检索结果-内蒙古大学图书馆

非靶向代谢组学联合智能传感技术分析不同炒制时间对炒白芍非挥发性代谢物及感官品质的影响

中国中药杂志 2025年

作者：江栋梁丁杨飞王梦茹程冉冉赵宏苏孟杰罗云吴心峰金传山吴德玲张伟安徽中医药大学药学院安徽九洲方圆制药有限公司现代中药安徽省产业研究院安徽省协和成药业饮片有限公司安徽省中药饮片制造新技术重点实验室安徽中医药大学国家中医药管理局中药炮制传承基地

针对白芍炮制过程中非挥发性代谢物及感官品质特征变化规律尚不明确等问题，该研究采用非靶向代谢组学、电子眼及电子舌相结合的方法，对不同炒制时间下的炒白芍的成分、颜色及滋味进行综合分析。利用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS揭示... 详细信息

针对白芍炮制过程中非挥发性代谢物及感官品质特征变化规律尚不明确等问题，该研究采用非靶向代谢组学、电子眼及电子舌相结合的方法，对不同炒制时间下的炒白芍的成分、颜色及滋味进行综合分析。利用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS揭示白芍在不同炒制时间中代谢物的动态变化，共鉴定出59种非挥发性代谢物，其中，以VIP ≥ 1和P < 0.05为筛选条件，确定11种关键差异非挥发性代谢物。利用电子眼及电子舌技术分别探讨了白芍加工过程中4个色度值及8个滋味值的变化，并将成分-颜色-滋味联合分析，结果表明白芍加工过程中颜色及滋味的变化与氧化芍药苷含量的先升高后降低、儿茶素含量的升高等代谢物变化存在很强的相关性。同时，基于数据融合的概念，建立支持向量机（SVM）模型区分不同炒制时间下的炒白芍，正确率达100%，显著提高了分类精度。该研究揭示了炒制对白芍的代谢产物及感官特性的影响，并建立炒白芍炮制程度快速判别方法，对后续炒白芍饮片的品质形成及智能化生产具有重要的指导意义。

关键词：炒白芍非靶向代谢组学电子眼电子舌差异标志物

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基于网络药理学结合药动学及靶点验证探究黄芩清热除痹胶囊治疗类风湿关节炎质量标志物

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药学学报 2023年第6期58卷 1422-1429页

作者：董心同柯江涛甘珮荣陈芳园徐凤陈建刘健吴虹安徽中医药大学药学院新安医学教育部重点实验室中药研究与开发安徽省重点实验室安徽合肥230012 安徽医科大学第二附属医院安徽合肥230601 安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031

黄芩清热除痹胶囊(Huangqin Qingre Chubi capsule, HQC)作为临床治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的有效方剂,质量控制尚属空白。本研究拟通过网络药理学、药动学结合实验验证探究HQC治疗RA的质量标志物(quality markers, Q... 详细信息

黄芩清热除痹胶囊(Huangqin Qingre Chubi capsule, HQC)作为临床治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的有效方剂,质量控制尚属空白。本研究拟通过网络药理学、药动学结合实验验证探究HQC治疗RA的质量标志物(quality markers, Q-marker)。通过构建“药效成分-靶点-通路”可视化网络,初步预测HQC治疗RA潜在质量标志物。建立风湿热痹证胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)大鼠模型,阐明HQC药效成分在大鼠疾病状态下的动态量化规律。建立肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)诱导的RA成纤维样滑膜细胞(MH7A)体外炎症模型,检测活性成分对鞘氨醇激酶1 (sphingosin kinase-1, Sphk1)、p-SphK1蛋白表达影响。网络药理学结果显示,黄芩苷、栀子苷、木犀草素、薏苡素和苦杏仁苷为HQC治疗RA的重要活性成分。定量分析结果进一步验证这5种成分的可测性。蛋白免疫印迹证实栀子苷和黄芩苷显著抑制Sphk1和p-SphK1蛋白表达。以上研究确定上述5种成分可作为HQC治疗RA的质量标志物。本实验经安徽中医药大学实验动物伦理委员会审核通过(批准号:AHUCM-rats-2021049),所有程序均严格按照动物使用和护理的原则进行。

