检索结果-内蒙古大学图书馆

中药肝豆汤含药血清对Wilson病模型TX小鼠肝细胞内ATP7b蛋白亚细胞定位和功能表达的影响

中华中医药杂志 2017年第1期32卷 250-253页

作者：徐陈陈董健健程楠韩咏竹王训安徽中医药大学研究生部合肥230038 安徽中医药大学神经病学研究所附属医院神经内科合肥230061

目的:观察肝豆汤调控TX小鼠肝细胞内铜转运通路的分子靶点,研究其调控机制。方法:免疫荧光双标记经激光共聚焦显微镜观察由含肝豆汤兔血清孵育后TX小鼠肝细胞内ATP7b蛋白的亚细胞定位变化。结果:ATP7b蛋白在DL小鼠肝细胞内定位于反面高... 详细信息

目的:观察肝豆汤调控TX小鼠肝细胞内铜转运通路的分子靶点,研究其调控机制。方法:免疫荧光双标记经激光共聚焦显微镜观察由含肝豆汤兔血清孵育后TX小鼠肝细胞内ATP7b蛋白的亚细胞定位变化。结果:ATP7b蛋白在DL小鼠肝细胞内定位于反面高尔基体管网状结构(TGN),位于高铜环境中则转运至顶端膜区,去除高铜环境则重新定位于TGN;ATP7b蛋白在TX小鼠肝细胞内不能定位于TGN及顶端膜区域,去除高铜环境也不能促使ATP7b蛋白重新定位于TGN。中药肝豆汤可促使ATP7b蛋白逐步重新定位于TGN。结论:肝豆汤可以通过诱导ATP7b蛋白重新定位于TGN,进而发挥细胞内排铜作用,改善Wilson病的临床症状。

关键词：肝豆汤 TX小鼠 Wilson病 ATP7b蛋白反面高尔基体管网状结构免疫荧光双标记

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肝豆状核变性患者肾脏损害的判断指标的研究

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临床神经病学杂志 2014年第2期27卷 125-127页

作者：吴君霞何志超王训杨任民安徽中医药大学神经病学研究所附属医院检验科合肥230031 安徽中医药大学神经病学研究所附属医院神经内科合肥230031

目的探讨肝豆状核变性（HLD）患者肾脏损害的判断指标。方法分别检测168例HLD患者（HLD组）和40名正常对照者（正常对照组）尿液中N-乙酰．β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）、视黄醇结合蛋白（RBP）、α1-微球蛋白（α1—MG）、β2-微球蛋白（... 详细信息

目的探讨肝豆状核变性（HLD）患者肾脏损害的判断指标。方法分别检测168例HLD患者（HLD组）和40名正常对照者（正常对照组）尿液中N-乙酰．β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）、视黄醇结合蛋白（RBP）、α1-微球蛋白（α1—MG）、β2-微球蛋白（β2·MG）、谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）、微量白蛋白（mAlb）的水平和血清胱抑素C（CysC）、m清转化生长因子β1（TGF-β1）、血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、血清Ⅳ型胶原（Ⅳ—C）的水平。对两组的检测结果进行比较，建立受试者工作特征曲线并分析各项指标曲线下面积（AUC）。结果HLD组患者尿液NAG、RBP、α1—MG、β2一MG、GSTs、mAlb水平和血清CysC、TGF-β1、PCⅢ、Ⅳ—C水平均显著高于正常对照组（P〈0．05—0．01）。RBP的AUC（0．983）最大，其次是CysC（0．974）、Ⅳ—C（0．938）、PCIII（0．929）、β2-MG（0．811）、NAG（0．783）、GSTs（0．763）、TGF-β1（0．69）和α1—MG（0．635），mAlb的AUC最小（0．602）。结论尿液RBP水平和血清CysC、Ⅳ—C、PCⅢ水平是反映HLD患者肾脏损害较为全面且准确性较高的指标。

关键词：肝豆状核变性肾脏损害视黄醇结合蛋白血清胱抑素C Ⅲ型前胶原 Ⅳ型胶原

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DMD模型鼠mdx小鼠线粒体损伤的研究进展

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中国实验动物学报 2024年第6期32卷 793-798页

作者：高天董健健喻绪恩安徽中医药大学神经病学研究所合肥230038 安徽中医药大学神经病学研究所附属医院合肥230061

Duchenne肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是一种由编码抗肌萎缩蛋白的Dystrophin基因突变导致的致死性、进行性、X连锁隐性遗传肌肉疾病。目前,DMD尚无治愈手段,临床研究进展缓慢,动物模型的建立对DMD的实验研究作用越来... 详细信息

