检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2015年第2期40卷 292-297页

作者：严园园施高翔邵菁陆克乔张梦翔汪天明王斌汪长中安徽中医药大学中西医结合临床学院安徽省中医药科学院中西医结合研究所安徽合肥230038 安徽中医药大学科研实验中心安徽合肥230038

目的:研究穿心莲内酯(andrographolide,AG)对白念珠菌群感效应(quorum sensing,QS)及相关毒力基因的影响。方法:气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)检测AG干预白念珠菌不同时间后法尼醇和酪醇的含量变化;qRT-PCR检测QS调节的相关毒力基因CHK1,P... 详细信息

目的:研究穿心莲内酯(andrographolide,AG)对白念珠菌群感效应(quorum sensing,QS)及相关毒力基因的影响。方法:气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)检测AG干预白念珠菌不同时间后法尼醇和酪醇的含量变化;qRT-PCR检测QS调节的相关毒力基因CHK1,PBS2,HOG1的表达。结果:白念珠菌生长2 h时法尼醇和酪醇分泌量较少,AG作用后变化不明显;12 h后分泌量最高,24 h回落。不同浓度AG干预后,法尼醇含量降低,酪醇升高,呈现剂量依赖性,其中1 000 mg·L-1AG效果均最明显。qRT-PCR结果显示,1 000 mg·L-1AG在2,12,24 h时分别使CHK1下调2.375,3.330,4.043倍;PBS2下调2.010,4.210,4.760倍;HOG1变化不明显。结论:AG可抑制法尼醇的分泌及促进酪醇的分泌,下调QS相关的毒力基因CHK1,PBS2的表达。

关键词：穿心莲内酯白念珠菌群感效应法尼醇酪醇

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针刺对戊四唑诱发惊厥大鼠海马葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白表达的影响

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针刺研究 2014年第4期39卷 267-271页

作者：杨帆马允昂文平陈浩杜卫东吴生兵吕磊张道芹安徽中医药大学针灸骨伤临床学院合肥230038 安徽中医药大学研究生部合肥230038 安徽中医药大学实验中心合肥230038 安徽中医药大学中西医结合临床学院合肥230038

目的:观察针刺对惊厥大鼠海马神经元内葡萄糖调节蛋白78(Grp 78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白表达的影响,探讨针刺抗惊厥的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、模型组(n=18)、针刺组(n=18)。腹腔注射戊四唑(50mg/kg)复制惊厥... 详细信息

目的:观察针刺对惊厥大鼠海马神经元内葡萄糖调节蛋白78(Grp 78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白表达的影响,探讨针刺抗惊厥的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、模型组(n=18)、针刺组(n=18)。腹腔注射戊四唑(50mg/kg)复制惊厥大鼠模型。针刺组立即针刺"百会""大椎"30min。各组分别于造模后2、12、48h采用免疫组化法观察各组大鼠海马CA 1区Grp 78和CHOP蛋白表达情况。结果:模型组大鼠在惊厥发作2、12h海马CA 1区Grp 78蛋白表达与正常组比较明显增强(P<0.01);针刺组大鼠在惊厥发作12h和48h与模型组比较Grp 78蛋白表达显著增加(P<0.01,P<0.05)。在惊厥发作各个时段与正常组比较,模型组大鼠海马CA 1区CHOP蛋白表达明显上调(P<0.01);针刺组海马CA 1区CHOP蛋白阳性表达在惊厥发作各个时段与模型组比较明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论:针刺能明显调节惊厥大鼠海马神经元Grp 78蛋白和CHOP蛋白的表达,从而起到保护惊厥性脑损伤作用。

关键词：惊厥针刺海马CA1区葡萄糖调节蛋白78 C EBP同源蛋白脑损伤

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艾叶挥发油诱导白念珠菌凋亡

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中国中药杂志 2017年第18期42卷 3572-3577页

作者：施高翔汪天明吴生兵汪云霞邵菁周美启汪长中安徽中医药大学中西医结合临床学院安徽合肥230038 安徽省中医药科学院中西医结合研究所安徽合肥230038 安徽中医药大学科研实验中心安徽合肥230038 安徽中医药大学科技处安徽合肥230038

