检索结果-内蒙古大学图书馆

中国地方病学杂志 2011年第4期30卷 376-378页

作者：王朝兰汤冬生姚湧汪学龙王业梅安徽中医学院寄生虫学教研室合肥230038 安徽医科大学病原生物学教研室

目的探讨重组弓形虫膜表面抗原SAG1基因的表达产物-原核表达蛋白（rSAG1）用于弓形虫病的免疫诊断价值.方法用异丙基-B-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导大肠埃希菌重组质粒pET28a-SAG1（pET28a-SAG1/BL21）表达,纯化重组pET28a-SAG1/B... 详细信息

目的探讨重组弓形虫膜表面抗原SAG1基因的表达产物-原核表达蛋白（rSAG1）用于弓形虫病的免疫诊断价值.方法用异丙基-B-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导大肠埃希菌重组质粒pET28a-SAG1（pET28a-SAG1/BL21）表达,纯化重组pET28a-SAG1/BL21弓形虫膜表面抗原SAG1基因表达产物;用弓形虫缓殖子感染的鼠血清、正常鼠血清和10例弓形虫患者血清为一抗,基因表达产物rSAG1用免疫印迹法进行鉴定,比较rSAG1在弓形虫病免疫诊断中的价值.结果纯化重组弓形虫膜表面抗原SAG1基因后获得了相对分子质量约38.5×103的表达产物rSAG1;表面抗原SAG1可被弓形虫缓殖子感染的鼠血清所识别;10例弓形虫患者血清在免疫印迹诊断中,有4例出现了弓形虫膜表面抗原SAG1基因表达产物rSAG1.结论 rSAG1具备一定的弓形虫病的免疫诊断价值.

关键词：弓形虫膜表面抗原重组蛋白免疫诊断

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白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34k2-1诱导的特异性细胞免疫应答对BMDM细胞中DENV-2复制的影响

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中国热带医学 2024年第8期24卷 907-913页

作者：覃燕春李莹胡欢周璐黄贞植吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳561113 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州贵阳561113

目的体外探究白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34k2-1诱导的小鼠脾淋巴细胞特异性免疫应答对2型登革病毒(dengue virus type 2,DENV-2)感染小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)的影响。方法采用CCK-8法分析rAlb-34k2-1蛋白对免疫/未免疫小鼠脾细胞的特异性增殖反应;制备荷载蚊唾液蛋白rAlb-34k2-1、rAalb_CTL1蛋白(蚊唾液C型凝集素蛋白)的抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC),与免疫/未免疫小鼠脾淋巴细胞进行混合淋巴细胞培养,取细胞培养上清处理DENV-2感染的BMDM细胞,实时荧光定量逆转录PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)检测DENV-2的核酸变化,分析rAlb-34k2-1蛋白诱导的特异性T淋巴细胞应答对BMDM内DENV-2复制的影响。将免疫/未免疫小鼠脾淋巴细胞与rAlb-34k2-1蛋白预处理的感染BMDM进行共培养,通过qRT-PCR检测培养48、72 h后DENV-2 E基因的表达,分析免疫/未免疫小鼠淋巴细胞对预处理的BMDM中DENV-2复制的影响。结果小鼠脾细胞体外特异性增殖实验显示,与未免疫组比较,rAlb-34k2-1蛋白能导致免疫小鼠脾细胞特异性增殖,刺激指数(stimulation index,SI)>2,P<0.0001;荷载rAalb_CTL1蛋白的混合淋巴细胞培养上清未影响BMDM细胞中DENV-2的复制,荷载rAlb-34k2-1蛋白的混合淋巴细胞培养上清可抑制BMDM中DENV-2复制(2^(-ΔΔCT) <0.5,P<0.05);与免疫/未免疫小鼠脾淋巴细胞混合培养后,rAlb-34k2-1预处理的BMDM中DENV-2复制无差异。结论rAlb-34k2-1蛋白诱导的小鼠T淋巴细胞应答上清可抑制BMDM细胞中DENV-2的复制,为探究蚊唾液蛋白诱导免疫效应在蚊媒病毒致病中的作用提供前期实验基础。

关键词： rAlb-34k2-1蛋白 2型登革病毒细胞免疫应答

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弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响

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安徽医科大学学报 2019年第10期54卷 1506-1510页

