检索结果-内蒙古大学图书馆

“菟丝子-枸杞子”药对调控SIRT1/Nrf2信号通路抑制氧化应激后血睾屏障损伤改善少弱精子症大鼠生精功能

中国实验方剂学杂志 2025年

作者：段雯张小静丁文捷金建宁楚国庆宁夏医科大学总医院宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室

目的：探讨“菟丝子-枸杞子”药对调控沉默信息调节因子（SIRT1）/核因子E2相关因子2（Nrf2）抑制氧化应激所致血睾屏障功能障碍改善少弱精子症（OAS）大鼠生精功能的作用及机制。方法：35只雄性SD大鼠随机分为正常组（7只）和造模组（2... 详细信息

目的：探讨“菟丝子-枸杞子”药对调控沉默信息调节因子（SIRT1）/核因子E2相关因子2（Nrf2）抑制氧化应激所致血睾屏障功能障碍改善少弱精子症（OAS）大鼠生精功能的作用及机制。方法：35只雄性SD大鼠随机分为正常组（7只）和造模组（28只），采取氢化可的松水溶液灌胃联合单因素电刺激法建立OAS大鼠模型，随机分为模型组、菟丝子-枸杞子颗粒剂组(3.2 g·kg-1)、菟丝子-枸杞子总黄酮组(0.1 g·kg-1+0.24 g·kg-1)和左卡尼汀组(0.38 g·kg-1)，给药4周。全自动精子分析仪检测大鼠精子质量；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠睾丸组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MAD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平；苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠睾丸组织病理变化及生精功能评分；透射电镜（TEM）观察大鼠睾丸支持细胞超微结构变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）及实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组大鼠沉默信息调节因子1（SIRT1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、闭合蛋白（occludin）、闭锁小带蛋白1（ZO-1）、缝隙连接蛋白43（connexin43，CX43）、β联蛋白（β-catenin）蛋白及mRNA表达水平。结果：与正常组比较，模型组精子总数、运动能力下降（P<0.05，P<0.01），睾丸组织及血睾屏障结构损伤明显，生精功能评分下降（P<0.01），睾丸组织GSH-PX水平、SOD水平下降（P<0.05），MDA水平升高，睾丸组织SIRT1、Nrf2、ZO-1、CX43、β-catenin、occludin蛋白表达水平不同程度下降（P<0.05，P<0.01），SIRT1、Nrf2、ZO-1、CX43、β-catenin mRNA转录水平下降（P<0.05，P<0.01）。经各组药物治疗后，菟丝子-枸杞子颗粒剂组、菟丝子-枸杞子总黄酮组、左卡尼汀组睾丸组织及血睾屏障结构损伤改善，生精功能评分升高（P<0.01）；与模型组比较，各治疗组GSH-PX、SOD水平均升高（P<0.05，P<0.01），菟丝子-枸杞子颗粒剂组MDA水平下降；菟丝子-枸杞子颗粒剂组、菟丝子-枸杞子总黄酮组睾丸组织SIRT1、Nrf2、ZO-1、CX43、β-catenin、occludin蛋白及mRNA水平表达升高（P<0.05，P<0.01）。结论：菟丝子-枸杞子药对可改善少弱精子症大鼠生精功能，其机制可能与调控SIRT1/Nrf2通路抑制氧化应激缓解血睾屏障损伤相关，且总黄酮可能为菟丝子-枸杞子药对发挥该治疗作用的物质基础。

关键词：菟丝子-枸杞子少弱精子症血睾屏障氧化应激沉默信息调节因子/核因子E 相关因子2

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密点麻蜥通过Akt/mTOR通路调控糖酵解抑制胃癌顺铂耐药的研究

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中药材 2025年 1251-1257页

作者：李铮刘彩月张泽洋朱西杰师小茜李卫强宁夏医科大学中医学院宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室