研究艾叶挥发油(Artemisia argyi essential oil,AAEO)诱导白念珠菌凋亡的活性。实验采用微量液基稀释法检测AAEO对白念珠菌(Candida albicans)SC5314的MIC;采用XTT还原法检测AAEO对白念珠菌SC5314代谢的影响;采用流式细胞仪检测AAEO对... 详细信息

研究艾叶挥发油(Artemisia argyi essential oil,AAEO)诱导白念珠菌凋亡的活性。实验采用微量液基稀释法检测AAEO对白念珠菌(Candida albicans)SC5314的MIC;采用XTT还原法检测AAEO对白念珠菌SC5314代谢的影响;采用流式细胞仪检测AAEO对白念珠菌SC5314细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平的影响;采用Annexin-V/PI法测定AAEO对白念珠菌SC5314细胞凋亡率的影响;采用荧光显微镜观察AAEO对白念珠菌SC5314细胞Caspase酶活性的影响;采用DAPI染色法观察AAEO对白念珠菌SC5314细胞核固缩的影响。结果显示,AAEO对白念珠菌SC5314的MIC为0.5 mL·L^(-1);XTT代谢活性显示AAEO对白念珠菌SC5314代谢呈剂量依赖性的抑制;>0.5 mL·L^(-1)的AAEO干预后,白念珠菌SC5314细胞内活性氧水平显著升高、线粒体膜电位显著降低、凋亡比例明显增加、metacaspase活性显著升高、细胞核固缩。AAEO具有诱导白念珠菌细胞凋亡的活性,该作用可能与ROS积累和线粒体损伤相关。

关键词：艾叶挥发油白念珠菌凋亡活性氧线粒体

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基于转录组测序的牛蒡木质素类物质生物合成途径及关键酶基因分析

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中草药 2020年第16期51卷 4300-4307页

作者：魏俊雯张声祥施圆圆单春苗马克龙吴家文安徽中医药大学中西医结合临床学院安徽合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心、新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038 安徽道地中药材品质提升协同创新中心安徽合肥230012 安徽中医药大学研究生院安徽合肥230012 安徽省中医药科学院安徽合肥230012

目的获得牛蒡Arctiumlappa根功能基因数据库,分析其木质素类化合物生物合成途径及关键酶基因。方法以牛蒡根为研究对象,利用华大基因BGISEQ-500测序平台进行转录组测序,通过从头组装获得Unigene,利用各种已有的核酸和蛋白质数据库对Unig... 详细信息

目的获得牛蒡Arctiumlappa根功能基因数据库,分析其木质素类化合物生物合成途径及关键酶基因。方法以牛蒡根为研究对象,利用华大基因BGISEQ-500测序平台进行转录组测序,通过从头组装获得Unigene,利用各种已有的核酸和蛋白质数据库对Unigene进行注释和分类,利用KEGG代谢途径分析木质素生物合成途径及其关键酶基因,利用三维同源建模分析苯丙氨酸解氨酶(AlPAL)的结构特点。结果通过转录组测序共获得54 215个Unigene,其中42 003个Unigene被任一数据库注释,1 668个Unigene被注释到54个转录因子家族中;KEGG途径分析鉴定了423个Unigene参与了木质素的生物合成。AlPAL空间结构模型显示其为同型四聚体,每个单体由3个结构域组成,包括4-甲基-咪唑-5-酮(MIO)结构域、核心结构域和屏蔽结构域,其中MIO结构域包含保守的三肽ASG,构成AlPAL酶的催化活性中心。结论对牛蒡根转录组进行分析,为牛蒡功能基因鉴定、次生代谢途径解析及其调控机制研究奠定了实验基础。

关键词：牛蒡转录组测序木质素功能基因苯丙氨酸解氨酶

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Foxp3/Treg与RORγt/Th17细胞失衡在慢性阻塞性肺疾病大鼠中的作用

