检索结果-内蒙古大学图书馆

SLC2A9基因rs13137074位点双荧光素酶报告系统的构建及其对基因活性的影响

国际检验医学杂志 2022年第13期43卷 1658-1660页

作者：陈邬锦玛依娜·卡哈尔田婷婷李瑞梁美婷贺怡崔月娜刘业洲白冰孙玉萍新疆医科大学基础医学院形态中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院微生物教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆第二医学院新疆克拉玛依834000

目的构建该实验室定点突变联合双荧光素酶报告系统,并通过该系统了解rs13137074基因位点突变对葡萄糖易化转运蛋白-9(SLC2A9)基因转录活性的影响。方法采用定点突变法对rs13137074基因位点进行点突变,并通过双酶切的方式连接构建双荧光... 详细信息

目的构建该实验室定点突变联合双荧光素酶报告系统,并通过该系统了解rs13137074基因位点突变对葡萄糖易化转运蛋白-9(SLC2A9)基因转录活性的影响。方法采用定点突变法对rs13137074基因位点进行点突变,并通过双酶切的方式连接构建双荧光素酶报告系统质粒。随后通过细胞转染及荧光素酶检测等方法确定突变位点对SLC2A9基因转录活性的影响程度。结果rs13137074基因位点突变成功;质粒转染过程中Lipofectamine 3000终水平为1.5μL/mL,转染时间为48 h时效果最佳;rs13137074位点发生突变时可导致SLC2A9基因转录活性下降23.60%。结论人群血尿酸水平可能受SLC2A9基因调控区rs13137074位点单核苷酸多态性的影响。

关键词：葡萄糖易化转运蛋白-9基因 rs13137074位点双荧光素酶报告系统载体构建

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白细胞介素-1β诱导甲状腺细胞凋亡机制的研究

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安徽医科大学学报 2020年第9期55卷 1385-1388页

作者：李阿楠张晓序任翠平沈际佳左春林安徽医科大学第一附属医院内分泌科合肥230022 安徽医科大学基础医学院微生物与寄生虫学教研室合肥230032

目的探讨在桥本甲状腺炎(HT)中白细胞介素-1β(IL-1β)诱导甲状腺细胞凋亡及其可能的作用机制。方法①不同浓度、不同时间IL-1β刺激大鼠甲状腺细胞系(FRTL-5细胞),采用实时荧光定量PCR方法检测FRTL-5细胞自杀因子(Fas)mRNA的表达。②... 详细信息

目的探讨在桥本甲状腺炎(HT)中白细胞介素-1β(IL-1β)诱导甲状腺细胞凋亡及其可能的作用机制。方法①不同浓度、不同时间IL-1β刺激大鼠甲状腺细胞系(FRTL-5细胞),采用实时荧光定量PCR方法检测FRTL-5细胞自杀因子(Fas)mRNA的表达。②设立对照组、IL-1β组、IL-1β+caspase-8抑制剂(Z-IETD-FMK)组,采用流式细胞术检测各组的甲状腺细胞凋亡率。结果①定量PCR结果显示IL-1β与FRTL-5细胞Fas mRNA表达水平存在剂量-时间依赖关系,差异有统计学意义(P<0.05);②流式细胞术结果显示,与对照组比较,IL-1β作用后,甲状腺细胞的凋亡率增加(P<0.05);联合加入Z-IETD-FMK后,可抑制IL-1β诱导甲状腺细胞凋亡率的增加(P<0.05)。结论IL-1β可能通过Fas和caspase-8途径导致甲状腺细胞的凋亡。

关键词：桥本甲状腺炎凋亡白细胞介素-1β FRTL-5细胞自杀相关因子

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家蝇抗真菌衍生肽Mt6-21DLeu抗白色念珠菌活性及其机制研究

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中国病原生物学杂志 2020年第7期15卷 761-767页

作者：花璇王涛毕言伟陶裕凯孔德龙汤仁仙吴建伟江苏省免疫与代谢重点实验室江苏徐州221004 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州贵阳550025

