检索结果-内蒙古大学图书馆

伴侣自吞噬在MPP^+损伤的SH-SY5Y细胞中的影响及葛根素的干预作用

中国中药杂志 2014年第1期39卷 106-112页

作者：王训翠王秀李庆林安徽中医药大学省部共建新安医学教育部重点实验室科研实验中心安徽合肥230038

目的:研究葛根素通过分子伴侣自吞噬途径保护MPP+损伤的SH-SY5Y细胞。方法:以1 mmol·L-1MPP+损伤SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型。采用CCK-8染色检测不同浓度的葛根素对MPP+损伤的SH-SY5Y细胞存活率的影响;透射电镜、AO染色观察... 详细信息

目的:研究葛根素通过分子伴侣自吞噬途径保护MPP+损伤的SH-SY5Y细胞。方法:以1 mmol·L-1MPP+损伤SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型。采用CCK-8染色检测不同浓度的葛根素对MPP+损伤的SH-SY5Y细胞存活率的影响;透射电镜、AO染色观察自噬体的形成及检测溶酶体活性的变化;RT-PCR检测Lamp2a,Hsc70 mRNA表达的变化,Western blotting法检测细胞内Lamp2a,Hsc70,α-synuclein蛋白的表达。结果:在12.5~50.0μmol·L-1,预先30 min加入葛根素可以保护SH-SY5Y细胞抵抗MPP+诱导的损伤,并呈一定的量效关系;AO染色和电子显微镜检测25.0,50.0μmol·L-1葛根素作用于1 mmol·L-1MPP+损伤的SH-SY5Y细胞,细胞内出现自噬体,并且随着葛根素剂量的增加,胞质中形成的自噬体增多;流式细胞术检测结果显示50.0μmol·L-1葛根素可以拮抗1 mmol·L-1MPP+诱导的SH-SY5Y细胞内ROS水平的增加,阻止氧化损伤的发生;RT-PCR和Western blotting结果表明在12.5~50.0μmol·L-1葛根素通过上调细胞内Hsc70,Lamp2a mRNA和蛋白水平保护MPP+造成的SH-SY5Y细胞损伤并抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞α-synuclein蛋白的积聚。结论:葛根素可以拮抗MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤,其保护机制可能与干预分子伴侣自吞噬途径有关。

关键词：葛根素伴侣自吞噬 MPP+ SH—SY5Y细胞 ROS

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肝豆扶木汤通过JAK/STAT信号通路对TX小鼠肾纤维化的干预作用

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中国实验方剂学杂志 2023年第18期29卷 26-35页

作者：李祥杨文明杨悦郝文杰李佩佩胡建鹏安徽中医药大学第一附属医院合肥230031 安徽中医药大学合肥230038 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室合肥230038

目的:研究肝豆扶木汤(GDFMT)对Wilson病肾纤维化小鼠的保护作用及其可能作用机制。方法:将60只成年雄性毒乳鼠(TX)随机分成模型组、GDFMT高、中、低剂量组、青霉胺组,另12只作为正常组的野生小鼠共6组。GDFMT高、中、低剂量组分别予以13... 详细信息

目的:研究肝豆扶木汤(GDFMT)对Wilson病肾纤维化小鼠的保护作用及其可能作用机制。方法:将60只成年雄性毒乳鼠(TX)随机分成模型组、GDFMT高、中、低剂量组、青霉胺组,另12只作为正常组的野生小鼠共6组。GDFMT高、中、低剂量组分别予以13.92、6.96、3.48 g·kg^(-1),青霉胺组0.1 g·kg^(-1),模型组及正常组使用等量0.9%氯化钠溶液灌胃,每天1次,连续给药4周。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中血尿素氮(BUN),肌酐(CRE),Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ),Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)的含量。苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色的小鼠肾的病理形态学改变。免疫荧光法测定肾细胞内瘦素(leptin)、Janus激酶2(JAK2)及信号传导及转录激活蛋白(STAT)蛋白表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定leptin、瘦素受体(OB-R)、JAK2及STAT mRNA的情况。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测转化生长因子-β(1 TGF-β_(1))、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达情况。结果:与正常组比较,模型小鼠BUN、CRE、PC-Ⅲ、C-Ⅳ水平显著增加(P<0.01),与模型组比较,GDFMT高、中剂量组和青霉胺组含量明显降低(P<0.05,P<0.01),GDFMT高剂量组显著减少(P<0.01)。肾组织病理形态结果表明,模型组肾纤维组织增生,用药干预后肾组织病理损害不同程度减轻,纤维化改善。免疫荧光结果显示,模型组leptin、JAK2及STAT3蛋白肾纤维化高表达,GDFMT干预后,荧光强度降低,GDFMT高剂量组荧光强度最低。Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型leptin、OB-R、JAK2、STAT3 mRNA表达水平明显升高,与模型组比较,GDFMT中、高剂量组及青霉胺组表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组TGF-β_(1)、MCP-1表达量显著上升(P<0.01),与模型组比较,GDFMT中、高剂量组表达水平显著降低(P<0.01)。结论:GDFMT可以减轻TX小鼠肾纤维化损伤,其机制可能是通过调控leptin及JAK/STAT信号通路表达有关。