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中华危重病急救医学 2014年第12期26卷 860-864页

作者：王成阳刘向国彭青和方莉王传博李泽庚安徽医科大学第一附属医院中医科合肥230022 安徽中医药大学中西医结合临床学院形态实验中心合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院呼吸病科合肥230031 安徽医科大学第二附属医院中医科合肥230601

目的观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠叉头状/翅膀状螺旋转录因子p3（Foxp3）、调节性T细胞（Treg）、辅助性T细胞17特异性转录因子T孤独核受体（RORγt）的表达。方法将20只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和COPD模型组，每... 详细信息

目的观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠叉头状/翅膀状螺旋转录因子p3（Foxp3）、调节性T细胞（Treg）、辅助性T细胞17特异性转录因子T孤独核受体（RORγt）的表达。方法将20只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和COPD模型组，每组10只。采用烟熏加脂多糖（LPS）气管滴入的方法建立COPD模型；正常对照组不予任何处理。28 d后测定两组大鼠肺功能；苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理学改变；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清白细胞介素（IL-6、IL-10）水平；流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg表达；蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织Foxp3、RORγt、IL-17蛋白表达。结果光镜下观察模型大鼠肺泡腔及肺间质内大量炎性细胞浸润，病变区肺泡结构破坏，肺泡壁变薄、甚至断裂融合成大疱，部分肺泡腔内有不同程度的出血。与正常对照组比较，模型组用力肺活量（FVC）、0.3 s用力呼气容积（FEV0.3）、FEV0.3/FVC、用力呼气峰值流速（PEF）明显下降〔FVC（mL）：8.04±2.03比9.97±2.14，FEV0.3（mL）：6.16±2.23比8.84±2.12，FEV0.3/FVC：0.70±0.09比0.85±0.11，PEF（mL/s）：33.56±4.76比40.14±5.64，P＜0.05或P＜0.01〕；血清IL-6明显升高（ng/L：93.17±20.96比76.28±13.24， P＜0.05），IL-10明显降低（ng/L：78.62±15.17比104.34±19.46，P＜0.01），CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg表达明显降低〔（2.75±0.83）%比（4.16±1.14）%，P＜0.01〕；肺组织Foxp3蛋白表达明显降低（灰度值：0.38±0.15比0.63±0.11，P＜0.01），RORγt、IL-17蛋白表达明显升高〔RORγt（灰度值）：0.96±0.23比0.47±0.11，IL-17（灰度值）：1.02±0.24比0.34±0.08，均P＜0.01〕。相关性分析显示，肺功能参数FEV0.3与Foxp3呈正相关（r＝0.585，P＜0.05）；FEV0.3/FVC与IL-6、RORγt呈负相关（r＝-0.655、r＝-0.607，均P＜0.05）；PEF与Treg呈正相关（r＝0.573，P＜0.05），与IL-17呈负相关（r＝-0.198，P＜0.05）。IL-6与Foxp3呈负相关（r＝-0.603， P＜0.05），与RORγt呈正相关（r＝0.588，P＜0.05）；IL-10与Treg呈正相关（r＝0.573，P＜0.05）；Treg与Foxp3呈正相关（r＝0.607，P＜0.05），与IL-17呈负相关（r＝-0.569，P＜0.05）；Foxp3与RORγt呈负相关（r＝-0.591，P＜0.05）；RORγt与IL-17呈正相关（r＝0.578，P＜0.05）。结论 COPD肺功能降低、炎症反应升高与Foxp3/Treg、RORγt/Th17表达失衡有关。

关键词：肺疾病,阻塞性,慢性叉头状/翅膀状螺旋转录因子p3 调节性T细胞孤独核受体辅助T细胞17

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浅谈中医药开放性实验室建设

浅谈中医药开放性实验室建设

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第二次中医药实验研究与重点实验室、研究室建设管理经验交流会

作者：刘向国张文娜黄金玲安徽中医药大学中西医结合临床学院形态实验中心

中医药实验室是中医院校学生进行实践的重要基地,传统的实验模式限制了学生的自主性和创新意识.因此建立中医药开放性实验室进行开放性实验教学显得尤为重要.本文从建设中医药开放性实验室的意义、开放形式及现存问题等几方面进行阐述,... 详细信息

中医药实验室是中医院校学生进行实践的重要基地,传统的实验模式限制了学生的自主性和创新意识.因此建立中医药开放性实验室进行开放性实验教学显得尤为重要.本文从建设中医药开放性实验室的意义、开放形式及现存问题等几方面进行阐述,并提出了解决方法,探讨了改革的思路和建设管理等措施.