目的设计家蝇抗真菌肽MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu,探讨其抗白色念珠菌(Candida albicans,Ca)活性及作用机制。方法通过氨基酸替换法设计MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu;采用微量液体稀释法测定Mt6-21DLeu对Ca的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(M... 详细信息

目的设计家蝇抗真菌肽MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu,探讨其抗白色念珠菌(Candida albicans,Ca)活性及作用机制。方法通过氨基酸替换法设计MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu;采用微量液体稀释法测定Mt6-21DLeu对Ca的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC)以及不同环境中Mt6-21DLeu对Ca抑菌活性的变化;通过时间-杀菌曲线反映Mt6-21DLeu对Ca的杀菌动力学;通过结晶紫染色测定Mt6-21DLeu对Ca不同阶段生物被膜的清除作用;采用多功能酶标仪检测荧光探针DPH的相对荧光密度;荧光显微镜观察Mt6-21DLeu的细胞膜通透性;采用流式细胞仪检测Mt6-21DLeu影响Ca活性氧ROS生成的影响。结果与MAF-1A相比,Mt6-21DLeu抑制Ca生长的效果提高近5倍,其MIC和MFC分别为0.128 mg/ml和0.256 mg/ml。在盐离子环境中,Mt6-21DLeu活性几乎不受影响,胰酶环境对Mt6-21DLeu有所抑制但远小于对MAF-1A活性的干扰。时间-杀菌曲线结果显示在MIC和2 MIC浓度下,Mt6-21DLeu于9 h后逐渐抑制Ca的生长;4 MIC浓度时Mt6-21DLeu的杀菌能力增强。Mt6-21DLeu在4、24、48 h时均能部分清除Ca已形成的生物被膜,清除效果与Mt6-21DLeu的浓度有关;4 MIC浓度的Mt6-21DLeu能显著增加Ca细胞膜的流动性(P<0.01)及通透性,进而引起Ca菌体内ROS的积累。结论衍生肽Mt6-21DLeu能高效、持久、稳定地抑杀Ca,其抗菌作用可能通过增强细胞膜通透性、促进胞内ROS积累的多靶点模式实现。因此,可将Mt6-21DLeu作为治疗Ca感染的候选药物分子。

关键词：家蝇抗菌肽衍生肽白色念珠菌抑菌活性活性氧

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白纹伊蚊rAlb-34k2蛋白诱导小鼠皮肤补体固有成分及CRIg的变化

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中国病原生物学杂志 2020年第5期15卷 551-555,579页

作者：金芮田炎珅朱亚妮代薇露卢涛徐昊朱俐兰朱家洪吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵州医科大学微生物与生化药学工程中心

目的探讨白纹伊蚊唾液特异性34k2重组蛋白(rAlb-34k2)刺激(小鼠腹腔巨噬细胞)RAW264.7及C57BL/6小鼠后补体相关成分mRNA的变化。方法分别用不同浓度rAlb-34k2蛋白刺激RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠足垫,采集样本,Trizol提取RNA,逆转录为cDN... 详细信息

目的探讨白纹伊蚊唾液特异性34k2重组蛋白(rAlb-34k2)刺激(小鼠腹腔巨噬细胞)RAW264.7及C57BL/6小鼠后补体相关成分mRNA的变化。方法分别用不同浓度rAlb-34k2蛋白刺激RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠足垫,采集样本,Trizol提取RNA,逆转录为cDNA后经实时荧光定量PCR方法检测刺激后不同时间各组标本中补体C3、C1q、CfB、CRIg的mRNA变化。结果rAlb-34k2诱导CfB、C3、C1q的mRNA表达上调,且皮肤组织上调幅度高于RAW264.7细胞,其中以CfB mRNA的上调幅度及持续更为显著,在诱导24h时各组(5μg、20μg)2-△△CT值分别是23.90±8.38、8.50±1.64(P<0.05);但刺激12-24h时高剂量组与低剂量组比较上调幅度差异无统计学意义(P>0.05)。在RAW264.7细胞,以刺激6h各种补体固有分成CfB、C3、C1q表达上调,但随时间延长均恢复至正常水平,各剂量组间差异不明显。在局部皮肤组织,rAlb-34k2刺激24h后CRIg表达上调,且呈浓度和时间依赖趋势;48h时,各组rAlb-34k2(5μg、20μg)2-△△CT值达到高峰,分别为8.67±2.44和32.98±9.74,有统计学差异(P<0.05)。在Raw264.7细胞,刺激6h时CRIg有上调表达趋势,但随时间延长而下调,各剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白参与调控巨噬细胞及皮肤补体重要成分的表达变化,在组织中尤为显著,且显著上调定居组织的巨噬细胞特异性膜受体CRIg。

