检索结果-内蒙古大学图书馆

中国热带医学 2025年

作者：周璐黄贞植牟安阳秦菲吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein， MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus ， DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊每周叮咬1次，连续4周免疫IfnaR... 详细信息

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein， MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus ， DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊每周叮咬1次，连续4周免疫IfnaR-/-鼠，并观察其饱血情况，末次叮咬后3周获取免疫血清。Western blot检测鼠血清中抗MSP抗体。间接ELISA法检测抗MSP IgG的效价及其亚类。使用Nanoject Ⅱ自动纳升注射器（Drummond）将107TCID50/mL的DENV2显微注射入蚊胸部，采用实时荧光定量逆转录PCR（ real-time quantitative reverse transcription PCR， qRT-PCR）检测不同时间点蚊唾液腺中DENV-E基因水平。使用DENV-2感染的雌蚊叮咬小鼠，qRT-PCR检测免疫/未免疫组蚊体内病毒残留量。蚊叮咬感染5 d后，qRT-PCR检测免疫/未免疫鼠不同组织中DENV-E基因的核酸变化；病毒空斑实验测定鼠脑组织中活病毒含量。结果 Western blot显示鼠血清中含有针对多种MSP的特异性IgG。抗MSP IgG效价可达1:800，以IgG1为主，且可维持21 d。胸腔注射10 d后蚊唾液腺中DENV-E基因含量达复制平台期。叮咬完成后qRT-PCR结果显示蚊唾液腺中的余留病毒量，推测两组小鼠初始感染量相近。免疫组鼠的脾脏，肝脏，脑组织中的病毒核酸含量明显低于未免疫组（P<0.0001），且脑组织中活病毒量低（P<0.0013）。结论蚊唾液蛋白诱发的适应性免疫具有抑制DENV-2感染的效应，为探究白纹伊蚊唾液蛋白具有抗病毒的免疫原组分提供实验基础。

关键词：白纹伊蚊唾液蛋白登革病毒抗蚊唾液蛋白抗体免疫应答

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胆管梗阻合并华支睾吸虫感染患者临床特征分析

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第3期34卷 311-314页

作者：方文娟李响姜旭段珊珊丁健左丽娇张雪丽张晓丽韩甦上海健康医学院微生物与免疫教研室上海201318 哈尔滨医科大学基础医学院寄生虫学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的分析胆管梗阻合并华支睾吸虫感染患者临床特征,为该病临床诊疗提供参考。方法收集2012年10月—2019年9月在哈尔滨医科大学附属第二医院就诊的45例胆管梗阻合并华支睾吸虫感染患者,并随机选取同期就诊的45例单纯胆管梗阻患者作为对... 详细信息

目的分析胆管梗阻合并华支睾吸虫感染患者临床特征,为该病临床诊疗提供参考。方法收集2012年10月—2019年9月在哈尔滨医科大学附属第二医院就诊的45例胆管梗阻合并华支睾吸虫感染患者,并随机选取同期就诊的45例单纯胆管梗阻患者作为对照。采用单因素分析华支睾吸虫感染相关流行病学特征、临床表现、实验室检查结果及影像学表现,并将有统计学意义的单因素作为自变量进行多因素logistic回归分析。结果与单纯胆管梗阻患者相比,胆管梗阻合并华支睾吸虫感染患者中男性占比更高(91.11%vs.46.67%;χ^(2)=20.737,P<0.01)、农村病例占比更高(62.22%vs.22.22%;χ^(2)=14.757,P<0.01),主要临床症状为黄疸(45例,占100%)和腹痛(40例,占88.89%)。多因素logistic回归分析显示,男性[比值比(OR)=10.717,95%可信区间(CI):(2.571,44.662)]和有饮酒史[OR=4.474,95%CI:(1.019,19.642)]是胆管梗阻合并华支睾吸虫感染危险因素;居住地为城市[OR=0.128,95%CI:(0.038,0.435)]为保护因素。实验室检查发现,胆管梗阻合并华支睾吸虫感染患者较单纯胆管梗阻患者总胆红素和直接胆红素水平降低,而间接胆红素水平升高,差异均有统计学意义(Z=-2.566、-3.454和-3.821,P均<0.05)。影像学检查发现,胆管梗阻合并华支睾吸虫感染患者胆管管壁增厚、肝内胆管扩张。结论胆管梗阻合并华支睾吸虫感染患者临床表现具有特征性,在临床工作中可结合患者流行病学特征、临床症状、实验室及影像学检查结果等进行综合鉴别诊断。