关键词：高等中医院校开放性实验室管理模式制度建设

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MMPs系统和细胞因子在慢性阻塞性肺疾病模型大鼠中的作用

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免疫学杂志 2013年第12期29卷 1024-1028页

作者：王成阳刘向国彭青和李达季乔雪王传博李泽庚湖北中医药大学研究生院武汉430065 安徽中医药大学中西医结合临床学院形态实验中心合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院呼吸科合肥230031 安徽医科大学第二附属医院中医科合肥230601

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠基质金属蛋白酶及炎性细胞因子的变化。方法将30只大鼠随机分为正常组、模型组,每组15只。除正常组外,其余大鼠采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入方法建立COPD大鼠模型,模型复制成功第28天,采用动... 详细信息

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠基质金属蛋白酶及炎性细胞因子的变化。方法将30只大鼠随机分为正常组、模型组,每组15只。除正常组外,其余大鼠采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入方法建立COPD大鼠模型,模型复制成功第28天,采用动物肺功能仪检测大鼠肺功能,酶联免疫吸附法观察大鼠血清白介素(IL)-1β、IL-10、IL-8、TGF-β1,免疫组化观察肺组织MMP-9及TIMP-1变化。结果模型组大鼠肺泡腔及肺间质内大量炎性细胞浸润,肺组织结构破坏。与正常组比较,模型组大鼠肺功能参数FEV0.3、FEV0.3/FVC、PEF值降低,Re升高(P<0.01,P<0.05);模型组大鼠IL-1β、IL-8、MMP-9表达水平较正常组明显升高,IL-10、TGF-β1、TIMP-1表达降低(P<0.05,P<0.01)。相关性分析显示肺功能参数FEV0.3与MMP-9呈负相关,FEV0.3/FVC与血清IL-1β呈负相关,PEF与血清IL-8呈负相关(P<0.05);FEV0.3/FVC、Re与TIMP-1呈正相关(P<0.05);MMP-9与IL-1β、IL-8呈正相关,TIMP-1与TGF-β1呈正相关(P<0.05,P<0.01);MMP-9与TGF-β1呈负相关(P<0.05)。结论 COPD的炎症反应与MMP-9/TIMP-1失衡有关,炎性细胞表达MMP-9占优势,炎症反应明显,最终导致肺功能降低。

关键词：慢性阻塞性肺病肺功能基质金属蛋白酶-9 基质金属蛋白酶抑制剂-1 炎性细胞

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基于小RNA测序的风轮菜microRNA及其靶基因分析

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植物科学学报 2022年第2期40卷 216-228页

作者：许景垚单春苗单婷玉赵历强马克龙吴家文安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽中医药大学中西医结合临床学院合肥230012 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230012 安徽省中医药科学院合肥230012

本研究以风轮菜(Clinopodium chinense(Benth.)***)为材料,采用BGISEQ-500测序平台对风轮菜根、茎和叶的小RNA进行转录组测序,并对其黄酮类物质合成途径中参与调控的microRNA(miRNA)及其靶基因进行了分析。结果显示,鉴定出的保守miRNA... 详细信息

