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中国药理学与毒理学杂志 2015年第5期29卷 794-800页

作者：王益琦陈为升徐文锦庄丁丁唐甩恩朱华强赖苗军周文华刘惠芬宁波市鄞州区同济中学浙江宁波315175 宁波市微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心浙江宁波315010 宁波大学医学院浙江宁波315211

目的观察边缘下皮质(IL)脑区注射β2肾上腺素受体激动剂克仑特罗对海洛因自身给药大鼠复吸行为的影响。方法成年雄性SD大鼠采用固定比率F1程序进行海洛因自身给药训练,每天4 h,连续14 d,建立海洛因自身给药模型。随后每天进行2 h环境消... 详细信息

目的观察边缘下皮质(IL)脑区注射β2肾上腺素受体激动剂克仑特罗对海洛因自身给药大鼠复吸行为的影响。方法成年雄性SD大鼠采用固定比率F1程序进行海洛因自身给药训练,每天4 h,连续14 d,建立海洛因自身给药模型。随后每天进行2 h环境消退,直至达到消退标准。每侧IL脑区微注射克仑特罗8 ng,15 min后进行线索诱导的海洛因觅药行为的测定,观察大鼠自主运动情况。行为测试结束后立即处死取脑组织,Western蛋白印迹法检测边缘前皮质、IL、伏隔核壳部及核部脑区磷酸化c AMP反应元件结合蛋白(p CREB)表达水平变化。结果在线索诱导的海洛因觅药行为测试中,克仑特罗组的有效鼻触数(8±3)显著低于模型组(45±10)(P<0.01);2 h自发活动度检测中,克仑特罗组大鼠自发活动度(1557±369)和模型组(1514±264)相比无显著性差异;Western蛋白印迹法检测显示,与模型组相比,克仑特罗组大鼠的IL和伏隔核壳部的p-CREB表达均明显减少(P<0.05),而核部的p-CREB表达显著增加(P<0.01)。结论IL脑区微注射克仑特罗可显著抑制海洛因自身给药大鼠的复吸行为,其抑制作用可能与伏隔核壳部和核部p CREB表达改变有关。

关键词：克仑特罗边缘下皮质海洛因复吸 cAMP反应元件结合蛋白

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miRNAs与药物成瘾

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中国生物化学与分子生物学报 2016年第12期32卷 1295-1302页

作者：徐文锦张盼盼刘惠芬宁波大学医学院浙江宁波315211 宁波市微循环与莨菪类药研究所宁波市戒毒研究中心浙江宁波315010

药物成瘾是一种慢性复发性脑病,主要表现为不可控制的对药物持续渴求和戒断后的高复吸。目前观点认为,成瘾是中脑腹侧被盖(ventral tegmental area,VTA)到伏隔核(nucleus accumbens,NAc)脑区多巴胺能奖赏通路中神经可塑性发生改变而导... 详细信息

药物成瘾是一种慢性复发性脑病,主要表现为不可控制的对药物持续渴求和戒断后的高复吸。目前观点认为,成瘾是中脑腹侧被盖(ventral tegmental area,VTA)到伏隔核(nucleus accumbens,NAc)脑区多巴胺能奖赏通路中神经可塑性发生改变而导致的一种神经精神疾病。基因表达变化在神经可塑性中发挥着重要作用,但成瘾药物导致相关脑区结构和功能改变的机制还不甚清楚。微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是一类非编码RNA,主要通过结合靶基因mRNA 3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR),在转录后水平阻断其翻译成蛋白质或触发其不稳定而降解。越来越多的研究证实,miRNAs参与调节成瘾相关神经可塑性的变化。本文较系统地阐述miRNAs在药物成瘾中的作用研究进展,将为深入阐明药物成瘾的机制以及药物成瘾临床有效干预和诊治提供新思路。

关键词：微小RNAs 药物成瘾表观遗传可卡因神经系统

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Akt在药物成瘾机制中的研究进展

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中国药理学通报 2017年第8期33卷 1046-1050页