关键词：肝豆扶木汤肝豆状核变性毒乳鼠(TX) 肾纤维化 Janus激酶(JAK)/信号传导及转录激活蛋白(STAT)

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痰瘀同治法对糖尿病大鼠心肌微血管病变AGEs/RAGE轴及氧化应激的影响

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南方医科大学学报 2021年第10期41卷 1527-1533页

作者：许笑雯储全根储俊蔡正银轩云罗宝璐李帅陈静罗世旷王悦琦安徽中医药大学安徽合肥230038 安徽中医药大学教育部新安医学重点实验室安徽合肥230038

目的观察痰瘀同治对高糖诱导心肌微血管内皮细胞损伤的保护作用并从AGEs/RAGE轴探讨其作用机制。方法利用酶消化法从大鼠心脏中分离出原代心肌微血管内皮细胞(CMECs),经免疫荧光法鉴定后,培养传代备用。在不同时间段采用不同浓度的葡萄... 详细信息

目的观察痰瘀同治对高糖诱导心肌微血管内皮细胞损伤的保护作用并从AGEs/RAGE轴探讨其作用机制。方法利用酶消化法从大鼠心脏中分离出原代心肌微血管内皮细胞(CMECs),经免疫荧光法鉴定后,培养传代备用。在不同时间段采用不同浓度的葡萄糖对大鼠CMECs进行诱导干预,MTT检测方法发现葡萄糖浓度在33 mmol/L且干预48 h为最佳造模条件;予不同浓度的含药血清,同上法检测得10%含药血清干预48 h为最佳干预方法。将造模成功的CMECs分成5组:模型组(MC)、化痰组(RP)、化瘀组(DBS)、痰瘀同治组(RPDBS)、ALT-711组,予以10%含药血清和ALT-711细胞干预制剂进行干预;另设一组空白对照组(NC)。采用ELISA法检测各组内皮细胞AGEs含量;免疫荧光法、Western blot法和RT-qPCR法检测各组内皮细胞RAGE蛋白及基因表达水平;细胞色素c还原法检测各组内皮细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性水平;二氢乙锭荧光探针法检测各组内皮细胞活性氧自由基(ROS)活性水平。结果MC组较NC组,细胞内晚期糖基化终末产物(AGEs)含量、RAGE蛋白及基因表达水平、NADPH氧化酶活性水平和ROS活性水平均升高(P<0.01)。与MC组比较,各治疗组的上述指标均降低(P<0.01)。在降低AGEs含量、RAGE蛋白及基因表达水平和NADPH氧化酶活性水平上,RPDBS组较RP组与DBS组显著下降(P<0.01,P<0.05);在降低ROS水平上,RPDBS组与DBS组差异无统计学意义(P>0.05),较RP组显著下降(P<0.01)。结论痰瘀同治法可能通过抑制AGEs/RAGE轴及氧化应激对高糖损伤的CMECs起到保护作用,从而防治糖尿病心肌微血管病变,且痰瘀同治法优于单独化痰法和单独化瘀法。

关键词：痰瘀同治 AGEs/RAGE轴原代心肌微血管内皮细胞糖尿病心肌微血管病变氧化应激

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UPLC-QTOF/MS^E联合UNIFI筛选平台快速分析牛膝中三萜皂苷类成分

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天然产物研究与开发 2019年第6期31卷 1054-1061,1090页

