能区保护性放疗计划患侧视皮质Dmax、Dmean分别降低8.40%、9.25%,健侧13.26%、14.77%。结论利用BOLD-fMRI指导制定视觉功能区保护性放疗计划,在保证靶区处方剂量前提下,相比常规放疗计划,降低了视觉功能区受量,进而可以实现相应的功能区保护。

关键词：血氧水平依赖磁共振成像视觉功能区脑胶质瘤调强放射疗法

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盐酸吡格列酮和阿托伐他汀钙在Beagle犬体内的药动学相互作用研究

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药学学报 2013年第5期48卷 741-745页

作者：陈和莉张文萍杨付英王欣瑜杨文成党宏万宁夏医科大学药学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院药剂科宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院临床药理研究室宁夏银川750004

探讨盐酸吡格列酮和阿托伐他汀钙在Beagle犬体内的药动学相互作用。采用自身对照随机交叉的方法。9只Beagle犬随机分成3组。第1周期3组动物分别口服阿托伐他汀钙片(A),盐酸吡格列酮片(B)和阿托伐他汀钙片+盐酸吡格列酮片(C);第2周期3组... 详细信息

探讨盐酸吡格列酮和阿托伐他汀钙在Beagle犬体内的药动学相互作用。采用自身对照随机交叉的方法。9只Beagle犬随机分成3组。第1周期3组动物分别口服阿托伐他汀钙片(A),盐酸吡格列酮片(B)和阿托伐他汀钙片+盐酸吡格列酮片(C);第2周期3组动物分别口服B、C、A;第3周期3组动物分别口服C、A、B。连续给药6天,在给药的第1天和第6天采集前肢静脉血,用LC-MS/MS法测定盐酸吡格列酮和阿托伐他汀钙的血药浓度,各周期间清洗期为7天。药物合用组与药物单独使用组的主要药动学参数用DAS 3.2.1统计矩法计算AUC0-t和Cmax用"生物等效性与生物利用度"模块下的90%可信区间法进行统计。与单独给药比较,联合使用盐酸吡格列酮和阿托伐他汀钙的主要药动学参数AUC0-t和Cmax在90%可信区间的生物等效性统计结果不合格;药物单用组与合用组的tmax用配对Wilcoxon检验,结果 P>0.05。药动学参数t1/2、CLint、MRT和V/F经t检验差异无统计学意义。Beagle犬同时服用盐酸吡格列酮和阿托伐他汀钙存在一定药动学相互影响。

关键词：盐酸吡格列酮阿托伐他汀钙药动学相互作用

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甘草次酸通过抑制Caspase 3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路保护心脏骤停心肺复苏大鼠心脏功能

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中药药理与临床 2019年第4期35卷 28-33页

作者：马汉宁姬艳燕陈伟马磊杨立山宁夏医科大学总医院急诊科银川750004 宁夏医科大学总医院手术室银川750004

目的:观察甘草次酸防治心脏骤停心肺复苏(CA/CPR)大鼠心脏功能的作用,并探讨其抑制Caspase 3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路分子机制。方法:将60只大鼠随机分为:阴性对照组、模型组、阳性对照组(依达拉奉6 mg/kg)及甘草次酸50、100、200mg/kg... 详细信息

