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‘海螺’望春花内生真菌EF-WCH-51鉴定及其抑制葫芦科刺盘孢活性成分分析

微生物学通报 2023年第9期50卷 3997-4009页

作者：张义军王捷裴宁宁秦丽王士娟彭凡安徽农业大学林学与园林学院、安徽省微生物防治重点实验室安徽合肥230036

【背景】药用植物内生真菌产生的次生代谢产物具有多种抗菌活性,因而具有生防菌开发潜力。【目的】鉴定一株对葫芦科刺盘孢(Colletotrichum orbiculare)有抑菌活性的‘海螺’望春花内生真菌EF-WCH-51,并确定其主要抑菌活性成分。【方法... 详细信息

【背景】药用植物内生真菌产生的次生代谢产物具有多种抗菌活性,因而具有生防菌开发潜力。【目的】鉴定一株对葫芦科刺盘孢(Colletotrichum orbiculare)有抑菌活性的‘海螺’望春花内生真菌EF-WCH-51,并确定其主要抑菌活性成分。【方法】根据形态特征并结合分子序列鉴定EF-WCH-51菌株,利用生长速率法确定EF-WCH-51抑菌活性,并采用半制备型HPLC、HPLC-MS/MS对其活性成分进行分离鉴定。【结果】供试菌株EF-WCH-51为丝枝蜡蚧菌(Lecanicillium aphanocladii),其发酵液粗提物对葫芦科刺盘孢菌丝生长具有较强抑制作用,EC50为0.0862 mg/mL;抑菌活性组分A(0.0850 mg/mL)对葫芦科刺盘孢抑制率达到76.08%,通过查询MS、MS/MS数据库以及与相关文献对比,确定该化合物为卵孢菌素(oosporein)。【结论】本研究发现丝枝蜡蚧菌对葫芦科刺盘孢具有较好的抑菌活性,其主要抑菌活性成分为卵孢菌素,具有作为瓜类炭疽病生防菌株的潜力。

关键词： ‘海螺’望春花内生真菌葫芦科刺盘孢丝枝蜡蚧菌卵孢菌素

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锈色粒肩天牛化学感受基因鉴定与分析

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植物保护学报 2024年第6期51卷 1413-1426页

作者：周敏梁志郑永鑫顾天滋张胜男张龙娃安徽农业大学林学与园林学院安徽省林木资源培育重点实验室真菌生物技术教育部工程研究中心安徽省微生物防治重点实验室合肥230036

为鉴定锈色粒肩天牛Apriona swainsoni的化学感受基因,利用Illumina Novaseq 6000平台对其雌雄成虫触角、口器、腹部生殖节、前足跗节进行转录组测序,从中筛选获得化学感受基因并进行生物信息学和系统进化分析,同时测定其组织表达模式,... 详细信息

为鉴定锈色粒肩天牛Apriona swainsoni的化学感受基因,利用Illumina Novaseq 6000平台对其雌雄成虫触角、口器、腹部生殖节、前足跗节进行转录组测序,从中筛选获得化学感受基因并进行生物信息学和系统进化分析,同时测定其组织表达模式,进一步通过序列比对和构建进化树分析锈色粒肩天牛、同属共寄主的桑天牛Apriona germari以及其他鞘翅目昆虫化学感受基因的同源性和系统发育关系。结果表明:从锈色粒肩天牛各组织中共获得32242条unigene,从中鉴定得到14个味觉受体(gustatory receptor,GR)基因、9个离子型受体(ionotropic receptor,IR)基因和39个气味受体(odorant receptor,OR)基因;其中,AswaGR5、AswaGR7、AswaGR12、AswaGR13聚集在果糖受体家族,AswaGR4聚集在糖受体家族,AswaIR9和AswaIR8为IR共受体基因,且这3类基因均与桑天牛的化学感受基因高度同源。大部分化学感受基因在锈色粒肩天牛触角或口器中高表达,不同基因呈现出不同的组织表达特异性,如AswaGR5、AswaIR2、AswaIR7、AswaOR3、AswaOR5、AswaOR6、AswaOR8、AswaOR18、AswaOR25、AswaOR28、AswaOR36和AswaOR38基因仅于雌雄成虫触角中有表达,AswaGR1基因在雄成虫口器中显著高表达。锈色粒肩天牛与桑天牛的AswaGR1/AgerGR6、AswaIR9/AgerIR9、AswaOR13/AgerOR22和AswaOrco/AgerOR25等化学感受基因有极高的同源性,推测这些基因可能在寄主定位以及生态位分隔中发挥着重要作用。

