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一种氟化纳米给药系统通过抑制阿霉素外排逆转MCF-7/ADR细胞耐药性的研究

中国药理学通报 2024年第6期40卷 1124-1130页

作者：孙怀涛林银花孙雨蓉陈乔陈硕曹煜安徽中医药大学科研技术中心安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥 230038 安徽中医药大学附属第一医院安徽合肥 230031 安徽中医药大学科研技术中心安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥 230038 食药用菌功能活性与资源利用安徽省联合共建学科重点实验室安徽合肥 230038

目的通过合成氟化纳米材料完成对阿霉素(doxoru-bicin,dox)的高效负载,并实现纳米药物对抗肿瘤耐药的机制研究.方法评估不同氟化程度(PF4和PF8)的纳米药物(nano dox)的理化性能,筛选出更为优良的氟化nano dox;通过细胞毒性、细胞摄取... 详细信息

目的通过合成氟化纳米材料完成对阿霉素(doxoru-bicin,dox)的高效负载,并实现纳米药物对抗肿瘤耐药的机制研究.方法评估不同氟化程度(PF4和PF8)的纳米药物(nano dox)的理化性能,筛选出更为优良的氟化nano dox;通过细胞毒性、细胞摄取、凋亡以及对抗外排泵P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的研究,考察nano dox对抗肿瘤多药耐药以及体外抗肿瘤活性研究.结果通过考察各种理化指标,PF8相对于PF4显示出更优良的负载dox性能;通过细胞毒性实验证明,nano dox的IC50值只有游离dox IC50值的1/40,显示出nano dox在对抗耐药性方面优良的体外活性;细胞摄取和凋亡研究说明nano dox可以有效提高耐药MCF-7/ADR细胞对dox的摄取并能成功地进入细胞核内,最终导致凋亡诱导的抗癌活性;P-gp的药物外排研究说明nano dox可以有效绕过P-gp外排泵,达到增加耐药细胞对药物的摄取同时减少外排量的双重作用.结论通过氟化nano dox的设计可以有效绕过P-gp对药物的外排作用,增加药物在耐药肿瘤细胞内的摄取,减少其外排,从而达到有效的对抗肿瘤多药耐药效果.

关键词：氟化纳米药物递送 P-糖蛋白体外活性药物外排多药耐药

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安神定志方对D-半乳糖协同AβO诱导的小鼠阿尔茨海默病样行为的改善作用及机制研究

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药学学报 2024年第1期59卷 119-134页

作者：瞿艳吴欢朱国旗王训翠新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038 安徽中医药大学科研技术中心安徽合肥230038 中药研究与开发安徽省重点实验室安徽合肥230012 安徽中医药大学分子生物学(脑病)重点实验室安徽合肥230012

本研究旨在探讨安神定志方(ADP)对小鼠阿尔茨海默病(AD)样行为的改善作用及机制。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱技术标定ADP的主要成分。以D-半乳糖(D-gal)协同Aβ1-42寡聚体(AβO)诱导小鼠AD样行为,运用多种行为学方法评估ADP对小... 详细信息

