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第十五次全国动脉硬化性疾病学术会议

作者：顾铃毓徐灵博马胜超李桂忠姜怡邓宁夏医科大学临床医学院国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏血管损伤与修复研究研究重点实验室宁夏医科大学基础医学院国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏血管损伤与修复研究研究重点实验室

背景：肝细胞自噬异常能够引起肝损伤,lnc GAS5 能够在乳腺癌等疾病中调控细胞自噬,但lncGAS5是否调控同型半胱氨酸引起的肝自噬的变化尚不清楚。目的：探讨lncGAS5 在同型半胱氨酸致肝细胞自噬中的作用。方法：将培养的肝细胞分为对照...

背景：肝细胞自噬异常能够引起肝损伤,lnc GAS5 能够在乳腺癌等疾病中调控细胞自噬,但lncGAS5是否调控同型半胱氨酸引起的肝自噬的变化尚不清楚。目的：探讨lncGAS5 在同型半胱氨酸致肝细胞自噬中的作用。方法：将培养的肝细胞分为对照组,同型半胱氨酸组,转染lncGAS5 空载体并用同型半胱氨酸干预组,干扰lncGAS5 并用同型半胱氨酸干预组。

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同型半胱氨酸致足细胞凋亡中FoxO1 DNA甲基化水平增高

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中国组织工程研究 2021年第2期25卷 269-273页

作者：刘昆谢琳曹军丁宁徐灵博马胜超李桂忠姜怡邓卢冠军宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学总医院宁夏回族自治区银川市750004

背景:同型半胱氨酸增多会引起肾损伤并导致足细胞凋亡,但是其具体机制还尚不清楚。目的:探讨叉头框转录因子O1(forkhead box O,FoxO1)及其DNA甲基化在同型半胱氨酸致足细胞凋亡中的作用。方法:体外培养小鼠肾脏足细胞(MPC-5),将其分为... 详细信息

背景:同型半胱氨酸增多会引起肾损伤并导致足细胞凋亡,但是其具体机制还尚不清楚。目的:探讨叉头框转录因子O1(forkhead box O,FoxO1)及其DNA甲基化在同型半胱氨酸致足细胞凋亡中的作用。方法:体外培养小鼠肾脏足细胞(MPC-5),将其分为对照组(0μmol/L同型半胱氨酸)和同型半胱氨酸组(80μmol/L同型半胱氨酸)。干预细胞48 h后,采用免疫荧光技术检验足细胞凋亡相关蛋白Bax、caspase12和Bcl-2的表达情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测FoxO1 mRNA水平;采用Western blot检测FoxO1和DNMT1蛋白表达水平;采用巢式降落式特异性PCR(nMS-PCR)测验FoxO1的DNA甲基化水平。结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组足细胞中Bax和caspase12表达明显增高,Bcl-2表达明显降低;②FoxO1的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01);③与对照组相比,同型半胱氨酸组FoxO1 DNA甲基化水平明显升高(P<0.01),同型半胱氨酸组足细胞中DNMT1蛋白表达明显增高(P<0.01);④结果表明:FoxO1 DNA高甲基化在同型半胱氨酸致足细胞凋亡中作用显著,而DNMT1参与同型半胱氨酸诱导的足细胞凋亡过程。

关键词：肾肾小球肾损伤同型半胱氨酸足细胞凋亡因子甲基化

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高血糖经抑制磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶加重脑缺血再灌注损伤

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解剖学杂志 2019年第2期42卷 132-137页

作者：肖亚利马艳梅郭永真李雅琼张建忠景丽宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复重点实验室银川750004 宁夏医科大学宁夏颅脑疾病重点实验室-国家重点实验室培育基地银川750004

目的:探讨磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)在高血糖加重脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:通过注射链脲佐菌素制备糖尿病高血糖模型,线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型;分为假手术组(sham组),正常血糖脑缺血再灌注24 h组(NM ... 详细信息

目的:探讨磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)在高血糖加重脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:通过注射链脲佐菌素制备糖尿病高血糖模型,线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型;分为假手术组(sham组),正常血糖脑缺血再灌注24 h组(NM I/R 24 h组)、72 h组(NM I/R 72 h组),高血糖脑缺血再灌注24 h组(HM I/R 24 h组)以及72 h组(HM I/R 72 h组),采用组织学、免疫组织化学及免疫印迹等方法,比较观察脑组织的损伤及p-AMPK的表达。结果:NM I/R 24 h组、NM I/R 72 h组大鼠均可见神经功能缺失的表现,HM组大鼠神经功能缺失评分明显高于NM组。NM I/R 24 h组梗死区脑组织疏松水肿,神经元固缩;HM组大鼠脑组织疏松水肿及固缩神经元较NM组大鼠明显增加;与NM I/R 72 h组比较,HM组大鼠仍存在脑组织疏松水肿,较多固缩神经元。免疫组织化学显色和免疫印迹结果可见,I/R 24 h和I/R 72 h,HM组p-AMPK相对蛋白量明显低于NM组。p-AMPK定位观察可见,p-AMPK与神经元共表达,但不与星形胶质细胞共表达。结论:糖尿病高血糖加重大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,可能与神经元磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶减少有关。

