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miR-148a靶向DNA甲基转移酶1对ATP结合盒转运体G1基因甲基化的调节

中国卫生检验杂志 2017年第12期27卷 1783-1786页

作者：杨曦李俊骍张霖黄晓燕廉姜芳宁波市医疗中心李惠利医院器官移植重点实验室浙江宁波315041 宁波市医疗中心李惠利医院心血管内科浙江宁波315041

目的探讨微小RNA(miR-148a)在巨噬细胞中能否靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)从而调节ATP结合盒转运体G1(ABCG1)的甲基化水平。方法运用生物信息学网站预测DNMT1是miR-148a靶基因,利用双萤光素酶报告基因系统验证miR-148a能否与DNMT1(3'U... 详细信息

目的探讨微小RNA(miR-148a)在巨噬细胞中能否靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)从而调节ATP结合盒转运体G1(ABCG1)的甲基化水平。方法运用生物信息学网站预测DNMT1是miR-148a靶基因,利用双萤光素酶报告基因系统验证miR-148a能否与DNMT1(3'UTR)特异性结合;将miR-148a模拟物转染至THP-1源性巨噬细胞,运用实时荧光定量PCR技术检测DNMT1的mRNA水平,运用Western Blot技术检测DNMT1蛋白表达水平;运用焦磷酸测序技术观察miR-148a能否在巨噬细胞中影响ABCG1甲基化水平。结果 miR-148a能显著降低pmir GLODNMT1载体上的萤火虫萤光素酶活性;miR-148a在巨噬细胞中不能降低DNMT1的mRNA水平,但可以降低DNMT1的蛋白质水平,上述差异均有统计学意义(P<0.05);焦磷酸测序发现在THP-1源性巨噬细胞miR-148a未影响ABCG1的甲基化水平。结论 miR-148a可以与DNMT1(3'UTR)特异性结合并且阻遏DNMT1蛋白质合成,但是在巨噬细胞中不能通过改变DNMT1的蛋白水平而影响ABCG1甲基化水平。

关键词： miR-148 DNA甲基转移酶1 甲基化 THP-1源性巨噬细胞

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三维动脉自旋标记法在胶质瘤术前的应用价值

三维动脉自旋标记法在胶质瘤术前的应用价值

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2014年浙江省医学会放射学学术年会

作者：张玉琴徐海东董海波王波李晖胡斌王莹莹梁良浙江省宁波市医疗中心李惠利医院MRI室

目的探讨三维动脉自旋标记法(3D-ASL)在脑胶质瘤术前分级的应用价值。方法选择45例经病理证实的胶质瘤患者(高级别26例,低级别19例),行常规MRI及3D-ASL检查,于脑血流量图测量肿瘤实性部分灌注最明显区及健侧CBF值,计算TBFmax/CBF健侧比... 详细信息

目的探讨三维动脉自旋标记法(3D-ASL)在脑胶质瘤术前分级的应用价值。方法选择45例经病理证实的胶质瘤患者(高级别26例,低级别19例),行常规MRI及3D-ASL检查,于脑血流量图测量肿瘤实性部分灌注最明显区及健侧CBF值,计算TBFmax/CBF健侧比值;观察全脑灌注情况。结果 45例患者均获得高质量全脑灌注图。高级别胶质瘤于脑血流量图上显示不同程度高灌注,低级别胶质瘤灌注正常或减低,高低级别胶质瘤TBFmax/健侧比值分别为3.11依1.45、0.86依0.28,其差异有统计学意义(p﹤0.01)。9例高级别胶质瘤出现瘤体周围血管较健侧扩张,CBF值升高征象。结论 3D-ASL可在术前安全无创地提取胶质瘤灌注信息以判断其级别,并且可评估患者全脑血流量情况,有助于术前制定周密方案。

关键词：磁共振成像三维动脉自旋标记技术脑胶质瘤

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PNN促进肾癌的发展并抑制舒尼替尼诱导的细胞凋亡(英文)