目的:观察甘草次酸防治心脏骤停心肺复苏(CA/CPR)大鼠心脏功能的作用,并探讨其抑制Caspase 3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路分子机制。方法:将60只大鼠随机分为:阴性对照组、模型组、阳性对照组(依达拉奉6 mg/kg)及甘草次酸50、100、200mg/kg剂量组,每天给药1次,连续6 d。实验第7 d,除阴性对照组外,其它各组均采用窒息法建立大鼠CA/CPR模型,并再给予相应药物1次。末次给药后1 h,记录大鼠左室收缩压(LVSP)、左室舒张末期压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmin)及平均动脉压(MABP)等血流动力学参数;采用生化法测定血清LDH、CK及CK-MB含量的变化;取大鼠心尖组织,进行HE病理切片染色,镜下观察心肌组织病理学变化;采用生化法检测大鼠心肌组织SOD、MDA、GSH-Px及T-AOC水平;采用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)及Western blot法检测大鼠心肌组织Caspase 3、Bax及Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平。结果:与阴性对照组比较,模型组大鼠LVEDP升高,+dp/dtmax、-dp/dtmin、LVSP及MABP降低,血清LDH、CK及CK-MB含量明显升高;心肌组织SOD、GSH-Px及T-AOC含量降低,MDA含量明显增多;心肌组织肌纤维走行紊乱,有纤维化和断裂现象,部分细胞结构受损、变性或坏死,可见少量炎性细胞浸润,且Caspase 3、Bax mRNA和蛋白表达水平明显上调,Bcl-2 mRNA表达水平明显下调。与模型组比较,甘草次酸200 mg/kg组大鼠LVEDP降低,+dp/dtmax、-dp/dtmin、LVSP及MABP升高,血清LDH、CK及CK-MB活性下降;心肌组织SOD、GSH-Px及T-AOC含量明显升高,MDA含量明显下降;心肌组织病理损伤明显减轻,且Caspase 3、Bax mRNA和蛋白表达水平下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平上调。结论:甘草次酸对CA/CPR大鼠心脏功能具有保护作用,其作用机制与抑制氧化应激和下调Caspase 3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路有关。

关键词：甘草次酸心脏骤停心肺复苏心脏功能氧化应激 Caspase 3/Bax/Bcl-2

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结直肠癌细胞中NF-κB活化与TRAF6、CCR5及PTEN/PI3K通路的关系及作用

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中国普通外科杂志 2022年第10期31卷 1363-1372页

作者：何亚琴苏进达赵少辉王健谢小亮宁夏医科大学总医院外科学研究室宁夏银川750004 宁夏医科大学宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院结直肠外科宁夏银川750004

背景与目的:NF-κB的活化在多种恶性肿瘤的发生、发展中起了重要的作用。研究发现,趋化因子受体5 (CCR5)、肿瘤坏死因子受体相关因子6 (TRAF6)以及PTEN/PI3K通路相关蛋白均在恶性肿瘤中异常表达。因此,本研究探讨以上分子在结直肠癌细... 详细信息

背景与目的:NF-κB的活化在多种恶性肿瘤的发生、发展中起了重要的作用。研究发现,趋化因子受体5 (CCR5)、肿瘤坏死因子受体相关因子6 (TRAF6)以及PTEN/PI3K通路相关蛋白均在恶性肿瘤中异常表达。因此,本研究探讨以上分子在结直肠癌细胞中的作用及相互关系。方法:分别用Westernblot、 CCK-8实验、 Transwell法检测结直肠癌HT29和SW480细胞经Maraviroc(CCR5抑制剂)、MG132 (TRAF6抑制剂)和NF-BAY (NF-κB抑制剂)处理后,各蛋白表达的变化,以及增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果:在两种结直肠癌细胞中,抑制CCR5蛋白后,PI3K的表达降低,PTEN表达升高(均P<0.05),TRAF6和NF-κB表达无明显变化(均P>0.05);抑制TRAF6蛋白后,PI3K和CCR5表达降低,PTEN表达升高(均P<0.05),NF-κB的表达无明显变化(均P>0.05);抑制NF-κB表达后,CCR5、TRAF6和PI3K表达降低,PTEN表达升高(均P<0.05)。三种抑制剂均可明显降低两种结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。结论:结直肠癌细胞中存在NF-κB异常活化,后者可能通过上调TRAF6与CCR5的表达,抑制抑癌分子PTEN的活性,从而导致促癌分子PI3K及其通路的活性升高。

关键词：结直肠肿瘤 NF-κB 肿瘤坏死因子受体相关肽和相关蛋白质类受体,CCR5

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缺氧缺血性脑病患儿表观扩散系数与行为神经测定评分的相关性研究

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中华放射学杂志 2015年第2期49卷 133-137页

