检索结果-内蒙古大学图书馆

中国新药杂志 2020年第8期29卷 953-960页

作者：郭艳方伟李妮妮蒋成君汪电雷安徽中医药大学药学院安徽中医药大学药物代谢动力学研究室

目的:建立化痰降气方的超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)指纹图谱,为其质量标准的进一步完善提供依据。方法:采用Phenomenon Polar C18色谱柱(100 mm×2. 1 mm,5μm),以乙腈-0. 1%甲酸水为流动相梯度... 详细信息

目的:建立化痰降气方的超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)指纹图谱,为其质量标准的进一步完善提供依据。方法:采用Phenomenon Polar C18色谱柱(100 mm×2. 1 mm,5μm),以乙腈-0. 1%甲酸水为流动相梯度洗脱,柱温为35℃,流速为0. 2 m L·min-1,进样量为3μL,检测波长为290 nm;建立10批次化痰降气方的UPLC指纹图谱,并使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)"对指纹图谱相似度进行评价。结果:10批次化痰降气方指纹图谱中有14个共有峰,指认了其中7个特征指纹峰; 10批次化痰降气方指纹图谱中有7批次相似度值均高于0. 926,另有3批次相似度值稍低,分别为0. 835,0. 869和0. 843,但各批次之间共有峰的相对保留时间和相对峰面积差异较小。结论:该方法灵敏度高、重复性好,可用于控制化痰降气方的质量稳定性。

关键词：化痰降气方超高效液相色谱法指纹图谱质量控制

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基于Notch通路研究化痰降气胶囊含药血清对人支气管上皮细胞MRP1的影响

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中药新药与临床药理 2019年第12期30卷 1442-1448页

作者：李妮妮蒋成君郭艳汪电雷安徽中医药大学研究生院安徽合肥230031 安徽中医药大学药物代谢动力学研究室安徽合肥230031

目的基于Notch通路探讨化痰降气胶囊含药血清对人支气管上皮细胞(16HBE)中多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达和外排功能的影响。方法根据血清药理学的方法制备化痰降气胶囊含药血清和空白血清,然后将含药血清分为5%、10%、15%、20%4个浓度对1... 详细信息

目的基于Notch通路探讨化痰降气胶囊含药血清对人支气管上皮细胞(16HBE)中多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达和外排功能的影响。方法根据血清药理学的方法制备化痰降气胶囊含药血清和空白血清,然后将含药血清分为5%、10%、15%、20%4个浓度对16HBE细胞进行干预,CCK-8法检测细胞增殖率筛选出最佳作用浓度;细胞分为空白血清组、香烟烟雾提取物(CSE)+空白血清组、CSE+含药血清组、化痰降气胶囊含药血清组、Notch通路抑制剂DAPT+空白血清组、DAPT+含药血清组,用Western Blot法检测各组Notch1、Hes1、MRP1蛋白表达;以5-羧基二乙酸荧光素(5-CFDA)为底物,采用流式细胞术检测细胞内荧光强度的变化评价MRP1的外排功能;免疫荧光法检测Notch1的胞内段(NICD)核移位活性。结果化痰降气胶囊含药血清的最佳作用浓度为15%。与空白血清组比较,含药血清组Notch1、Hes1、MRP1蛋白表达呈浓度依赖性升高(P<0.05,P<0.01),MRP1转运体的外排能力明显提高(P<0.01),细胞核内NICD的荧光强度有所增强;而CSE+空白血清组蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与CSE+空白血清组比较,CSE+化痰降气胶囊含药血清组的Notch1、Hes1、MRP1蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01);与化痰降气胶囊含药血清组比较,DAPT+化痰降气胶囊含药血清组的Notch1、Hes1、MRP1蛋白表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),MRP1的外排能力也降低(P<0.01),胞质胞核荧光强度均减弱。结论化痰降气胶囊含药血清可能通过Notch通路上调16HBE细胞中MRP1的表达和外排功能,这可能是其治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用机制之一。

关键词：化痰降气胶囊含药血清慢性阻塞性肺疾病多药耐药相关蛋白1 Notch信号通路人支气管上皮细胞

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烟雾所致轻度稳定期COPD小鼠肺组织中MRP1表达增加与Nrf2信号通路有关

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中国药理学通报 2019年第2期35卷 272-277页

作者：吴洁姚兆敏方伟吴青青曹鹏汪电雷安徽中医药大学研究生院江苏南京210028 安徽中医药大学江苏省中医药研究院细胞与分子生物学实验室江苏南京210028 安徽中医药大学药物代谢动力学研究室

