检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2022年第2期57卷 173-177页

作者：刘莉顾亚男李名聪黄依璇张胜权安徽医科大学科研实验中心基础医学院生物化学与分子生物学教研室第一临床医学院合肥230032

目的探究单独应用羊毛固醇合成酶抑制剂(RO)或联合胆固醇(CH)刺激皮肤角质形成细胞(KCs)后对其分化及凋亡的影响。方法RO单独或联合CH于KCs共培养不同时间后,加入Ca^(2+)(1.8 mmol/L)处理1d,Western blot法分析KCs的分化相关蛋白角皮蛋... 详细信息

目的探究单独应用羊毛固醇合成酶抑制剂(RO)或联合胆固醇(CH)刺激皮肤角质形成细胞(KCs)后对其分化及凋亡的影响。方法RO单独或联合CH于KCs共培养不同时间后,加入Ca^(2+)(1.8 mmol/L)处理1d,Western blot法分析KCs的分化相关蛋白角皮蛋白(INV)和兜甲蛋白的表达;RO单独或联合CH与KCs共培养不同时间后,流式细胞术检测KCs细胞凋亡变化和Western blot法验证凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达。结果RO下调KCs,Ca^(2+)诱导的分化标志蛋白INV的表达,对Loricrin表达抑制作用较弱,而CH没有表现出对RO的拮抗效应;RO诱导KCs细胞凋亡并呈时间依赖性,CH能够拮抗RO对KCs的诱导凋亡作用;RO单独应用时细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达均受到抑制,联合CH应用能部分拮抗RO对Bcl-2表达抑制作用,对Bax的表达抑制无显著影响;RO能时间依赖性降低Bcl-2/Bax的比值,CH能部分减弱RO对Bcl-2/Bax比值的影响。结论RO可能通过下调Loricrin、Bcl-2的表达,进而抑制KCs分化和诱导KCs细胞凋亡。

关键词：毛固醇合成酶抑制剂胆固醇角质形成细胞细胞分化细胞凋亡

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人皮肤表皮干细胞外泌体的分离培养与鉴定

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安徽医科大学学报 2023年第2期58卷 224-229页

作者：李碧优马洁张启宇章华兵朱云平安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 军事医学研究院生命组学研究所蛋白质组学国家重点实验室北京102206 北京协和医院皮肤科北京100730

目的通过优化技术流程,探究人皮肤表皮干细胞(EPSCs)体外分离培养及表皮干细胞外泌体(EPSCs-Exo)分离纯化的方法。方法首先通过优化人源EPSCs的分离酶,运用改良的无血清培养液,添加10种因子刺激EPSCs生长,促进其分泌EPSCs-Exo,同时维持E... 详细信息

目的通过优化技术流程,探究人皮肤表皮干细胞(EPSCs)体外分离培养及表皮干细胞外泌体(EPSCs-Exo)分离纯化的方法。方法首先通过优化人源EPSCs的分离酶,运用改良的无血清培养液,添加10种因子刺激EPSCs生长,促进其分泌EPSCs-Exo,同时维持EPSCs干性和增殖性,延缓EPSCs的分化和成熟。进一步优化差速离心的条件,高效高纯度提取人源的EPSCs-Exo。对人皮肤组织进行免疫荧光染色溯源EPSCs;对分离的EPSCs进行Western blot和免疫荧光染色检测其表面多个标志物;对EPSCs-Exo从形态、粒径大小、多个胞内和膜上标志物进行鉴定。结果人皮肤组织分层表达表皮细胞的标志物,EPSCs高表达整合素α6(integrin-α6)、整合素β1(integrin-β1)、P63蛋白(P63)、细胞角蛋白19(CK19)等标志物,EPSCs上清液超速离心后的透射电镜显示茶托状结构,粒径大小检测直径介于30~150 nm,蛋白印迹显示Tsg101、CD9、CD63(溶酶体相关膜蛋白3)呈阳性,Calnexin、GAPDH呈阴性。结论该研究成功在体外分离培养了人源EPSCs并获得人源EPSCs-Exo。

关键词：外泌体人表皮干细胞超速离心再生医学

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细胞周期检测点激酶与肺癌耐药研究进展

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中国肺癌杂志 2021年第4期24卷 265-270页

作者：柯芷茵梁爱玲刘勇军广东省医学分子诊断重点实验室东莞523808 广东医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室东莞523808 广东医科大学医学技术学院临床生物化学教研室东莞523808