作者：李艳杜奕陈志强李鹏刘岭岭邱银萍田淑萍吴玉华刘家赵张俊杨文君宁夏医科大学总医院放射科银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏医科大学总医院新生儿科银川750004 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室

目的：探讨缺氧缺血性脑病（HIE）新生儿大脑ADC值与临床行为神经测定（NBNA）评分的相关性，从影像角度评价ADC值在HIE早期诊断中的价值。方法选取109例日龄在7 d内的HIE患儿行常规MRI和DWI检查，根据HIE分级标准分为轻度组43例、中度... 详细信息

目的：探讨缺氧缺血性脑病（HIE）新生儿大脑ADC值与临床行为神经测定（NBNA）评分的相关性，从影像角度评价ADC值在HIE早期诊断中的价值。方法选取109例日龄在7 d内的HIE患儿行常规MRI和DWI检查，根据HIE分级标准分为轻度组43例、中度组38例、重度组28例；同期收集24例正常足月儿作为对照组。所有受试者均进行NBNA评分，并测量双侧额叶深部白质、顶叶深部白质、侧脑室旁白质、内囊后肢、丘脑腹外侧核、豆状核、胼胝体压部及脑干8个部位的ADC值。采用单因素方差分析比较各组间ADC值，采用Pearson相关分析各部位ADC值与NBNA评分的相关性。结果除豆状核和脑干外，额叶深部、顶叶深部、侧脑室旁白质和内囊后肢、丘脑腹外侧核及胼胝体压部的ADC值随脑损伤程度加重而依次减低。轻、中、重度组额叶深部白质ADC值分别为（1.82±0.33）×10-3、（1.77±0.34）×10-3、（1.62±0.31）×10-3 mm2/s，顶叶深部白质ADC值分别为（1.81±0.34）×10-3、（1.79±0.27）×10-3、（1.72±0.31）×10-3 mm2/s，侧脑室旁白质ADC值分别为（1.27±0.15）×10-3、（1.23±0.12）×10-3、（1.15±0.17）×10-3 mm2/s，内囊后肢ADC值分别为（1.08±0.09）×10-3、（0.97±0.07）×10-3、（0.84±0.06）×10-3 mm2/s，丘脑腹外侧核ADC值分别为（1.13±0.07）×10-3、（1.08±0.13）×10-3、（1.00±0.13）×10-3 mm2/s，胼胝体压部ADC值分别为（1.27±0.22）×10-3、（1.18±0.16）×10-3、（1.00±0.23）×10-3 mm2/s，3组间差异均有统计学意义（F值分别为61.27、16.27、23.26、72.70、26.73、66.09，P值均〈0.05）。轻、中、重度组NBNA评分分别为（36.8±1.4）、（33.5±1.6）、（29.3±2.6）分。额叶深部白质、顶叶深部白质、侧脑室旁白质、内囊后肢、丘脑腹外侧核及胼胝体压部ADC值与NBNA评分均呈正相关（r值分别为0.60、0.49、0.54、0.67、0.56、0.65，P值均〈0.05）。结论 HIE新生儿大脑相关ROI ADC值与NBNA评分具有相关性，二者结合能够更准确、客观地评价HIE脑损伤。

关键词：磁共振成像,弥散婴儿,新生缺血缺氧,脑

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一氧化碳释放分子2对心肺复苏大鼠复苏后肠屏障功能的影响

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中国病理生理杂志 2019年第2期35卷 346-352页

作者：刘芳刘敏王峰王晓红宁夏医科大学研究生院临床医学系宁夏银川750004 宁夏医科大学颅脑实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院ICU 宁夏银川750004

目的:探讨一氧化碳释放分子2(CORM-2)对心肺复苏(CPR)后大鼠肠黏膜上皮屏障功能的影响。方法:采用冰氯化钾停跳联合窒息4 min、人工胸外心脏按压3 min的方法建立大鼠心脏骤停(CA)-CPR后肠缺血再灌注损伤模型。32只健康雄性SD大鼠随机分... 详细信息