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中国细胞生物学学报 2020年第9期42卷 1560-1569页

作者：余肖刘开泰项振飞林晨张雁儒王萍马琪宁波大学医学院浙江省病理生理重点实验室宁波315211 宁波市医疗中心李惠利医院放疗科宁波315040 宁波市第一医院宁波市泌尿系疾病转化医学研究实验室宁波315010

桥粒相关蛋白与肿瘤的关系是目前的研究热点之一。传统观点认为,桥粒相关蛋白PNN(pinin)能够促进上皮细胞间的黏附和RNA的选择性剪接;而新近研究发现,PNN在肝癌、乳腺癌等肿瘤的发生发展中扮演着重要角色;但其是否参与肾透明细胞癌(ccR... 详细信息

桥粒相关蛋白与肿瘤的关系是目前的研究热点之一。传统观点认为,桥粒相关蛋白PNN(pinin)能够促进上皮细胞间的黏附和RNA的选择性剪接;而新近研究发现,PNN在肝癌、乳腺癌等肿瘤的发生发展中扮演着重要角色;但其是否参与肾透明细胞癌(ccRCC)的发生,尚需深入研究。在该研究中,首先发现PNN在肾癌组织和细胞中的表达显著性高于对照组;且其升高程度与肾癌的病理分级密切相关。其次,降低肾癌细胞中PNN的表达后,细胞增殖被显著抑制,细胞周期被阻滞在G0/G1期。最后,降低细胞内PNN的表达能显著增强靶向药物舒尼替尼的细胞毒性,增加凋亡细胞的数量,此作用与PI3K/AKT途径密切相关。因此,PNN能激活PI3K/AKT通路促进靶向药物舒尼替尼对肾癌细胞的毒性作用;PNN有望成为肾癌耐药靶向治疗的潜在靶点。

关键词：桥粒相关蛋白PNN 细胞增殖舒尼替尼肾透明细胞癌

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高血浆降钙素原患者的临床特征及预后分析：附188例分析

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中华危重病急救医学 2017年第7期29卷 613-618页

作者：潘楚丽崔巍周妃妃涂军伟林秀慧李立斌张根生金华市中心医院呼吸科浙江金华321000 浙江大学医学院附属第二医院重症医学科浙江杭州310009 宁波市医疗中心李惠利医院重症监护室浙江宁波315040

目的探讨高血浆降钙素原（PCT〉100μg/L）患者的临床特征以及预后情况,以提高临床医师对这类患者的认识和诊治水平.方法采用回顾性研究方法,收集2013年2月至2016年12月浙江大学医学院附属第二医院收治的入院48 h内血浆PCT〉100μg/L... 详细信息

