检索结果-内蒙古大学图书馆

肝豆扶木汤通过调控miR-29b-3p/ULK1表达对Wilson病肝纤维化小鼠自噬的影响

中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 17-25页

作者：钱南南杨文明魏涛华唐露露江海林郝文杰杨玉龙张帅帅胡胜安徽中医药大学第一附属医院合肥230031 安徽中医药大学合肥230038 新安医学教育部重点实验室合肥230038

目的:探讨肝豆扶木汤(GDFMD)在Wilson病肝纤维化发展过程中的作用机制及途径。方法:将30只毒性乳突变小鼠(TX-j)随机分为模型组、GDFMD高、中、低剂量组、青霉胺组,每组6只,另随机选取6只野生型小鼠作为正常组,GDFMD高、中、低剂量组予1... 详细信息

目的:探讨肝豆扶木汤(GDFMD)在Wilson病肝纤维化发展过程中的作用机制及途径。方法:将30只毒性乳突变小鼠(TX-j)随机分为模型组、GDFMD高、中、低剂量组、青霉胺组,每组6只,另随机选取6只野生型小鼠作为正常组,GDFMD高、中、低剂量组予13.92、6.96、3.48 g·kg^(-1)药物进行灌胃。青霉胺组予0.1 g·kg^(-1)青霉胺药物进行灌胃。模型组和正常组用等容积的生理盐水,每天1次,连续灌胃4周。灌胃4周后收集样本,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN);苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)及苦味酸-天狼星红胶原(Sirus Red)染色观察肝纤维化组织病理学改变。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、免疫组化和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察肝星状细胞(HSCs)活化相关指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)表达。采用Real-time PCR观察miR-29b-3p表达;Western blot观察Unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)及其下游相关因子的表达。应用双荧光素酶报告基因检测方法对miR-29b-3p下游基因进行了验证。结果:与正常组比较,模型组肝纤维化4项(PCⅢ、ColⅣ、HA、LN)显著异常(P<0.01),病理明显异常,HSCs活化相关指标α-SMA、ColⅠ及α-SMA、ColⅠmRNA表达上调(P<0.05,P<0.01),miR-29b-3p表达下调(P<0.01),ULK1、磷酸化(p)-ULK1、自噬相关基因13(Atg13)、p-Atg13、Beclin-1、FAK家族激酶200 kDa相互作用蛋白(FIP200)、激活分子BECN1调节的自噬蛋白1(AMBRA1)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)上调(P<0.05,P<0.01),p62蛋白表达下调(P<0.01)。与模型组比较,GDFMD高、中、低剂量组及青霉胺组肝纤维化4项显著改善(P<0.01),病理状况改善,HSCs活化相关指标α-SMA、ColⅠ及α-SMA、ColⅠmRNA表达下调(P<0.05,P<0.01),miR-29b-3p表达上调(P<0.01),ULK1、p-ULK1、Atg13、p-Atg13、Beclin-1、FIP200、AMBRA1、LC3Ⅱ/Ⅰ下调(P<0.05,P<0.01),p62蛋白表达上调(P<0.01)。预测软件预测出miR-29b-3p与ULK1存在结合位点。双荧光素酶报告基因检测方法提示ULK1-WT质粒转染的细胞组在加入miR-29b-3p模拟物共培养时,荧光素酶活性降低(P<0.01)。结论:肝豆扶木汤能够通过上调miR-29b-3p,从而调控ULK1介导的细胞自噬,进一步发挥抗Wilson病肝纤维化作用。

关键词： Wilson病肝纤维化肝豆扶木汤 miR-29b-3p Unc-51样自噬激活激酶1(ULK1) 细胞自噬

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痰瘀同治法对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1/Smad3信号通路的影响

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南方医科大学学报 2020年第5期40卷 708-712页

作者：储全根蔡正银储俊轩云程婕王盼安徽中医药大学中医学院安徽合肥230012 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230012

目的观察痰瘀同治法通过调节TGF-β1/Smad3信号通路对糖尿病大鼠肾脏病变的影响。方法选取SD大鼠随机分为:空白组(NC)、模型组(MC)、痰瘀同治组(RPDBS)、化痰组(RP)、化瘀组(DBS),予以单次注射链脲佐菌素溶液制备糖尿病模型,喂养4周后,R... 详细信息