关键词：锈色粒肩天牛化学感受基因嗅觉受体表达模式同源性分析

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锈色粒肩天牛幼虫头部感受器扫描电镜观察

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植物保护学报 2024年第3期51卷 568-577页

作者：梁志徐倩然郑永鑫张升伟顾天滋张龙娃安徽农业大学林学与园林学院安徽省林木资源培育重点实验室真菌生物技术教育部工程研究中心安徽省微生物防治重点实验室合肥230036 北京林业大学林学院北京100083

为明确锈色粒肩天牛Apriona swainsoni幼虫头部感受器的类型、数量和分布,利用冷场发射扫描电镜对锈色粒肩天牛幼虫头壳、触角和口器不同部位的超微结构进行观察,并统计分析其上各类感受器的分布位置和数量。结果显示,锈色粒肩天牛幼虫... 详细信息

为明确锈色粒肩天牛Apriona swainsoni幼虫头部感受器的类型、数量和分布,利用冷场发射扫描电镜对锈色粒肩天牛幼虫头壳、触角和口器不同部位的超微结构进行观察,并统计分析其上各类感受器的分布位置和数量。结果显示,锈色粒肩天牛幼虫头部整体宽阔扁平,头部长度平均为4.71μm,宽度平均为2.93μm。头式为下口式,咀嚼式口器,包括上唇、上颚、下唇和下颚等。幼虫头部感受器共有6类12种,包括4种(Ⅰ~Ⅳ)刺形感受器(sensilla chaetica,SCH)、1种毛形感受器(sensillum trichodeum,ST)、4种(Ⅰ~Ⅳ)锥形感受器(sensilla basiconica,SB)、1种栓锥形感受器(sensillum styloconicum,SST)、1种Bǒhm氏鬃毛(Bǒhm bristle,BB)和1种钟形感受器(sensillum campaniformium,Ca),其中,幼虫头壳和口器上感受器分布较多,头壳感受器共4类6种,为SCH-I、SCH-II、SCH-III、ST、BB和Ca;口器感受器共4类9种,为SCH-I、SCH-III、SCH-IV、ST、SB-I、SB-II、SB-III、SB-IV和SST;触角上感受器较少,仅SB-III一种。锥形感受器在锈色粒肩天牛幼虫口器上分布多而广,推测在取食和寄主选择中可能发挥着关键作用。

关键词：锈色粒肩天牛感受器幼虫头部形态特征扫描电镜

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蓝莓枝枯病病原菌鉴定、生物学特性及对杀菌剂敏感性研究

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北方园艺 2024年第5期 39-47页

作者：沈丹琦周晓琪许雪松陈名君安徽农业大学林学与园林学院安徽省微生物防治重点实验室安徽合肥230036 北京林业大学生态与自然保护学院北京100091 南陵县自然资源和规划局安徽芜湖241399

以蓝莓为试材,采用组织分离法获得蓝莓枝枯病的病原菌,进行形态学和分子生物学鉴定;并基于不同碳源、氮源、温度、pH开展病原菌的生物学特性研究,最后采用菌丝生长速率法测定了病原菌对4种常用化学杀菌剂的敏感性的研究方法,研究了该病... 详细信息

以蓝莓为试材,采用组织分离法获得蓝莓枝枯病的病原菌,进行形态学和分子生物学鉴定;并基于不同碳源、氮源、温度、pH开展病原菌的生物学特性研究,最后采用菌丝生长速率法测定了病原菌对4种常用化学杀菌剂的敏感性的研究方法,研究了该病原菌分类地位、生物学特性及敏感杀菌剂,以期为严重影响蓝莓经济价值的枝枯病的流行预测和科学防控提供参考依据。结果表明:蓝莓枝枯病致病菌为棒状新拟盘多毛孢(Neopestalotiopsis clavispora),其最适碳源为麦芽糖,最适氮源为磷酸二氢铵,最适pH为8,最适温度为25℃。抑菌敏感性测定结果显示,戊唑·咪鲜胺对病原菌的抑制效果最好。

关键词：蓝莓枝枯病棒状新拟盘多毛孢生物学特性抑菌性测定杀菌剂

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虫尸表面罗伯茨绿僵菌产孢、致病力及其相关基因的表达特征

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植物保护学报 2022年第4期49卷 1241-1251页