目的探讨高血浆降钙素原（PCT〉100μg/L）患者的临床特征以及预后情况,以提高临床医师对这类患者的认识和诊治水平.方法采用回顾性研究方法,收集2013年2月至2016年12月浙江大学医学院附属第二医院收治的入院48 h内血浆PCT〉100μg/L的患者资料,分析其临床特征;按照入院28 d预后分为存活组和死亡组.收集患者一般资料及PCT〉100μg/L当日生命体征、24 h尿量、血常规、生化全套、凝血谱、心肌酶谱、动脉血气分析等;采用logistic回归分析筛选影响预后的危险因素.结果研究期间共收治入院48 h内血浆PCT〉100μg/L的患者188例,所有患者均纳入最终分析;其中男性128例（占68.1%）,平均年龄62（49,75）岁;主要分布于重症加强治疗病房（ICU）,占70.7%（133/188）;患者主诊断多为脓毒症（91.0%）、多器官功能障碍综合征（MODS,57.4%）、胸腹腔大手术后（20.7%）、创伤/烧伤（13.8%）及心肺复苏后（CPR,6.4%）;28 d存活115例,死亡73例,总病死率为38.8%.与存活组相比,死亡组主诊断为MODS（84.9%比40.0%）、创伤/烧伤（26.0%比6.1%）、CPR后的比例（13.7%比1.7%）及主诊断叠加数〔个：2.0（2.0,3.0）比2.0（1.0,2.0）〕,呼吸机支持（82.2%比40.9%）和休克的比例（100.0%比60.0%）,以及急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ评分〔APACHEⅡ（分）：24（19,28）比14（10,16）〕、序贯器官衰竭评分〔SOFA（分）：16.0（12.5,18.0）比9.0（6.0,12.0）〕均显著升高,肝功能指标、凝血谱、心肌酶谱以及血乳酸（Lac）等指标均明显升高,但血小板计数（PLT）显著下降〔×109/L：62.00（21.50,111.00）比93.00（53.00,136.00）〕,差异均有统计学意义（均P〈0.05）.将单因素分析中有统计学意义的指标纳入多因素logistic回归分析,结果显示,高APACHEⅡ评分〔优势比（OR）=1.290,95%可信区间（95%CI）=1.121~1.484,P=0.000〕以及发生MODS（OR=7.264,95%CI=1.762~29.941,P=0.006）是预测高血浆PCT患者死亡的独立危险因素.结论高血浆PCT（〉100μg/L）主要见于脓毒症、MODS、创伤及CPR后患者,多有呼吸及循环功能不全.高血浆PCT患者的预后与原发疾病（创伤/烧伤、MODS、心搏骤停）、PLT、肝功能、凝血功能、心肌酶谱以及Lac水平相关,而高APACHEⅡ评分以及发生MODS为高血浆PCT患者预后不良的独立危险因素.

关键词：降钙素原临床特征预后因素

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游离空肠移植重建下咽和颈段食管的手术配合

游离空肠移植重建下咽和颈段食管的手术配合

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第十五次中国中西医结合耳鼻咽喉科专业委员会年会

作者：张雨娜浙江省宁波市医疗中心李惠利医院手术室

目的总结8例自体游离空肠移植重建下咽和颈段食管的手术配合。方法全喉全下咽切除,颈段食管部分切除,游离空肠修复下咽和颈段食管缺损,针对手术进程进行相应的护理配合。结果手术均顺利完成,8例患者移植游离空肠全部成活,术后吞咽功... 详细信息

目的总结8例自体游离空肠移植重建下咽和颈段食管的手术配合。方法全喉全下咽切除,颈段食管部分切除,游离空肠修复下咽和颈段食管缺损,针对手术进程进行相应的护理配合。结果手术均顺利完成,8例患者移植游离空肠全部成活,术后吞咽功能恢复良好,无并发症发生。结论全面的心理护理,充分的术前准备,娴熟的术中护理,尤其小血管吻合的精细配合,为手术成功提供保障。

关键词：下咽癌空肠移植重建下咽重建颈段食管血管吻合手术配合

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游离空肠移植重建下咽和颈段食管的手术配合

游离空肠移植重建下咽和颈段食管的手术配合

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2016年浙江省医学会耳鼻咽喉头颈外科学学术年会

作者：张雨娜浙江省宁波市医疗中心李惠利医院手术室

目的总结8例自体游离空肠移植重建下咽和颈段食管的手术配合。方法全喉全下咽切除,颈段食管部分切除,游离空肠修复下咽和颈段食管缺损,针对手术进程进行相应的护理配合。结果手术均顺利完成,8例患者移植游离空肠全部成活,术后吞咽功能... 详细信息

关键词：游离空肠手术配合颈段食管

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伊贝沙坦和培垛普利对左心室肥大时心肌连接蛋白43、结蛋白与肌钙蛋白T表达的实验研究

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中国病理生理杂志 2005年第8期21卷 1552-1556页

作者：毛斐斐朱有法王钰姜庆军余小锋浙江大学附属儿童医院临床药学室浙江杭州310003 浙江大学医学院病理科浙江杭州310031 宁波市医疗中心李惠利医院心内科浙江宁波315000