本研究旨在探讨安神定志方(ADP)对小鼠阿尔茨海默病(AD)样行为的改善作用及机制。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱技术标定ADP的主要成分。以D-半乳糖(D-gal)协同Aβ1-42寡聚体(AβO)诱导小鼠AD样行为,运用多种行为学方法评估ADP对小鼠AD样行为的影响;Nissl染色与透射电镜观察海马组织的病理形态改变;ELISA检测氧化应激和炎症相关因子水平;Western blot检测Aβ、Tau和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。根据TCMSP和HERB数据库筛选ADP的活性成分,利用Swiss Target Prediction平台预测活性成分的作用靶点;通过TTD、OMIM、GeneCards和DisGeNET数据库预测AD的疾病靶点;运用Metascape数据库对共有靶点进行GO、KEGG富集分析。结合GO和KEGG分析结果进行体内实验验证,从PI3K/Akt、钙信号通路以及突触功能角度探究ADP改善小鼠AD样行为的潜在机制。最后使用Autodock Vina对ADP的核心成分与已验证靶点进行分子对接。动物实验经安徽中医药大学动物伦理委员会批准(批准号:AHUCM-mouse-2021080)。结果表明,ADP中含有ginsenoside Rg1、ginsenoside Rb1、tenuifolin、poricoic acid B、α-asarone等主要化学成分。ADP显著改善D-gal协同AβO诱导的AD小鼠焦虑样行为和记忆损伤,保护海马神经元,降低氧化应激和炎症水平,抑制Aβ、磷酸化Tau表达。网络药理学结果提示PI3K/Akt、钙信号通路以及与突触后膜相关的细胞组分可能是ADP改善AD的关键因素。动物实验进一步确证ADP作用可以上调小鼠海马N-甲基-D-天氡氨酸离子型谷氨酸受体2A(GluN2A)、突触后致密蛋白95(PSD95)、钙蛋白酶1(calpain-1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(p-CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,抑制p-GluN2B和calpain-2表达。分子对接结果表明,ADP的核心成分panaxacol、dehydroeburicoic acid、deoxyharringtonine等与已验证靶点GRIN2A、GRIN2B、PSD95等均具有较强结合力。综上表明,ADP能够改善D-gal协同AβO诱导的小鼠AD样病理变化和行为改变,其调控机制可能和NMDAR/calpain、Akt/CREB/BDNF通路有一定的关联性。

关键词：安神定志方阿尔茨海默病氧化应激炎症反应突触缺失

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针刺改善大鼠功能性消化不良伴抑郁样行为的作用机制研究

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针刺研究 2025年第1期50卷 76-83页

作者：张成朱国旗王婧吉李学军李梦王训翠安徽中医药大学第二附属医院合肥230061 安徽省针灸临床医学研究中心合肥230061 新安医学教育部重点实验室安徽中医药大学科研技术中心合肥230038 安徽中医药大学新安医学与中医药现代化研究所合肥230012

目的:观察针刺对功能性消化不良(FD)伴抑郁样行为大鼠的胃肠动力、突触结构、脑肠肽和5-羟色胺(5-HT)系统的影响,探讨针刺改善FD伴抑郁样行为大鼠的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组和氟西汀组,每组10只。采用多因... 详细信息

目的:观察针刺对功能性消化不良(FD)伴抑郁样行为大鼠的胃肠动力、突触结构、脑肠肽和5-羟色胺(5-HT)系统的影响,探讨针刺改善FD伴抑郁样行为大鼠的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组和氟西汀组,每组10只。采用多因素应激干预法建立FD伴抑郁样行为大鼠模型。针刺组针刺“百会”“中脘”和双侧“足三里”,20 min/次,每天1次,持续7 d;氟西汀组予以氟西汀(20 mg/kg)腹腔注射,每天1次,持续7 d。检测大鼠悬尾不动时间、强迫游泳不动时间和糖水偏好率;检测大鼠胃排空率和小肠推进率;透射电镜观察大鼠海马髓鞘和突触超微形态的变化;ELISA法检测大鼠血清生长抑素(SS)、胃动素(MTL)和5-HT的含量;Western blot法检测大鼠海马色氨酸羟化酶1(TPH1)和5-羟色胺受体3(5-HT_(3)R)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠悬尾不动时间和强迫游泳不动时间增加(P<0.05),糖水偏好率降低(P<0.05),胃排空率和小肠推进率降低(P<0.05),髓鞘结构明显损伤,突触数量减少(P<0.05),血清SS、MTL和5-HT的含量降低(P<0.05),TPH1和5-HT_(3)R蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,针刺组大鼠悬尾不动时间和强迫游泳不动时间减少(P<0.05),糖水偏好率升高(P<0.05),胃排空率和小肠推进率升高(P<0.05),髓鞘结构正常,突触数量显著增加(P<0.05),血清SS、MTL和5-HT含量升高(P<0.05),TPH1和5-HT_(3)R蛋白表达水平升高(P<0.05);氟西汀组行为学指标、突触数量、血清5-HT含量、海马TPH1和5-HT_(3)R蛋白表达水平变化趋势与针刺组相同,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺能够改善FD伴抑郁样行为大鼠胃肠动力障碍和突触损伤,其机制可能与调节脑肠肽水平和5-HT系统有关。

关键词：功能性消化不良抑郁样行为针刺 5-羟色胺系统共病突触

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毛茛中与苯丙烷生物合成途径相关的1R-MYB类转录因子的鉴定与分析