作者：傅俊吴欢吴虹安徽中医药大学药学院合肥230012 新安医学教育部重点实验室合肥230038

为明确牛膝三萜皂苷主要化学成分,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)联合UNIFI科学信息系统对牛膝中的三萜皂苷进行快速定性分析。首先,经UPLC色谱分离后的牛膝三萜皂苷化学成分群在MS^E模式下采集质谱数据;然后,通... 详细信息

为明确牛膝三萜皂苷主要化学成分,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)联合UNIFI科学信息系统对牛膝中的三萜皂苷进行快速定性分析。首先,经UPLC色谱分离后的牛膝三萜皂苷化学成分群在MS^E模式下采集质谱数据;然后,通过UNIFI平台自动检出并经过MassLynx工作站进行逐个核对,以快速完成牛膝三萜皂苷化学成分群的定性分析。本实验共分离、鉴定了40种三萜类皂苷类成分,其中以齐墩果酸为母核的化合物有38种,另有其它母核的三萜皂苷化合物2种。该方法可以快速的对牛膝中的三萜皂苷进行全面分析,将为牛膝皂苷的质量控制及后续药效物质研究提供参考。

关键词： UPLC-QTOF/MS^E 牛膝 UNIFI 三萜皂苷

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丹皮酚上调小凹蛋白-1抑制NF-κB通路减轻动脉粥样硬化模型大鼠主动脉血管内皮炎症的作用

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中国中药杂志 2020年第11期45卷 2578-2585页

作者：刘雅蓉邵倩张慧慧贾颖戴敏安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 新安医学教育部重点实验室安徽合肥230012

为探讨丹皮酚是否能通过调控主动脉小凹蛋白-1的表达,影响NF-κB通路,从而抑制动脉粥样硬化模型大鼠血管内皮炎症反应来发挥抗动脉粥样硬化的作用。采用高脂饮食+维生素D2诱导大鼠动脉粥样硬化模型;采用组织块预消化贴壁法原代培养血管... 详细信息

为探讨丹皮酚是否能通过调控主动脉小凹蛋白-1的表达,影响NF-κB通路,从而抑制动脉粥样硬化模型大鼠血管内皮炎症反应来发挥抗动脉粥样硬化的作用。采用高脂饮食+维生素D2诱导大鼠动脉粥样硬化模型;采用组织块预消化贴壁法原代培养血管内皮细胞(VECs),并建立脂多糖(LPS)刺激的VECs损伤模型,加入小凹蛋白抑制剂filipin进行对照。HE染色法观察主动脉病理形态学变化,ELISA法分别检测血清中及VECs分泌的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平变化,Western blot法分别检测主动脉及VECs中小凹蛋白-1、p65蛋白表达水平变化。整体动物结果显示,丹皮酚显著减轻动脉粥样硬化模型大鼠主动脉斑块面积及病变程度,减少内膜增生和血管壁脂质沉积;明显降低血清中的TNF-α,IL-6,VCAM-1水平;升高主动脉中小凹蛋白-1相对表达量并降低p65蛋白水平(P<0.05或P<0.01)。细胞实验结果显示,丹皮酚可以明显改善损伤的VECs细胞形态,显著降低损伤的VECs分泌的TNF-α,IL-6,VCAM-1水平,明显增加小凹蛋白-1的表达并减少p65蛋白表达(P<0.05或P<0.01);加入小凹蛋白-1抑制剂filipin后,可以显著逆转丹皮酚对炎症因子及蛋白表达的作用(P<0.05或P<0.01)。该研究结果表明,丹皮酚可以通过上调主动脉血管小凹蛋白-1的表达,抑制NF-κB通路的激活,从而减轻动脉粥样硬化模型大鼠血管内皮炎症反应,最终发挥抗动脉粥样硬化的作用。

关键词：小凹蛋白-1 丹皮酚动脉粥样硬化主动脉血管内皮炎症反应

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丹皮酚通过下调miR-155/JAK1-STAT1通路抑制巨噬细胞M1极化

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中国中药杂志 2020年第9期45卷 2158-2164页

作者：孙颖刘玲施晓艳何海黄翰文戴敏安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 新安医学教育部重点实验室安徽合肥230012

探究丹皮酚(paeonol)对小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7 M1型极化的影响,并从基因层面探讨该干预作用是否与miR-155的下调及下游JAK1-STAT1通路受抑制有关,进一步为丹皮酚抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的分子机制提供新的思路。实验采... 详细信息