关键词：类风湿关节炎质量标志物黄芩清热除痹胶囊热痹网络药理学药动学

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基于网络药理学及实验验证探讨止嗽散治疗慢性支气管炎的作用机制

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中药药理与临床 2023年第1期39卷 29-37页

作者：董娅慧刘扬杜佳慧杨晔刘园旭尹登科安徽中医药大学药学院合肥230012 现代中药研究与开发安徽省重点实验室合肥230012 药物制剂技术与应用安徽省重点实验室合肥230012

目的:本研究旨在通过网络药理学结合动物实验探讨止嗽散治疗慢性支气管炎的作用机制。方法:利用网络药理学工具,获得止嗽散治疗慢性支气管炎的有效成分、核心靶点和信号通路。建立慢性支气管炎大鼠模型,进行病理染色、ELISA、免疫组织... 详细信息

目的:本研究旨在通过网络药理学结合动物实验探讨止嗽散治疗慢性支气管炎的作用机制。方法:利用网络药理学工具,获得止嗽散治疗慢性支气管炎的有效成分、核心靶点和信号通路。建立慢性支气管炎大鼠模型,进行病理染色、ELISA、免疫组织化学、免疫荧光及Western blot试验验证网络药理学预测的主要靶点和信号通路。结果:网络药理学筛选出止嗽散关键有效成分包括槲皮素、山柰酚、木犀草素、β-谷甾醇、7-甲氧基-2-甲基异黄酮、川陈皮素、芒柄花素;核心靶点涉及TP53、TNF、IL-6、VEGFA、CASP3、IL-1β、JUN、PTGS2;KEGG通路富集分析PI3K-AKT信号通路、HIF-1信号通路等可能在止嗽散治疗慢性支气管炎中起关键作用;分子对接验证各核心靶点与其对应化合物之间均有较强的结合力。动物实验表明,与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清、支气管肺泡灌洗液以及肺组织中IL-4、IL-6、TNF-α含量明显升高,肺组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、HIF-1α、VEGFA蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,止嗽散9.72 g/kg组、氢溴酸右美沙芬片8.1×10^(-3)g/kg组能明显改善肺组织病理变化,显著降低血清、支气管肺泡灌洗液以及肺组织中IL-4、IL-6、TNF-α含量,明显下调肺组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、HIF-1α、VEGFA蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:止嗽散对慢性支气管炎模型大鼠具有较好的治疗作用,这可能与止嗽散中以槲皮素为代表的活性成分通过调控PI3K-AKT、HIF-1信号通路相关蛋白的表达抑制炎症反应有关。

关键词：止嗽散慢性支气管炎网络药理学分子对接作用机制

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基于网络药理学与体外实验探讨茯苓酸治疗心肌纤维化的作用机制

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海南医学院学报 2024年第10期30卷 747-761页

作者：吴婉婉魏科东丁芮任涵赵婉竹陈明周鹏王靓黄金玲安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012 安徽中医药大学中医学院安徽合肥230012 中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的:基于网络药理学与体外验证实验探讨茯苓酸治疗心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)的作用机制。方法:借助SwissTargetPrediction、GeneCards等数据库预测茯苓酸、氧化应激及MF靶点,取三者交集靶点于STRING数据库构建蛋白互作(PPI)... 详细信息