肺癌是最常见的诊断癌症和癌症死亡的主要原因。虽然化疗、放疗、靶向治疗等治疗手段取得了重大进展,但获得性耐药的出现阻碍了临床治疗的疗效。研究表明肿瘤是一类细胞周期调控机制破坏的疾病,其中细胞周期检测点激酶(checkpoint kinas... 详细信息

肺癌是最常见的诊断癌症和癌症死亡的主要原因。虽然化疗、放疗、靶向治疗等治疗手段取得了重大进展,但获得性耐药的出现阻碍了临床治疗的疗效。研究表明肿瘤是一类细胞周期调控机制破坏的疾病,其中细胞周期检测点激酶(checkpoint kinase,Chk)发挥着核心的作用,而Chk1和Chk2是检测点中非常重要的蛋白激酶。近年来发现,调控Chk1和Chk2对肺癌的临床治疗和耐药机制有十分重要的意义。本文就细胞周期检测点激酶与肺癌耐药机制进行综述,阐述有效的肺癌治疗靶点和方法。

关键词：细胞周期检测点激酶肺肿瘤耐药

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基于转录组测序筛选不同性别C57BL/6J小鼠差异基因及通路

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安徽医科大学学报 2022年第5期57卷 742-747页

作者：李昱昊李艳玲尹雪莉孙晓梅张军李名聪刘莉张素梅张胜权安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室合肥230032 合肥市第二人民医院病理科合肥230012 安徽医科大学科研实验中心合肥230032

目的通过转录组测序筛选雌性与雄性C57BL/6J小鼠差异基因及通路,为进一步探讨小鼠雌雄间行为学差异的分子机制奠定基础。方法C57BL/6J品系的8周龄雌性与雄性小鼠,完整分离小鼠海马体组织,提取总RNA后逆转录构建cDNA文库,并在华大基因平... 详细信息

目的通过转录组测序筛选雌性与雄性C57BL/6J小鼠差异基因及通路,为进一步探讨小鼠雌雄间行为学差异的分子机制奠定基础。方法C57BL/6J品系的8周龄雌性与雄性小鼠,完整分离小鼠海马体组织,提取总RNA后逆转录构建cDNA文库,并在华大基因平台上生成单端为50个碱基的读数进行转录组测序。测序结束后基于GO和KEGG数据库,结合R语言中的phyper函数对数据进行筛选、校正和富集分析,计算P值;然后对P值进行矫正得到Q值并基于超几何测试方法对带注释的不同基因表达情况进行了分析,筛选出不同性别小鼠海马体中的差异基因及通路。测序结束后,使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证在雌雄小鼠海马中筛选出的差异基因并比较差异基因在不同信号通路上的表达情况。结果通过雌雄差异比较,筛选出325个差异基因,其中上调基因233个,下调基因92个,这些差异基因功能主要富集于长时程增强(LTP)、钙离子信号通路、尼古丁成瘾等过程;雌雄差异基因相互作用网络共有362个连接点和1703个相互作用边,筛选出的10个核心基因分别为:赖氨酸脱甲基酶5D(Kdm5d)、细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdkl5)、细胞输出介质(Cle1)、多巴胺受体6a3(Slc6a3)、盒式转录因子(Fox)、前体mRNA加工因子4B(Prpf4b)、甘氨酸受体4(Glur4)、钙离子受体2(Camk2)、DNA和RNA结合蛋白家族(Son)、5-羟色胺受体5b(Htr5b)。RT-qPCR验证结果与测序结果一致。结论从雌雄小鼠海马体中筛选出差异基因为研究不同性别小鼠行为学差异提供实验思路并为后续小鼠行为学研究做出针对性实验设计。

关键词：转录组测序行为学差异 C57BL/6J小鼠雌雄差异

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脯氨酰-4-羟化酶亚基α-2通过肌醇需要酶1α介导的UPR信号通路调控肝癌细胞凋亡并预测早期肝细胞癌的不良预后

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第2期39卷 269-276页

作者：朱睿安李朝英姜颖安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心(北京)军事科学院军事医学研究院生命组学研究所北京102206

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)严重危害着人类健康。尽管大量研究表明,在HCC早期进行手术切除可提高患者的生存率,但其高复发率仍然阻碍着治疗进程。本研究分析蛋白质组学数据发现。脯氨酰-4-羟化酶亚基α-2(prolyl 4-hydroxy... 详细信息