关键词：华支睾吸虫胆管梗阻合并感染临床特征

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白纹伊蚊唾液蛋白促进巨噬细胞免疫应答及2型登革病毒的复制

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中国热带医学 2025年第2期25卷 149-155页

作者：旷晓元肖秋秋吴文诗牟小会吴家红贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州贵阳550025 贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室贵州贵阳550025 安顺市人民医院生殖医学科贵州安顺561000

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞(Raw264.7)的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒(Dengue virus type 2,DENV-2)复制的影响。方法将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入大肠埃希菌(***)BL21(DE3)后,按实验室前期建立的表达纯化条件获取唾液蛋白并通过SDS-PAGE及Western Blot(WB)方法鉴定;以CCK8法分析rAlb-34kDa-1蛋白对Raw264.7细胞的毒性。将0.02、0.20和2.0μg/mL浓度rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞6、12和24 h,采用实时荧光定量逆转录PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR, qRTPCR)检测细胞中白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、趋化因子配体2(chemokine ligand 2, CCL2)、干扰素-β(interferon-β, IFN-β)、干扰素刺激基因15(interferon stimulated gene 15, ISG15)的表达,运用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测细胞培养上清IL-6和TNF-α的分泌;免疫荧光法观察rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞后p65进入细胞核的情况,分析rAlb-34kDa-1蛋白是否通过NF-κB信号通路实现对Raw264.7细胞的免疫调控;按分组(DENV-2作用组、唾液蛋白+DENV-2共孵育组)加不同的处理因素作用6、12和24 h后收集细胞,利用qRT-PCR检测细胞内DENV-2的mRNA表达量及运用流式细胞术(FCM)检测不同处理因素作用24 h细胞内J2(dsRNA)的荧光强度。结果 SDS-PAGE及WB结果显示成功获得rAlb-34kDa-1蛋白且经CCK8法分析该蛋白对Raw264.7细胞无毒性;0.2μg/mL和2.0μg/mL的rAlb-34kDa-1均能诱导Raw264.7细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL2、IFN-β、ISG15的表达;rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞1 h后显著增强Raw264.7细胞核内的p65的荧光强度;rAlb-34kDa-1与DENV-2作用于Raw264.7细胞12 h时,2μg/mL的rAlb-34kDa-1显著增强细胞中DENV-2的mRNA表达量。作用24 h时,0.02、0.20和2μg/mL的rAlb-34kDa-1均能增强Raw264.7细胞中DENV-2的mRNA表达量,2μg/mL的rAlb-34kDa-1与DENV-2共孵育于Raw264.7细胞24h后细胞内J2的荧光信号显著增强。结论 rAlb-34kDa-1蛋白能调节小鼠Raw264.7细胞免疫应答,促进DENV-2在Raw264.7细胞中复制。

关键词：白纹伊蚊 rAlb-34kDa-1蛋白 2型登革病毒免疫调控

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基于样本来源探索病原生物学实验整合课程新模式

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南方医科大学学报 2021年

作者：高剑迪丽达尔·库德热提单骄宇新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室新疆医科大学基础医学院医学微生物学教研室

基于病原生物学整合课程中人体寄生虫学和医学微生物学生物学分类的绝对差异,理论教学短期内往往难以达到融合的目的,但基于传染病的样本采集与检验,病原生物学实验课程可能通过样本来源重新划分模块,并能够实现两门课程的融合。本文尝... 详细信息

基于病原生物学整合课程中人体寄生虫学和医学微生物学生物学分类的绝对差异,理论教学短期内往往难以达到融合的目的,但基于传染病的样本采集与检验,病原生物学实验课程可能通过样本来源重新划分模块,并能够实现两门课程的融合。本文尝试探讨基于样本来源探索病原生物学实验课程整合建设的立论依据和应用意义,并延伸思考虚拟实验室等多媒体教学手段对该种实验课程模式的应用。

关键词：病原生物学实验课程整合建设样本来源虚拟实验室网络课程

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白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1促进Raw264.7细胞免疫应答及DENV-2的复制

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中国热带医学 2025年

作者：旷晓元肖秋秋吴文诗牟小会吴家红贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室贵州省安顺市人民医院生殖医学科

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞（Raw264.7）的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒（Denguevirustype2，DENV-2）复制的影响。方法将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入到大肠埃希菌（***）BL21（DE3）... 详细信息