Duchenne肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是一种由编码抗肌萎缩蛋白的Dystrophin基因突变导致的致死性、进行性、X连锁隐性遗传肌肉疾病。目前,DMD尚无治愈手段,临床研究进展缓慢,动物模型的建立对DMD的实验研究作用越来越重要。结合研究发现,mdx小鼠具有DMD患者相同的发病机制,广泛应用于DMD病理机制和新药开发的研究中。线粒体损伤是DMD重要的病理机制之一,对线粒体的保护是DMD的潜在治疗靶点,因此探讨mdx小鼠与线粒体损伤的关系具有重要意义。本文就近年来DMD模型鼠mdx小鼠线粒体损伤的研究进展进行综述,为相关实验提供参考。

关键词： Duchenne肌营养不良线粒体损伤动物模型 mdx小鼠

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电针对脑缺血大鼠神经血管单元及Wnt/β-catenin信号通路的影响

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针刺研究 2021年第2期46卷 87-94页

作者：李广大李笑笑董健健吴云韩永升安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学神经病学研究所附属医院合肥230061 中国科学院合肥物质研究院合肥230031 安徽中医药大学神经病学研究所合肥230038

目的:观察电针对脑缺血大鼠神经血管单元主要标志蛋白——血管内皮生长因子(VEGF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核抗原(NeuN)和Wnt/β-catenin信号通路关键成分β-连环蛋白(β-catenin)、支架蛋白(Axin2)蛋白及mRNA表达的影响,探讨... 详细信息

目的:观察电针对脑缺血大鼠神经血管单元主要标志蛋白——血管内皮生长因子(VEGF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核抗原(NeuN)和Wnt/β-catenin信号通路关键成分β-连环蛋白(β-catenin)、支架蛋白(Axin2)蛋白及mRNA表达的影响,探讨电针治疗缺血性脑卒中的机制。方法:将108只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组,每组36只,并按照术后7、14、21 d分为3个时相组,每组12只。电凝大鼠大脑中动脉建立永久性大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。电针组大鼠予以电针刺激"百会""水沟"及双侧"三阴交""内关"(2 Hz/100 Hz,2~4 V,30 min)。第1次电针在造模后2 h内进行,此后每天上午电针1次,7 d为1个疗程,最多3个疗程。用Zea Longa评分法评价各组大鼠神经功能缺损情况;用磁共振影像系统检测各组大鼠脑梗死情况;分别用免疫组织化学法和荧光定量PCR法检测各组大鼠缺血区脑组织VEGF、GFAP、NeuN、β-catenin及Axin2蛋白和mRNA的表达。结果:与对照组比较,造模后模型组大鼠神经功能评分和脑梗死体积均明显升高(P<0.01);电针组在术后第7、14、21天神经功能评分和脑梗死体积均显著低于模型组(P<0.01)。与对照组比较,模型组各时点缺血脑组织中VEGF、GFAP、β-catenin蛋白和mRNA表达显著升高(P<0.01),NeuN、Axin2蛋白和mRNA表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,电针组各时点VEGF、GFAP、NeuN、β-catenin蛋白和mRNA表达显著增多(P<0.01),且随着时间延长,表达均逐渐增加,在第21天达到峰值;Axin2蛋白和mRNA表达明显下降(P<0.01)。结论:电针可以有效保护脑缺血大鼠神经血管单元,减少脑梗死体积,改善MCAO大鼠神经功能缺损症状,其机制可能与上调β-catenin及下调Axin2的表达,激活经典Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词：脑缺血电针神经血管单元 Wnt/β-catenin信号通路

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肝豆汤对Wilson病模型TX小鼠肝细胞内铜代谢通路的分子调控机制

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中国实验方剂学杂志 2016年第24期22卷 128-133页

作者：董健健韩咏竹程楠安徽中医药大学神经病学研究所附属医院合肥230061

目的:探讨肝豆汤调控毒牛奶(TX)小鼠肝细胞内铜转运通路的分子靶点并观察其相应的调控机制。方法:20只家兔适应性喂养3 d后,随机分为空白组(生理盐水)和肝豆汤组(4.5 g·kg-1·d^(-1)),每日2次ig,连续10 d,制得含药血清;采用2... 详细信息

