检索结果-内蒙古大学图书馆

膀胱癌组织RON蛋白与CXC趋化因子受体4蛋白的表达及临床意义

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中华实验外科杂志 2017年第12期34卷 2275-2275页

作者：马琪虞碧霞陈俊丰杨育生吕秀依蒋军辉程跃宁波市第一医院泌尿外科 315010 宁波市第一医院泌尿系疾病转化医学研究实验室 315010 宁波市临床病理诊断中心 315010

酪氨酸激酶受体RON在细胞的恶性转化和肿瘤形成中发挥了重要作用。趋化因子受体CXC趋化因子受体4（CXCR4）属趋化因子家族，与肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移及预后密切相关。

关键词： CXC趋化因子受体4 膀胱癌组织临床意义 N蛋白酪氨酸激酶受体肿瘤细胞肿瘤形成恶性转化

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人前列腺特异性同源框基因NKX3．1真核表达载体的构建及其对PC3细胞周期与凋亡的影响

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中国医师杂志 2016年第11期18卷 1637-1641页

作者：马琪王平吕秀依陈俊丰程跃陈昭典宁波市第一医院泌尿系疾病转化医学研究实验室宁波315010 浙江大学附属第一医院泌尿外科杭州310003

目的构建NKX3．1真核表达载体，探讨NKX3．1的基因定位以及其对前列腺癌细胞株PC3细胞周期和凋亡的影响。方法利用PCR技术从正常人前列腺组织中扩增NKX3．1全长读码框（ORF），并将其克隆到T载体。以该载体为模板，将NKX3．1克隆到真核... 详细信息

目的构建NKX3．1真核表达载体，探讨NKX3．1的基因定位以及其对前列腺癌细胞株PC3细胞周期和凋亡的影响。方法利用PCR技术从正常人前列腺组织中扩增NKX3．1全长读码框（ORF），并将其克隆到T载体。以该载体为模板，将NKX3．1克隆到真核细胞高效表达载体pcDNA3．1（＋）和pEGFPC1，转染入PC3细胞株并观察NKX3．1在细胞内的定位，采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡的情况。结果本实验成功构建了NKX3．1真核表达载体。转染NKX3．1inpEGFPC1的荧光主要在细胞核表达，而转染pEGFPC1的荧光则胞浆和胞核均有表达。与转染pcD-NA3．1空载体的PC3细胞株比较，转染NKX3．1的PC3细胞株细胞周期没有明显改变（P〉0．05），但早期凋亡明显增加（P〈0．01）。结论本实验在成功构建了NKX3．1真核表达载体的基础上，证明了NKX3．1是一种胞核蛋白，它不影响细胞周期，但是具有一定促进早期凋亡的作用。

关键词：基因,肿瘤抑制基因,同源盒遗传载体转染前列腺肿瘤细胞周期细胞凋亡

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鼠源性HSP70、GM-CSF双修饰前列腺癌全细胞疫苗的建立与鉴定

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中国现代医生 2015年第19期53卷 1-4,11,F0003页

作者：马琪陈俊丰蒋军辉王平蒋照辉程跃浙江大学宁波医院宁波市第一医院泌尿外科浙江宁波315010 宁波市第一医院泌尿系疾病转化医学研究实验室浙江宁波315010 浙江大学医学院附属第一医院泌尿外科浙江宁波310009

目的建立鼠源性HSP70、GM-CSF双修饰前列腺癌全细胞疫苗。方法通过化学合成和PCR方法分别构建小鼠Hspa1a、Csf2基因片段,TA克隆入p MD-18T载体测序验证。上述合成好的目的序列通过限制性内切酶Bam HI/Asc I酶切、T4DNA连接酶连接,分别... 详细信息

目的建立鼠源性HSP70、GM-CSF双修饰前列腺癌全细胞疫苗。方法通过化学合成和PCR方法分别构建小鼠Hspa1a、Csf2基因片段,TA克隆入p MD-18T载体测序验证。上述合成好的目的序列通过限制性内切酶Bam HI/Asc I酶切、T4DNA连接酶连接,分别装入慢病毒表达载体p Lenti6.3_MCS中,构建慢病毒重组载体p Lenti6.3_MCS_Hspa1a_c Myc和p Lenti6.3_MCS_Csf2_V5。载有重组载体p Lenti6.3_MCS_Hspa1a_c Myc和p Lenti6.3_MCS_Csf2_V5的慢病毒液分别对鼠前列腺癌细胞系RM-1进行稳定转染或共转染,Western blot检测蛋白表达,10 Gy放射线照射使其丧失增殖能力后冻存。结果测序验证重组慢病毒表达载体p Lenti6.3_MCS_Hspa1a_c Myc和p Lenti6.3_MCS_Csf2_V5构建成功。经293T细胞包装后分别或共转染RM-1,Western blot证实GM-CSF、s HSP70表达,GM-CSF和HSP70共表达。结论本实验成功建立了鼠HSP70、GM-CSF双修饰RM-1细胞全细胞疫苗,为以后进一步探讨全细胞抗原作用机制和全细胞免疫增强机理奠定基础。

关键词：热休克蛋白巨噬细胞集落刺激因子前列腺癌全细胞疫苗

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