作者：金郁计永胜姚湧汪学龙安徽医科大学基础医学院人体寄生虫教研室

目的探讨弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白对妊娠小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响。方法原代培养小鼠子宫基质细胞,用雌二醇、孕酮和cAMP体外诱导蜕膜化的同时加入ROP16重组慢病毒,72 h后qRT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素(PRL)mRNA的表达,流式细胞术检... 详细信息

目的探讨弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白对妊娠小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响。方法原代培养小鼠子宫基质细胞,用雌二醇、孕酮和cAMP体外诱导蜕膜化的同时加入ROP16重组慢病毒,72 h后qRT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素(PRL)mRNA的表达,流式细胞术检测蜕膜细胞凋亡率的变化,并用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果提取的小鼠子宫基质细胞纯度为95%以上,在体外诱导蜕膜化后,PRL mRNA的表达随时间延长而显著升高(P<0.05),在诱导的蜕膜细胞中过表达ROP16Ⅰ/Ⅲ,相比于对照组,蜕膜细胞的凋亡率降低(P<0.01),凋亡蛋白Bax表达降低,Bcl-2蛋白表达上调。结论弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白会抑制蜕膜细胞的凋亡,可能会影响蜕膜细胞增殖与凋亡的平衡,从而影响胚胎的植入。

关键词：弓形虫 ROP16蛋白蜕膜化凋亡

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不同培养条件对旋毛虫肌幼虫产生排泄分泌抗原的影响

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首都医科大学学报 2010年第5期31卷 591-595页

作者：崔世娟杨静顾园魏骏飞王少华杨雅平诸欣平首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室

目的对比在常规1640培养基中和在模拟宿主生理环境的培养液的刺激下旋毛虫肌幼虫排泄分泌(excretory-secretory,ES)抗原产量及成分的变化,同时观察在感染初期ES抗原的不同组分在小鼠体内诱导产生主要抗体的时间,以寻找获得更高产量的肌... 详细信息

目的对比在常规1640培养基中和在模拟宿主生理环境的培养液的刺激下旋毛虫肌幼虫排泄分泌(excretory-secretory,ES)抗原产量及成分的变化,同时观察在感染初期ES抗原的不同组分在小鼠体内诱导产生主要抗体的时间,以寻找获得更高产量的肌幼虫ES抗原的制备方法。方法在虫数、培养液体积、培养时间、温度、ES抗原体积浓缩倍数等条件相同的情况下,按培养液中小鼠血清超滤液(简称血超)、还原型谷胱甘肽(简称谷胱甘肽)和胆汁粉的不同组合分组,分别培养肌幼虫并收集ES抗原,再以相同上样体积作SDS-PAGE电泳,Odyssey双色红外激光成像系统扫描凝胶并测定条带信号强度进行定量比较。用Western blotting对比观察不同组ES抗原的活性及成分变化。以旋毛虫人工感染小鼠不同时期收集的血清(感染后15、18、20、21、22、24、27、30、40、50 d)作为一抗进行Western blotting,观察ES抗原主要成分在小鼠体内产生抗体的先后顺序。结果S DS-PAGE电泳凝胶定量分析结果显示,血超+谷胱甘肽组、胆汁组和胆汁+血超组的抗原产量明显高于1640培养基组,其中胆汁+血超组的抗原产量最高。Western blotting结果显示,各组抗原均能被感染血清(感染后40 d)识别产生多个条带,其中血超+谷胱甘肽组的条带中相对分子质量约为87 000的条带荧光信号明显强于其他组;感染初期ES抗原不同组分在小鼠体内产生抗体的先后顺序为:45 000、53 000、41 000,其抗体可被检测到的最早时间分别为感染后15、21、24 d。结论培养液中添加胆汁粉可大大提高旋毛虫肌幼虫ES抗原产量,胆汁粉与血超共用后ES抗原的增产效果更佳;感染初期肌幼虫ES抗原的不同组分诱导小鼠产生抗体的时间不同。此研究将为改进ES抗原制备方法,寻找旋毛虫病早期诊断抗原提供实验依据。

关键词：旋毛虫排泄分泌抗原制备方法 Western blotting

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融合免疫佐剂Lipo多肽与包膜蛋白EDⅢ区的登革病毒四价疫苗的构建及免疫效应研究

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中国人兽共患病学报 2016年第2期32卷 119-123页

作者：任守凤曹国梅谭峰梁韶晖刘文权潘长旺温州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室温州325035