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞（Raw264.7）的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒（Denguevirustype2，DENV-2）复制的影响。方法将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入到大肠埃希菌（***）BL21（DE3）后，按实验室前期建立的表达纯化条件获取唾液蛋白并通过SDS-PAGE及WesternBlot（WB）方法鉴定；以CCK8法分析rAlb-34kDa-1蛋白对Raw264.7细胞的毒性。将0.02 、0.20和2.0μg/mL浓度rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞6、12和24 h，采用实时荧光定量逆转录PCR（Real-timequantitativereversetranscriptionPCR，qRT-PCR）检测细胞中白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α(Tumornecrosisfactor-α，TNF-α)、趋化因子配体2（Chemokineligand2，CCL2）、干扰素-β（Interferon-β，IFN-β）、干扰素刺激基因15（InterferonStimulatedGene15，ISG15）的表达，运用酶联免疫吸附实验（Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）检测细胞培养上清IL-6和TNF-α的分泌；免疫荧光法观察rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞后p65进入细胞核的情况，分析rAlb-34kDa-1蛋白是否通过NF-κB信号通路实现对Raw264.7细胞的免疫调控；按分组（DENV-2作用组、唾液蛋白+DENV-2共孵育组）加不同的处理因素作用6、12和24 h后收集细胞，利用qRT-PCR检测细胞内DENV-2的mRNA表达量及运用流式细胞术（FCM）检测不同处理因素作用24h细胞内J2（dsRNA）的荧光强度。结果 SDS-PAGE及WB结果显示成功获得rAlb-34kDa-1蛋白且经CCK8法分析该蛋白对Raw264.7细胞无毒性；0.2μg/mL和2.0μg/mL的rAlb-34kDa-1均能诱导Raw264.7细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL2、IFN-β、ISG15的表达；rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞1 h后显著增强Raw264.7细胞核内的p65的荧光强度；rAlb-34kDa-1与DENV-2作用于Raw264.7细胞12 h时，2 μg/mL的rAlb-34kDa-1显著增强细胞中DENV-2的mRNA表达量。作用24 h时，0.02μg/mL、0.2μg/mL、2μg/mL的rAlb-34kDa-1均能增强Raw264.7细胞中DENV-2的mRNA表达量，2μg/mL的rAlb-34kDa-1与DENV-2共孵育于Raw264.7细胞24h后细胞内J2的荧光信号显著增强；结论 rAlb-34kDa-1蛋白能调节小鼠Raw264.7细胞免疫应答，促进DENV-2在Raw264.7细胞中复制。

关键词：白纹伊蚊 rAlb-34kDa-1蛋白 2型登革病毒免疫调控

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弓形虫MIC1、MIC6和ROP18混合蛋白对小鼠的免疫保护作用

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中国动物传染病学报 2024年第3期32卷 34-41页

作者：李虎朱进进李婧旸韩成建余莉病原生物学安徽省重点实验室安徽省高校人畜共患病重点实验室安徽医科大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室合肥230032 安徽医科大学合肥第三临床学院合肥市第三人民医院检验科合肥230032

为评估弓形虫微线体蛋白MIC1、MIC6和棒状体蛋白ROP18组成的重组疫苗对BALB/c小鼠的免疫保护作用,我们将重组表达的MIC1、MIC6和ROP18三种蛋白进行不同的组合,并联合弗氏佐剂通过皮下注射的方式免疫小鼠。用ELISA技术检测免疫后小鼠血... 详细信息

为评估弓形虫微线体蛋白MIC1、MIC6和棒状体蛋白ROP18组成的重组疫苗对BALB/c小鼠的免疫保护作用,我们将重组表达的MIC1、MIC6和ROP18三种蛋白进行不同的组合,并联合弗氏佐剂通过皮下注射的方式免疫小鼠。用ELISA技术检测免疫后小鼠血清特异性抗体,以及免疫蛋白刺激后脾细胞培养上清中各细胞因子的水平,通过脾淋巴细胞增殖实验检测脾淋巴细胞增殖情况。最后一次免疫后,用弓形虫WH3强毒株攻击,观察并记录小鼠的存活情况。结果表明,与对照PBS组相比,蛋白免疫组产生高滴度的IgG和IgG亚型(IgG1和IgG2a)抗体,滴度可高达1∶128000。细胞因子IL-4、IL-10和IFN-γ表达水平不同程度地升高,并且重组蛋白能够诱导淋巴细胞特异性增殖。免疫组小鼠的生存时间较对照组有所延长,其中MIC6-ROP18组延长时间最长(P<0.01)。MIC1、MIC6和ROP18组成的重组疫苗能诱导小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫应答,其中MIC6-ROP18蛋白组合的免疫保护效果更为明显,但仍需进一步改进。本研究为弓形虫疫苗的研发提供了思路。