目的:研究密点麻蜥对胃癌顺铂耐药细胞(MKN45/DDP)糖酵解途径的影响及作用机制。方法:选择SD大鼠制备空白血清与密点麻蜥含药血清,采用CCK-8法检测各浓度密点麻蜥含药血清对MKN45/DDP细胞活力的影响,测得20%密点麻蜥含药血清抑制作用最... 详细信息

目的:研究密点麻蜥对胃癌顺铂耐药细胞(MKN45/DDP)糖酵解途径的影响及作用机制。方法:选择SD大鼠制备空白血清与密点麻蜥含药血清,采用CCK-8法检测各浓度密点麻蜥含药血清对MKN45/DDP细胞活力的影响,测得20%密点麻蜥含药血清抑制作用最佳,用于进行后续实验。实验设空白对照组、顺铂组、密点麻蜥组、密点麻蜥+顺铂组、SC79(Akt/mTOR通路激动剂)组、密点麻蜥+SC79组。采用EdU法、克隆形成实验、Annexin V-FITC双染法检测各组细胞的增殖和凋亡情况;用试剂盒检测各组药物对细胞葡萄糖摄取量、乳酸生成量、ATP生成量的影响;Western Blot检测各组细胞中GLUT1、HK2、PKM2、LDHA、P-gp、MRP6和Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果:与空白对照组比较,顺铂组、密点麻蜥组、密点麻蜥+顺铂组细胞增殖活力、集落形成能力、葡萄糖摄取量、乳酸生成量、ATP生成量显著降低,凋亡率显著升高,细胞中GLUT1、HK2、PKM2、LDHA、P-gp、MRP6蛋白表达及Akt、mTOR蛋白的磷酸化水平显著降低,SC79组细胞中细胞增殖活力、集落形成能力、葡萄糖摄取量、乳酸生成量、ATP生成量显著升高,凋亡率显著降低,细胞中GLUT1、HK2、PKM2、LDHA、P-gp、MRP6蛋白表达及Akt、mTOR蛋白的磷酸化水平显著升高(P<0.01)。密点麻蜥的作用显著优于顺铂,二者联合作用显著优于单独使用(P<0.01)。SC79能显著减弱密点麻蜥的作用(P<0.01)。结论:密点麻蜥可能通过调控Akt/mTOR信号通路抑制胃癌顺铂耐药细胞内糖酵解关键酶及耐药相关蛋白表达,抑制胃癌顺铂耐药细胞活力,诱导其凋亡,发挥对顺铂增敏提效、改善耐药的作用。

关键词：密点麻蜥胃癌顺铂耐药糖酵解 Akt/mTOR信号通路

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慢性静力性损伤模型家兔颈后肌群转录组学的生物信息分析

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中国康复医学杂志 2024年第4期39卷 480-487页

作者：杨楠魏晓歌袁兰英穆静孙文静宋斐王燕李开颖马惠昇宁夏医科大学中医学院宁夏回族自治区银川市750000 宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室

目的:利用转录组测序分析技术研究慢性静力性损伤模型家兔颈后肌的差异表达基因(DEGs)和关键信号通路。方法:通过长期反复屈曲家兔颈部复制兔颈后肌慢性静力负荷损伤模型。利用转录组测序技术筛选DEGs并进行GO功能富集和KEGG通路富集分... 详细信息

目的:利用转录组测序分析技术研究慢性静力性损伤模型家兔颈后肌的差异表达基因(DEGs)和关键信号通路。方法:通过长期反复屈曲家兔颈部复制兔颈后肌慢性静力负荷损伤模型。利用转录组测序技术筛选DEGs并进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。构建PPI网络,筛选出前10位的DEGs。结果:与空白组相比,共有310个DEGs,其中上调193个,下调117个;GO分析显示,模型组差异基因主要涉及炎症和免疫反应调节等相关功能;KEGG分析显示吞噬体与Fcγ-R介导的吞噬作用、NF-κB等信号通路表现活跃。PPI网络确定了10个hub基因,其中TLR4、CTSS、ITGB2、TYROBP、CD74、LAPTM5等表达上调,仅PPARG表达下调。结论:颈肌慢性静力性损伤的病理变化涉及众多基本的生物学过程,炎症反应及免疫微环境的紊乱在其中发挥着重要作用;与炎症反应密切相关的差异基因以及NF-κB信号通路、吞噬体、Fcγ-R介导的吞噬作用等通路分子的转录激活可能是其主要的分子机制。