目的:基于网络药理学与体外验证实验探讨茯苓酸治疗心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)的作用机制。方法:借助SwissTargetPrediction、GeneCards等数据库预测茯苓酸、氧化应激及MF靶点,取三者交集靶点于STRING数据库构建蛋白互作(PPI)网络,借助Cytoscape 3.7.2软件进行可视化分析,筛选出核心靶点,使用Metascape数据库进行GO和KEGG富集分析,预测茯苓酸治疗MF的作用机制,采用分子对接技术及大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)实验加以验证。结果:预测发现,茯苓酸潜在靶点164个、氧化应激靶点3040个、MF靶点4441个,三者交集靶点84个,涉及Bcl-2、PTGS2、Bcl-2L1、MMP-2等9个核心靶点。GO分析发现,生物过程主要作用于抗氧化活性、对缺氧的反应。KEGG分析显示,茯苓酸治疗MF的主要信号通路为PI3K/Akt。分子对接结果显示,茯苓酸与Bcl-2、PTGS2、Bcl-2L1、MMP-2等9个核心靶点均具有良好的结合活性。体外实验结果显示,茯苓酸(5、10、20μmol/L)能显著抑制CFs迁移能力(P<0.01),降低ROS、MDA水平(P<0.05),升高SOD水平(P<0.05),下调CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-9、MMP-2、PTGS2 mRNA水平(P<0.05)和CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA蛋白表达(P<0.05),上调PI3K、Akt、Bcl-2、Bcl-2L1 mRNA水平(P<0.05)和p-PI3K、p-Akt蛋白表达(P<0.05)。采用PI3K抑制剂(LY294002)后,茯苓酸对CFs细胞中ROS、SOD、MDA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA、p-PI3K、p-Akt作用被逆转(P<0.05)。结论:表明茯苓酸能够抑制CFs氧化应激损伤和心肌纤维化,该作用与其调控PI3K/Akt信号通路密切相关。

关键词：茯苓酸心肌纤维化网络药理学分子对接

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艾灸对膝关节骨关节炎大鼠血浆氨基酸代谢的影响

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针刺研究 2024年第8期49卷 797-804页

作者：魏霞刘磊段文秀张帆舒琪王茜伊吴子建蔡荣林胡玲安徽中医药大学针灸推拿学院合肥230012 安徽省中医药科学院针灸经络研究所合肥230038 经脉脏腑相关安徽省重点实验室合肥230038

目的:观察艾灸“足三里”对膝关节骨关节炎(KOA)大鼠血浆氨基酸代谢的影响,探讨艾灸修复KOA软骨损伤的氨基酸代谢机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组与艾灸组。模型组与艾灸组予以双侧膝关节腔内注射L-半胱氨酸与木瓜蛋白酶混合... 详细信息

目的:观察艾灸“足三里”对膝关节骨关节炎(KOA)大鼠血浆氨基酸代谢的影响,探讨艾灸修复KOA软骨损伤的氨基酸代谢机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组与艾灸组。模型组与艾灸组予以双侧膝关节腔内注射L-半胱氨酸与木瓜蛋白酶混合液制备KOA模型。艾灸组艾灸双侧“足三里”,30 min/次,每天1次,连续30 d。测量大鼠膝关节直径并计算各组大鼠膝关节肿胀度,Von Frey丝测定大鼠机械性痛阈值,HE染色法观察膝关节软骨组织损伤情况,ELISA法检测膝关节滑膜组织基质金属蛋白酶-13(MMP-13)含量,液相色谱-质谱法检测并筛选血浆差异氨基酸代谢物。结果:与正常组比较,模型组膝关节软骨表面不平整,软骨细胞数量减少,分布不均匀,局部可见簇集软骨细胞,潮线模糊,关节肿胀度升高(P<0.01),机械性痛阈值降低(P<0.01),滑膜组织MMP-13含量升高(P<0.01),血浆脯氨酸、色氨酸含量下调(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,艾灸组膝关节软骨组织损伤减轻,膝关节肿胀度降低(P<0.05),机械性痛阈值升高(P<0.05),滑膜组织MMP-13含量降低(P<0.01),血浆谷氨酸与组氨酸的含量下调(P<0.05)。结论:艾灸“足三里”能显著减轻KOA模型大鼠膝关节疼痛、关节炎性肿胀状态,缓解软骨损伤,通过调节部分血浆氨基酸代谢物水平调控KOA大鼠软骨的合成与分解,发挥抗炎镇痛和软骨损伤保护作用。

关键词：艾灸膝关节骨关节炎氨基酸代谢软骨损伤

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小陷胸汤对5-氟尿嘧啶介导的小鼠肠黏膜损伤的保护作用研究

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海南医学院学报 2024年第19期30卷 1441-1450页