目的观察痰瘀同治法通过调节TGF-β1/Smad3信号通路对糖尿病大鼠肾脏病变的影响。方法选取SD大鼠随机分为:空白组(NC)、模型组(MC)、痰瘀同治组(RPDBS)、化痰组(RP)、化瘀组(DBS),予以单次注射链脲佐菌素溶液制备糖尿病模型,喂养4周后,RPDBS组、RP组和DBS组分别予以相应的药物干预8周,麻醉状态下取材。采用HE染色法观察肾脏组织病理学变化;Western blot法和实时荧光定量PCR法检测肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及其信号蛋白Smad3蛋白和基因表达水平。结果与MC组比较,光镜下各治疗组肾小球和肾小管结构和排列改善明显;各治疗组TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白和基因表达水平均明显下调(P<0.05);其中RPDBS组TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白和基因表达水平较RP组和DBS组下调更明显(P<0.05)。结论痰瘀同治可能通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路激活,延缓糖尿病肾病纤维化,发挥肾脏保护作用。

关键词：糖尿病肾病痰瘀同治 TGF-β1/Smad3信号通路

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肝豆扶木汤通过JNK信号通路对Wilson病肝纤维化小鼠的干预作用

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中国实验方剂学杂志 2022年第12期28卷 119-126页

作者：杨悦杨文明魏涛华唐露露郝文杰钱南南饶志红杨玉龙安徽中医药大学合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院合肥230031 新安医学教育部重点实验室合肥230038

目的:研究肝豆扶木汤(GDFMD)对Wilson病肝纤维化小鼠的肝脏保护作用及其可能作用机制。方法:将50只纯合型TX;小鼠,随机分为5组,每组各10只,另外选取10只野生型小鼠作为正常组。GDFMD高、中、低剂量组分别予以13.92、6.96、3.48 g·k... 详细信息

目的:研究肝豆扶木汤(GDFMD)对Wilson病肝纤维化小鼠的肝脏保护作用及其可能作用机制。方法:将50只纯合型TX;小鼠,随机分为5组,每组各10只,另外选取10只野生型小鼠作为正常组。GDFMD高、中、低剂量组分别予以13.92、6.96、3.48 g·kg^(-1),青霉胺组0.1 g·kg^(-1),模型组及正常组使用等量0.9%氯化钠溶液灌胃,每天1次,连续给药4周。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量变化。采用相应试剂盒检测肝组织线粒体腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)含量,Na;-K;-ATP酶活性。苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察小鼠肝组织病理形态学改变及透射电镜观察肝组织超微结构变化。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路中JNK及其磷酸化蛋白,胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达情况。结果:与正常组比较,模型组MDA含量明显升高,SOD活性明显下降(P<0.05);与模型组比较,GDFMD高、中、低剂量组及青霉胺组可显著升高SOD活性(P<0.01),明显降低MDA含量(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组ATP含量和Na;-K;-ATP酶活力明显降低(P<0.05);与模型组比较,GDFMD中、高剂量组及青霉胺组可明显提高ATP含量和Na;-K;-ATP酶活力(P<0.05,P<0.01)。肝组织病理形态结果表明,模型组可见大量肝细胞变性坏死,炎性细胞浸润,肝小叶结构不清,胶原纤维沉积;透射电镜显示模型组肝组织线粒体数量明显减少,线粒体局部损害显著,可见线粒体嵴断裂或者消失。用药干预后可见肝组织病理形态及线粒体结构有不同程度的恢复。Western blot结果提示,与正常组比较,模型组肝组织p-JNK、p-JNK/JNK、Caspase-3、Bax表达水平明显上调,Bcl-2表达明显下调(P<0.05);GDFMD中、高剂量组及青霉胺组p-JNK、p-JNK/JNK、Caspase-3、Bax表达水平显著下调,Bcl-2表达显著上调(P<0.01)。结论:GDFMD可以减轻TX;肝纤维化小鼠氧化应激损伤,恢复线粒体功能,其机制可能与调控JNK信号通路及其下游因子表达,抑制细胞凋亡有关。