关键词：脑高血糖糖尿病缺血再灌注神经元腺苷酸活化蛋白激酶

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Hcy促血管平滑肌细胞增殖迁移相关的miRNAs筛选研究

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宁夏医科大学学报 2024年第1期46卷 7-14页

作者：马星桂娜马婷王秀玉莫廷润张鸣号宁夏医科大学基础医学院银川750004 国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室银川750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室银川750004 宁夏贺兰县人民医院贺兰750200

目的明确同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对人源血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖迁移的影响以及分析Hcy干预下VSMC增殖迁移相关差异miRNAs,为探讨Hcy促VSMC增殖迁移的分子机制提供依据。方法体外培养VSMC,分为Con... 详细信息

目的明确同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对人源血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖迁移的影响以及分析Hcy干预下VSMC增殖迁移相关差异miRNAs,为探讨Hcy促VSMC增殖迁移的分子机制提供依据。方法体外培养VSMC,分为Control组和100μmol·L^(-1) Hcy组。采用CCK-8法测量VSMC的增殖活性;采用划痕实验分析VSMC在0 h和48 h的迁移情况。高通量测序分析各组VSMC中差异化表达的miRNAs,采用miRanda和TargetScan软件进行靶基因预测,使用BLAST软件将预测靶基因序列与GO和KEGG数据库比对,分析靶基因的功能,获得与VSMC增殖和迁移相关的靶基因信息。通过RT-qPCR对其中表达上调的miRNAs进行验证。结果Hcy干预能增加VSMC的增殖活力(P<0.01),且VSMC的划痕面积减少(P<0.01)。两组细胞共检测到576个miRNAs,其中已知miRNAs 404个,新预测miRNAs 172个。与Control组相比,Hcy组存在88个差异表达的miRNAs,其中表达上调的20个,表达下调的68个。与VSMC增殖和迁移相关的miRNAs有20个,表达上调的包括miRNA39、miRNA206和miRNA212-5p,表达下调的包括miRNA35等17个。RT-qPCR结果显示,Hcy组miRNA212-5p的表达上调(P<0.05)。结论Hcy致VSMC增殖迁移过程中存在差异表达的miRNAs,miRNA212-5p可能参与了Hcy对VSMC的作用。

关键词：微小RNA 靶基因预测高通量测序同型光胱氨酸血管平滑肌细胞

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miR-148a-5p参与了高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠的肝细胞凋亡

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中国组织工程研究 2020年第35期24卷 5632-5637页

作者：马芳张辉李桂忠马胜超沈江涌孙磊郝银菊马生贤姜怡邓宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学总医院烧伤整形外科宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学药学院宁夏回族自治区银川市750004

背景:高蛋氨酸饮食可以导致ApoE^-/-小鼠发生肝损伤,微小RNA(miRNA)参与细胞存活、分化和细胞凋亡等各种细胞过程,具有重要意义。目的:探讨miR-148a-5p在高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠肝细胞凋亡中的作用。方法:12只ApoE^-/-小鼠随机分... 详细信息

背景:高蛋氨酸饮食可以导致ApoE^-/-小鼠发生肝损伤,微小RNA(miRNA)参与细胞存活、分化和细胞凋亡等各种细胞过程,具有重要意义。目的:探讨miR-148a-5p在高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠肝细胞凋亡中的作用。方法:12只ApoE^-/-小鼠随机分为2组,每组6只,ApoE^-/-对照组为普通饮食,ApoE^-/-高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食。苏木精-伊红染色观察2组肝组织形态学变化;TUNEL染色观察肝细胞的凋亡情况;Western blot测定Bax、Bcl-2的表达改变;荧光定量PCR检测miR-148a-5p的表达;运用Target Scan靶基因预测软件预测miR-148a-5p的靶基因;双荧光素酶活性实验明确其靶向关系。结果与结论:①与对照组相比,ApoE^-/-高蛋氨酸组肝脏组织肝小叶结构发生明显紊乱,部分细胞呈胞浆疏松化变性,肝细胞凋亡增加,Bax的表达明显上升且Bcl-2的表达显著下降(P<0.01);②荧光定量PCR结果显示,ApoE^-/-高蛋氨酸组miR-148a-5p的表达增加(P<0.05);③靶基因预测软件提示,Bcl-2为miR-148a-5p的潜在靶基因;④双荧光素酶活性实验确定了miR-148a-5p与Bcl-2的靶向关系(P<0.05);⑤肝细胞中过表达miR-148a-5p后Bax的表达显著上升且Bcl-2的表达明显下降(P<0.01);⑥提示在高蛋氨酸饮食诱导的ApoE^-/-小鼠肝细胞中,miR-148a-5p通过负调控Bcl-2促进肝细胞凋亡,这可能是造成肝损伤的机制之一。