关键词：白纹伊蚊 rAlb-34k2 皮肤局部补体 CRIg 巨噬细胞

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基于致倦库蚊转录组的溴氰菊酯抗性相关基因分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第4期38卷 453-463页

作者：沈瑞鑫王意婷李春晓吴家红赵彤言陈艳贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵阳550000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

目的通过对致倦库蚊溴氰菊酯敏感株和抗性株进行转录组分析,筛选可能与抗性相关的差异表达基因。方法对致倦库蚊实验室敏感株(SS株)、海南株(HN株)和溴氰菊酯药筛抗性株(RR株) 3个不同抗性水平的株系进行生物测定,分别构建3个株系的cDN... 详细信息

目的通过对致倦库蚊溴氰菊酯敏感株和抗性株进行转录组分析,筛选可能与抗性相关的差异表达基因。方法对致倦库蚊实验室敏感株(SS株)、海南株(HN株)和溴氰菊酯药筛抗性株(RR株) 3个不同抗性水平的株系进行生物测定,分别构建3个株系的cDNA文库,提取RNA,进行转录组测序。基于FPKM值进行差异性分析,对差异基因进行GO和KEGG功能注释与富集分析。筛选出致倦库蚊不同株系中表达量有显著性差异的基因,并采用实时定量PCR验证。结果生物测定结果显示,与致倦库蚊SS株相比,HN株和RR株的抗性倍数分别达到了4 828倍和197 241倍,为高等抗性水平。RNA-seq测序结果显示,致倦库蚊SS株、HN株和RR株转录组共注释基因转录本197 079个。GO富集分析结果显示,在结合、催化活性、细胞过程、代谢过程、单一生物过程、细胞、细胞连接、细胞器中基因富集数量较多。KEGG富集分析结果显示,在富集度最高的前20个条目中,RR株主要富集于剪接体、核糖体等通路,HN株则主要富集于剪切体、RNA转运、hedgehog信号通路、细胞周期、核苷酸切除修复、DNA复制等方向。基于FPKM值的差异性分析结果显示,致倦库蚊RR株和HN株较SS株均上调的有5 357个,均下调的有10 978个。与溴氰菊酯抗性相关基因的靶向性筛选结果显示,与SS株相比,RR株和HN株注释的细胞色素P450基因、谷胱甘肽转移酶基因、气味结合蛋白基因、气味受体基因、视觉基因、核糖体蛋白基因和碳酸酐酶基因转录本中,均上调的分别为100、17、13、4、16、191和1个,均下调的分别为253、48、43、4、15、504和9个。从上调基因中挑选的12个基因(2个细胞色素P450基因、1个谷胱甘肽转移酶基因、1个视觉基因、1个核糖体蛋白基因、1个碳酸酐酶基因、1个核酸内切酶基因、2个气味结合蛋白基因、3个气味受体基因)进行实时定量PCR验证结果显示,在RR株和HN株中,这12个基因较SS株均显著上调,其中RR株较SS株上调1.62~80.26倍,HN株较SS株上调2.01~189.48倍。相关性分析结果显示,12个目标基因的RNA-seq结果与实时定量PCR结果在HN株和RR株中均呈正相关(r=0.802、0.710)。证明这12个目标基因的实时定量PCR结果与转录组测序结果趋势一致。结论基于高通量测序结果和定量PCR验证分析,致倦库蚊中的某些细胞色素P450基因、谷胱甘肽S转移酶基因、视觉基因、嗅觉蛋白基因可能在其对溴氰菊酯的抗性中起一定作用。