关键词：肝豆扶木汤肝豆状核变性 TXJ小鼠线粒体氧化应激 c-Jun氨基末端激酶(JNK)

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同型半胱氨酸与肝豆状核变性患者中医证型的相关性

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中国实验方剂学杂志 2022年第23期28卷 110-116页

作者：丁宇峰张静杨文明郝文杰安徽中医药大学合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院合肥230031 新安医学教育部重点实验室合肥230038

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)与肝豆状核变性[又称Wilson病(WD)]患者中医证型的相关性。方法:收集符合纳入标准的WD患者356例作为WD组,同时纳入100例正常人作为健康对照,所有入选的对象均行血清Hcy水平测定及性别、年龄分析。此外,所有W... 详细信息

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)与肝豆状核变性[又称Wilson病(WD)]患者中医证型的相关性。方法:收集符合纳入标准的WD患者356例作为WD组,同时纳入100例正常人作为健康对照,所有入选的对象均行血清Hcy水平测定及性别、年龄分析。此外,所有WD组患者均采用总体评定量表(GAS)与Barthel指数(BI)评定量表进行评定,并分析GAS评分及BI评分与WD组患者血清Hcy水平之间的相关性。结果:WD组患者血清Hcy水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。不同证型之间差异明显,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),其证候顺位依次为湿热内蕴组、痰瘀互结组、肝肾阴亏组。相关性分析发现WD患者血清Hcy水平与GAS评分呈正相关(P<0.01),与BI评分呈负相关(P<0.01)。差异性分析显示WD组的性别之间差异具有统计学意义,男性的总体血清Hcy水平显著高于女性(P<0.01);而年龄差异无统计学意义。结论:血清Hcy水平与WD关系密切,在WD不同中医证型间有显著差别,其水平变化可一定程度上反映不同中医证候和临床病情情况。因此,检测Hcy水平可作为辨别WD中医证型类型、评估病情及预后的参考。

关键词：肝豆状核变性 Wilson病同型半胱氨酸中医证型相关性

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新安医家验方脑络欣通改善缺血性中风作用机制研究的思路与方法

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中华中医药杂志 2017年第5期32卷 1921-1925页

作者：何玲王键安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室合肥230012

始于宋,盛于明清的新安医学,得益于家族世医传承而延绵不绝。歙县王氏内科作为名医世家之一,在临床上积累了丰富的经验,并形成自身学术与临床特色,是新安医学的重要组成部分。新安王氏医学对心脑血管疾病的诊疗有深刻的认识和独具特色... 详细信息

始于宋,盛于明清的新安医学,得益于家族世医传承而延绵不绝。歙县王氏内科作为名医世家之一,在临床上积累了丰富的经验,并形成自身学术与临床特色,是新安医学的重要组成部分。新安王氏医学对心脑血管疾病的诊疗有深刻的认识和独具特色的临证经验,尤其是益气活血法治疗气虚血瘀型缺血性中风。文章对中风病气虚血瘀病机理论溯源、益气活血疗法和近年来课题组对益气活血法及其代表方剂脑络欣通治疗缺血性中风的实验研究的思路与方法进行总结和梳理。

关键词：新安医学王氏内科缺血性中风益气活血脑络欣通

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新藤黄酸诱导人胃癌MGC-803细胞线粒体途径凋亡的实验研究

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中药材 2014年第1期37卷 95-99页

作者：王训翠朱国旗程卉李庆林安徽中医药大学省部共建新安医学教育部重点实验室/科研实验中心安徽合肥230038

目的：研究新藤黄酸（Gambogenic acid,GNA）对人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响,并探讨其抗肿瘤的作用机制。方法：MTT法检测细胞存活率;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术（FCM）检测MGC-803细胞凋亡率;H2DCFDA探针法流式细胞术检测细胞内... 详细信息