关键词：慢性静力性损伤颈肌损伤转录组测序差异表达基因

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外用中药复方凝胶贴剂基质的优化

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中国医药工业杂志 2023年第4期54卷 584-590页

作者：李莉顾相帅乔芳霞牛阳杨建宏宁夏医科大学药学院宁夏银川750004 宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏银川750004

以凝胶贴剂基质的初黏力、剥离强度、内聚力和综合物理性能为评价指标,通过单因素试验和Box-Behnken设计结合响应面法筛选并优化了空白基质中各成分的种类和用量。结果表明,外用中药复方凝胶贴剂的空白基质优化处方为聚丙烯酸钠NP7006.... 详细信息

以凝胶贴剂基质的初黏力、剥离强度、内聚力和综合物理性能为评价指标,通过单因素试验和Box-Behnken设计结合响应面法筛选并优化了空白基质中各成分的种类和用量。结果表明,外用中药复方凝胶贴剂的空白基质优化处方为聚丙烯酸钠NP7006.14%、聚丙烯酸钠N5004.06%、甘羟铝0.21%,甘油24.05%。照优化处方制备的贴剂外观光滑细腻,成形性、黏弹力良好。

关键词：中药复方外用凝胶贴剂基质优化

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复方蜥蜴散对胃癌顺铂耐药裸鼠肠道菌群的影响

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中成药 2024年第11期46卷 3776-3783页

作者：李铮程翻娥刘彩月白星师小茜朱西杰李卫强宁夏医科大学中医学院宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏银川750004

目的探讨复方蜥蜴散对胃癌顺铂耐药裸鼠肿瘤的抑制作用及对肠道菌群的影响。方法32只SPF级雄性BALB/c裸鼠随机分为空白组(8只)和造模组(24只),造模组于右侧腋窝皮下注射顺铂耐药的人胃癌MKN45/DDP细胞悬液,制备胃癌裸鼠顺铂耐药模型。... 详细信息

目的探讨复方蜥蜴散对胃癌顺铂耐药裸鼠肿瘤的抑制作用及对肠道菌群的影响。方法32只SPF级雄性BALB/c裸鼠随机分为空白组(8只)和造模组(24只),造模组于右侧腋窝皮下注射顺铂耐药的人胃癌MKN45/DDP细胞悬液,制备胃癌裸鼠顺铂耐药模型。造模成功后,将造模组裸鼠随机分为模型组、顺铂组(0.002 g/kg)和复方蜥蜴散组(2.8 g/kg),每组8只。空白组和模型组灌胃生理盐水,复方蜥蜴散组灌胃复方蜥蜴散水煎液,顺铂组腹腔注射顺铂溶液,连续干预4周。免疫荧光、ELISA、Western blot法检测各组裸鼠肿瘤组织中多药耐药(MDR)蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药蛋白1(MRP1)表达。采集各组裸鼠粪便,运用16S rRNA测序技术检测各组裸鼠肠道菌群变化。将P-gp、MRP1蛋白表达与肠道菌群中门、属水平的优势物种进行相关性分析。结果MKN45/DDP细胞相较MKN45细胞具有更高耐药性(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,各造模组裸鼠体质量降低(P<0.01);与模型组比较,复方蜥蜴散组裸鼠肿瘤质量减轻(P<0.01),P-gp、MPR1蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);与顺铂组比较,复方蜥蜴散组P-gp、MPR1蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。16S rRNA肠道菌群测序结果显示,与空白组比较,模型组裸鼠肠道菌群出现失调,Shannon、Sobs指数升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,复方蜥蜴散组Sobs指数降低(P<0.05),拟杆菌门(Bacteroidota)、别样杆菌属(Alistipes)丰度升高,厚壁菌门(Firmicutes)、乳杆菌属(Lactobacillus)丰度降低;与顺铂组比较,复方蜥蜴散组Shannon、Sobs指数降低(P<0.05),Bacteroidota、阿克曼氏菌属(Akkermansia)丰度升高,Firmicutes、Lactobacillus丰度降低。相关性分析结果显示,Firmicutes、Lactobacillus菌群丰度与P-gp、MRP1蛋白表达呈正相关(P<0.05,P<0.01)。结论复方蜥蜴散可通过增加能恢复药物响应的Bacteroidota和Akkermansia丰度,降低刺激P-gp表达的Firmicutes及Lactobacillus丰度,抑制胃癌MDR蛋白P-gp、MRP1表达,减少药物外排,恢复药物敏感性,发挥对胃癌顺铂耐药的肿瘤抑制作用。