目的:探讨一氧化碳释放分子2(CORM-2)对心肺复苏(CPR)后大鼠肠黏膜上皮屏障功能的影响。方法:采用冰氯化钾停跳联合窒息4 min、人工胸外心脏按压3 min的方法建立大鼠心脏骤停(CA)-CPR后肠缺血再灌注损伤模型。32只健康雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组、CPR组、CORM-2组及灭活型CORM-2(i CORM-2)组,每组8只。假手术组仅置入相关导管,不行CPR术,其余各组均置入相关导管并经历CA-CPR。假手术组使用4 m L/kg生理盐水、CPR组使用4 m L/kg 2%二甲基亚砜、CORM-2组及i CORM-2组使用4 mg/kg相应干预药物,于术前12 h腹腔注射。各组复苏(或置管)后连续监测4 h血流动力学,并于复苏(或置管)后4 h留取回肠组织及血清。HE染色及透射电镜观察回肠组织病理形态及超微结构。ELISA法测定血清肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)含量。Western blot检测回肠组织紧密连接蛋白claudin-3、occludin和ZO-1及促炎因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果:假手术组和复苏各组之间置管后即刻平均动脉压(MAP)的变化差异均无统计学显著性;CPR组、CORM-2组和i CORM-2组复苏后各时点MAP均明显低于置管后即刻,并持续至复苏后4 h(P <0.05);复苏各组复苏后各时点MAP均显著低于假手术组置管术后同一时点MAP(P <0.05);CORM-2组复苏后各时点MAP均显著高于CPR组及i CORM-2组(P <0.05)。CPR组大鼠肠道组织病理形态和超微结构损伤严重;CORM-2组大鼠肠黏膜病理形态和超微结构完整性明显优于其它复苏各组。与假手术组比较,CPR组和i CORM-2组的I-FABP水平明显升高(P <0.05);CORM-2组的I-FABP水平与假手术组比较差异无统计学显著性,但显著低于CPR组及i CORM-2组(P <0.05)。与假手术组比较,CPR组和i CORM-2组的claudin-3、occludin和ZO-1蛋白表达均降低(P <0.05),CORM-2组仅claudin-3和ZO-1蛋白表达降低(P <0.05);CORM-2组上述蛋白表达均高于CPR组及i CORM-2组(P <0.05)。与假手术组比较,CPR组和i CORM-2组的促炎因子TNF-α蛋白表达均升高(P <0.05);CORM-2组TNF-α蛋白表达与假手术组比较差异无统计学显著性,但显著低于CPR组及i CORM-2组(P <0.05)。结论:心脏骤停-心肺复苏可造成大鼠肠机械屏障损伤。CORM-2可上调肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白表达,降低肠黏膜通透性,从而有效维持心肺复苏大鼠肠屏障完整性。

关键词：一氧化碳释放分子2 心脏骤停心肺复苏肠屏障紧密连接

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敲低双特异性磷酸酶5(DUSP5)通过阻断NF-κB信号抑制卡介苗诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎性反应

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第5期40卷 404-410页

作者：任超刘文淼骆佳宁夏医科大学总医院医学科学研究院宁夏银川750001 宁夏医科大学总医院病案统计室宁夏银川750001 宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750001

目的探讨双特异性磷酸酶5(DUSP5)对卡介苗(BCG)介导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎性反应的调控作用。方法Western blot法检测BCG感染RAW264.7巨噬细胞0.5、1、2、4、6、8、12、24 h,DUSP5表达变化;采用小干扰RNA(siRNA)技术下调RAW264.7巨... 详细信息