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植物科学学报 2024年第4期42卷 478-487页

作者：樊金世博钟欣欣单婷玉张京晶王郅炜吴家文安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽省中医药科学院合肥230012 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230012

1R-MYB家族在植物生长发育、抗胁迫、次生代谢物合成中具有重要的调控作用。本研究基于毛茛(Ranunculus japonicus Thunb.)的全长转录组测序数据库,分析了其1R-MYB家族成员的基序、系统进化关系、表达特性、空间结构及功能。结果共鉴定... 详细信息

1R-MYB家族在植物生长发育、抗胁迫、次生代谢物合成中具有重要的调控作用。本研究基于毛茛(Ranunculus japonicus Thunb.)的全长转录组测序数据库,分析了其1R-MYB家族成员的基序、系统进化关系、表达特性、空间结构及功能。结果共鉴定出221个1R-MYB基因,其中18个通过KEGG富集到苯丙烷生物合成途径,可能调控此途径中的过氧化物酶。研究结果为深入探究毛茛1R-MYB转录因子调控苯丙烷的生物合成机制奠定了基础。

关键词：毛茛转录因子全长转录组 1R-MYB 苯丙烷生物合成途径

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茯苓碱溶性多糖的理化性质评价及其在双氯芬酸钠缓释片中的应用研究

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药学学报 2023年第4期58卷 1033-1040页

作者：毛荣方文悠孙娟高松刘军玲陈胜麒胡容峰李庆林安徽中医药大学药物制剂技术与应用安徽省重点实验室安徽合肥230012 安徽省食品药品检验研究院安徽合肥230051 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038 省部共建安徽道地中药材品质提升协同创新中心安徽合肥230012 安徽中医药大学中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

本研究从茯苓残渣中提取得到茯苓碱溶性多糖,采用傅里叶变换红外光谱法(FTIR)、X-射线粉末衍射法(XRD)、差示扫描量热法分析(DSC)等方法对茯苓碱溶性多糖进行了结构表征,采用电子扫描显微镜(SEM)考察了茯苓碱溶性多糖和乙基纤维素(EC)... 详细信息

本研究从茯苓残渣中提取得到茯苓碱溶性多糖,采用傅里叶变换红外光谱法(FTIR)、X-射线粉末衍射法(XRD)、差示扫描量热法分析(DSC)等方法对茯苓碱溶性多糖进行了结构表征,采用电子扫描显微镜(SEM)考察了茯苓碱溶性多糖和乙基纤维素(EC)的物理形貌,并重点考察休止角、松密度、振实密度、卡尔指数、颗粒间孔隙率、内聚力指数、豪斯纳比等指标,绘制粉末物理指纹图谱,采用多元分析法进行粉体学性能评价。采用直接压片法,分别使用茯苓碱溶性多糖和EC为不溶性骨架材料,制备双氯芬酸钠缓释片,评价缓释片的基本性能,考察体外释药行为,并研究其释放机制。结果表明,茯苓碱溶性多糖是一种呈光滑片状结构的半结晶聚合物,堆积性、可压性均强于EC;体外释放实验表明,茯苓碱溶性多糖缓释性能强于EC,其所制备的缓释片释药行为符合Higuchi模型,释放过程中片剂内部形成了孔隙结构,释放方式为孔道扩散释药。该研究结果对新型缓释材料的开发和资源的合理利用具有重要意义。

关键词：茯苓多糖乙基纤维素表征粉体学性质药物释放

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三叶木通转录组分析及三萜皂苷生物合成途径关键酶基因的发掘

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植物科学学报 2022年第3期40卷 378-389页

作者：钱程程赵历强杨亚湉韩邦兴吴家文欧金梅安徽中医药大学药学院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 皖西学院生物与制药工程学院安徽六安237012 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室合肥230012

为了解三叶木通(Akebia trifoliata(Thunb.)Koidz.)的三萜皂苷合成途径及其关键酶,本研究对其花、叶、根、茎进行转录组测序,组装获得了57.25 Gb数据,含140859个unigenes,序列平均长度为1350 bp。KEGG代谢通路富集结果显示,517个unigene... 详细信息