作者：朱华强周文华宁波大学行为神经科学研究中心浙江宁波310010 宁波市微循环与莨菪类药研究所浙江宁波315010

Akt是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的下游靶蛋白,PI3K/Akt信号通路参与细胞增殖、分化、凋亡和代谢等基本功能。中枢系统的Akt活性还受神经递质多巴胺(DA)的调节,介导多种药物成瘾的进程。该文就Akt的结构特征、活性调节以及该信号分子在药... 详细信息

Akt是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的下游靶蛋白,PI3K/Akt信号通路参与细胞增殖、分化、凋亡和代谢等基本功能。中枢系统的Akt活性还受神经递质多巴胺(DA)的调节,介导多种药物成瘾的进程。该文就Akt的结构特征、活性调节以及该信号分子在药物成瘾中的相关研究予以综述。

关键词： Akt CREB 伏隔核多巴胺 D2受体药物成瘾

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吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱受体亚型基因的表达

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药学学报 2002年第8期37卷 611-615页

作者：周文华刘惠芬顾钧谢小虎唐甩恩杨国栋吴其夏宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心浙江宁波315010 中国协和医科大学病理生理教研室北京100050

目的　观察吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱型乙酰胆碱受体m1～ 5的表达。方法　以 β actin为内标 ,用RT PCR方法检测m1～ 5的表达。结果　吗啡依赖大鼠脊髓m1～ 5受体和脑干中m1 和m2 表达较正常对照组明显升高 ,注射纳洛酮 1h后脊髓m1... 详细信息

目的　观察吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱型乙酰胆碱受体m1～ 5的表达。方法　以 β actin为内标 ,用RT PCR方法检测m1～ 5的表达。结果　吗啡依赖大鼠脊髓m1～ 5受体和脑干中m1 和m2 表达较正常对照组明显升高 ,注射纳洛酮 1h后脊髓m1～ 4 和脑干m1 表达较依赖组减少。东莨菪碱 (0 5mg·kg- 1 ,ip)或呱伦西平 (10mg·kg- 1 ,ip)明显减少吗啡戒断症状 ,呱伦西平处理后脊髓m1 ,m2 ,m3和m5表达较戒断对照组增加 ,东莨菪碱处理后脊髓m2 ,m3和m4 表达增加。结论　脊髓M受体适应性改变是吗啡戒断症状表达的生物学基础。

关键词：毒蕈碱受体吗啡依赖东莨菪碱阿片受体戒断症状基因表达

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μ阿片受体基因内含子2多态性与海洛因成瘾的关联性研究

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中国临床药理学杂志 2013年第5期29卷 331-333页

作者：谢小虎刘惠芬陈为升庄丁丁张建兵周文华宁波市微循环与莨菪类药研究所宁波大学行为神经科学研究中心

目的观察μ阿片受体基因内含子2的两个单核苷酸多态位点(rs9479757和rs2075572)与海洛因成瘾的相关性。方法用TaqMan荧光法检测332例海洛因成瘾者和190例健康对照者的rs9479757(31A/G)和rs2075572(691C/G)的基因型并进行关联分析。结果 ... 详细信息

目的观察μ阿片受体基因内含子2的两个单核苷酸多态位点(rs9479757和rs2075572)与海洛因成瘾的相关性。方法用TaqMan荧光法检测332例海洛因成瘾者和190例健康对照者的rs9479757(31A/G)和rs2075572(691C/G)的基因型并进行关联分析。结果 rs9479757和rs2075572在对照组和成瘾组间的多态分布差异无统计学意义(P>0.05);rs9479757在海洛因成瘾轻型、中型及重型组间多态分布差异有统计学意义(P<0.01);海洛因烫吸者rs9479757为GG基因型者的日均使用量,显著高于AG基因型者(P<0.05)。结论μ阿片受体基因内含子2多态性与海洛因成瘾无明显相关性,但与海洛因成瘾者的严重程度及某些行为特征有关联。

关键词： μ阿片受体基因多态性海洛因成瘾

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吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱受体和α2受体的互相调节

吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱受体和α2受体的互相调节

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中国药理学会第十届全国神经学术会议暨浙江省药理学会2002年年会

作者：周文华刘惠芬陈为升谢小虎杨国栋宁波微循环与莨菪类药研究所、宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所、宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所、宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所、宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所、宁波戒毒研究中心