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)严重危害着人类健康。尽管大量研究表明,在HCC早期进行手术切除可提高患者的生存率,但其高复发率仍然阻碍着治疗进程。本研究分析蛋白质组学数据发现。脯氨酰-4-羟化酶亚基α-2(prolyl 4-hydroxylase subunit α-2,P4HA2)在早期HCC组织中高表达,Kaplan-Meier曲线、Cox比例风险回归模型(cox regression model)证明,P4HA2高表达的早期肝癌患者预后较差,且P4HA2可作为患者预后的独立预测因子。通过敲低或过表达实验发现,P4HA2明显促进肿瘤细胞的增殖、迁移等恶性生物学行为。敲低P4HA2激活了由肌醇需要酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)介导的促凋亡非折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)。以上结果表明,P4HA2可能通过调节内质网稳态来调控肝癌细胞凋亡,P4HA2有望成为HCC潜在的治疗靶点。

关键词：肝细胞癌脯氨酰-4-羟化酶亚基α-2 预后细胞凋亡

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人G蛋白偶联受体107表达载体构建及细胞定位的研究

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安徽医科大学学报 2021年第7期56卷 1012-1015页

作者：冯阳贺凡涂珍珍臧丹丹倪鸣岳周海胜安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学科研实验中心合肥230032

目的克隆人G蛋白偶联受体107(GPR107)基因以构建真核表达载体,并探讨GPR107在真核细胞中的亚细胞定位。方法通过分子克隆技术克隆人GPR107基因的cDNA;利用真核细胞表达载体pCMV-Tag2B构建重组载体pCMV-Tag2B-GPR107,瞬时转染至293T细胞,... 详细信息

目的克隆人G蛋白偶联受体107(GPR107)基因以构建真核表达载体,并探讨GPR107在真核细胞中的亚细胞定位。方法通过分子克隆技术克隆人GPR107基因的cDNA;利用真核细胞表达载体pCMV-Tag2B构建重组载体pCMV-Tag2B-GPR107,瞬时转染至293T细胞,Western blot检测GPR107的表达变化;采用免疫荧光标记,激光共聚焦显微镜观察GPR107在细胞中的定位。结果经过基因测序证实获得人GPR107的cDNA;成功构建真核表达载体pCMV-Tag2B-GPR107;Western blot结果显示,与未转染组比较,转染组GPR107表达量明显上调。激光共聚焦显微镜观察显示GPR107主要表达于细胞质。结论GPR107在293T细胞中过表达,并定位于细胞质。

关键词： GPR107 表达转染亚细胞定位

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丙酮酸脱氢酶激酶4与非小细胞肺癌耐药研究进展

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实用医学杂志 2022年第22期38卷 2880-2884页

作者：王雪纯梁爱玲刘勇军广东省医学分子诊断重点实验室广东东莞523808 广东医科大学医学技术学院广东东莞523808 广东医科大学生物化学与分子生物学教研室广东东莞523808

三羧酸循环到有氧糖酵解的代谢转换是肿瘤细胞代谢的重要特征之一,丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)在多数癌细胞中的表达明显增加,作为促进这种代谢转换的关键分子,PDK4通过调节丙酮酸脱氢酶活性,在多种肿瘤细胞的增殖、侵袭与转移、凋亡和耐... 详细信息

三羧酸循环到有氧糖酵解的代谢转换是肿瘤细胞代谢的重要特征之一,丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)在多数癌细胞中的表达明显增加,作为促进这种代谢转换的关键分子,PDK4通过调节丙酮酸脱氢酶活性,在多种肿瘤细胞的增殖、侵袭与转移、凋亡和耐药中起到关键作用。越来越多的研究发现PDK4与肺癌发展和耐药联系密切。本文通过对PDK4在恶性肿瘤中的研究进行综述和展望,以期对肿瘤尤其是非小细胞肺癌的预防、治疗和逆转耐药提供一定的思路。

关键词：丙酮酸脱氢酶激酶4 肿瘤耐药非小细胞肺癌

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1例弓形虫IgM抗体假阳性案例分析

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标记免疫分析与临床 2025年第3期32卷 656-660页

作者：李虎杨春秋王楠楠朱进进余莉太和县人民医院检验科安徽阜阳236600 安徽医科大学基础医学院医学生物化学与分子生物学实验室安徽合肥230032 动物源性传染病安徽省重点实验室安徽省高校人畜共患病重点实验室安徽医科大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室安徽合肥230032

目的通过病原学检测并结合患者临床症状以及影像学检查排除弓形虫感染,通过实验设计以及查阅文献分析患者血清弓形虫IgM抗体假阳性原因,并总结归纳处理流程,为临床提供全面的诊疗思路。方法通过外周血涂片镜检、弓形虫核酸检测以及影像... 详细信息