目的:探讨肝豆汤调控毒牛奶(TX)小鼠肝细胞内铜转运通路的分子靶点并观察其相应的调控机制。方法:20只家兔适应性喂养3 d后,随机分为空白组(生理盐水)和肝豆汤组(4.5 g·kg-1·d^(-1)),每日2次ig,连续10 d,制得含药血清;采用2步灌注法分离提取DL,TX小鼠肝细胞,采用原子吸收法检测加含不同百分含量(5%,10%,15%,20%)含肝豆汤兔血清作用24 h后,对TX小鼠肝细胞内微量元素的影响,另设空白组;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测经含肝豆汤兔血清作用后腺嘌呤核苷三磷酸7b(adenosine triphosphate7b,ATP7b),抗氧化蛋白1(anti-oxidant1,ATOX1),铜转运体1(copper transporter1,CTR1),金属巯蛋白(metallothionein,MT),超氧化剂物歧化酶铜伴侣蛋白(copper chaperone of superoxide dismutase,CCS),细胞色素氧化酶17(cytochrome-coxidase17,COX17)蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组TX小鼠肝细胞内铜含量升高,锌含量降低,铁含量升高,ATP7b,ATOX1,CCS,COX17蛋白表达明显降低,CTR1,MT蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,含肝豆汤兔血清可显著降低TX小鼠肝细胞内铜含量,增加锌含量,降低铁含量(P<0.05,P<0.01);Western blot检测结果显示,含肝豆汤兔血清可明显增加ATP7b,ATOX1,CCS,COX17蛋白表达(P<0.05,P<0.01),降低CTR1,MT蛋白表达(P<0.01)。结论:肝豆汤可能是通过调控细胞内铜代谢相关蛋白,上调ATP7b,ATOX1,CCS,COX17蛋白表达,抑制CTR1,MT表达,从而发挥细胞内排铜作用。肝豆汤可通过多靶点、多途径调控铜代谢通路达到降低肝细胞内铜含量的治疗效果。

关键词： Wilson病肝豆汤 TX小鼠铜代谢通路

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肝豆状核变性患者心理弹性水平及影响因素

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中国健康心理学杂志 2021年第4期29卷 509-513页

作者：方明娟许亚运杨任民严彦胡文彬安徽中医药大学神经病学研究所附属医院 230061

目的:研究肝豆状核变性(WD)患者心理弹性水平并分析其相关影响因素。方法:抽取123例WD患者,收集患者一般资料,采用心理弹性量表(CD-RISC)、社会支持量表(SSRS)、一般自我效能感量表(GSES)展开调查。结果:WD患者心理弹性总分(56.78±... 详细信息

目的:研究肝豆状核变性(WD)患者心理弹性水平并分析其相关影响因素。方法:抽取123例WD患者,收集患者一般资料,采用心理弹性量表(CD-RISC)、社会支持量表(SSRS)、一般自我效能感量表(GSES)展开调查。结果:WD患者心理弹性总分(56.78±15.75),单因分析显示,年龄、职业、收入、一般自我效能感水平及社会支持水平是影响WD患者心理弹性的因素;进一步logistics多因素回归分析显示,年龄(OR=2.164,P<0.05,95%CI 1.120~4.181)、一般自我效能感(OR=6.155,P<0.001,95%CI 2.373~15.964)及社会支持(OR=2.232,P<0.05,95%CI 1.059~4.703)为其心理弹性水平的独立影响因素。Pearson相关分析显示WD患者心理弹性与一般自我效能、社会支持均呈正相关(r=0.587、0.514,P<0.01)。结论:WD患者心理弹性水平较低,而对于年龄小,社会支持水平及自我效能感低的WD群体需给予更多的干预措施以提高其心理弹性。

关键词：肝豆状核变性心理弹性社会支持一般自我效能

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肝豆汤改良方对TX小鼠脑组织ASM、Cer及p38 MAPK mRNA和蛋白表达的影响

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中华中医药杂志 2017年第11期32卷 5049-5055页

作者：徐陈陈董健健陈雪燕王训程楠韩咏竹胡文彬安徽中医药大学合肥230038 安徽中医药大学神经病学研究所附属医院神经内科合肥230061 蚌埠市第五人民医院安徽蚌埠233000

目的:探讨肝豆汤改良方(MGDD)对TX小鼠脑组织酸性鞘磷脂水解酶(ASM)、神经酰胺(Cer)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)m RNA和蛋白表达的影响。方法:将140只TX小鼠随机分成1、3、5月龄模型组,3、5月龄MGDD组及3、5月龄丁苯酞组,每组20... 详细信息