作者：王玉龙刘珍刘世红汪迅李心怡陆晨丽李晓娟黄勃安徽农业大学林学与园林学院安徽省微生物防治重点实验室合肥230036 安徽省林业科学研究院松材线虫病预防与控制技术国家林草局重点实验室合肥230088

为明确绿僵菌在其致死害虫表面生长发育和致病力等相关分子机制,通过显微观察大蜡螟Galleria mellonella虫尸表面罗伯茨绿僵菌Metarhizium robertsii生长和产孢特性,并测定其致病力,分别对虫尸表面和PDA培养基上罗伯茨绿僵菌的菌丝生长... 详细信息

为明确绿僵菌在其致死害虫表面生长发育和致病力等相关分子机制,通过显微观察大蜡螟Galleria mellonella虫尸表面罗伯茨绿僵菌Metarhizium robertsii生长和产孢特性,并测定其致病力,分别对虫尸表面和PDA培养基上罗伯茨绿僵菌的菌丝生长阶段和大量产孢阶段进行高通量测序,对虫尸表面罗伯茨绿僵菌产孢及致病力通路相关基因进行系统分析,并采用荧光定量PCR技术对高通量测序结果进行验证。结果表明,PDA培养基上培养5 d后,罗伯茨绿僵菌开始大量产孢,培养14 d时产孢量最高,为4.6×10^(7)个/cm^(2),大蜡螟幼虫注射罗伯茨绿僵菌4 d后,其体表出现菌丝,5.5 d后虫尸表面罗伯茨绿僵菌大量产孢,9 d后产孢量最高,为2.6×10^(8)个/cm^(2)。与PDA培养基上罗伯茨绿僵菌对大蜡螟幼虫的半致死时间(7.09 d和4.66 d)相比,体壁侵染法和显微注射法侵染的虫尸表面罗伯茨绿僵菌对大蜡螟幼虫的半致死时间(6.33 d和4.49 d)分别显著缩短和无显著变化。高通量测序结果显示,在菌丝生长阶段和大量产孢时期,虫尸表面罗伯茨绿僵菌中共有810个基因上调表达,452个基因下调表达,其中大量差异基因富集到丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)级联信号、ABC转运蛋白、类固醇生物合成及甘油磷脂代谢等通路中。在虫尸表面罗伯茨绿僵菌MAPK级联信号通路中,在菌丝生长和大量产孢阶段分别有36个和32个基因发生显著差异表达。在MAPK调控通路中,虫尸表面罗伯茨绿僵菌在菌丝生长和大量产孢阶段分别有11个和12个产孢相关基因,有11个和8个致病力相关基因发生差异表达,荧光定量PCR结果与高通量测序结果高度一致。

关键词：绿僵菌虫尸表面产孢致病力丝裂原活化蛋白激酶级联信号通路

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桃蛀螟在安徽省薄壳山核桃产区的发生规律及防控技术

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植物保护学报 2024年第4期51卷 979-980页

作者：梁志杨旭涛周溪王朝晖胡俊彭凡张龙娃安徽农业大学林学与园林学院安徽省林木资源培育重点实验室真菌生物技术教育部工程研究中心安徽省微生物防治重点实验室合肥230036 滁州市林业工作站安徽滁州239000 合肥市林业保护中心合肥230036 安徽森绿成刚生态园林科技发展有限公司合肥230036

薄壳山核桃Carya illinoinensis是特色生态经济型树种,截止2023年底全国的种植面积近10万hm2,年产量超5 000 t(https://***/c/www/lcdt/***)。安徽省是我国薄壳山核桃种植大省,种植面积达4万hm2,随着种植规模不断扩大,病虫害问题也日益... 详细信息

薄壳山核桃Carya illinoinensis是特色生态经济型树种,截止2023年底全国的种植面积近10万hm2,年产量超5 000 t(https://***/c/www/lcdt/***)。安徽省是我国薄壳山核桃种植大省,种植面积达4万hm2,随着种植规模不断扩大,病虫害问题也日益凸显。桃蛀螟Conogethespunctiferalis是一种重要的世界性农林害虫,可为害多种农作物和果树。

关键词：薄壳山核桃病虫害问题防控技术农林害虫桃蛀螟种植规模

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杉木落针上齿裂菌属一新种

杉木落针上齿裂菌属一新种

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：郑璐王士娟安徽农业大学林学与园林学院安徽省微生物防治重点实验室安徽农业大学