关键词：复方蜥蜴散胃癌顺铂耐药肠道菌群多药耐药(MDR)蛋白

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基于IL-6/JAK2/STAT3通路探讨化瘀消痞汤对胃癌前病变大鼠胃黏膜损伤的作用及机制

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中药新药与临床药理 2024年第12期35卷 1827-1834页

作者：公艳霞白敏刘自由陈涵斐彭鹏郭崇元虎峻瑞李卫强段永强宁夏医科大学宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏银川 750004 宁夏区域高发病中西医结合防治研究重点实验室宁夏银川 750004 甘肃中医药大学甘肃兰州 730000 宁夏医科大学宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏银川 750004

目的基于白细胞介素6(IL-6)/Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路探讨化瘀消痞汤对胃癌前病变(PLGC)大鼠胃黏膜损伤的作用及机制.方法随机选取10只大鼠作为空白组,其余50只大鼠作为造模组,采用多因素综合造模.将模... 详细信息

目的基于白细胞介素6(IL-6)/Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路探讨化瘀消痞汤对胃癌前病变(PLGC)大鼠胃黏膜损伤的作用及机制.方法随机选取10只大鼠作为空白组,其余50只大鼠作为造模组,采用多因素综合造模.将模型复制成功的大鼠随机分为模型组、叶酸组(0.002 g·kg-1)及化瘀消痞汤低、中、高剂量组(6.2、12.4、24.8 g·kg-1).灌胃给药,每日1次,连续干预3个月.观察大鼠一般状况并测定体质量、3 h进食量;采用HE染色法观察胃组织病理变化;ELISA法检测血清中IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β水平;免疫荧光法检测胃组织中B细胞淋巴瘤/白血病-xL(Bcl-xL)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平;Western Blot法检测胃组织中IL-6、p-JAK2、p-STAT3、细胞周期素D1(CyclinD1)、原癌基因(c-Myc)蛋白表达水平.结果与空白组比较,模型组大鼠体质量、3 h进食量明显降低(P<0.05);胃黏膜明显变薄且不完整,腺体排列紊乱且数量减少,部分区域可见胃上皮细胞肠化的杯状细胞及炎性细胞浸润;血清IL-6、TNF-α、IL-1β 水平明显升高(P<0.05);胃组织中Bcl-xL、VEGF、IL-6、p-JAK2、p-STAT3、CyclinD1、c-Myc蛋白表达明显上调(P<0.05).与模型组比较,化瘀消痞汤中、高剂量组大鼠的体质量、3 h进食量明显升高(P<0.05);胃黏膜损伤有不同程度改善,腺体排列趋于整齐,胃上皮细胞肠化情况有所改善,炎性细胞较少;血清IL-6、TNF-α、IL-1β水平明显降低(P<0.05);胃组织中Bcl-xL、VEGF、IL-6、p-JAK2、p-STAT3、CyclinD1、c-Myc蛋白表达明显下调(P<0.05).结论化瘀消痞汤能明显改善PLGC大鼠的胃黏膜病理损伤,可能与其抑制炎症反应及调控IL-6/JAK2/STAT3通路抑制细胞增殖有关.