目的构建编码免疫佐剂Lipo多肽与登革病毒1-4型包膜蛋白EDIII区的重组甲病毒载体,并在小鼠体内研究其免疫效应,为研制新型的登革病毒四价疫苗奠定基础。方法先通过GS linker将编码免疫佐剂Lipo多肽的基因序列与编码登革病毒1-4型包膜蛋... 详细信息

目的构建编码免疫佐剂Lipo多肽与登革病毒1-4型包膜蛋白EDIII区的重组甲病毒载体,并在小鼠体内研究其免疫效应,为研制新型的登革病毒四价疫苗奠定基础。方法先通过GS linker将编码免疫佐剂Lipo多肽的基因序列与编码登革病毒1-4型包膜蛋白EDIII区的基因序列进行串联获得LipoEDIII;然后将LipoEDIII基因插入甲病毒载体DREP的多克隆位点,构建重组甲病毒载体DREP-LipoEDIII;将DREP-LipoEDIII转染293细胞,Western blot检测融合蛋白的表达;随后将DREP-LipoEDIII免疫ICR小鼠,不加任何佐剂,再加强免疫2次后,通过ELISA检测血清中的抗体效价和细胞因子的分泌情况来评价其免疫效应。结果成功构建了含有"融合免疫佐剂Lipo多肽与包膜蛋白EDIII区"的重组甲病毒质粒DREP-LipoEDIII。DREP-LipoEDIII免疫小鼠后可以诱导产生特异性抗体,抗体效价为1∶160。抗原刺激小鼠脾淋巴细胞可以产生IFN-r、IL-4、IL-10细胞因子,实验组的浓度明显高于对照组。结论在不需要加入任何外源佐剂的情况下,本研究构建的融合免疫佐剂Lipo多肽的登革四价疫苗能够诱导小鼠产生特异性的体液和细胞免疫应答,且以细胞免疫应答为主,为今后新型登革病毒四价疫苗的研究奠定了基础。

关键词：登革病毒包膜蛋白甲病毒载体四价疫苗

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埃及伊蚊yellow基因家族的鉴别和表达谱分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第1期34卷 1-8页

作者：颜凤吕清巧程金芝牟小会翟慧杨迅商正玲吴家红贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学实验室贵阳550025

目的筛选并鉴定埃及伊蚊（Aedes aegypti）全基因组中的yellow基因，分析其基因结构、基因进化以及在不同发育时期和不同组织的表达谱。方法运用模式昆虫黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）Dm-yellow基因（GenBank登录号为AAF45497）... 详细信息

目的筛选并鉴定埃及伊蚊（Aedes aegypti）全基因组中的yellow基因，分析其基因结构、基因进化以及在不同发育时期和不同组织的表达谱。方法运用模式昆虫黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）Dm-yellow基因（GenBank登录号为AAF45497）王浆主蛋白（MRJP）结构域氨基酸序列，在埃及伊蚊全基因组数据库中筛选并鉴定埃及伊蚊yell0叫基因家族．采用ExPASy在线相关工具包分析其理化性质和结构域，运用SignalP4．1预测信号肽．结合使用DNAstar、MAGA6．0和GeneDoc软件包进行同源性比对、保守性分析和系统进化树构建。提取埃及伊蚊总RNA，合成cDNA，利用实时荧光定量PCR（qRT—PCR）法对埃及伊蚊不同发育时期（卵、I～Ⅳ龄幼虫、蛹以及未吸血雌蚊和雄蚊）和未吸血雌蚊不同组织（唾液腺、中肠、脂肪体和卵巢）的yellow基因表达谱进行相对定量分析。结果从埃及伊蚊全基因组中筛选出12条yellow基因（Aa-一yellow、Aa一yellow—b、Aa一yellow—c、Aa一yellow—d、Aa-yellow—e、Aa一yellow-f2、Aa—yellow-fb、Aa一yellow-fc、Aa—yellow—g、Aa—yellow—g2、Aa—yellow—h和Aa一fellow—x）。生物信息学分析结果显示，12条yellow基因均具有MRJP结构域和信号肽序列。同源性比对结果显示．埃及伊蚊yellow基因家族成员间同源性较低，为15％～49％：但其保守域间同源性较高，可达60％。系统进化树分析结果显示．12个yellow蛋白分为5个亚家族，其中11个在黑腹果蝇中均有直系同源蛋白存在。Ⅱ***结果显示，An—yellow-d和Aa-yelloW一Ⅳ在雄蚊中高表达（P〈0．01或P〈O．05），相对表达量分别为0．0189和0．0235；Aa一yelloW一尼在雌蚊和唾液腺中特异高表达（P〈0．01），相对表达量分别为0．0248和0．0349；Aa一yellow-f2在Ⅱ龄幼虫中特异高表达（P〈0．01），相对表达量为0．0934；Aa一yellow、Aa—yellow—e和Aa—yellow一加在Ⅲ龄幼虫中特异高表达（P〈0．01）．相对表达量分别为0．5621、0．0044和0．0084：Aa—yellow、Aa—yellow—e、Aa一yellow-f2、Aa—yelloW—fb、Aa一yellow-h和Aa一yellow一x等6条基因在卵巢中高表达（P〈0.01或P〈0．05），相对表达量分别为0．5694、0．0270、0．0065、0．0010、0．0848和0．0151；除Aa一yyellow一c（0．0040）和Aa一yellow一z（0．0074）外，其余基因几乎不在中肠表达。结论在埃及伊蚊基因组中获得的12条yelloW基因同源性较低．