目的:观察吗啡依赖或戒断大鼠脊髓和脑干中α受体基因表达。方法:以β-actin为内参照,用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定α受体mRNA的表达水平。结果:吗啡依赖大鼠脊髓和脑干α受体表达水平较正常对照大鼠升

关键词：吗啡依赖大鼠受体表达毒蕈碱受体

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毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型基因表达介导吗啡戒断反应

毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型基因表达介导吗啡戒断反应

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中国药理学会第十届全国神经学术会议暨浙江省药理学会2002年年会

目的:观察毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型(m)基因表达在吗啡依赖和戒断过程中作用。方法:鞘内和侧脑室注射特异性反义寡脱氧核苷酸（A-olig）抑制毒蕈碱受体亚型基因表达,用RT-PCR方法测定m mRNA的表达。结果:鞘内注射m和m A-olig可以明显抑... 详细信息

目的:观察毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型(m)基因表达在吗啡依赖和戒断过程中作用。方法:鞘内和侧脑室注射特异性反义寡脱氧核苷酸（A-olig）抑制毒蕈碱受体亚型基因表达,用RT-PCR方法测定m mRNA的表达。结果:鞘内注射m和m A-olig可以明显抑制吗啡戒断症状总评分值,m、m和m A-olig处

关键词：毒蕈碱型乙酰胆碱受体吗啡戒断受体亚型基因表达

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小剂量海洛因慢性给药对大鼠活动度和GFAP表达的影响

小剂量海洛因慢性给药对大鼠活动度和GFAP表达的影响

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中国细胞生物学学会医学细胞生物学学术大会

作者：陈为升刘芳赖苗军刘惠芬周文华宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心

目的:观察小剂量海洛因慢性给药对大鼠活动度和脑内胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响。方法:SD成年雄性大鼠随机分为四组:0．05mg／kg组、0.25mg／kg组、1．00mg／kg组和对照组,分别皮下注射海洛因0．... 详细信息

目的:观察小剂量海洛因慢性给药对大鼠活动度和脑内胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响。方法:SD成年雄性大鼠随机分为四组:0．05mg／kg组、0.25mg／kg组、1．00mg／kg组和对照组,分别皮下注射海洛因0．05mg／kg、0．25mg／kg、1．00mg／kg和等体积的生理盐水,每日1次,连续8 天,建立海洛因敏化模型。day8给药后立即使用摄像监控分析系统跟踪大鼠的活动轨迹测定大鼠2 h活动量(Locomotor Activity,LA),各组取部分大鼠断头处死取脑组织。其余大鼠停药7天,day16分别用0．05mg／kg、0．25mg／kg海洛因进行激发实验,给药后测定大鼠2 h活动量,然后断头处死取脑组织。用western blot方法检测海马、NAc、VTA中GFAP表达情况。结果:连续给药8天后,0．05mg／kg组大鼠活动量与对照组无显著差异,0．25mg／kg组在给药后40-50分钟时间段较生理盐水组大鼠活动量明显增大;0．05mg／kg组海马和VTA中GFAP表达减少,NAc中GFAP表达无显著差异;0．25mg／kg组海马和NAc中GFAP表达明显增加,VTA中GFAP表达减少;1．00mg／kg组海马、NAc和VTA中GFAP表达都明显增加。0．05mg／kg剂量海洛因激发后,大鼠活动量较对照组增加,海马、NAc和VTA中GFAP表达增加;0．25mg／kg剂量海洛因激发后,大鼠活动度较对照组增加明显,海马和VTA中GFAP 表达增加,NAc中GFAP表达变化不明显。结论:0．25mg／kg海洛因慢性处理能使大鼠建立行为敏化。小剂量海洛因对大鼠海马、VTA、NAc中GFAP表达有影响,提示胶质细胞可能参与海洛因敏化过程。

关键词：海洛因敏化 GFAP

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VTA中微注射M5毒蕈碱受体反义寡核苷酸抑制海洛因敏化大鼠NAc和海马中FosB表达

VTA中微注射M5毒蕈碱受体反义寡核苷酸抑制海洛因敏化大鼠NAc和海...