作者：秦美洁叶倩倩丁芮黄金玲安徽中医药大学中医学院安徽合肥230012 安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012 中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的:探究小陷胸汤对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)介导的小鼠肠黏膜损伤的保护作用。方法:将100只SPF级雄性ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、小陷胸汤低、中、高剂量(8.3、16.6、33.2g/kg)组。除正常对照组外,其余各组采用5-FU(... 详细信息

目的:探究小陷胸汤对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)介导的小鼠肠黏膜损伤的保护作用。方法:将100只SPF级雄性ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、小陷胸汤低、中、高剂量(8.3、16.6、33.2g/kg)组。除正常对照组外,其余各组采用5-FU(30 mg/kg,ip,7 d)诱导肠黏膜损伤小鼠模型。小陷胸汤给药组造模同时按照设定剂量以10 mL·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,正常对照组和模型组给予等量蒸馏水,连续处理7 d。采用苏木素-伊红染色法(HE)观察小肠的病理形态学变化并测定肠绒毛高度/隐窝深度(VH:CD)比值;采用阿利新蓝染色法(AB)测定小肠黏膜杯状细胞数量;采用分光光度法检测血清内毒素(ET)、D-乳酸(D-LA)及小肠组织二胺氧化酶(DAO)水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测小肠组织IL-6、信号转导和转录激活因子3(STAT3)和表皮生长因子受体(EGFR)mRNA表达;采用Western blot法检测小肠组织IL-6、STAT3及EGFR蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型组小鼠体质量显著降低,腹泻评分、粪便质量、粪便含水量及小肠推进率明显升高(P<0.01),小肠黏膜VH:CD比值和杯状细胞数量降低(P<0.01),血清ET和D-LA水平升高,小肠组织DAO水平降低(P<0.05),脾指数和胸腺指数降低(P<0.01),血清IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),小肠组织IL-6、STAT3 mRNA表达升高,EGFR mRNA表达降低(P<0.01);小肠组织IL-6、STAT3蛋白表达升高,EGFR蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组相比,小陷胸汤能够明显改善上述指标(P<0.05)。结论:小陷胸汤对5-FU介导的肠黏膜损伤具有保护作用,其作用机制可能与小陷胸汤激活EGFR信号转导,下调IL-6/STAT3信号通路,减轻5-FU诱导的肠黏膜炎症反应,改善免疫功能有关。

关键词：小陷胸汤 5-氟尿嘧啶(5-FU) 肠黏膜损伤表皮生长因子受体(EGFR) 白细胞介素6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路

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基于PI3K/Akt信号通路探讨肉桂酸保护H_(2)O_(2)诱导H9c2细胞损伤的作用机制

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海南医学院学报 2024年第14期30卷 1048-1058页

作者：魏科东吴婉婉任涵赵婉竹丁芮陈明周鹏王靓黄金玲安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012 安徽中医药大学中医学院安徽合肥230012 中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的:探讨肉桂酸对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞H9c2损伤的保护作用及与PI3K/Akt信号通路的关系。方法:借助生物信息学预测慢性心力衰竭的作用机制,利用H_(2)O_(2)(100μmol/L)诱导心肌细胞H9c2构建氧化应激损伤模型,设正常组、模型组、肉... 详细信息