关键词：化瘀消痞汤胃癌前病变 IL-6/JAK2/STAT3通路细胞增殖炎症反应大鼠

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基于网络药理学和体外实验探究臭壳虫通过MAPK/JNK信号通路诱导肺腺癌细胞凋亡和自噬

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中国中药杂志 2025年

作者：吴丹马科马治国金学连杜子怡宁夏医科大学中医学院宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室银川市中医医院

基于网络药理学分析和体外实验验证，探讨臭壳虫治疗肺腺癌（lung adenocarcinoma， LUAD）的作用机制。通过收集臭壳虫入血成分的药物靶点与LUAD 疾病靶点，进行交集靶点基因本体（gene ontology， GO）和京都基因与基因组百科全书（ky... 详细信息

基于网络药理学分析和体外实验验证，探讨臭壳虫治疗肺腺癌（lung adenocarcinoma， LUAD）的作用机制。通过收集臭壳虫入血成分的药物靶点与LUAD 疾病靶点，进行交集靶点基因本体（gene ontology， GO）和京都基因与基因组百科全书（kyoto encyclopedia of genes and genomes， KEGG）富集分析，预测臭壳虫治疗 LUAD 的功能过程和主要活性物质，对入血成分中核心活性化合物和关键靶点进行分子对接；并通过 CCK-8 实验、平板克隆实验、吖啶橙染色、流式细胞术和免疫印迹法等实验，验证臭壳虫治疗 LUAD 的机制。臭壳虫 39 个入血成分共有 766 个靶点，和 2 820 个 LUAD 疾病靶点取交集后得到 334 个潜在治疗靶点，综合 GO 和 KEGG 富集分析表明，丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路与 LUAD 密切相关，入血成分的主要活性物质包括山柰酚、甘草查尔酮B、(3，6，9-trimethylidene-2-oxo-3a，4，5，6a，7，8，9a，9b-octahydroazuleno[4，5-b]furan-8-yl) acetate、杨梅素和柚皮苷查尔酮；体外实验表明，臭壳虫以浓度依赖性方式降低 LUAD 细胞活力，并通过下调增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）表达水平，上调 Bcl-2相关X蛋白（BCL-2-associated X protein，BAX）/ B细胞淋巴瘤因子2（b-cell lymphoma-2，Bcl-2）、胱天蛋白酶3（cysteine-aspartate specific protease 3，Caspase-3）、苄氯素1（Beclin1）、微管相关蛋白轻链3 Ⅱ (microtubule-associated protein light chain 3 Ⅱ， LC3Ⅱ) 表达水平，诱导凋亡和自噬来抑制 LUAD 细胞的增殖，自噬抑制剂氯喹（chloroquine，CQ）增强了臭壳虫的促凋亡作用。此外，c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase， JNK）抑制剂（SP600125）抑制 JNK 通路的激活以及臭壳虫诱导的细胞凋亡和自噬。结论：综上所述，臭壳虫通过激活 MAPK/JNK 通路诱导 LUAD 细胞凋亡和自噬，在 LUAD 中发挥有效的抗癌作用。

关键词：臭壳虫肺腺癌 MAPK信号通路凋亡自噬

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密点麻蜥不同部位调控NF-κB/SNAIL通路干预胃癌顺铂耐药研究

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中草药 2023年第15期54卷 4920-4927页

作者：程翻娥白星李铮师小茜李卫强宁夏医科大学中医学院宁夏银川750004 宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏银川750004

目的基于核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/SNAIL通路探讨密点麻蜥Eremias multiocellata不同部位联合顺铂(cisplatin,DDP)对胃癌裸鼠顺铂耐药模型的干预机制。方法将36只BALB/c裸鼠于右侧腋窝sc MKN45/DDP细胞悬液制备胃癌裸鼠... 详细信息