关键词：埃及伊蚊 yellow基因家族 qRT—PCR 表达谱

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PCR技术与病原染色法检测大鼠卡氏肺孢子虫的研究

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中国医科大学学报 1999年第1期28卷 27-28页

作者：安春丽李素云姜莉田边将信中国医科大学基础医学院寄生虫学教研室日本庆应大学热带医学寄生虫教室

卡氏肺孢子虫肺炎（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉｐｎｅｕｍｏｎｉａ，ＰＣＰ）是免疫机能低下病人常见的并发症和死亡原因，由于ＡＩＤＳ病人的增多，抗癌化疗和器官移植等医疗手段的应用，ＰＣＰ病人日趋增多。本文应用ＰＣ... 详细信息

卡氏肺孢子虫肺炎（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉｐｎｅｕｍｏｎｉａ，ＰＣＰ）是免疫机能低下病人常见的并发症和死亡原因，由于ＡＩＤＳ病人的增多，抗癌化疗和器官移植等医疗手段的应用，ＰＣＰ病人日趋增多。本文应用ＰＣＲ技术检测大鼠肺内病原体ＤＮＡ，并...

关键词：卡氏肺孢子虫病原染色法聚合酶链反应

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黑水虻饲养料中孳生粉螨群落生态调查

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中国病原生物学杂志 2021年第5期16卷 564-566,569页

作者：姚润蒋峰国果湛孝东李朝品皖南医学院医学寄生虫学教研室安徽芜湖241002 贵州医科大学基础医学院

目的了解黑水虻饲养料中孳生粉螨种类及其多样性,为养殖黑水虻的害螨控制提供参考。方法采集黑水虻饲养池中的饲养料,用60目/吋的分样筛过筛后采用直接镜检法分离其中的螨类,并制作玻片标本对其进行鉴定与分类。结果共采集黑水虻饲养料1... 详细信息

目的了解黑水虻饲养料中孳生粉螨种类及其多样性,为养殖黑水虻的害螨控制提供参考。方法采集黑水虻饲养池中的饲养料,用60目/吋的分样筛过筛后采用直接镜检法分离其中的螨类,并制作玻片标本对其进行鉴定与分类。结果共采集黑水虻饲养料19.02g,检出螨类15276只,隶属4科5属5种。其中粉螨4种,即腐食酪螨(Tyrophagus putrescentiae)1361只、伯氏嗜木螨(Caloglyphus berlesei)12359只、拱殖嗜渣螨(Chortoglyphus arcuatus)229只和粉尘螨(Dermatophagoides farinae)524只。肉食螨一种为马六甲肉食螨(Cheyletus alaccensis)共803只。平均孳生密度为803.15只/g。结论黑水虻饲养料中螨类污染较为严重,主要螨种为伯氏嗜木螨等粉螨,应提高预防控制意识并采取有效的防制措施,抑制黑水虻养殖池中粉螨的孳生。

关键词：粉螨黑水虻生态学多样性

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旋毛虫感染不同时期对小鼠胶原诱导性关节炎影响的差异性观察？

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寄生虫与医学昆虫学报 2016年第1期23卷 1-8页

作者：王笑欢程喻力袁慧慧黄京京诸欣平首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室北京100069