关键词：致倦库蚊溴氰菊酯抗性基因转录组测序实时定量PCR

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1例弓形虫IgM抗体假阳性案例分析

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标记免疫分析与临床 2025年第3期32卷 656-660页

作者：李虎杨春秋王楠楠朱进进余莉太和县人民医院检验科安徽阜阳236600 安徽医科大学基础医学院医学生物化学与分子生物学实验室安徽合肥230032 动物源性传染病安徽省重点实验室安徽省高校人畜共患病重点实验室安徽医科大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室安徽合肥230032

目的通过病原学检测并结合患者临床症状以及影像学检查排除弓形虫感染,通过实验设计以及查阅文献分析患者血清弓形虫IgM抗体假阳性原因,并总结归纳处理流程,为临床提供全面的诊疗思路。方法通过外周血涂片镜检、弓形虫核酸检测以及影像... 详细信息

目的通过病原学检测并结合患者临床症状以及影像学检查排除弓形虫感染,通过实验设计以及查阅文献分析患者血清弓形虫IgM抗体假阳性原因,并总结归纳处理流程,为临床提供全面的诊疗思路。方法通过外周血涂片镜检、弓形虫核酸检测以及影像学脑部磁共振成像(MRI)检测排除弓形虫感染;通过不同检测平台复检,增加类风湿因子(RF)、嗜异性抗体、冷凝集素的检测,以及动态监测弓形虫IgM抗体变化趋势分析假阳原因。结果患者血清中升高的弓形虫IgM抗体为假阳性,其血清中存在的EBV-IgM抗体和检测试剂发生交叉反应,干扰了检测结果。结论发现弓形虫IgM抗体异常升高时,应参考相应处理流程,增加相关检测,分析原因,避免误诊。

关键词：弓形虫病假阳性 IgM抗体传染性单核细胞增多症

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新型冠状病毒肺炎疫情下对医学留学生人体寄生虫学教学的思考

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中华医学教育杂志 2021年第6期41卷 504-508页

作者：吕芳丽沈继龙中山大学中山医学院寄生虫学教研室中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广州510080 安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室安徽省病原生物学重点实验室安徽省高校人兽共患病重点实验室合肥230032

新型冠状病毒肺炎疫情(简称疫情)的暴发,给世界各国人民的生命安全和身体健康带来巨大威胁。在应对疫情的同时,不能忽视新型冠状病毒与寄生虫共感染对中低收入国家人群的威胁。被忽视的热带寄生虫病主要流行于包括"一带一路"... 详细信息

新型冠状病毒肺炎疫情(简称疫情)的暴发,给世界各国人民的生命安全和身体健康带来巨大威胁。在应对疫情的同时,不能忽视新型冠状病毒与寄生虫共感染对中低收入国家人群的威胁。被忽视的热带寄生虫病主要流行于包括"一带一路"沿线国家/地区和非洲大陆在内的热带和亚热带地区,因此人体寄生虫学课程与来华医学留学生日后的医疗卫生工作关系密切。本文分析了我国医学留学生人体寄生虫学课程教学的现状和教学中存在的问题,并提出了疫情下在人体寄生虫学教学中适当增加医学留学生生源国的重要寄生虫病、新型冠状病毒与疟原虫或蠕虫共感染及相互作用的教学内容,在医学留学生人体寄生虫学教学中融入"全健康"(One Health)的理念,加强医学留学生人体寄生虫学线上和线下教学资源建设等方面的思考和建议。

关键词：新型冠状病毒肺炎医学留学生人体寄生虫学教学思考

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伊蚊唾液特异性rAlb-34k2蛋白促进DENV-2早期感染BHK-21细胞作用研究

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中国病原生物学杂志 2019年第5期14卷 530-533,538页

作者：徐倩田炎珅朱亚妮赵久刚李永念吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵州医科大学微生物与生化药学工程中心

目的探讨白纹伊蚊特异性rAlb-34k2蛋白与登革病毒(DENV)多种靶细胞粘附后促进DENV-2感染作用。方法1)采用间接免疫荧光法检测rAlb-34k2蛋白24 h内对DENV-2感染BHK-21细胞的作用。2)Western blot和间接免疫荧光法检测rAlb-34k2蛋白与BHK... 详细信息