目的探讨Nrf2信号通路对烟雾致轻度稳定期COPD小鼠肺组织中MRP1表达的影响。方法被动香烟烟吸法建立轻度COPD小鼠模型,检测肺功能;病理切片观察肺组织病理学改变;免疫组化及Western blot检测相关蛋白在肺组织中的表达水平。结果与正常... 详细信息

目的探讨Nrf2信号通路对烟雾致轻度稳定期COPD小鼠肺组织中MRP1表达的影响。方法被动香烟烟吸法建立轻度COPD小鼠模型,检测肺功能;病理切片观察肺组织病理学改变;免疫组化及Western blot检测相关蛋白在肺组织中的表达水平。结果与正常组相比,野生型(WT)及Nrf2^(-/-)模型组各肺功能指标明显降低;并且Nrf2^(-/-)模型组与WT模型组相比,各肺功能指标的下降更为明显。HE染色结果显示,WT及Nrf2^(-/-)模型小鼠肺泡中均发生弥漫性炎症反应,肺泡支气管结构受损,并且在Nrf2^(-/-)模型小鼠中病理改变更为明显。免疫组化及Western blot结果显示,与WT正常组相比,MRP1在Nrf2^(-/-)正常组小鼠肺组织中的表达明显减少;被动香烟烟吸后,与WT正常组相比,MRP1、Nrf2、HO-1在WT模型组中的表达明显增多,但是与Nrf2^(-/-)正常组相比,在Nrf2^(-/-)模型组中MRP1的表达并未发生明显改变。结论

关键词：轻度稳定期慢性阻塞性肺疾病 Nrf2基因敲除小鼠香烟烟雾多药耐药相关蛋白1 Nrf2/ARE信号通路血红素加氧酶-1

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栀子酸调节胆汁淤积大鼠SHP-LRH-1信号通路的实验研究

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中南大学学报（医学版） 2019年第6期44卷 605-613页

作者：陈浩高璇赵威俞浩王宁生宓穗卿安徽科技学院生命与健康科学学院安徽凤阳233100 广州中医药大学临床药理研究所药物代谢动力学研究室广州510405

目的:研究栀子酸(geniposidic acid,GPA)对α-萘异硫氰酸酯(α-naphthyl isothiocyanate,ANIT)诱导胆汁淤积大鼠胆汁酸代谢小分子异源二聚体伴侣受体(small heterodimer partner,SHP)与肝受体同源物1(liver receptor homologue 1,LRH-1)信号通路的调节.方法:将50只SD大鼠随机分为5组,分别为空白组、ANIT组、ANIT+GPA 100 mg/kg组(AG100组)、ANIT+GPA 50 mg/kg组(AG50组)、ANIT+GPA 25 mg/kg组(AG25组),每组10只,连续给药10 d,空白组和ANIT组用生理盐水灌胃,ANIT+GPA各组给予GPA,给药的第8天,除空白组外,其余各组用ANIT(65 mg/kg)灌胃1次造模,继续给药至第10天,测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)和总胆汁酸(total bile acids,TBA)的含量;分离并培养大鼠原代肝细胞(rat primary hepatocytes,RPH),将RPH分为空白组、40μmol/L ANIT组、40μmol/L ANIT+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(A4G,A1G和A0.25G组),real-time RT-PCR检测RPH中SHP和胆汁酸合成关键酶胆固醇7α羟化酶(cytochrome P450 family 7 subfamily A member 1,CYP7a1)mRNA转录水平,蛋白印迹法检测SHP和CYP7a1蛋白表达;沉默实验中,将RPH分为空白对照组、阴性转染组、siRNA-LRH-1组(ZR组)、siRNA-LRH-1+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(ZR4G、ZR1G、ZR0.25G组),检测SHP,CYP7a1和LRH-1蛋白和基因的表达;过表达实验中,将RPH又分为空白对照组、阴性转染组(空白转染siRNA-阴性组)、LRH-1过表达组(LRH-1过表达质粒,OE组)、LRH-1过表达质粒+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(OE4G,OE1G,OE0.25G组),检测SHP,CYP7a1和LRH-1蛋白和基因的表达.结果:在体实验中,与空白对照组比较,ANIT组的TC和TBA均显著升高(均P<0.01)、TG无差别;与ANIT组比较,AG100组和AG50组的TC和TBA均显著降低(均P<0.01).RPH实验中,与空白对照组比较,ANIT组中SHP的蛋白和基因水平均显著降低(均P<0.01),CYP7a1的蛋白和基因水平均显著升高(均P<0.01);与ANIT组比较,A4G和A1G组的SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),A0.25G组SHP基因和蛋白水平均升高(P<0.05),A4G和A1G组的CYP7a1基因和蛋白水平均显著降低(均P<0.01).LRH-1沉默实验中,与阴性转染组比较,ZR组中CYP7a1和LRH-1蛋白和基因均显著抑制(均P<0.01),SHP无变化;与ZR组比较,ZR4G,ZR1G和ZR0.25G组SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),LRH-1和CYP7a1无显著变化.LRH-1过表达实验中,与阴性转染组比较,OE组的CYP7a1和LRH-1蛋白和基因均显著抑制(均P<0.01),SHP无变化;与OE组比较,OE4G和OE1G组SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),OE0.25G组SHP基因显著升高(P<0.05),LRH-1和CYP7a1无显著变化.结论:RPH中LRH-1的过表达能上调CYP7a1的活性,GPA可以改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠的生物化学水平和肝脏病理,其机制可能与GPA激活大鼠RPH中SHP造成LRH-1的消耗来降低CYP7a1的表达有关.