目的：研究新藤黄酸（Gambogenic acid,GNA）对人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响,并探讨其抗肿瘤的作用机制。方法：MTT法检测细胞存活率;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术（FCM）检测MGC-803细胞凋亡率;H2DCFDA探针法流式细胞术检测细胞内活性氧的含量;罗丹明123染色FCM检测细胞线粒体膜电位（△Ψm）的改变;Western blot法检测细胞内P53蛋白的表达变化。结果：新藤黄酸在1.0~12.0μmol/L浓度范围内可抑制人胃癌细胞MGC-803细胞的增殖;增加细胞内活性氧的含量;降低线粒体膜电位;诱导细胞发生凋亡并呈浓度依赖性;Western blotting结果显示,新藤黄酸明显升高MGC-803细胞凋亡诱导基因P53的表达。结论：新藤黄酸可诱导人胃癌MGC-803细胞的凋亡,其机制可能与促进P53介导的线粒体途径依赖的细胞凋亡相关。

关键词：新藤黄酸 MGC-803细胞线粒体途径细胞凋亡

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丹皮酚通过抑制PI3K/AKT-NF-κB通路对LPS诱导的与平滑肌细胞共培养的大鼠血管内皮细胞的保护作用

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中国中药杂志 2016年第12期41卷 2298-2302页

作者：胡文君张振戴敏安徽中医药大学药学院省部共建新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

该研究为观察丹皮酚(Pae)对脂多糖(LPS)诱导的与平滑肌细胞(SMC)共培养内皮细胞(VEC)的保护作用以及对磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)/丝/苏氨酸激酶(ser-ine threonine kinase,AKT)/核因子κB(nucler factorkappa B,NF-κB)信号通路的影响。采用组织块预消化贴壁法原代培养大鼠血管内皮细胞和大鼠血管平滑肌细胞;用Transwell小室建立VEC-SMC共培养模型;LPS(100μg·L^(-1),7 h)诱导VEC损伤;MTT法检测VEC活性;LDH试剂盒检测细胞通透性;Western blot法检测Pae(15,30,60μmol·L^(-1),24 h)对LPS诱导损伤的共培养VEC的PI3K/AKT及NF-κB信号通路的表达;Western blot法检测VEC的细胞核p-P65表达的影响。研究证实不同浓度的Pae可显著性抑制LPS诱导的VEC损伤,提高细胞活性;并且Pae能够明显下调LPS诱导的PI3K,p-PI3K,AKT,p-AKT的表达;下调NF-κB的表达水平并降低P65蛋白的生物活性,下调p-P65蛋白的表达;下调P65的转移入核。Pae对LPS损伤的VEC有保护作用,可能通过抑制PI3K/AKT及NF-κB信号通路相关信号蛋白的表达。

关键词：丹皮酚血管内皮细胞血管平滑肌细胞共培养 PI3K/AKT信号通路 NF-κB信号通路

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抵当陷胸汤调控PI3K/Akt信号通路对糖尿病大鼠足细胞凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 62-69页

作者：张可敬王悦琦储全根储俊安徽中医药大学中医学院新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽中医药大学新安医学与中医药现代化研究所合肥230012

目的:观察抵当陷胸汤对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的调控作用与对足细胞凋亡的影响,探讨抵当陷胸汤改善糖尿病肾病的机制。方法:采用单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液55 mg·kg^... 详细信息

目的:观察抵当陷胸汤对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的调控作用与对足细胞凋亡的影响,探讨抵当陷胸汤改善糖尿病肾病的机制。方法:采用单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液55 mg·kg^(-1)的方法建立糖尿病模型,将模型复制成功的30只随机分为模型组、抵当陷胸汤组(8.10 g·kg^(-1))、小陷胸汤组(4.05 g·kg^(-1))、抵当汤组(4.05 g·kg^(-1))、阿拉氯胺(ALT-711)组(3 mg·kg^(-1)),每组6只,另设6只空白组大鼠。连续给药8周后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理形态变化;马松(Masson)染色观察胶原沉积程度;高碘酸-席夫(PAS)染色观察基底膜病变;免疫组化法检测大鼠肾组织磷酸化(p)-PI3K、p-Akt蛋白表达;原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠足细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肾组织PI3K、Akt mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾小球代偿性膨胀,系膜细胞增殖,系膜间质大量胶原沉积,基底膜增厚,PI3K、Akt mRNA表达减少,PI3K、Akt蛋白磷酸化显著受到抑制(P<0.01),足细胞凋亡率显著升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低(P<0.01),Bax、p-GSK-3β、Caspase-3表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,抵当陷胸汤组肾脏组织病理明显改善,PI3K、Akt mRNA表达显著升高(P<0.01),PI3K、Akt蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01),Bcl-2表达显著升高(P<0.01),Bax、p-GSK-3β、Caspase-3表达显著降低(P<0.01),足细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:抵当陷胸汤可能通过促进PI3K/Akt信号通路活化,抑制足细胞凋亡,减缓糖尿病肾病的发展进程。