本研究以风轮菜(Clinopodium chinense(Benth.)***)为材料,采用BGISEQ-500测序平台对风轮菜根、茎和叶的小RNA进行转录组测序,并对其黄酮类物质合成途径中参与调控的microRNA(miRNA)及其靶基因进行了分析。结果显示,鉴定出的保守miRNA有86个,属于26个家族,新发现miRNA 8个,筛选出风轮菜黄酮类物质合成途径中调控3个关键酶的候选miRNA(novel_mir3、miR167d-5p、miR396h)。通过对靶基因编码的关键酶4-香豆酸辅酶A连接酶进行序列分析和同源建模,发现其具有高度保守的底物结合区域、催化结构域及两个保守的肽基序。

关键词：风轮菜转录组测序 miRNA 黄酮 4-香豆素辅酶A连接酶

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异叶天南星苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与蛋白结构分析

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植物科学学报 2019年第2期37卷 221-229页

作者：施圆圆张声祥赵德蕊王晨凯马克龙吴家文安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽中医药大学中西医结合临床学院合肥230012 安徽省中医药科学院合肥230012 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230012

以异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)为材料,采用逆转录PCR(RT-PCR)法扩增其苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)基因Ah PAL,获得该基因的开放读码框(ORF),并通过系统的生物信息学软件分析Ah PAL的结构和理化性质。结果显示,Ah PAL的ORF全长为2184 bp,编码727个氨基酸;Ah PAL与郁金香(Tulipa fosteriana W. Irving) PAL的亲缘关系最近,序列相似性达88%。空间结构模型分析结果显示,Ah PAL为同型四聚体,每个单体由3个结构域组成,其中MIO结构域含有PAL酶家族的保守序列和Ala-Ser-Gly三肽活性中心,是Ah PAL酶活性的决定性结构域。利用荧光定量PCR方法检测3个Ah PAL Unigene在根、块茎和叶中的表达情况,发现它们在根中表达量均最高,而在叶和块茎中表达较低。

关键词：异叶天南星苯丙氨酸解氨酶基因克隆生物信息学分析

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基于T-bet、GATA-3、RORgammat调控Th细胞研究六味补气胶囊对慢性阻塞性肺病大鼠肺功能的影响

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广州中医药大学学报 2014年第3期31卷 404-409,493,494页

作者：王成阳王婕琼刘向国王传博李达季乔雪李泽庚湖北中医药大学研究生院湖北武汉430065 安徽中医药大学中西医结合临床学院形态实验中心安徽合肥230038 安徽医科大学第二附属医院中医科安徽合肥230601 安徽中医药大学第一附属医院呼吸科安徽合肥230031

【目的】观察六味补气胶囊对慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠T细胞介导转录调节因子(T-bet)、GATA-结合蛋白3(GATA-3)、孤独核受体(RORgammat)的影响。【方法】将50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,六味补气高、中、低剂量组(剂量分别为0.7、0... 详细信息

【目的】观察六味补气胶囊对慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠T细胞介导转录调节因子(T-bet)、GATA-结合蛋白3(GATA-3)、孤独核受体(RORgammat)的影响。【方法】将50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,六味补气高、中、低剂量组(剂量分别为0.7、0.35、0.175 g·kg-1·d-1),金水宝组(剂量为0.495 g·kg-1·d-1),脾氨肽组(剂量为0.33 mg·kg-1·d-1)。除正常组外,其他组大鼠均采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入方法复制COPD模型,造模周期28 d后给药,连续给药30 d。采用动物肺功能仪检测大鼠肺功能,酶联免疫吸附法观察大鼠血清干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4、IL-17表达,Western blot法检测肺组织T-bet、GATA-3、RORgammat蛋白表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠肺功能值降低,血清IL-4和肺组织GATA-3表达降低,IFN-γ、IL-17、Th1/Th2升高,肺组织T-bet、T-bet/GATA-3、RORgammat表达升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,六味补气组肺功能值升高,IFN-γ、IL-17、Th1/Th2、T-bet、RORgammat表达降低,GATA-3表达升高(P<0.05或P<0.01)。【结论】六味补气胶囊通过上调GATA-3表达和下调T-bet、RORgammat表达而改善肺功能。

关键词：慢性阻塞性肺病/中药疗法六味补气胶囊/药理学肺/病理学疾病模型,动物大鼠

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