目的通过病原学检测并结合患者临床症状以及影像学检查排除弓形虫感染,通过实验设计以及查阅文献分析患者血清弓形虫IgM抗体假阳性原因,并总结归纳处理流程,为临床提供全面的诊疗思路。方法通过外周血涂片镜检、弓形虫核酸检测以及影像学脑部磁共振成像(MRI)检测排除弓形虫感染;通过不同检测平台复检,增加类风湿因子(RF)、嗜异性抗体、冷凝集素的检测,以及动态监测弓形虫IgM抗体变化趋势分析假阳原因。结果患者血清中升高的弓形虫IgM抗体为假阳性,其血清中存在的EBV-IgM抗体和检测试剂发生交叉反应,干扰了检测结果。结论发现弓形虫IgM抗体异常升高时,应参考相应处理流程,增加相关检测,分析原因,避免误诊。

关键词：弓形虫病假阳性 IgM抗体传染性单核细胞增多症

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LSS基因功能缺失对雄性小鼠生殖的影响

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安徽医科大学学报 2022年第2期57卷 208-212页

作者：孙晓梅李名聪李涛魏翔葛若木张军李昱昊周青汪渊张胜权张素梅安徽医科大学分子生物学实验室生物化学与分子生物学教研室安徽省省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室合肥230032 合肥市第二人民医院病理科合肥230011 安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230032 合肥市第二人民医院高压氧科合肥230011

目的研究羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能缺失对小鼠生殖的影响。方法取8周龄的LSS^(+/+)(WT)型和LSS^(+/-)(KO)型鼠雌雄共30只鼠,分别按♂WT×♀WT、♂WT×♀KO、♂KO×♀WT、♂KO×♀KO分组进行1:1合笼,时长4个月,统计... 详细信息

目的研究羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能缺失对小鼠生殖的影响。方法取8周龄的LSS^(+/+)(WT)型和LSS^(+/-)(KO)型鼠雌雄共30只鼠,分别按♂WT×♀WT、♂WT×♀KO、♂KO×♀WT、♂KO×♀KO分组进行1:1合笼,时长4个月,统计每胎生仔个数及平均产仔周期;取WT型和KO型小鼠的血清,进行性激素检测;用TUNEL染色观察睾丸中生精细胞的凋亡情况;用Western blot检测睾丸组织中Tubulin、LSS和凋亡相关蛋白(GPX4/Bax/Bcl-2)的表达。结果配繁结果显示♂WT×♀WT与♂KO×♀KO相比,每胎平均生仔个数差异有统计学意义,其余组别均无差异,产仔周期4组的差异均无统计学意义;WT型和KO型小鼠性激素检测结果相比,差异也无统计学意义;TUNEL染色结果可以观察到,基因敲除鼠的睾丸组织中生精细胞凋亡增多;Western blot结果中,与WT型相比,KO型小鼠的凋亡相关蛋白(GPX4/Bax/Bcl-2)表达量均无差异。结论LSS基因功能缺失会导致小鼠生精细胞凋亡增加,其可能影响小鼠的生育能力。

关键词：羊毛固醇合成酶基因敲除小鼠凋亡性激素生殖

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miR-150与恶性肿瘤关系的研究进展

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医学综述 2023年第22期29卷 4876-4881页

作者：陈燃王艳张全颖谢朝阳李祥勇广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室广东省教育厅医学生物活性分子研究重点实验室生物化学与分子生物学教研室广东湛江524023 广东医科大学医学技术学院广东东莞523808

基因表达的改变是导致包括癌症在内的人类多种疾病发病的主要分子机制。微RNA(miRNA/miR)是一类小分子非编码RNA,其发挥着抑癌基因或原癌基因的作用,目前是肿瘤研究的热点。其中,miR-150在多种肿瘤中异常表达,在不同类型的肿瘤中发挥不... 详细信息

基因表达的改变是导致包括癌症在内的人类多种疾病发病的主要分子机制。微RNA(miRNA/miR)是一类小分子非编码RNA,其发挥着抑癌基因或原癌基因的作用,目前是肿瘤研究的热点。其中,miR-150在多种肿瘤中异常表达,在不同类型的肿瘤中发挥不同的作用,其异常表达与肿瘤的发生发展密切相关,可通过作用于多个靶点调控肿瘤的生物学过程,影响多种肿瘤对化疗药物的敏感性、癌症诊断和患者预后。随着研究的深入,miR-150很有可能成为特定恶性肿瘤精准诊断及治疗的靶点。

关键词：恶性肿瘤基因 miR-150

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