探究丹皮酚(paeonol)对小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7 M1型极化的影响,并从基因层面探讨该干预作用是否与miR-155的下调及下游JAK1-STAT1通路受抑制有关,进一步为丹皮酚抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的分子机制提供新的思路。实验采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)共刺激24 h建立巨噬细胞M1型极化的模型,丹皮酚在刺激前24 h给予细胞起到预保护作用。CCK-8法检测LPS和IFN-γ共刺激对细胞的损伤作用,流式细胞术检测M1型表面标志物F4/80和CD86的表达,ELISA法检测细胞上清液中炎症因子白介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌,RT-qPCR法检测各组细胞miR-155的表达,Western blot法检测JAK1-STAT1-SOCS1通路上的蛋白表达。结果显示,LPS和IFN-γ在最适浓度下对细胞没有明显损伤作用,但可诱导巨噬细胞向M1极化,使得细胞表面的M1型标志性因子F4/80和CD86高表达,同时导致细胞表面炎症因子IL-6和TNF-α的分泌增多(P<0.05或P<0.01)。丹皮酚可显著降低RAW264.7细胞由LPS和IFN-γ诱导的表面M1型标志物F4/80和CD86的高表达,同时减少了炎症因子IL-6和TNF-α的分泌(P<0.05或P<0.01),降低了miR-155的表达水平,显著下调了JAK1-STAT1的蛋白磷酸化水平,上调SOCS1蛋白表达(P<0.01)。结果表明,丹皮酚通过下调细胞表面标志性因子及细胞分泌的炎症因子,达到抑制巨噬细胞M1型极化的作用,这种作用可能与丹皮酚下调miR-155的表达,抑制JAK1-STAT1通路的活化有关。

关键词：丹皮酚 miR-155 JAK1-STAT1通路 M1极化

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基于《黄帝内经》养生思想探析《保生要录》饮食养生观

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中国中医基础医学杂志 2021年

作者：陈家敏胡建鹏安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室

蒲虔贯，宋代著名养生学家，著有养生专著《保生要录》，专论日常摄生之术，其内容涵盖调神、气功、衣物、饮食、起居、药食等诸多方面，内容全面，论述详实，其中饮食养生颇具特色。《黄帝内经》作为现存最早的中医学典籍，其价值无可... 详细信息

蒲虔贯，宋代著名养生学家，著有养生专著《保生要录》，专论日常摄生之术，其内容涵盖调神、气功、衣物、饮食、起居、药食等诸多方面，内容全面，论述详实，其中饮食养生颇具特色。《黄帝内经》作为现存最早的中医学典籍，其价值无可比拟。本文基于《黄帝内经》中的相关养生思想，对该书从饮食的重要性，食物的分类与功效，饮食的节与度；食物的寒热，食物的进食次序；饮食的五味和调以及四时五味养藏法等方面进行探析，发现蒲氏非常重视饮食养生，并认为应先饥后食、饥饱适度；拒绝过冷及过热食物、先食热再食冷；食物应全面搭配、谨和五味，不多食当季五行属性所旺及所制之味，而多食母藏所属之味以助养当季所旺之气。其养生方法简便易行，其养生观点有理可依，内容详实，对今人不无借鉴。

关键词：《黄帝内经》《保生要录》饮食养生

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1-磷酸鞘氨醇及其信号通路在炎症相关性疾病中的作用

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中国药理学通报 2019年第8期35卷 1041-1046页

作者：卜妍红吴虹孙明慧张衡戴学静王言占翔安徽中医药大学药学院新安医学教育部重点实验室中药复方安徽省重点实验室

1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)是细胞膜鞘磷脂在代谢过程中产生的一类重要的信号分子,S1P可被转运到细胞外,通过作用于S1P受体,激活一系列下游信号分子发挥作用,如Ras/Raf/ERK、PI3K/Akt等,也可作为第二信使直接作用于细... 详细信息

1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)是细胞膜鞘磷脂在代谢过程中产生的一类重要的信号分子,S1P可被转运到细胞外,通过作用于S1P受体,激活一系列下游信号分子发挥作用,如Ras/Raf/ERK、PI3K/Akt等,也可作为第二信使直接作用于细胞内靶点,如HDAC、TRAF2。其介导的信号通路在很多生理和病理过程中发挥作用,如细胞增殖和迁移、炎性细胞因子浸润、血管生成、自身免疫等。该文分别从S1P的胞外及胞内两种作用方式,探讨S1P及其信号通路在炎症相关性疾病中的作用,综述S1P信号通路相关药物研究进展。