目的:探讨肉桂酸对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞H9c2损伤的保护作用及与PI3K/Akt信号通路的关系。方法:借助生物信息学预测慢性心力衰竭的作用机制,利用H_(2)O_(2)(100μmol/L)诱导心肌细胞H9c2构建氧化应激损伤模型,设正常组、模型组、肉桂酸(1、2、4μmol/L)组,采用CCK8法检测肉桂酸(1、2、4μmol/L)对H2O2诱导的H9c2细胞活力的影响,Hochest33342/PI双染色法和流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞ROS水平,比色法检测氧化应激标志物SOD、MDA、LDH、GSH和CAT水平,RTqPCR法检测细胞PI3K、Akt、caspase9、caspase3、Bax、Bcl2 mRNA水平,Western blot法检测细胞PI3K、pPI3K、Akt、pAkt、caspase3蛋白表达。加入LY294002(PI3K抑制剂)后对细胞凋亡率、ROS、SOD、MDA、LDH、GSH、CAT水平,PI3K、pPI3K、Akt、pAkt、caspase3蛋白表达进行检测。结果:生物信息学分析出慢性心力衰竭的发生、发展主要与PI3K/Akt信号通路有关。体外实验结果显示,肉桂酸能显著提高H_(2)O_(2)诱导后心肌细胞活力(P<0.01),降低细胞凋亡率和ROS、MDA、LDH水平(P<0.01),提高SOD、GSH、CAT水平(P<0.01),下调caspase9、caspase3、Bax mRNA水平和caspase3蛋白表达(P<0.05),上调PI3K、Akt、Bcl2mRNA水平和pPI3K、pAkt蛋白表达(P<0.05)。加入LY294002后,逆转了对肉桂酸对心肌细胞H9c2的上述作用(P<0.05)。结论:肉桂酸可通过调控PI3K/Akt信号通路抑制H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞H9c2氧化应激损伤和细胞凋亡,保护心肌细胞。

关键词：肉桂酸氧化应激细胞凋亡 PI3K/Akt信号

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基于HPLC指纹图谱和多成分定量测定结合化学模式识别的断血流质量评价

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中草药 2024年第17期55卷 6009-6015页

作者：王娜韩玲玲张亚中刘军玲安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽省食品药品检验研究院安徽合肥230051 国家药监局中药质量研究与评价重点实验室安徽合肥230051

目的建立断血流的HPLC指纹图谱与含量测定方法,结合化学计量学分析断血流的质量。方法采用HPLC法建立15批断血流药材的指纹图谱,通过对照品比对,指认共有峰,并测定其中4种有效成分(木犀草苷、橙皮苷、槲皮素、醉鱼草皂苷IVb)的含量,使... 详细信息

目的建立断血流的HPLC指纹图谱与含量测定方法,结合化学计量学分析断血流的质量。方法采用HPLC法建立15批断血流药材的指纹图谱,通过对照品比对,指认共有峰,并测定其中4种有效成分(木犀草苷、橙皮苷、槲皮素、醉鱼草皂苷IVb)的含量,使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》、IBM SPSS Statistics 23和Simca软件进行相似度评价、聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)及正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA),对不同产地断血流的差异进行分析。结果建立的15批断血流指纹图谱共匹配出21个共有峰,通过与对照品比对,指认出木犀草苷、橙皮苷、迷迭香酸、蒙花苷、槲皮素、醉鱼草皂苷IVb 6个色谱峰,指纹图谱相似度为0.660~1.000;15批次断血流药材中木犀草苷、橙皮苷、槲皮素、醉鱼草皂苷IVb的质量分数分别为0.2029~2.7728、4.7190~16.9570、0.2520~1.0453、0.0228~0.1708mg/g;CA分析将样品分为3类;PCA提取出1个主成分;OPLS-DA分析确定木犀草苷、槲皮素2个差异标志物。结论建立的断血流HPLC指纹图谱与含量测定并结合化学计量学分析方法稳定可靠,可用于断血流药材的质量评价。

关键词：断血流高效液相色谱指纹图谱木犀草苷橙皮苷槲皮素醉鱼草皂苷IVb 含量测定化学计量学质量评价

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基于优化的Maxent模型预测桔梗在中国的潜在适生区

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药学学报 2024年第9期59卷 2625-2633页

作者：张玉洁余函纹郑昭焕蒋超刘娟查良平池秀莲桂双英安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽中医药大学新安医学与中医药现代化研究所安徽合肥230012 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq.)***.作为最常用的大宗药材,在药用、食用和化妆品领域中都有着重要价值,市场需求量逐年增多,具有良好的开发前景。本研究以中国境内桔梗为研究对象,基于403条分布点和8个环境因子变量,运用参数优化后... 详细信息

桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq.)***.作为最常用的大宗药材,在药用、食用和化妆品领域中都有着重要价值,市场需求量逐年增多,具有良好的开发前景。本研究以中国境内桔梗为研究对象,基于403条分布点和8个环境因子变量,运用参数优化后的Maxent模型探究未来气候条件下桔梗的适生分布情况。研究表明Maxent参数在特征组合(featurecombination,FC)为LQPH(L:线性特征;Q:二次型特征;P:片段化特征;H:乘积型特征),调控倍频(regularizationmultiplier,RM)为2.1时,模型模拟效果最佳,受试者曲线下面积(areaundercurve,AUC)为0.901;模型预测显示在当前气候条件下,桔梗广泛分布于中国的28个省份,适生区面积达2337419.98km^(2);在未来气候变化影响下,桔梗的适生区面积呈现降低趋势,分布中心整体呈现向北和向东偏移的趋势;当前三大主产区内桔梗的分布面积受气候变化影响的变化趋势不同,总体表现为在内蒙古赤峰的未来适生分布面积增加,而在共享社会经济路径5-8.5(shared socioeconomicpathways,SSP)排放情景下山东淄博和安徽亳州、太和县的未来适生分布面积减少甚至消失。建议维持和保护好适宜桔梗生长的保留区的生态环境和种质资源,增加在桔梗扩增区中的栽培研究,为后续拓展桔梗种植打下基础,由此促进桔梗资源的保护和可持续发展。

关键词：桔梗 Maxent模型参数优化气候变化适生区变化

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基于MGC-803细胞微环境探讨加味小陷胸汤抑制侵袭迁移作用机制

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中国实验方剂学杂志 2023年第1期29卷 18-25页

作者：丁芮王景辉王靓陈建黄金玲安徽中医药大学合肥230012 安徽省中医药科学院、中西医结合研究所中药复方安徽省重点实验室合肥230012

目的:观察加味小陷胸汤水提取物对MGC-803细胞微环境的影响,探究该方通过调控MGC-803细胞微环境抑制侵袭迁移作用与其调控Wnt5a/Ca^(2+)/活化T细胞核因子(NFAT)信号通路的可能机制。方法:转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))造模后,将MGC-... 详细信息

目的:观察加味小陷胸汤水提取物对MGC-803细胞微环境的影响,探究该方通过调控MGC-803细胞微环境抑制侵袭迁移作用与其调控Wnt5a/Ca^(2+)/活化T细胞核因子(NFAT)信号通路的可能机制。方法:转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))造模后,将MGC-803细胞分为空白组、模型组、加味小陷胸汤组(10、20、40 mg·L^(-1));Wnt5a过表达质粒转染后,分为过表达载体(pEX)-空白(NC)组、pEX-Wnt5a组、pEX-NC+加味小陷胸汤组(40 mg·L^(-1))和pEX-Wnt5a+加味小陷胸汤组(40 mg·L^(-1))。观察MGC-803细胞侵袭能力、迁移能力、微环境关键因子、上皮间质转化(EMT)基因、Wnt5a、钙调神经磷酸酶(CaN)、NFAT1、磷酸化(p)-NFAT1和NFAT1核蛋白表达及细胞Ca^(2+)浓度变化。结果:与空白组比较,模型组微环境显著上调(P<0.01);与模型组比较,加味小陷胸汤(10、20、40 mg·L^(-1))可明显抑制微环境(P<0.05,P<0.01)。进一步实验表明,与空白组比较,模型组过表达Wnt5a后侵袭细胞增多,划痕率升高,微环境因子和EMT基因呈活化态势,Wnt5a/Ca^(2+)/NFAT通路激活(P<0.01);与模型组比较,加味小陷胸汤可抑制细胞远处侵袭和减少愈合,抑制微环境、EMT发展,和Wnt5a/Ca^(2+)/NFAT信号转导,降低NFAT1核表达和NFAT1介导的转录活性,从而降低细胞Ca^(2+)浓度,且可逆转Wnt5a的作用(P<0.05,P<0.01)。结论:加味小陷胸汤可通过改善MGC-803细胞微环境调控Wnt5a/Ca^(2+)/NFAT通路,抑制胃癌侵袭转移和EMT进程。

关键词：微环境加味小陷胸汤 MGC-803细胞胃癌侵袭转移

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