齿裂菌属Coccomyces是斑痣盘菌科Rhytismataceae的第二大属,目前全球有效描述齿裂菌共140种,我国报道39种。对生于杉木Cunninghamia lanceolata上的斑痣盘菌进行调查时发现齿裂菌属一新种——杉木齿裂菌Coccomyces cunninghamiae。该种... 详细信息

齿裂菌属Coccomyces是斑痣盘菌科Rhytismataceae的第二大属,目前全球有效描述齿裂菌共140种,我国报道39种。对生于杉木Cunninghamia lanceolata上的斑痣盘菌进行调查时发现齿裂菌属一新种——杉木齿裂菌Coccomyces cunninghamiae。该种生于一、二年生枯枝和落叶上,子囊果外表灰黑色至黑褐色,散生,三角形至六边形或近圆形,400–960μm,周边线黑色,唇缺;表皮内生或表皮下生。子座覆盖层黑褐色,由角状细胞组成,朝着边缘变薄并与基部层相连。子座基部层由黑褐色角状细胞和角状-圆形细胞构成。侧丝线形,顶部逐渐膨大,并纠结形成囊层被。子囊棍棒状,100–150×8–11μm。子囊孢子,无色,无隔,线形纺锤状或线形棍棒状,25–57×1.2–4μm。分生孢子器存在。该种与安徽齿裂菌Coccomyces anhuiensis和油杉齿裂菌Coccomyces keteleeriae近似,但存在一定区别,***子囊果角质层下生,子座基部层弱度发育,囊层被缺,子囊孢子线形,较细,宽1.5–2μm;***子囊果的子座覆盖层多不延至基部层,囊层被缺,子囊孢子线形,较细长,50–92×1.8–2.2μm。基于ITS、nrLSU和mtSSU构建多基因系统发育树,结果显示新种位于齿裂菌属内并形成独立的分支。

关键词：斑痣盘菌科形态学多基因系统发育

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美国白蛾触角感器的超微结构

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植物保护学报 2023年第2期50卷 507-518页

作者：刘丹邓竣丹许维康顾天滋忙定泽张龙娃安徽农业大学林学与园林学院安徽省微生物防治省重点实验室真菌生物技术教育部工程研究中心合肥230036 河北大学生命科学学院保定071002 东京农工大学生物系统应用科学府分子生物学研究室日本东京184-8588

为明确美国白蛾Hyphantria cunea成虫触角上感器的种类、形态和分布,通过扫描电镜观察美国白蛾雌、雄成虫触角上感器的超微结构。结果显示,美国白蛾雌成虫触角呈锯齿状,雄成虫触角呈双栉节状。雌、雄成虫触角上的感器类型有所不同,个别... 详细信息

为明确美国白蛾Hyphantria cunea成虫触角上感器的种类、形态和分布,通过扫描电镜观察美国白蛾雌、雄成虫触角上感器的超微结构。结果显示,美国白蛾雌成虫触角呈锯齿状,雄成虫触角呈双栉节状。雌、雄成虫触角上的感器类型有所不同,个别感器的长度和基部直径差异显著。美国白蛾成虫触角上分布9类共16种感器,即4种毛形感器Ⅰ~Ⅳ、2种刺形感器Ⅰ~Ⅱ、1种鳞形感器、2种锥形感器Ⅰ~Ⅱ、2种腔锥形感器Ⅰ~Ⅱ、1种栓锥形感器、1种舌形感器、2种Bǒhm氏鬃毛Ⅰ~Ⅱ以及1种新的感器——单孔栓感器。毛形感器数量最多,且雄成虫触角上的毛形感器数量多于雌成虫触角上的。单孔栓感器数量较少,雌、雄成虫触角上仅发现2~3个,在雌成虫第1~3鞭亚节腹面锯齿端部各分布有1个。毛形感器Ⅳ——超长毛形感器及舌形感器仅分布在雄成虫触角上。锥形感器Ⅰ~Ⅱ、腔锥形感器Ⅰ和Bǒhm氏鬃毛Ⅰ~Ⅱ的长度在雌、雄成虫间均差异不显著,而其余感器的长度在雌、雄成虫间均差异显著;雄成虫触角上毛形感器Ⅰ~Ⅲ、腔锥形感器Ⅱ和刺形感器Ⅰ~Ⅱ的长度均显著大于雌成虫触角上的,雌成虫触角上鳞形感器和栓锥形感器的长度显著大于雄成虫触角上的。表明美国白蛾雄成虫触角上的感器种类和数量较多,推测雄成虫感受寄主植物或性信息素的能力较强。