为了解三叶木通(Akebia trifoliata(Thunb.)Koidz.)的三萜皂苷合成途径及其关键酶,本研究对其花、叶、根、茎进行转录组测序,组装获得了57.25 Gb数据,含140859个unigenes,序列平均长度为1350 bp。KEGG代谢通路富集结果显示,517个unigenes参与三萜皂苷合成相关的3条代谢途径,其中415个unigenes编码三萜皂苷生物合成途径的19个关键酶。对三萜皂苷生物合成过程中的关键酶角鲨烯环氧酶(SE)进行序列分析和同源建模,发现其具有保守的底物结合结构域。将三叶木通茎与花、叶、根的基因表达水平进行比较,发现茎与根相比较其上调基因数目最多,其中295个差异表达基因(DEGs)与三萜皂苷生物合成途径相关。

关键词：三叶木通转录组测序三萜皂苷生物合成角鲨烯环氧酶

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基于小RNA测序的风轮菜microRNA及其靶基因分析

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植物科学学报 2022年第2期40卷 216-228页

作者：许景垚单春苗单婷玉赵历强马克龙吴家文安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽中医药大学中西医结合临床学院合肥230012 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230012 安徽省中医药科学院合肥230012

本研究以风轮菜(Clinopodium chinense(Benth.)***)为材料,采用BGISEQ-500测序平台对风轮菜根、茎和叶的小RNA进行转录组测序,并对其黄酮类物质合成途径中参与调控的microRNA(miRNA)及其靶基因进行了分析。结果显示,鉴定出的保守miRNA... 详细信息

本研究以风轮菜(Clinopodium chinense(Benth.)***)为材料,采用BGISEQ-500测序平台对风轮菜根、茎和叶的小RNA进行转录组测序,并对其黄酮类物质合成途径中参与调控的microRNA(miRNA)及其靶基因进行了分析。结果显示,鉴定出的保守miRNA有86个,属于26个家族,新发现miRNA 8个,筛选出风轮菜黄酮类物质合成途径中调控3个关键酶的候选miRNA(novel_mir3、miR167d-5p、miR396h)。通过对靶基因编码的关键酶4-香豆酸辅酶A连接酶进行序列分析和同源建模,发现其具有高度保守的底物结合区域、催化结构域及两个保守的肽基序。

关键词：风轮菜转录组测序 miRNA 黄酮 4-香豆素辅酶A连接酶

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多花黄精果糖激酶和GDP-甘露糖焦磷酸化酶的基因克隆及酶结构性质

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生物学杂志 2022年第4期39卷 1-6页

作者：赵历强赵德蕊单春苗张声祥施圆圆吴家文安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230012 安徽省中医药科学院合肥230012

多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua,PC)果糖激酶(PCFRK)和GDP-甘露糖焦磷酸化酶(PCGMPP)是黄精多糖生物合成中重要的关键酶,为探究它们在黄精多糖生物合成途径中的作用,基于转录组测序数据分析,利用RT-PCR技术对这两种关键酶基因进行... 详细信息

多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua,PC)果糖激酶(PCFRK)和GDP-甘露糖焦磷酸化酶(PCGMPP)是黄精多糖生物合成中重要的关键酶,为探究它们在黄精多糖生物合成途径中的作用,基于转录组测序数据分析,利用RT-PCR技术对这两种关键酶基因进行克隆,并分析酶蛋白的理化性质及结构特点。PCFRK开放读码框(ORF)为1725 bp,编码574个氨基酸,具有两个磷酸果糖激酶B家族的特征保守基序;PCGMPP的ORF为1086 bp,编码361个氨基酸,具有焦磷酸化酶家族的保守位点和活性位点。系统进化树分析发现在已知数据库中PC FRK与深圳拟兰FRK亲缘关系最近;而PC GMPP与芦笋GMPP亲缘关系最近。基因表达分析说明PCFRK和PCGMPP在根状茎中的基因表达总量明显高于其他组织,这与多花黄精根茎中多糖含量高于其他组织是一致的。研究为PCFRK和PCGMPP两种关键酶功能的进一步研究及黄精多糖生物合成途径的解析奠定基础。

关键词：多花黄精基因克隆果糖激酶 GDP-甘露糖焦磷酸化酶生物信息学分析

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化痰化瘀通络法对糖尿病大鼠心肌微血管和细胞外间质的影响及机制研究