关键词：弓形虫疫苗重组蛋白 MIC1 MIC6 ROP18

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IL-1β诱导甲状腺细胞UGRP1表达及其与Fas/FasL介导凋亡的相关性

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安徽医科大学学报 2022年第7期57卷 1073-1077页

作者：陈翠萍李阿楠任翠平沈际佳左春林安徽医科大学第一附属医院内分泌科合肥230022 安徽医科大学基础医学院微生物与寄生虫学教研室合肥230032

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)诱导甲状腺细胞子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)的表达及其与Fas/FasL介导细胞凋亡的相关性。方法设立对照组、IL-1β组、IL-1β+抗FasL抗体组,体外培养大鼠甲状腺细胞(FRTL-5细胞),采用Real-time PCR法检测... 详细信息

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)诱导甲状腺细胞子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)的表达及其与Fas/FasL介导细胞凋亡的相关性。方法设立对照组、IL-1β组、IL-1β+抗FasL抗体组,体外培养大鼠甲状腺细胞(FRTL-5细胞),采用Real-time PCR法检测各组细胞UGRP1及Fas mRNA表达水平;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果与对照组比较,IL-1β组、IL-1β+抗FasL抗体组UGRP1及Fas mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,IL-1β组甲状腺细胞早期凋亡率升高(7.49%±1.91%vs 28.46%±3.17%),差异有统计学意义(P<0.001),与IL-1β组比较,IL-1β+抗FasL抗体组甲状腺细胞早期凋亡率降低(28.46%±3.17%vs 19.20%±1.75%),差异有统计学意义(P<0.05);与IL-1β组比较,IL-1β+抗FasL抗体组UGRP1 mRNA(2.22±0.31 vs 2.66±0.28)及Fas mRNA(2.75±0.18 vs 3.03±0.16)表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-1β诱导甲状腺细胞UGRP1与Fas高表达以及细胞凋亡,UGRP1高表达与Fas/FasL介导的细胞凋亡不相关。

关键词：白细胞介素-1β 子宫球蛋白相关蛋白1 Fas/FasL通路凋亡自身免疫性甲状腺病

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金刚烷胺抗人呼吸道合胞病毒感染的体内外研究

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中国抗生素杂志 2025年

作者：陈芳张勇沈胡艳张平平林思宇侯长周张淋牟荣罗语思张科贵州医科大学基础医学院贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室/病毒研究所/现代病原生物学特色重点实验室/人体寄生虫学教研室贵州中医药大学药学院贵州医科大学附属医院急诊ICU 贵州医科大学附属医院六盘水医院急诊科

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HE... 详细信息

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HEp-2细胞上清，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验和免疫荧光实验评估金刚烷胺的体外抗病毒活性。将Balb/c小鼠分为Mock组、GZ08-18攻毒组、GZ08-18攻毒加10 mg/kg金刚烷胺治疗组、GZ08-18攻毒加20 mg/kg金刚烷胺治疗组和GZ08-18攻毒加50 mg/kg利巴韦林治疗组。通过小鼠体重变化、存活情况、肺指数、肺泡灌洗液病毒滴度、肺切片免疫荧光、肺组织病理损伤和炎症因子变化等评估金刚烷胺的体内抗病毒活性。结果体外实验qRT-PCR和免疫荧光结果显示不同浓度金刚烷胺处理后，病毒滴度与病毒融合蛋白表达均显著下降，且具量效依赖性。体内实验结果示，与GZ08-18攻毒组相比，金刚烷胺治疗后小鼠体重下降减缓，存活率显著提高，肺指数和病毒滴度在20 mg/kg金刚烷胺治疗组显著降低，肺组织切片病毒融合蛋白免疫荧光强度明显降低，相关炎症因子表达水平显著下调。肺组织病理切片的H&E染色结果示金刚烷胺明显抑制小鼠肺组织损伤。结论金刚烷胺在体内外均可显著抑制RSV感染。

关键词：人呼吸道合胞病毒金刚烷胺抗病毒离子通道

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白纹伊蚊唾液蛋白诱导的免疫应答对小鼠体内2型登革病毒感染的影响

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中国热带医学 2025年第5期25卷 588-593页

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein,MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus,DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊叮咬IfnaR-/-鼠，每周1次，连续4... 详细信息