目的:探讨左室肥大时血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型拮抗剂伊贝沙坦和血管紧张素转换酶抑制剂培垛普利对心肌连接蛋白43(CX43)、结蛋白与肌钙蛋白T(cTnT)表达的影响。方法:分假手术组、SD大鼠腹主动脉部分结扎的手术组及腹主动脉部分结扎的处理... 详细信息

目的:探讨左室肥大时血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型拮抗剂伊贝沙坦和血管紧张素转换酶抑制剂培垛普利对心肌连接蛋白43(CX43)、结蛋白与肌钙蛋白T(cTnT)表达的影响。方法:分假手术组、SD大鼠腹主动脉部分结扎的手术组及腹主动脉部分结扎的处理组即伊贝沙坦组(20mg·kg-1·d-1ig)、培垛普利组(2mg·kg-1·d-1ig)、两药联用组(伊贝沙坦组20mg·kg-1·d-1ig+培垛普利组2mg·kg-1·d-1ig),术后次周起干预8周,观察左室重量指数(LVMI)和心肌细胞横径(TDM),免疫组织化学检测心肌CX43、结蛋白与cTnT表达。结果:培垛普利组、伊贝沙坦组和联合用药组LVMI和TDM均显著低于手术组(P<0·05),手术组心肌细胞闰盘区域和侧侧连接的胞膜上均有不规则CX43表达;伊贝沙坦组、培垛普利和其联用组的CX43表达分布较有规律,主要以带状表达于闰盘;手术组心肌CX43、结蛋白、cTnT表达量明显少于伊贝沙坦组、培垛普利组和其联用组(P<0·05)。结论:左室肥大时伊贝沙坦和培垛普利有利于心肌CX43、结蛋白与cTnT的表达与分布,能减轻左室心肌肥大,减少心肌细胞损伤,促进心肌细胞骨架结构与缝隙连接的基本正常恢复。

关键词：伊贝沙坦培垛普利血管紧张素转换酶抑制药连接蛋白43 结蛋白肌钙蛋白T 肥大,左心室大鼠

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心电轴偏转在宽QRS波心动过速体表心电图诊断中的作用

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实用医学杂志 2019年第3期35卷 476-478页

作者：徐小勇孟香红关海旺麻付胜廉姜芳葛世俊周建庆宁波市医疗中心李惠利医院心血管内科浙江宁波315041 宁波卫生职业技术学院基础医学教研室浙江宁波315104

目的探索QRS波额面电轴偏转在体表心电图鉴别诊断宽QRS波心动过速(WCT)中的价值。方法收集2012年4月至2018年4月间经电生理检查证实的WCT患者186例(体表心电图390份),运用查表法计算WCT与窦性心律下QRS波额面心电轴的偏转情况,并分析其... 详细信息

目的探索QRS波额面电轴偏转在体表心电图鉴别诊断宽QRS波心动过速(WCT)中的价值。方法收集2012年4月至2018年4月间经电生理检查证实的WCT患者186例(体表心电图390份),运用查表法计算WCT与窦性心律下QRS波额面心电轴的偏转情况,并分析其在体表心电图鉴别诊断WCT中的作用。结果 186例WCT中147例(79.03%)为室性心动过速(VT),39例(20.97%)为室上性心动过速(SVT)伴传导异常。在95%置信区间内,QRS波电轴偏转诊断VT的ROC曲线下面积为0.708(0.579～0.817,P=0.007)。与电轴左偏、电轴右偏、LBBB+电轴右偏等方法相比,电轴偏转> 68°诊断VT的特异性(91.43%)和敏感性(53.06%)均更理想。电轴偏转> 130°,特异性可达到100%,敏感性12.24%,其诊断效能与无人区电轴相当。结论 QRS波额面电轴偏转能准确地鉴别诊断WCT且易于掌握,可作为临床特别是基层医院心脏急症辅助诊断的常规方法加以推广。