关键词： 1-磷酸鞘氨醇鞘氨醇激酶 G蛋白偶联受体组蛋白去乙酰化酶信号通路炎症

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脑络欣通方对大鼠脑缺血后纹状体中5-HT、DA、NE、5-HIAA的影响

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北京中医药大学学报 2015年第11期38卷 740-744,I0002页

作者：何玲温安徽严郑元胡建鹏徐伟谭辉王键安徽中医药大学省部共建新安医学教育部重点实验室安徽230038

目的研究脑络欣通方对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠100只,随机分为假手术组、模型组、预处理组、治疗3 d组、治疗7 d组,每组20只。复制MCAO(脑中动脉栓塞)/R大鼠模型。治疗3 d组造模后连续给予脑络欣通方3 d、治疗7 ... 详细信息

目的研究脑络欣通方对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠100只,随机分为假手术组、模型组、预处理组、治疗3 d组、治疗7 d组,每组20只。复制MCAO(脑中动脉栓塞)/R大鼠模型。治疗3 d组造模后连续给予脑络欣通方3 d、治疗7 d组造模后连续给予脑络欣通方7 d,预处理组造模前给予脑络欣通方药7 d,3组每天灌胃给药2次,8.54 m L/kg。假手术组及模型组予以等量生理盐水灌胃7 d。解剖大鼠并取出脑组织,分离纹状体。采用激光多普勒血流仪(LDF)测定梗死侧纹状体局部脑血流量(r CBF);采用TTC染色法检测大鼠脑梗死体积;采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)测定5-HT(5-羟色胺)mRNA、DA(多巴胺)mRNA、NE(去甲肾上腺素)mRNA、5-HIAA(5-羟吲哚乙酸)mRNA的表达含量。结果与假手术组比较,模型组发生明显缺血现象,脑血流量显著降低,脑梗死体积显著升高(P<0.01),其纹状体中的5-HT mRNA、DA mRNA、NE mRNA、5-HIAA mRNA表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,脑络欣通方预处理组、治疗3 d、治疗7 d组脑血流量明显恢复,脑梗死体积显著下降(P<0.01),纹状体中的5-HT mRNA、DA mRNA、NE mRNA、5-HIAA mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。结论脑络欣通方具有明显预防和治疗MCAO大鼠脑损伤的作用,通过增加MCAO/R大鼠的脑血流量,降低MCAO/R大鼠脑梗死体积,提高MCAO/R大鼠的纹状体组织中5-HT mRNA、DA mRNA、NE mRNA、5-HIAA mRNA单胺类递质的表达,从而起到抑制缺血后再灌注对大脑纹状体的损伤作用。

关键词：脑络欣通方脑缺血后再灌注局部脑血流量去甲肾上腺素多巴胺 5-羟色胺 5-羟吲哚乙酸大鼠

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介导缺氧诱导因子-1α表达的相关信号通路在类风湿性关节炎中的研究进展

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中国药理学通报 2019年第9期35卷 1197-1202页

作者：孙明慧吴虹卜妍红张衡戴学静王言占翔安徽中医药大学药学院新安医学教育部重点实验室中药复方安徽省重点实验室

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种系统性自身免疫性疾病,其病情的发生发展与关节缺氧微环境密切相关。缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)是调节细胞对缺氧反应的核转录因子,在促进滑膜炎症、血管... 详细信息

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种系统性自身免疫性疾病,其病情的发生发展与关节缺氧微环境密切相关。缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)是调节细胞对缺氧反应的核转录因子,在促进滑膜炎症、血管新生及血管翳形成、软骨破坏及骨侵蚀方面发挥重要作用。HIF-1α的表达除受氧感受器调节外,还受多条信号转导途径的调控,包括PI3K/Akt、Ras-Raf-MEK-ERK、JAK/STAT、NF-κB等。该文就参与调控HIF-1α表达的信号通路进行概述,以期为治疗RA以及寻找新的改善病情药物提供新的思路和依据。

关键词：类风湿性关节炎缺氧微环境缺氧诱导因子1α 信号通路作用机制炎症

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