目的:探讨肝豆汤改良方(MGDD)对TX小鼠脑组织酸性鞘磷脂水解酶(ASM)、神经酰胺(Cer)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)m RNA和蛋白表达的影响。方法:将140只TX小鼠随机分成1、3、5月龄模型组,3、5月龄MGDD组及3、5月龄丁苯酞组,每组20只,同时选用相同月龄60只DL小鼠分别为1、3、5月龄正常对照组,每组20只,饲养环境及喂食食物相同,均从入组时开始给药,MGDD治疗组按24.5g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,丁苯酞组给以丁苯酞混悬液0.156g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,正常对照组及模型组灌胃100m L·kg^(-1)·d^(-1) 0.9%氯化钠溶液,1次/d,收集处理标本,采用RT-PCR、免疫组织化学法及Western blot技术检测脑组织内ASM、Cer及p38 MAPK m RNA及蛋白表达水平。结果:模型组小鼠脑组织ASM、Cer及p38 MAPK mRNA及蛋白表达程度伴随着月龄的增加,表达有增多趋势,MGDD治疗组较模型组可显著降低小鼠脑内ASM、Cer及p38 MAPK mRNA及蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),且随着疗程的延长,抑制更加显著。结论:MGDD可能通过下调小鼠脑组织神经酰胺信号通路中ASM、Cer、p38 MAPK mRNA及蛋白的表达水平,改善铜负荷引起的神经元损伤。

关键词： Wilson病 TX小鼠神经酰胺通路铜酸性鞘磷脂水解酶神经酰胺 p38丝裂原活化蛋白激酶肝豆汤改良方

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不同状态-特质焦虑水平Wilson病患者的注意偏向特征

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中华行为医学与脑科学杂志 2022年第8期31卷 698-702页

作者：施倍倍王共强马心锋张龙韩咏竹安徽中医药大学研究生院合肥230038 安徽中医药大学神经病学研究所附属医院合肥230061

目的探讨Wilson病(Wilson disease,WD)患者不同状态-特质焦虑水平的注意偏向特征。方法采用情绪Stroop范式及状态-特质焦虑量表(state-trait anxiety inventory,STAI)评估49例WD患者焦虑水平及注意偏向变化特点。采用SPSS 25.0进行统计... 详细信息

目的探讨Wilson病(Wilson disease,WD)患者不同状态-特质焦虑水平的注意偏向特征。方法采用情绪Stroop范式及状态-特质焦虑量表(state-trait anxiety inventory,STAI)评估49例WD患者焦虑水平及注意偏向变化特点。采用SPSS 25.0进行统计分析,两组间比较采用独立样本t检验,多元线性回归分析评估注意偏向反应时的影响因素。结果(1)WD患者高特质焦虑组分别在正性、负性及中性词刺激下测得的反应时[分别为(867.0±172.1)ms、(877.0±167.7)ms、(898.4±169.8)ms]明显高于低特质焦虑组[分别为(771.9±128.9)ms、(770.9±110.4)ms、(778.4±120.1)ms],均差异有统计学意义(t=-2.183,-2.605,-2.847,均P<0.05)。高状态焦虑组分别在正性、负性及中性词刺激下的反应时[分别为(866.9±171.9)ms、(867.8±173.8)ms、(889.8±173.5)ms]高于低状态焦虑组[分别为(771.9±129.2)ms、(780.4±109.3)ms、(787.3±123.0)ms],均差异有统计学意义(t=-2.177,-2.116,-2.378,均P<0.05)。(2)多元线性回归分析显示,特质焦虑总分(B=4.584、4.671、5.376,P=0.020、0.015、0.008)及年龄(B=9.314、7.864、7.505,P=0.002、0.008、0.014)是正性、负性情绪词及中性词刺激下反应时的影响因素。结论焦虑情绪会导致WD患者表现出更多的负性注意偏向,且特质焦虑能够显著预测注意偏向的特征。

关键词： Wilson病肝豆状核变性注意偏向情绪Stroop范式状态-特质焦虑

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肝豆状核变性患者中医证型与血尿酸、Goldstein分级的关系

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中国中西医结合杂志 2015年第11期35卷 1335-1339页

作者：胡纪源周志华韩咏竹叶群荣洪铭范蔡永亮任明山潘发明王训杨任民安徽中医药大学神经病学研究所附属医院合肥230061 广州药学院第一附属医院神经内科广州510080 安徽中医药大学第一附属医院神经内科合肥230061 安徽省立医院神经内科合肥230061 安徽医科大学公共卫生学院合肥230061