目的探讨白纹伊蚊特异性rAlb-34k2蛋白与登革病毒(DENV)多种靶细胞粘附后促进DENV-2感染作用。方法1)采用间接免疫荧光法检测rAlb-34k2蛋白24 h内对DENV-2感染BHK-21细胞的作用。2)Western blot和间接免疫荧光法检测rAlb-34k2蛋白与BHK-21、HepG2、HaCat细胞的粘附作用以及兔抗rAlb-34k2抗体的阻断效应。结果1)免疫荧光法检测结果显示,热灭活rAlb-34k2蛋白处理组感染比值为0.40±0.023,未灭活组0.54±0.029,差异有统计学意义(P=0.001 1)。2)Western blot和免疫荧光法检测显示rAlb-34k2蛋白与BHK-21、HepG2、HaCat细胞均可发生粘附,且与BHK-21细胞的粘附具有剂量依赖性;特异性抗体不能阻断rAlb-34k2蛋白与BHK-21、HepG2细胞的粘附效应。结论rAlb-34k2蛋白可与BHK-21等DENV多种靶细胞发生粘附作用,具有介导DENV-2吸附细胞,促进病毒入侵宿主的潜能。

关键词：白纹伊蚊蚊唾液蛋白宿主细胞虫媒病毒粘附作用

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地摊经济背景下我国食源性寄生虫病防控工作的思考

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热带病与寄生虫学 2020年第4期18卷 247-250页

作者：计永胜姚湧刘淼沈继龙病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室

地摊经济是指通过摆地摊获得收入来源的一种经济形式。地摊经济对缓解就业压力,改善低收入人群的生活具有一定的现实意义,是我国市场经济的补充,有助于促进经济的发展,但也可能为食源性寄生虫病的防控带来一定的挑战。本文简要介绍了当... 详细信息

地摊经济是指通过摆地摊获得收入来源的一种经济形式。地摊经济对缓解就业压力,改善低收入人群的生活具有一定的现实意义,是我国市场经济的补充,有助于促进经济的发展,但也可能为食源性寄生虫病的防控带来一定的挑战。本文简要介绍了当前我国地摊美食中常见食材的食源性寄生虫感染情况以及人群中食源性寄生虫病的流行情况,为地摊经济背景下我国食源性寄生虫病的防控提出了建议。

关键词：地摊经济食源性寄生虫病防控措施

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弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒的构建与表达

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贵州医科大学学报 2020年第3期45卷 286-291页

作者：綦廷娜石畅汪政勇宗永丽李金福贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550004 中国人民解放军联勤保障部队第968医院神经内分泌科辽宁锦州121000 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州贵阳550004

目的:构建弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒,并观察其在小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3细胞中的表达。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法分别扩增弓形虫SAG1和GRA1基因片段,导入质粒载体pc DNA3.1(+),构建真核表达重组质粒pc DNA3.1(+)... 详细信息

目的:构建弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒,并观察其在小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3细胞中的表达。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法分别扩增弓形虫SAG1和GRA1基因片段,导入质粒载体pc DNA3.1(+),构建真核表达重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1和pc DNA3.1(+)-GRA1,继而构建重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1;设pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1为实验组、pc DNA3.1(+)为对照组分别转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光染色法鉴定其在NIH3T3细胞中的表达。结果:限制性内切酶双酶切及DNA测序分析结果显示,插入pc DNA3.1(+)的片段分别为1008 bp、570 bp和1578 bp,与预期的SAG1、GRA1和SAG1-GRA1复合基因分子大小相当、序列一致;免疫荧光染色法结果显示,转染重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1的NIH3T3细胞内观察到较强的绿色荧光,而转染pc DNA3.1(+)的NIH3T3细胞内未见绿色荧光。结论:成功构建了弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1,且该重组质粒携带的SAG1-GRA1复合基因在NIH3T3细胞中获得表达。

关键词：弓形虫属 SAG1基因 GRA1基因基因重组重组质粒体外表达

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