目的基于核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/SNAIL通路探讨密点麻蜥Eremias multiocellata不同部位联合顺铂(cisplatin,DDP)对胃癌裸鼠顺铂耐药模型的干预机制。方法将36只BALB/c裸鼠于右侧腋窝sc MKN45/DDP细胞悬液制备胃癌裸鼠耐药模型,造模成功后随机分为模型组、DDP组、密点麻蜥头部+DDP组、四肢+DDP组、躯干+DDP组和尾部+DDP组,每组6只。除模型组外,其余各组给予相应药物治疗4周。MTT法检测MKN45/DDP细胞的耐药性;检测各组肿瘤体积及抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色观察各组肿瘤组织病理变化;免疫组化法检测各组肿瘤组织黏蛋白1(Mucin 1,MUC1)表达;Western blotting检测各组肿瘤组织中NF-κB/SNAIL通路相关蛋白、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)、肺耐药蛋白(lung resistant protein,LRP)表达;TUNEL检测各组肿瘤组织细胞凋亡情况。结果与MKN45细胞相比,MKN45/DDP细胞对顺铂的耐药性相对较强,其半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50))和耐药指数分别为0.671μg/mL、1.973。与模型组比较,各给药组肿瘤体积均显著缩小(P<0.05),以尾部+DDP组抑瘤率最高;肿瘤细胞排列稀疏,细胞核呈不同程度缩小或破裂;肿瘤组织p-p65、SNAIL、P-gp、MRP1、LRP和MUC1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01),E-cadherin蛋白表达水平均显著升高(P<0.05、0.01),细胞凋亡率均显著升高(P<0.05、0.01),以尾部+DDP组最为明显。结论密点麻蜥不同部位联合DDP可调控NF-κB/SNAIL通路,逆转荷瘤裸鼠胃癌顺铂耐药,以尾部+DDP组增敏提效作用最佳。

关键词：密点麻蜥顺铂胃癌耐药性 NF-κB/SNAIL通路尾部

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基于PI3K/Akt/HIF-1信号通路探讨杞蓉片改善卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制

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中国中药杂志 2023年第17期48卷 4774-4781页

作者：南楠杜小利陈苗罗嘉琦宁夏医科大学宁夏银川750000 宁夏区域高发病中西医结合防治研究重点实验室、宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏银川750000

观察杞蓉片通过PI3K/Akt/HIF-1信号通路对早发性卵巢功能不全(POI)小鼠卵巢颗粒细胞调亡的影响,探讨其作用机制。SPF级雌性BALB/c小鼠60只,以完全随机法分为正常组、模型组、阳性对照组、杞蓉片低剂量组、杞蓉片中剂量组、杞蓉片高剂量... 详细信息