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中国中西医结合杂志 2020年第8期40卷 948-954页

作者：蔡正银储全根储俊轩云程捷安徽中医药大学中医学院合肥230038 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽中医药大学科研实验中心合肥230038

目的观察化痰化瘀通络法对糖尿病大鼠心肌微血管和细胞外间质的影响并探索部分机制。方法将糖尿病成功造模的40只清洁级SD大鼠随机分为:模型组(DCM组)、糖基化终末产物特异性蛋白交联抑制剂(ALT-711)组、化痰化瘀组(RPDBS组)、化痰组(RP... 详细信息

目的观察化痰化瘀通络法对糖尿病大鼠心肌微血管和细胞外间质的影响并探索部分机制。方法将糖尿病成功造模的40只清洁级SD大鼠随机分为:模型组(DCM组)、糖基化终末产物特异性蛋白交联抑制剂(ALT-711)组、化痰化瘀组(RPDBS组)、化痰组(RP组)、化瘀组(DBS组),每组8只,另选10只正常SD大鼠作对照组(NC组)。3周后各组开始灌胃相应药物8周,麻醉状态下取材。光镜观察心肌组织的形态变化和细胞外间质胶原的沉积情况,透射电镜观察心肌微血管的超微结构;免疫组织化学法检测心肌组织中Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)和基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)蛋白的表达。结果光镜显示,与DCM组比较,各治疗组心肌细胞变性坏死程度情况改善,心肌胶原纤维增生减少,排列基本均匀,RPDBS组治疗效果优于RP组和DBS组;透射电镜结果显示,与DCM组比较,各治疗组心肌微血管内皮细胞和基底膜的破坏程度均改善,且RPDBS组改善情况优于RP组和DBS组;免疫组织化学法显示,与NC组比较,DCM组ColⅠ、ColⅢ、MMP-1、TIMP-1蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05);与DCM组比较,各治疗组均下调了ColⅠ、ColⅢ和MMP-1、TIMP-1蛋白表达水平(P<0.01,P<0.05),其中RPDBS组较RP组和DBS组蛋白表达水平下调明显(P<0.01)。结论化痰化瘀通络法能够改善糖尿病大鼠心肌微血管及细胞外间质病变,其机制可能与下调心肌组织MMP-1、TIMP-1蛋白表达水平,调节MMP-1/TIMP-1平衡,改善心肌细胞外基质代谢有关。且化痰化瘀通络法合用疗效优于化痰法和化瘀法单独应用。

关键词：化痰化瘀通络心肌微血管细胞外间质机制

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UPLC-ESI-QTOF/MS^E结合UNIFI快速分析华蟾素注射液化学成分

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天然产物研究与开发 2020年第3期32卷 498-506页

作者：吴欢唐卯星陶欣怡占翔仇静文高波李庆林安徽中医药大学科研实验中心合肥230038 四川大学化学学院成都610065 新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽华润金蟾药业股份有限公司淮北235000

采用超高效液相色谱-电喷雾离子源-四级杆飞行时间质谱(UPLC-ESI-QTOF/MS)结合UNIFI天然产物信息平台快速分析华蟾素注射液化学成分。利用QTOF/MS非信息依赖扫描的MS^E模式采集复杂组分质谱信息,将采集的质谱数据文件和自建化学成分库导... 详细信息

采用超高效液相色谱-电喷雾离子源-四级杆飞行时间质谱(UPLC-ESI-QTOF/MS)结合UNIFI天然产物信息平台快速分析华蟾素注射液化学成分。利用QTOF/MS非信息依赖扫描的MS^E模式采集复杂组分质谱信息,将采集的质谱数据文件和自建化学成分库导入UNIFI,进行智能匹配,随后使用MassLynx工作站逐个核对。本实验共辨识76个化学成分,其中蟾蜍二烯羟酸内酯类36个、生物碱类12个(包括1种新成分)、小分子肽类13个、有机酸类7个、酰胺类4个、甾醇类2个、其他类2个。本方法能快速分离、分析华蟾素注射液复杂组分,为该制剂的毒-效成分及质量控制研究奠定了基础。

关键词：华蟾素注射液 UPLC-ESI-QTOF/MS UNIFI 化学成分

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