目的观察肝豆状核变性(Wilson's disease,WD)患者不同中医证型的血尿酸水平、Goldstein分级及其两者的关系。方法将符合纳入标准的906例WD患者根据不同中医证候分为痰蒙心窍组(26例)、痰火扰心组(90例)、湿热内蕴组(113例)、气血两... 详细信息

目的观察肝豆状核变性(Wilson's disease,WD)患者不同中医证型的血尿酸水平、Goldstein分级及其两者的关系。方法将符合纳入标准的906例WD患者根据不同中医证候分为痰蒙心窍组(26例)、痰火扰心组(90例)、湿热内蕴组(113例)、气血两虚组(168例)、肝肾阴虚组(327例)、肝肾亏虚组(182例)。以同期年龄相仿、饮食结构大致相同的160例健康体检者作为正常对照组。分别于清晨空腹采肘正中静脉血检测各组血尿酸水平。结果 WD各中医证型组血尿酸水平[痰蒙心窍组为(146.08±67.24)μmol/L、痰火扰心组为(157.08±69.77)μmol/L、湿热内蕴组为(162.58±97.72)μmol/L、气血两虚组为(156.20±62.63)μmol/L、肝肾阴虚组为(161.83±111.23)μmol/L、肝肾亏虚组为(194.41±90.01)μmol/L]均较正常对照组[(242.39±87.55)μmol/L]明显降低(P<0.01)。各中医证型组间比较发现,肝肾亏虚组血尿酸较痰蒙心窃组、痰火扰心组、湿热内蕴组、气血两虚组、肝肾阴虚组升高(P<0.01)。Goldstein分级结合血尿酸分析发现,随着Goldstein分级的增加(即病情的加重),患者血尿酸水平下降(P<0.01)。结论 WD患者血尿酸水平较减健康人降低,不同中医辨证分型血尿酸水平及Goldstein评分不同;且血尿酸具有评定患者病情轻重的价值。

关键词：肝豆状核变性中医证型尿酸 Goldstein分级

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基于Cer通路探讨肝豆汤对Wilson病模型高铜诱导海马神经元细胞损伤的保护作用

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中国实验方剂学杂志 2019年第7期25卷 56-60页

作者：徐陈陈董健健王训韩咏竹程楠安徽中医药大学神经病学研究所附属医院合肥230061 安徽医科大学第二附属医院合肥230601

目的:探讨肝豆汤调控海马神经元内神经酰胺(Cer)信号通路的分子靶点并观察其相应的调控机制。方法:本实验采用海马神经元HT-22细胞,分为正常组,模型组,10%,15%及20%肝豆汤组5个组,模型组为硫酸铜(CuSO_4)孵育HT-22细胞所得,正常组加入... 详细信息

目的:探讨肝豆汤调控海马神经元内神经酰胺(Cer)信号通路的分子靶点并观察其相应的调控机制。方法:本实验采用海马神经元HT-22细胞,分为正常组,模型组,10%,15%及20%肝豆汤组5个组,模型组为硫酸铜(CuSO_4)孵育HT-22细胞所得,正常组加入空白含药血清,10%,15%及20%肝豆汤组分别加含不同体积分数(10%,15%,20%)肝豆汤兔血清的培养基培养。噻唑蓝(MTT)比色法检测不同剂量CuSO_4作用不同时间点对HT-22细胞生长和增殖的影响;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)释放量的变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Cer信号通路相关蛋白表达情况。结果:MTT结果显示CuSO_4在一定时间和浓度范围内对HT-22细胞生长和增殖有明显抑制作用;流式细胞仪检测发现,与正常组比较,模型组ROS荧光强度显著增加(P <0. 01),肝豆汤组较模型组可显著降低细胞内ROS的释放量(P <0. 01)。Western blot检测结果显示与模型组比较,肝豆汤组可明显降低细胞内酸性鞘磷脂水解酶(ASM),Cer,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK),细胞色素C(Cyt C),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达(P <0. 05,P <0. 01)。结论:高铜可诱导HT-22细胞内线粒体氧化应激并引起Cer信号通路失活,从而诱导海马神经元损伤的发生。肝豆汤可能通过促进过量铜排出而抑制细胞内ASM,Cer,p38 MAPK,Cyt C,Caspase-9,Caspase-3蛋白的表达,从而减轻高铜对海马神经元的损伤作用。肝豆汤可通过减少脑内铜含量,进而调控Cer信号通路达到减轻高铜诱导海马神经元损伤的治疗效果。

关键词： Wilson病肝豆汤 Cer信号通路 HT-22细胞

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