观察杞蓉片通过PI3K/Akt/HIF-1信号通路对早发性卵巢功能不全(POI)小鼠卵巢颗粒细胞调亡的影响,探讨其作用机制。SPF级雌性BALB/c小鼠60只,以完全随机法分为正常组、模型组、阳性对照组、杞蓉片低剂量组、杞蓉片中剂量组、杞蓉片高剂量组,每组各10只。正常组腹腔注射等量生理盐水,其余组腹腔注射1次环磷酰胺120 mg·kg^(-1)·d^(-1),建立POI动物模型。造模成功后,杞蓉片低、中、高剂量组分别以0.6、1.2、2.4 mg·g^(-1)·d^(-1)灌胃,阳性对照组给予克龄蒙片0.22 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,治疗28 d为1个疗程。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠外周血中雌二醇(E_(2))、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗缪勒管激素(AMH)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察卵巢组织形态,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测颗粒细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、促凋亡蛋白(Bax)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸激酶(Akt)、低氧诱导因子1(HIF-1)蛋白表达水平。HE染色结果显示,与正常组比较,模型组卵巢组织松散或被破坏,有空泡样结构出现,卵巢间质可见水肿及纤维化,颗粒细胞排列紊乱或松散,正常卵泡数显著减少;与模型组相比,给药组卵巢结构及各级卵泡均有不同程度的恢复,闭锁卵泡相对减少。与正常组比较,模型组小鼠血清E_(2)、AMH显著减少(P<0.01),FSH、LH浓度显著升高(P<0.01);与模型组比较,杞蓉片高剂量组E_(2)、AMH显著升高(P<0.05),FSH、LH浓度显著降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组小鼠卵巢组织中PI3K、Akt、HIF-1、Bax、caspase-3蛋白表达显著上升(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.01);与模型组相比,杞蓉片高、中、低剂量组小鼠卵巢组织中PI3K、Akt、HIF-1、Bax、caspase-3蛋白表达显著下降(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著上升(P<0.05)。结果表明,杞蓉片可上调POI小鼠Bcl-2,下调Bax、caspase-3蛋白表达,抑制卵泡颗粒细胞凋亡状态,从而延缓卵巢衰老,改善生殖轴功能,增强卵巢储备能力,其机制可能与抑制PI3K/Akt/HIF-1通路有关。

关键词：杞蓉片早发性卵巢功能不全卵巢组织 PI3K/Akt/HIF-1 小鼠

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基于Keap1/Nrf2信号通路探讨丹葛解酲汤对酒精性肝病大鼠模型的作用机制

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临床肝胆病杂志 2023年第5期39卷 1119-1125页

作者：王铭徐建虎马丽宁夏医科大学中医学院银川750004 宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室银川750004

目的观察丹葛解酲汤对酒精性肝病(ALD)大鼠模型的治疗作用,探讨丹葛解酲汤抗氧化应激的作用机制。方法将96只SD大鼠随机分为空白组(n=13)和ALD组(n=83),ALD组采用白酒灌胃法建立ALD模型。随后将存活ALD组大鼠随机分为模型组、丹葛解... 详细信息

目的观察丹葛解酲汤对酒精性肝病(ALD)大鼠模型的治疗作用,探讨丹葛解酲汤抗氧化应激的作用机制。方法将96只SD大鼠随机分为空白组(n=13)和ALD组(n=83),ALD组采用白酒灌胃法建立ALD模型。随后将存活ALD组大鼠随机分为模型组、丹葛解酲汤高剂量组(24 g/kg)、丹葛解酲汤低剂量组(6 g/kg)及益肝灵片组(21 mg/kg),每组各17只,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,其余组分别灌胃给予相应的药物,共干预4周。采用HE染色法观察大鼠肝组织的病理变化;Western Blot法检测肝脏组织Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、核转录因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)的蛋白含量;实时荧光定量PCR检测肝组织Keap1、HO-1 mRNA表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与空白组相比,模型组肝细胞排列紊乱,出现肝细胞坏死,有大量炎性细胞浸润,并伴有大量的脂滴空泡;Keap1蛋白、Keap1 mRNA表达水平均明显上升(P值均<0.05),Nrf2蛋白、HO-1蛋白、HO-1 mRNA表达水平均明显下降(P值均<0.05)。与模型组相比,丹葛解酲汤高剂量组、丹葛解酲汤低剂量组及益肝灵片组肝细胞排列变整齐,坏死及炎性细胞减少,偶见或无脂滴空泡;Keap1蛋白、Keap1 mRNA表达水平显著降低(P值均<0.05),Nrf2蛋白、HO-1蛋白、HO-1 mRNA表达水平显著上升(P值均<0.05)。结论丹葛解酲汤可能通过调节Keap1/Nrf2信号通路,促使Nrf2入核,上调HO-1的表达,减轻氧化应激反应,进而对ALD大鼠发挥保护作用。

关键词：肝疾病,酒精性 Kelch样ECH相关蛋白1 NF-E2相关因子2 丹葛解酲汤大鼠,Sprague-Dawley

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