目的探讨双特异性磷酸酶5(DUSP5)对卡介苗(BCG)介导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎性反应的调控作用。方法Western blot法检测BCG感染RAW264.7巨噬细胞0.5、1、2、4、6、8、12、24 h,DUSP5表达变化;采用小干扰RNA(siRNA)技术下调RAW264.7巨噬细胞DUSP5水平,并设置siRNA阴性对照(si-NC)组、DUSP5敲低(si-DUSP5)组、si-NC联合BCG感染组、si-DUSP5联合BCG感染组。实时定量PCR检测细胞白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10的mRNA表达,ELISA检测细胞上清液IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10含量;Western blot法检测细胞核因子κB(NF-κB)与磷酸化的NF-κB(p-NF-κB)表达变化。结果BCG感染上调RAW264.7巨噬细胞核DUSP5蛋白表达,并在BCG刺激4 h后,DUSP5表达量达到高峰;与si-NC联合BCG感染组相比,敲低DUSP5抑制细胞促炎因子IL-1β、IL-6与TNF-α表达与分泌,而抑炎因子IL-10表达不受DUSP5的影响;且敲低DUSP5抑制细胞NF-κB磷酸化。结论敲低DUSP5通过阻断NF-κB信号抑制BCG介导的巨噬细胞炎性反应。

关键词：卡介苗(BCG) 双特异性磷酸酶5(DUSP5) RAW264.7巨噬细胞炎性反应

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针刺联合脐带间充质干细胞改善卵巢早衰大鼠卵巢储备功能研究

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北京中医药大学学报 2023年第3期46卷 435-444页

作者：刘文钊陈冬梅陈苗虎娜邢莎莎罗嘉琦田瑞莹王静杨丽何瑞杨桦马会明宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室宁夏医科大学基础医学院宁夏医科大学实验动物中心宁夏医科大学中医学院

目的观察针刺联合脐带间充质干细胞对卵巢早衰大鼠卵巢储备功能的影响。方法70只雌性SD大鼠随意分为造模组和正常组。造模组大鼠给予去氧乙烯基环己烯(80 mg/kg)腹腔注射,制备卵巢早衰大鼠模型。造模成功后,再将其随意分为模型组、针刺... 详细信息

目的观察针刺联合脐带间充质干细胞对卵巢早衰大鼠卵巢储备功能的影响。方法70只雌性SD大鼠随意分为造模组和正常组。造模组大鼠给予去氧乙烯基环己烯(80 mg/kg)腹腔注射,制备卵巢早衰大鼠模型。造模成功后,再将其随意分为模型组、针刺组、干细胞组、联合治疗组,每组12只,剩余12只正常大鼠为空白组。针刺组针刺“关元”“气海”“足三里”;干细胞组在干预的第1、8天,经大鼠尾静脉注入人类脐带间充质干细胞液0.5 mL(细胞数为2.5×106个);联合治疗组进行针刺和尾静脉注入人类脐带间充质干细胞液。干预后,检测大鼠卵巢湿重和卵巢指数;酶联免疫吸附测定检测血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)和抗米勒管激素(AMH)水平及抗氧化指标丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;HE染色检测各组大鼠卵巢形态结构变化;免疫组织化学法及蛋白质印迹法检测卵巢组织中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠卵巢湿重、卵巢指数降低(P<0.01);血清LH、T、FSH、MDA水平上升(P<0.05,P<0.01),E2、AMH、GSH、SOD水平下降(P<0.05,P<0.01);HE染色显示卵巢内成熟卵泡减少,闭锁卵泡增多;卵巢组织中Akt、p-Akt、Bcl-2相对表达量下降(P<0.05,P<0.01),Bax相对表达量上升(P<0.01)。与模型组比较,针刺组、干细胞组、联合治疗组大鼠卵巢湿重、卵巢指数上升(P<0.05,P<0.01);血清中的T、FSH水平下降(P<0.05,P<0.01);血清中E2、AMH、GSH、SOD水平上升(P<0.05,P<0.01);HE染色显示卵巢异常情况减少;卵巢组织中p-Akt、Bcl-2阳性表达与蛋白相对表达量上升(P<0.05,P<0.01),Bax阳性表达与蛋白相对表达量下降(P<0.05,P<0.01)。与针刺组和干细胞组比较,联合治疗组卵巢湿重上升(P<0.05),血清T、FSH水平下降(P<0.05,P<0.01),AMH水平上升(P<0.05,P<0.01),Akt阳性表达上升(P<0.05)。与针刺组比较,联合治疗组SOD、GSH水平上升(P<0.01),Bax蛋白相对表达量下降(P<0.01)。与干细胞组比较,联合治疗组血清MDA水平下降(P<0.05)。结论针刺、干细胞和联合治疗对卵巢早衰大鼠均能起到积极治疗作用,均能改善卵巢早衰大鼠卵巢储备功能,促进卵巢颗粒细胞增殖,抑制卵泡凋亡;且联合治疗效果优于单纯针刺和干细胞治疗。