关键词：美国白蛾触角感器形态扫描电镜

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不同寄主植物对美国白蛾肠道细菌群落的影响

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植物保护学报 2022年第4期49卷 1201-1209页

作者：邓竣丹王海超许维康徐乐天唐燕平张龙娃安徽农业大学林学与园林学院安徽省微生物防治省重点实验室真菌生物技术教育部工程研究中心合肥230036 湖北大学生命科学学院省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室武汉430062

为明确美国白蛾Hyphantria cunea在取食不同寄主植物后其肠道细菌群落的变化情况,采用高通量测序技术分析其肠道细菌16S rDNA的V3~V4区域,分析肠道细菌的多样性、物种组成和菌群结构差异,并对其生物学功能进行预测。结果显示,美国白蛾4... 详细信息

为明确美国白蛾Hyphantria cunea在取食不同寄主植物后其肠道细菌群落的变化情况,采用高通量测序技术分析其肠道细菌16S rDNA的V3~V4区域,分析肠道细菌的多样性、物种组成和菌群结构差异,并对其生物学功能进行预测。结果显示,美国白蛾4龄幼虫在取食不同寄主植物后肠道细菌Shannon多样性指数出现明显差异,由高到低依次为取食寄主法国梧桐Platanus orientalis、柿Diospyros kaki、胡桃Juglans regia、杨树Populus×canadensis和杏Armeniaca vulgaris的群体。美国白蛾肠道优势菌门主要为变形菌门和厚壁菌门,而属分类水平上的物种在不同处理之间存在较大差异,在取食法国梧桐和柿树的美国白蛾肠道中Burkholderia-Caballeronia-Paraburkholderia的相对丰度较高,分别为63.16%和34.50%;取食杏树和杨树的美国白蛾肠道优势菌属分别是肠球菌属Enterococcus和肠杆菌属Enterobacter,相对丰度分别为87.58%和37.93%。不同寄主也导致美国白蛾肠道细菌群的组成结构产生分型;美国白蛾肠道细菌基因功能主要表现为代谢功能。表明取食不同寄主植物可以影响美国白蛾肠道细菌的多样性和菌群结构,肠道细菌可能参与寄主的营养代谢。

关键词：美国白蛾寄主植物肠道细菌多样性高通量测序

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球孢白僵菌对松墨天牛的致病力及其与花绒寄甲的相容性

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植物保护学报 2021年第3期48卷 602-609页

作者：邓竣丹庄文欣刘玉军宋丽文张龙娃安徽农业大学林学与园林学院安徽省微生物防治省重点实验室真菌生物技术教育部工程研究中心合肥230036 安徽省科学技术研究院合肥230088 吉林省林业科学研究院长春130033

为探明昆虫病原真菌球孢白僵菌Beauveria bassiana与天敌昆虫花绒寄甲Dastarcus helophoroides的相容性,观察4株球孢白僵菌菌株的生长性状、产孢量以及孢子萌发率,并选用Bb3275和Bb202菌株测定其对松墨天牛Monochamus alternatus的致病... 详细信息

为探明昆虫病原真菌球孢白僵菌Beauveria bassiana与天敌昆虫花绒寄甲Dastarcus helophoroides的相容性,观察4株球孢白僵菌菌株的生长性状、产孢量以及孢子萌发率,并选用Bb3275和Bb202菌株测定其对松墨天牛Monochamus alternatus的致病力以及对花绒寄甲的毒力;同时在模拟环境条件下,分别用Bb3275和Bb202菌株的孢子悬浮液先侵染松墨天牛幼虫,再按1∶1比例将花绒寄甲与受侵染的松墨天牛置于同一环境下饲养,观察花绒寄甲的死亡率。结果显示,孢子悬浮液浓度为1×106孢子/mL至1×108孢子/mL时,Bb3275菌株和Bb202菌株对松墨天牛幼虫和成虫的致病力与对照组相比均有显著差异;经4种浓度Bb3275和Bb202菌株侵染花绒寄甲幼虫和成虫15 d后,仅在高浓度1×108孢子/mL时表现出轻微致死作用,但花绒寄甲的存活率均高于85.00%;模拟条件下,松墨天牛幼虫校正死亡率均在80.00%以上,而同环境下花绒寄甲幼虫和成虫均表现出良好的活力,且侵染率为0。表明球孢白僵菌和花绒寄甲之间具有很好的相容性,可以同时应用于松墨天牛的生物防治。

关键词：松墨天牛球孢白僵菌花绒寄甲致病力相容性

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