关键词：栀子酸小分子异源二聚体伴侣受体肝受体同源物1 大鼠原代肝细胞肝肠循环

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HPLC法测定Beagle犬血浆中阿齐沙坦及其渗透泵控释片药代动力学研究

HPLC法测定Beagle犬血浆中阿齐沙坦及其渗透泵控释片药代动力学研...

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第十五届长三角科技论坛——2018年长三角色谱分析技术共建共享创新成果学术研讨会

作者：李妮妮汪电雷樊玲安徽中医药大学药学院安徽合肥230031 安徽中医药大学药学院安徽合肥230031 安徽中医药大学药物代谢动力学研究室安徽合肥230031

目的：采用HPLC建立测定阿齐沙坦在Beagle犬血浆中的浓度方法 ,研究给予口服阿齐沙坦渗透泵控释片后其体内的药代动力学特征,同时阐明其控释片的生物利用度,对其生物等效性进行评价.方法：以水-乙腈-冰醋酸为(57∶42∶1v/v/v)为流动相,... 详细信息

目的：采用HPLC建立测定阿齐沙坦在Beagle犬血浆中的浓度方法 ,研究给予口服阿齐沙坦渗透泵控释片后其体内的药代动力学特征,同时阐明其控释片的生物利用度,对其生物等效性进行评价.方法：以水-乙腈-冰醋酸为(57∶42∶1v/v/v)为流动相,流速1.0mL·min-1,紫外检测波长254 nm,以缬沙坦为内标,甲醇沉淀蛋白.采用双周期自身交叉实验分别单剂量口服给予Beagle犬阿齐沙坦渗透泵控释片和阿齐沙坦普通片测定不同时间点其血浆浓度.实验数据运用DAS 2.1软件分析,得其主要药代动力学参数,计算渗透泵控释片的生物利用度.结果：阿齐沙坦在0.03～12.5 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9994),定量下限0.03 mg·L-1,日内、日间精密度RSD不大于10％,准确度在85％～100％范围内,提取回收率均大于85％,方法学考察均符合要求.分别单剂量口服给药阿齐沙坦渗透泵控释片(受试制剂)和阿齐沙坦普通片(参比制剂),同时单剂量静脉给药阿齐沙坦,经DAS2.1软件计算药动参数,与普通片相比,阿齐沙坦的相对生物利用度为114.80％,与静脉给药相比,阿齐沙坦的绝对生物利用度为31.88％.结论：建立的HPLC法测定阿齐沙坦在Beagle犬血浆中浓度,方法可靠、操作简便,能满足阿齐沙坦渗透泵控释片在Beagle犬体内的药代动力学研究的要求.

关键词：高血压阿齐沙坦渗透泵药代动力学

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NAC上调COPD大鼠中Nrf2和MRP1表达的机制研究

NAC上调COPD大鼠中Nrf2和MRP1表达的机制研究

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第三届全国药物代谢动力学青年科学家论坛暨刘昌孝人才奖颁奖大会

作者：徐晓雅张敏汪电雷姚兆敏吴青青吴洁方伟安徽中医药大学药学院安徽中医药大学药物代谢动力学研究室

目的:研究COPD大鼠肺支气管上皮红系衍生的核因子相关因子(Nrf2)及其调控的下游表达产物血红素氧合酶1 (HO-1)表达的改变,同时考察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对COPD大鼠肺支气管上皮Nrf2和MRP1表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为3组,即正常对... 详细信息