关键词：针刺脐带间充质干细胞卵巢早衰干细胞移植大鼠

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弓形虫毒力相关效应分子ROP16Ⅲ诱导人肺腺癌A549细胞的基因表达谱

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第4期39卷 473-479,486页

作者：苏雅静乔霞汪澎涛康宇婷杨宁爱贾伟赵志军宁夏医科大学总医院宁夏临床病原微生物重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院医学实验中心银川750004

目的利用生物信息学方法分析刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)棒状体蛋白16Ⅲ(ROP16Ⅲ)重组表达载体转染人肺腺癌A549细胞后的基因表达谱,筛选致病候选基因。方法构建真核表达载体pEGFP-N1-ROP16Ⅲ。将A549细胞分为未转染组、pEGFP-N1组、... 详细信息

目的利用生物信息学方法分析刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)棒状体蛋白16Ⅲ(ROP16Ⅲ)重组表达载体转染人肺腺癌A549细胞后的基因表达谱,筛选致病候选基因。方法构建真核表达载体pEGFP-N1-ROP16Ⅲ。将A549细胞分为未转染组、pEGFP-N1组、pEGFP-N1-ROP16Ⅲ组,后两组分别用pEGFP-N1、pEGFP-N1-ROP16Ⅲ质粒进行瞬时转染,48 h后收集各组细胞,提取总RNA,纯化后进行芯片杂交分析,筛选差异表达基因(DEG)。将DEG进行基因本体(GO)功能富集分类和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。利用ToppGene从DEG中筛选弓形虫ROP16Ⅲ致病候选基因。利用STRING在线分析软件对候选基因所编码的蛋白质进行蛋白间相互作用(PPI)网络分析。结果pEGFP-N1-ROP16Ⅲ转染A549细胞后共有566个基因表达差异显著,其中382个基因上调,184个基因下调。对DEG进行生物信息学分析,共获得997条GO注释和50条KEGG信号通路。这些DEG参与了多种生物学过程,包括防御反应、I型干扰素信号通路、先天免疫应答、对外界生物刺激的反应等;参与的信号通路主要集中在抗原处理及呈递,细胞质DNA传感通路,Toll样受体信号通路,NOD样受体信号通路等。ToppGene筛选共获得14个弓形虫ROP16Ⅲ致病候选基因,其中C-X-C基序趋化因子配体11(CXCL11)、Toll样受体3(TLR3)、C-C基序趋化因子26(CCL26)、人类白细胞抗原-E(HLA-E)、早幼粒白血病基因(PML)及信号转导子与转录激活因子2(STAT2)等6个基因在弓形虫方面的研究尚未见报道。PPI网络构建分析发现,DEG编码的蛋白质PPI网络由376个节点(蛋白质)和1152条边(相互作用关系)组成,STAT2、HLA-E和PML位于PPI网络的中心节点处,删除这些关键节点后PPI网络结构涣散。通路富集分析结果显示,CXCL11等6个基因共涉及12条信号通路,主要与趋化因子信号通路、Toll样受体信号通路、程序性坏死、内吞作用及细胞因子-细胞因子受体相互作用等相关,这些生物信号通路可能参与弓形虫ROP16Ⅲ的致病过程。结论本研究筛选发现CXCL11、TLR3、CCL26、HLA-E、PML和STAT2致病候选基因,为进一步探索刚地弓形虫病的致病机制提供了理论依据。

关键词：弓形虫ROP16Ⅲ 表达谱生物信息学蛋白互作网络

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