关键词： miR-148a-5p Bcl-2 高蛋氨酸饮食肝细胞凋亡动物

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核转录因子NF-κB在同型半胱氨酸致ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化中的作用

核转录因子NF-κB在同型半胱氨酸致ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化中的...

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第十五次全国动脉硬化性疾病学术会议

作者：李桂忠王睿杨安宁姜怡邓宁夏医科大学基础医学院国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室(宁夏医科大学) 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室

目的探讨核转录因子NF-κB 在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化中的作用及其机制。方法选用C57BL/6J 背景5 周龄雄性ApoE-/-小鼠为研究对象，将小鼠随机分为3 组：对照组、高蛋氨酸组、干预组。所有小鼠喂养14 周后处死，进行标本采集和检...

目的探讨核转录因子NF-κB 在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化中的作用及其机制。方法选用C57BL/6J 背景5 周龄雄性ApoE-/-小鼠为研究对象，将小鼠随机分为3 组：对照组、高蛋氨酸组、干预组。所有小鼠喂养14 周后处死，进行标本采集和检测。主动脉病理切片HE 染色，检测血清Hcy、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)含量，通过ELISA 法检测血清核因子-κB(NF-κB)以及荧光定量PCR 检测血管FABP4 基因mRNA 的表达。

关键词：

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HCM Risk-SCD评分单独及联合LVEF对中青年肥厚型心肌病患者长期预后的预测价值

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郑州大学学报（医学版） 2023年第5期58卷 656-661页

作者：程栋秦臻于凤仪高佳敏王泽禹路永政徐彦彦杨宇孙钊威汤毅桑海强唐俊楠郑州大学第一附属医院心血管内科郑州450052 河南省心脏损伤修复重点实验室郑州450052 河南省心血管疾病临床医学研究中心郑州450052

目的:探讨HCM Risk-SCD评分及其联合左心室射血分数(LVEF)预测中青年肥厚型心肌病(HCM)长期预后的价值。方法:收集2014年1月至2022年6月共224例确诊为HCM的中青年患者临床资料。通过Cox回归确定患者发生心源性猝死(SCD)的危险因素,ROC... 详细信息

目的:探讨HCM Risk-SCD评分及其联合左心室射血分数(LVEF)预测中青年肥厚型心肌病(HCM)长期预后的价值。方法:收集2014年1月至2022年6月共224例确诊为HCM的中青年患者临床资料。通过Cox回归确定患者发生心源性猝死(SCD)的危险因素,ROC曲线分析LVEF联合HCM Risk-SCD评分对SCD的预测价值。结果:随访期间共发生SCD 17例。在调整了BMI、血小板计数等混杂因素后,HCM Risk-SCD评分对于患者生存结局的评估仍具有统计学意义(HR=1.321,95%CI为1.155~1.510,P<0.001)。HCM Risk-SCD评分与LVEF联合后AUC(95%CI)可达0.901(0.878~0.924),而HCM Risk-SCD评分AUC(95%CI)为0.776(0.762~0.790),LVEF AUC(95%CI)为0.683(0.665~0.701),联合后对HCM患者发生SCD的预测价值上升(P<0.05)。结论:HCM Risk-SCD评分联合LVEF可预测中青年HCM患者发生SCD。

关键词：肥厚型心肌病 HCM Risk-SCD评分左心室射血分数中青年心源性猝死长期预后

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β-谷甾醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤和ERK1/2信号通路的影响

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心血管病学进展 2020年第3期41卷 321-325页

作者：严宁杨春霞马娟齐国雪杨立波马玉茹马学平宁夏医科大学总医院心脏中心宁夏银川750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学研究生院宁夏银川750004

目的研究β-谷甾醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤和ERK1/2信号通路的影响。方法30只SD雄性大鼠随机分成3组:假手术组、模型组和β-谷甾醇处理组;采用HE染色观察大鼠心肌组织损伤,监测大鼠心脏指数(CI)、每搏量(SV)和每搏指数(SI)等心肌功能... 详细信息