目的:研究COPD大鼠肺支气管上皮红系衍生的核因子相关因子(Nrf2)及其调控的下游表达产物血红素氧合酶1 (HO-1)表达的改变,同时考察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对COPD大鼠肺支气管上皮Nrf2和MRP1表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为3组,即正常对照组、COPD模型组、NAC给药组,其中正常对照组和COPD模型组、NAC给药组采用被动吸烟联合气管内滴入脂多糖(LPS)方法建立经典大鼠COPD模型。在动物造模成功后,连续给药15 d后,测定各组大鼠肺功能指标;观察肺组织病理学改变;采用免疫组化分析各组肺组织中Nrf2、MRP1的蛋白水平;采用免疫荧光观察Nrf2在各组中的表达变化情况;应用Western blot和RT-PCR技术测定Nrf2、HO-1、MRP1在各组肺支气管上皮组织中的表达情况。结果:(1)模型组中Nrf2、MRP1蛋白表达均下降(P<0.05);与模型组比较,NAC组的Nrf2、MRP1蛋白表达均上升(P<0.05)。(2)与正常对照组比较,模型组大鼠肺支气管部位组织Nrf2、HO-1、MRP1 mRNA蛋白表达均明显下调(P<0.05);与模型组比较,经过NAC治疗后Nrf2、HO-1、MRP1 mRNA蛋白表达均明显上调(P<0.05)。结论:Nrf2-ARE信号通路可能参与NAC上调COPD大鼠肺支气管上皮MRP1的表达,进而在COPD的治疗中发挥重要作用。

关键词： NAC 慢性阻塞性肺疾病红系衍生的核因子相关因子2 多药耐药相关蛋白1

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UPLC法测定大鼠血浆中海南粗榧内酯醇及其药代动力学研究

UPLC法测定大鼠血浆中海南粗榧内酯醇及其药代动力学研究

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第三届全国药物代谢动力学青年科学家论坛暨刘昌孝人才奖颁奖大会

作者：方伟汪电雷安徽中医药大学药学院安徽中医药大学药物代谢动力学研究室

目的:建立测定大鼠血浆中海南粗榧内酯醇浓度的UPLC方法,进而研究其在大鼠体内的初步药代动力学过程。方法:以海南粗榧内酯为内标,乙腈为沉淀剂,甲醇-水(47:53,V/V),流速为0.17ml/min,检测波长为326 nm。大鼠单剂量尾静脉注射1、2、4 mg... 详细信息

目的:建立测定大鼠血浆中海南粗榧内酯醇浓度的UPLC方法,进而研究其在大鼠体内的初步药代动力学过程。方法:以海南粗榧内酯为内标,乙腈为沉淀剂,甲醇-水(47:53,V/V),流速为0.17ml/min,检测波长为326 nm。大鼠单剂量尾静脉注射1、2、4 mg·kg-1,采用该方法测定不同时间点大鼠血浆中的海南粗榧内酯醇的浓度,并对其血药浓度—时间采用DAS 2.1软件拟合,计算药动学参数。结果:定量下限为0.05mg·L-1,提取回收率均大于85%,其日内日间RSD均小于5%,血浆中海南粗榧内酯醇在0.05～10.0 mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9996)。在大鼠体内的T1/2分别为(39.82±0.92)、(40.11±0.79)、(41.61±2.07) min,AUC0-t分别为(65.77±1.08)、(130.48±1.26)和(268.75±1.24) min·mg·L-1。结论:所建立的UPLC方法操作简便、快速、专属性强,能满足海南粗榧内酯醇在大鼠体内的药代动力学研究。

关键词：海南粗榧内酯醇 UPLC 大鼠血药浓度药代动力学

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基于Notch1信号通路探讨异硫氰酸烯丙酯上调COPD大鼠肺支气管上皮MRP1表达的机制

基于Notch1信号通路探讨异硫氰酸烯丙酯上调COPD大鼠肺支气管上皮...