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中国细胞生物学学会医学细胞生物学学术大会

作者：刘惠芬周文华朱华强赖苗军陈为升刘芳杨国栋宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心宁波微循环与莨菪类药研究所宁波戒毒研究中心

目的探讨M5毒蕈碱受体亚型对海洛因诱导的大鼠行为敏化的影响,以及海洛因敏化后大脑伏隔核(NAc)和海马中FosB蛋白表达的影响。方法 SD成年雄性大鼠随机分为四组,分别皮下注射0．25mg／kg海洛因(Her),对照组注射等体积的生理盐水(NS),每... 详细信息

目的探讨M5毒蕈碱受体亚型对海洛因诱导的大鼠行为敏化的影响,以及海洛因敏化后大脑伏隔核(NAc)和海马中FosB蛋白表达的影响。方法 SD成年雄性大鼠随机分为四组,分别皮下注射0．25mg／kg海洛因(Her),对照组注射等体积的生理盐水(NS),每日1次,注射10min后置实验笼内实时监测和记录1hr内大鼠活动量(Locomotor Activity,LA),连续8d。然后停用海洛因10d。而在第17天和第18天大脑中脑腹侧被盖区(VTA)中分别微注射0．5μl(2μg Oligos)M5毒蕈碱受体反义寡核苷酸(M5 AS-ONs)、有义寡核苷酸(M5 S-ONs)或转染液(vehicle)。24hr 后所有大鼠皮下注射(0．25 mg／kg)海洛因进行激发实验,10min后置实验笼内实时监测和记录大鼠活动量,连续1 hr。最后一次活动量测定后,各组动物i．p戊巴比妥钠(60 mg·kg-1)麻醉,开胸,经左心室灌流固定,取全脑,冰冻冠状切片,用免疫组织化学法测定大鼠FosB蛋白表达。结果 Her／veh／Her组大鼠与NS／veh／Her 组相比,大鼠1hr内LA显著增加,表明实验动物已稳定建立了对海洛因的敏化。大脑VTA中微注射M5毒蕈碱受体反义寡核苷酸能抑制大鼠海洛因行为敏化的表达(P<0．05)。海洛因诱导的行为敏化大鼠中NAc及海马齿状回(DG)FosB免疫反应阳性神经元的表达增加(P<0．05),而VTA内微注射M5 AS-ONs能明显抑制 NAc及DG中FosB阳性神经元表达的增加(和海洛因敏化组(Her／veh／Her)相比,有显著性差异,P<0．05)。但VTA中微注射有义寡核苷酸不能明显抑制大鼠行为敏化的表达,也不能抑制海洛因敏化大鼠NAc和DG中FosB蛋白的表达(P 0．05)。结论阻断VTA中M5毒蕈碱受体可抑制海洛因诱导的运动敏化的表达,其机制可能是通过抑制NAc和海马神经元中FosB蛋白的激活而起作用的。M5毒蕈碱受体可作为改变海洛因行为学效应的有效药理学靶点之一。

关键词：海洛因敏化毒蕈碱受体 FosB VTA Nac DG

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毒蕈碱型乙酰胆碱受体调节吗啡大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶表达

毒蕈碱型乙酰胆碱受体调节吗啡大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶表达

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中国药理学会第十届全国神经学术会议暨浙江省药理学会2002年年会

目的:观察毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型(m)对吗啡依赖和戒断大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶（nNOS）表达的调节。方法:RTPCR方法测定nNOS mRNA的表达,western blot检测nNOS的表达,高效毛细管电泳激光诱发荧光测定微透析液谷氨酸浓度。结果:... 详细信息

目的:观察毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型(m)对吗啡依赖和戒断大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶（nNOS）表达的调节。方法:RTPCR方法测定nNOS mRNA的表达,western blot检测nNOS的表达,高效毛细管电泳激光诱发荧光测定微透析液谷氨酸浓度。结果:鞘内注射nNOS、m或m A-olig可以明显抑制吗啡戒

关键词：毒蕈碱型乙酰胆碱受体神经元型一氧化氮合酶吗啡戒断大鼠

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