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein,MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus,DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊叮咬IfnaR-/-鼠，每周1次，连续4周进行主动免疫，并观察其饱血情况，末次叮咬后3周获取免疫血清。Western blot检测鼠血清中抗MSP抗体。间接ELISA法检测抗MSP IgG的效价及其亚类。使用NanojectⅡ自动纳升注射器（Drummond）将10～7TCID50/mL的DENV2显微注射入蚊胸部，采用实时荧光定量逆转录PCR（real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR）检测不同时间点蚊唾液腺中DENV-E基因水平。使用DENV-2感染的雌蚊叮咬小鼠，qRT-PCR检测免疫/未免疫组蚊体内病毒残留量。蚊叮咬感染5 d后，qRT-PCR检测免疫/未免疫鼠不同组织中DENV-E基因的核酸变化；病毒空斑实验测定鼠脑组织中活病毒含量。结果 Western blot显示鼠血清中含有针对多种MSP的特异性IgG。抗MSP IgG效价可达1∶800，以IgG1为主，且可维持21 d。胸腔注射10 d后蚊唾液腺中DENV-E基因含量达复制平台期。叮咬完成后qRT-PCR结果显示蚊唾液腺中的余留病毒量，推测2组小鼠初始感染量相近。免疫组鼠的脾脏，肝脏，脑组织中的病毒核酸含量明显低于未免疫组（P<0.001），且脑组织中活病毒量低（P<0.001）。结论蚊唾液蛋白诱发的适应性免疫具有抑制DENV-2感染的效应，为探究白纹伊蚊唾液蛋白具有抗病毒的免疫原组分提供实验基础。

关键词：白纹伊蚊唾液蛋白登革病毒抗蚊唾液蛋白抗体免疫应答

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一株人肠源性高效尿酸降解菌的分离、鉴定及降尿酸条件优化

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现代生物医学进展 2023年第21期23卷 4013-4019,4006页

作者：梁美婷杨珊珊贺怡玛依娜·卡哈尔陈邬锦李瑞孙玉萍新疆第二医学院基础医学部病理学教研室新疆克拉玛依834000 新疆医科大学第五附属医院检验科新疆乌鲁木齐830000 新疆第二医学院基础医学部细胞生物学与遗传学教研室新疆克拉玛依834000 新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830000 新疆医科大学基础医学院微生物教研室新疆乌鲁木齐830000 新疆医科大学基础医学院形态中心新疆乌鲁木齐830000 新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室新疆乌鲁木齐830000 新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830000

目的:肠道作为人体的重要消化器官,其内定植的微生物在尿酸合成和代谢过程中发挥着重要作用,本研究利用含尿酸靶向培养基筛选正常人群肠道内具有降尿酸功能的细菌并鉴定。方法:依据尿酸的摩尔质量制备含不同浓度尿酸的BHI培养基,液体培... 详细信息

目的:肠道作为人体的重要消化器官,其内定植的微生物在尿酸合成和代谢过程中发挥着重要作用,本研究利用含尿酸靶向培养基筛选正常人群肠道内具有降尿酸功能的细菌并鉴定。方法:依据尿酸的摩尔质量制备含不同浓度尿酸的BHI培养基,液体培养基扩增并驯化肠道粪便微生物,固体培养基分离和纯化具有尿酸降解功能的细菌。挑取固体培养基上形态一致的单个菌落进行革兰氏染色和镜检,筛选出已纯化菌株,在需氧和厌氧培养条件下测定尿酸降解率,选取降解率≥50%以上的菌株为高效尿酸降解菌的候选菌株,再测定不同温度和pH值条件下的尿酸降解率,进行降尿酸条件优化。利用16S r DNA序列测定法对尿酸降解菌进行鉴定,药敏实验测定该菌对抗生素的敏感性。结果:正常人群粪便微生物中分离获得一株高效尿酸降解菌B5C,第5天需氧条件下的尿酸降解率均>50%,与初始尿酸浓度相比具有统计学意义(P<0.05)。优化降尿酸条件后,在37℃、pH7.0时,降解率可达88.7%,经鉴定为粪肠球菌,对常见的抗生素如阿莫西林、氨苄西林和青霉素G等具有较高的敏感性。结论:本研究利用含不同尿酸浓度的靶向培养基驯化、分离和鉴定出一株人肠源性细菌,在需氧条件下也具有较高的尿酸降解率,可为今后临床降尿酸微生物制剂的开发和利用提供新的菌种资源。

关键词：肠道微生物尿酸降解菌尿酸降解率

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