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第三届全国药物代谢动力学青年科学家论坛暨刘昌孝人才奖颁奖大会

作者：吴洁汪电雷安徽中医药大学药学院安徽中医药大学药物代谢动力学研究室

目的:本实验通过检测COPD模型大鼠肺组织中Notch1基因及MRP1基因的表达,探讨Notch信号通路与MRP1转运体在COPD中的相关性,以及异硫氰酸烯丙酯(Allyl isorhodanate,AITC)治疗COPD疾病的可能机制,旨在为治疗COPD寻找一种新的研究方向。方... 详细信息

目的:本实验通过检测COPD模型大鼠肺组织中Notch1基因及MRP1基因的表达,探讨Notch信号通路与MRP1转运体在COPD中的相关性,以及异硫氰酸烯丙酯(Allyl isorhodanate,AITC)治疗COPD疾病的可能机制,旨在为治疗COPD寻找一种新的研究方向。方法:采用烟熏复合气管滴入脂多糖的方法制备COPD模型大鼠,AITC组40天组后每天灌胃AITC混悬液,另设正常对照组及N-乙酰半胱氨酸(N-Acetyl-L-cysteine,NAC)阳性对照组。测定大鼠的肺功能;病理切片观察各组肺组织病理改变;免疫组化分析Notch 1和MRP1相关蛋白在肺组织中的表达位置;Western blot测定Notch 1、MRP1及其下游HES1相关蛋白的表达水平。结果:1)与正常对照组相比,COPD模型组大鼠肺功能指标均显著降低(P<0.05);HE染色结果表明COPD模型组大鼠肺气管平滑肌出现增厚,支气管的结构不完整,并伴有炎症细胞侵润,杯状细胞增多,肺泡壁变薄且断裂,甚至融合成肺大泡等现象;免疫组化结果表明Notch1及MRP1的两种蛋白均主要表达于肺支气管上皮细胞及肺泡间隙中;WB实验结果表明COPD模型组大鼠较正常对照组相比,Notch1与MRP1蛋白呈现低表达(P<0.05)。2)与COPD模型组相比,AITC高、低剂量组大鼠肺功能指标(P<0.05)及HE染色病理结果均有所好转;Notch1与MRP1蛋白的表达水平均显著上升(P<0.05)。结论:COPD大鼠肺支气管上皮Notch1的基因与蛋白表达与MRP1的表达下调,且具有正相关;异硫氰酸烯丙酯可能通过激活Notch1的表达及调控Notch1下游基因及蛋白包括MRP1的表达,进而在COPD的治疗中发挥重要作用。

关键词： AITC COPD MRP1 Notch 1

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UPLC法测定大鼠血浆中海南粗榧内酯醇及其药代动力学研究

UPLC法测定大鼠血浆中海南粗榧内酯醇及其药代动力学研究

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第三届全国药物代谢动力学青年科学家论坛

作者：方伟汪电雷安徽中医药大学药学院安徽合肥230031 安徽中医药大学药学院安徽合肥230031 安徽中医药大学药物代谢动力学研究室安徽合肥230031

目的：建立测定大鼠血浆中海南粗榧内酯醇浓度的UPLC方法,进而研究其在大鼠体内的初步药代动力学过程.方法：以海南粗榧内酯为内标,乙腈为沉淀剂,甲醇-水(47：53,V/V),流速为0.17 ml/min,检测波长为326 nm.大鼠单剂量尾静脉注射1、2、4 ... 详细信息

目的：建立测定大鼠血浆中海南粗榧内酯醇浓度的UPLC方法,进而研究其在大鼠体内的初步药代动力学过程.方法：以海南粗榧内酯为内标,乙腈为沉淀剂,甲醇-水(47：53,V/V),流速为0.17 ml/min,检测波长为326 nm.大鼠单剂量尾静脉注射1、2、4 mg·kg-1,采用该方法测定不同时间点大鼠血浆中的海南粗榧内酯醇的浓度,并对其血药浓度-时间采用DAS 2.1软件拟合,计算药动学参数.

关键词：海南粗榧内酯醇 UPLC 大鼠血药浓度药代动力学

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基于Notch1信号通路探讨异硫氰酸烯丙酯上调COPD大鼠肺支气管上皮MRP1表达的机制

基于Notch1信号通路探讨异硫氰酸烯丙酯上调COPD大鼠肺支气管上皮...

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作者：吴洁汪电雷安徽中医药大学药学院安徽合肥230031 安徽中医药大学药学院安徽合肥230031 安徽中医药大学药物代谢动力学研究室安徽合肥230031

目的：本实验通过检测COPD模型大鼠肺组织中Notch1基因及MRP1基因的表达,探讨Notch信号通路与MRP1转运体在COPD中的相关性,以及异硫氰酸烯丙酯(Allyl isorhodanate,AITC)治疗COPD疾病的可能机制,旨在为治疗COPD寻找一种新的研究方向。

关键词： AITC COPD MRP1 Notch1

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