关键词：糖尿病肾脏病变抵当陷胸汤痰瘀同治磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路足细胞凋亡

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基于数据挖掘的高血压性眩晕医案辨证用药特点分析

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中药药理与临床 2022年第3期38卷 194-199页

作者：郭锦晨王茎李凌基安徽中医药大学合肥230012 新安医学教育部重点实验室合肥230038

目的:基于数据挖掘技术研究高血压性眩晕组方用药规律,归纳辨治特色,指导临床运用。方法:通过检索各数据库中医家医案文献,构建方药数据库,通过SPSS Modeler 18.0、SPSS Statistics 22.0、中医传承辅助系统平台(V2.5)对组方用药进行频... 详细信息

目的:基于数据挖掘技术研究高血压性眩晕组方用药规律,归纳辨治特色,指导临床运用。方法:通过检索各数据库中医家医案文献,构建方药数据库,通过SPSS Modeler 18.0、SPSS Statistics 22.0、中医传承辅助系统平台(V2.5)对组方用药进行频次统计、关联规则、复杂网络、系统聚类、熵层次聚类新方及主成分因子分析。结果:253首处方涉及中药258味,涵盖7个病位证素和13个病性证素;挖掘出用药频次大于平均频次的药物61味,高频中药是天麻、钩藤、甘草、茯苓、白芍、牛膝,病位证素以肝、脾、肾为主,病性证素以阳亢、阴虚、痰、动风、血瘀、湿为主;当最小支持度为10%,最小置信度为75%,得到药对关联组合19项,当最小支持度为10%,最小置信度为90%,得到三项关联组合20项;复杂网络生成核心组方为天麻、钩藤、半夏、茯苓、牛膝、白术、石决明、甘草;系统聚类得到龙骨、牡蛎等16组药物聚类组合,熵层次聚类得到10个中药新处方,主成分因子分析共提取出22个公因子。结论:高血压性眩晕多属本虚标实之证,病机多见阴虚阳亢动风,治疗以滋阴平肝、熄风止眩为基本法则,随证搭配。

关键词：原发性高血压眩晕中医数据挖掘用药规律

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阴阳辨证在帕金森病临证中的地位探要

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 187-195页

作者：董薇郝文杰杨文明黄鹏安徽中医药大学第一附属医院合肥230031 新安医学教育部重点实验室合肥230012

阴阳辨证在八纲辨证中具有统率其他六纲的作用,是对病情进行更高层面或总的归纳,在中医临证过程中阴阳辨证贯穿疾病诊治过程的始末。阴阳辨证对于帕金森病而言尤为重要,不同症状表现、病情发展过程中病机的转化和中西医治疗都体现了阴... 详细信息

阴阳辨证在八纲辨证中具有统率其他六纲的作用,是对病情进行更高层面或总的归纳,在中医临证过程中阴阳辨证贯穿疾病诊治过程的始末。阴阳辨证对于帕金森病而言尤为重要,不同症状表现、病情发展过程中病机的转化和中西医治疗都体现了阴阳对立制约、互根互用、消长转化的特点。该文从阴阳辨证的源流及应用、阴阳辨证是帕金森病辨证基础、阴阳辨证在帕金森病临证中的地位和作用3个方面论述了阴阳辨证产生的背景、应用的基础和价值,以“阴阳为纲”的辨证方法来指导帕金森病的诊治具有重要意义。

关键词：帕金森病阴阳辨证临证应用中医药

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