观察旋毛虫感染的不同阶段对小鼠胶原诱导性关节炎（ Collagen？Ⅱ induced arthritis， CIA）的影响并初步探讨其机制。建立雄性DBA／1小鼠胶原（CⅡ）诱导性关节炎（CIA）模型，以旋毛虫肌幼虫（400条／只）分别于造模前14 d、造模当... 详细信息

观察旋毛虫感染的不同阶段对小鼠胶原诱导性关节炎（ Collagen？Ⅱ induced arthritis， CIA）的影响并初步探讨其机制。建立雄性DBA／1小鼠胶原（CⅡ）诱导性关节炎（CIA）模型，以旋毛虫肌幼虫（400条／只）分别于造模前14 d、造模当天感染小鼠。关节评分评价足爪关节病变的发生及严重程度。于胶原首次诱导后第50 d处死小鼠，取足爪关节切片观察组织病理学变化； ELISA检测血清抗CⅡ特异性IgG、IgG1、 IgG2a水平；分离脾淋巴细胞以ConA刺激培养， ELISA检测培养上清中IFN-γ、 IL-4、 IL-10、 IL-17和TNF-α细胞因子水平。结果显示，与单纯CIA造模组相比，预先14 d感染旋毛虫的CIA小鼠关节炎发病率、关节评分及组织学评分均显著降低，血清IgG1水平则显著升高，脾细胞培养上清Th2型细胞因子IL？4和调节性细胞因子IL？10水平显著增加。而造模当天感染旋毛虫的CIA小鼠关节评分和组织学评分显著升高，血清IgG2a水平显著升高，细胞培养上清Th1型细胞因子IFN-γ和促炎细胞因子IL-17、 TNF-α水平显著升高，且差异具有统计学意义。该结果表明，旋毛虫感染早期可加重胶原诱导性小鼠关节炎，而感染后期则对关节炎有一定抑制作用，提示旋毛虫对小鼠胶原诱导性关节炎的影响作用因感染时限的不同而存在差异，且该差异可能与不同感染时期诱导的Th反应类型的变化有关。

关键词：旋毛虫类风湿关节炎 Ⅱ型胶原免疫调节

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日本血吸虫尾蚴感染小鼠CD8α^-CD11c^+型树突状细胞对哮喘的抑制作用

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天津医药 2012年第7期40卷 695-697,I0003页

作者：路平朱云娟刘俊燕吴增强安桂珍纪伟华任继玲刘佩梅天津医科大学基础医学院寄生虫学教研室 300070

目的:研究日本血吸虫尾蚴感染鼠CD8α-CD11c+型树突状细胞(DC)在抑制过敏性哮喘中的作用。方法:用磁珠分选方法纯化日本血吸虫尾蚴感染鼠及正常鼠DC亚群CD8α-CD11c+细胞。将20只BALB/c小鼠随机均分为4组,A组为过继转移日本血吸虫尾蚴... 详细信息

目的:研究日本血吸虫尾蚴感染鼠CD8α-CD11c+型树突状细胞(DC)在抑制过敏性哮喘中的作用。方法:用磁珠分选方法纯化日本血吸虫尾蚴感染鼠及正常鼠DC亚群CD8α-CD11c+细胞。将20只BALB/c小鼠随机均分为4组,A组为过继转移日本血吸虫尾蚴感染鼠CD8α-CD11c+型DC并诱发过敏性哮喘组,B组为过继转移正常鼠CD8α-CD11c+型DC并诱发过敏性哮喘组,C组为单纯过敏性哮喘组,D组为生理盐水对照组。A、B组小鼠经尾静脉过继转移5×105个DC,1h后A、B、C3组均开始诱发哮喘。4周后处死小鼠,取小鼠肺组织进行病理学检查。结果:肺部病理学结果显示A组小鼠肺组织炎症明显减轻,支气管管壁基本光滑,支气管内无黏液分泌。B组、C组肺组织炎症反应严重,支气管管壁增厚,管内存在大量黏液。D组小鼠肺组织无炎症反应。病理评分结果A组高于D组,低于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),B组和C组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:日本血吸虫尾蚴感染鼠CD8α-CD11c+型DC可明显抑制过敏性哮喘的发生。

关键词：血吸虫病日本哮喘树突细胞过继转移小鼠近交BALB C疾病模型动物

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