关键词：宽QRS波心动过速室性心动过速心电轴体表心电图

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重组质粒pmCherry-WT-hERG和pEGFP-E637K-hERG的构建及其在细胞内的表达和定位

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中国卫生检验杂志 2015年第8期25卷 1216-1219页

作者：黄晓燕杨曦廉姜芳宁波市医疗中心李惠利医院器官移植重点实验室浙江宁波315040

目的分别构建先天性长QT综合征(LQTS)相关HERG基因和E637K突变基因与红色和绿色荧光蛋白基因的融合表达载体pmCherry-WT-hERG和pEGFP-E637K-bERG,观察其在细胞内的表达和定位情况。方法将克隆在pcDNA3上的HERG和E637K片段分别亚克隆到... 详细信息

目的分别构建先天性长QT综合征(LQTS)相关HERG基因和E637K突变基因与红色和绿色荧光蛋白基因的融合表达载体pmCherry-WT-hERG和pEGFP-E637K-bERG,观察其在细胞内的表达和定位情况。方法将克隆在pcDNA3上的HERG和E637K片段分别亚克隆到红色荧光蛋白载体pmCherry-C2和绿色荧光蛋白载体pEGFP-C1上,转染HEK293T细胞,24 h后利用western blot技术和荧光显微镜观察重组质粒蛋白表达和细胞内定位情况。结果重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误。转染pmCherry-WT-hERG野生型质粒的细胞可以检测到135 kD和155 kD 2条蛋白质条带,而转染pEGFP-E637K-bERG突变型质粒的细胞仅显示1条135 kD蛋白质条带,155 kD处条带缺失。融合蛋白发出的红色和绿色荧光表明,突变型蛋白分布于胞浆中,而野生型蛋白主要位于胞膜上。结论成功构建了pmCherry-WT-hERG和pEGFP-E637K-hERG不同荧光蛋白融合表达载体,并在真核细胞中得到有效表达,为LQTS突变基因的进一步功能研究奠定了基础。

关键词：先天性长QT综合征 HERG基因 E637K突变体真核表达载体

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肾上腺皮质嗜酸细胞肿瘤的影像学表现及预后

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首都医科大学学报 2014年第3期35卷 368-372页

作者：罗雪芬赵亦军陈振东浙江省宁波市医疗中心李惠利医院放射科CT室浙江宁波315041

目的探讨肾上腺皮质嗜酸细胞肿瘤(adrenocortical oncocytic neoplasm,AOA)的影像学表现及预后。方法回顾性分析10例经病理证实的肾上腺皮质嗜酸细胞肿瘤的影像学表现,术后对患者进行随访。结果 10例患者影像学表现:CT平扫表现为稍低密... 详细信息

目的探讨肾上腺皮质嗜酸细胞肿瘤(adrenocortical oncocytic neoplasm,AOA)的影像学表现及预后。方法回顾性分析10例经病理证实的肾上腺皮质嗜酸细胞肿瘤的影像学表现,术后对患者进行随访。结果 10例患者影像学表现:CT平扫表现为稍低密度肿块,MRI表现为稍长T1、T2信号;增强后CT及MRI表现为动脉期呈不均匀轻度强化,静脉期及延迟期呈持续性强化。10例患者术后随访,9例未见复发及转移,1例术后半年肿瘤复发,随后转移。结论肾上腺皮质嗜酸细胞肿瘤没有显著的临床和影像学特征,术前影像学很难做出定性诊断,易误诊为嗜铬细胞瘤等其他肿瘤,对于较大的肾上腺无功能腺瘤,应考虑到嗜酸细胞肿瘤的可能性;基于肾上腺嗜酸细胞肿瘤部分尚有交界性和恶性,因此仍需术后密切随访。

关键词：嗜酸细胞肿瘤肾上腺肿瘤随访

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