目的研究β-谷甾醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤和ERK1/2信号通路的影响。方法30只SD雄性大鼠随机分成3组:假手术组、模型组和β-谷甾醇处理组;采用HE染色观察大鼠心肌组织损伤,监测大鼠心脏指数(CI)、每搏量(SV)和每搏指数(SI)等心肌功能指标的变化;采用酶联免疫吸附剂法测定大鼠血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;采用蛋白印记法检测大鼠心脏组织中细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2结合蛋白X(Bax)的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠心肌指标CI、SV和SI,血清中SOD水平及心脏组织中Bcl-2的表达均显著下降,血清中MDA、ROS、CK、CK-MB、IL-1β、IL-6、TNF-α和心脏组织中ERK1/2和Bax的表达显著上升(P<0.05);与模型组相比,β-谷甾醇处理组大鼠心肌指标CI、SV和SI,血清中SOD水平和心脏组织中Bcl-2的表达均显著上升,血清中MDA、ROS、CK、CK-MB、IL-1β、IL-6、TNF-α和心脏组织中ERK1/2和Bax的表达显著下降(P<0.05)。结论β-谷甾醇可保护大鼠心肌缺血再灌注损伤,可能参与ERK1/2信号通路,缓解心肌缺血再灌注大鼠出现的氧化应激和炎症损伤,并抑制其心肌细胞的凋亡。

关键词： β-谷甾醇 ERK1/2信号通路氧化应激炎症凋亡

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脂肪酸结合蛋白4在蛋氨酸致ApoE-/-鼠动脉粥样硬化中的作用

脂肪酸结合蛋白4在蛋氨酸致ApoE-/-鼠动脉粥样硬化中的作用

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第十五次全国动脉硬化性疾病学术会议

作者：王睿李桂忠杨安宁姜怡邓宁夏医科大学基础医学院国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室(宁夏医科大学) 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川 750004

目的探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在蛋氨酸致ApoE-/-鼠动脉粥样硬化(AS)中的作用。方法选用C57BL/6J 背景5 周龄雄性ApoE-/-鼠为研究对象，将小鼠随机分为3 组：对照组、高蛋氨酸组、干预组。所有小鼠喂养14 周后处死，进行后续实验。...

目的探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在蛋氨酸致ApoE-/-鼠动脉粥样硬化(AS)中的作用。方法选用C57BL/6J 背景5 周龄雄性ApoE-/-鼠为研究对象，将小鼠随机分为3 组：对照组、高蛋氨酸组、干预组。所有小鼠喂养14 周后处死，进行后续实验。行主动脉病理切片HE 染色，通过高效液相色谱(HPLC)法检测血管S-腺苷甲硫氨酸(SAM)、S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)含量，应用DNA 甲基化转移酶(DNMTs)活性分析试剂盒检测DNMTs 活性，通过巢式降落式甲基化特异性PCR(ntMS-PCR)法检测血管FABP4DNA 甲基化的变化，采用荧光定量PCR 检测血管FABP4 基因mRNA 的表达。

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miR-30a-5p启动子区DNA甲基化在同型半胱氨酸致肝损伤中的作用研究

miR-30a-5p启动子区DNA甲基化在同型半胱氨酸致肝损伤中的作用研究

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第十五次全国动脉硬化性疾病学术会议

作者：孙磊郭伟马鹏俊马胜超杜星辰张鸣号郝银菊姜怡邓宁夏医科大学基础医学院宁夏银川 750004 宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川 750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川 750004 宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川 750004 宁夏医科大学药学院宁夏银川 750004

目的：探讨miR-30a-5p 启动子区DNA 甲基化在肝损伤中的作用.方法：随机选取4 周龄CBS 基因正常(CBS+/+,n=12)及单基因敲除小鼠(CBS+/-,n=12),均给予高蛋氨酸饮食8 周.HL-7702 细胞体外常规培养,分为Control 组、Hcy 组、Hcy+AZC 组.全...

目的：探讨miR-30a-5p 启动子区DNA 甲基化在肝损伤中的作用.方法：随机选取4 周龄CBS 基因正常(CBS+/+,n=12)及单基因敲除小鼠(CBS+/-,n=12),均给予高蛋氨酸饮食8 周.HL-7702 细胞体外常规培养,分为Control 组、Hcy 组、Hcy+AZC 组.全自动生化分析仪检测小鼠血清Hcy、ALT、AST 水平;微板法测定肝细胞ALT、AST 水平;小鼠肝脏石蜡切片HE 染色观察肝脏损伤情况;细胞活力染色检测肝细胞活力;实时定量PCR(RT-qPCR)法检测小鼠肝脏组织和肝细胞miR-30a-5p 的表达;Pearson 相关性分析肝脏miR-30a-5p 表达与血清ALT、AST 水平的相关性;巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测小鼠肝脏组织以及肝细胞miR-30a-5p 启动子区DNA 甲基化水平的变化.

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