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第八届北京热带医学与寄生虫学论坛

作者：杨小迪宋迪吴琦王旗计永胜薛洪宝孙希萌陈兴智蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠 233030 安徽医科大学病原生物学教研室安徽省人兽共患病重点实验室合肥 230032 蚌埠医学院化学教研室蚌埠 233030 首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室北京100069

目的观察金丝桃素对体外培养的弓形虫RH 株速殖子的杀伤作用,探讨金丝桃素抗弓形虫的效果及杀虫机制.方法将实验按药物(金丝桃素)浓度分为四组,即生理盐水组为A 组即对照组、药物浓度为5ug/ml、50ug/ml、500ug/ml 各为B 组、C 组和D ... 详细信息

目的观察金丝桃素对体外培养的弓形虫RH 株速殖子的杀伤作用,探讨金丝桃素抗弓形虫的效果及杀虫机制.方法将实验按药物(金丝桃素)浓度分为四组,即生理盐水组为A 组即对照组、药物浓度为5ug/ml、50ug/ml、500ug/ml 各为B 组、C 组和D 组,分别置入到(含弓形虫速殖子1×106个/ml)的24 孔培养板中,于2h、4h、6h 收集虫体,用台盼蓝染色法检测弓形虫速殖子着色率;吉姆萨染色法观察其形态和结构变化,透射电镜观察虫体超微结构,流式细胞仪检测虫体的存活状态.结果速殖子经不同浓度金丝桃素(5ug/ml、50ug/ml、500ug/ml)作用后,B 组、C组和D 组的台盼蓝着色率在2h 分别为(11.00±3.60)％、(25.00±6.25)％和(40.00±2.65)％,D组着色率显著高于C 组和B 组(P＜0.01),各组均高于A 组(6.00±3.00)％,但B 组和A 组之间无明显差异;作用4h后,D组着色率(97.00±2.00)％显著高于C 组(30.00±7.21)％、B组(20.00±3.00)％和A 组(10.00±1.00)％(P＜0.01);6h 后,D 组着色率(98.00±1.73)％亦高于C 组(42.67±5.50)％、B 组(34.00±6.56)％和A 组(19.33±4.93)％,且各组之间均有显著性差异(P＜0.01).Giemsa染色观察,随时间的延长及剂量的增加,弓形虫两端逐渐变圆、肿胀、坏死;透射电镜观察随时间延长,速殖子逐渐出现肿胀,胞膜与基质之间有明显空隙,虫体内空泡变多变大,胞膜破裂,内部结构溶解;流式细胞仪检测结果表明：弓形虫存活率在药物作用后的各时间段内与对照组相比差异显著(P＜0.01);药物作用2h后,C 组弓形虫存活率(7.91±1.86)％显著低于B 组(38.10±5.47)％和A组(81.84±6.02)％(P＜0.01);4h和6h后,B组弓形虫存活率分别为(14.32±7.89)％和(1.37±1.76)％明显低于A 组(73.80±11.33)％和(64.11±14.37)％(P＜0.01);C 组在4h 后达到最低值,D 组则在2h 即达到最低值.结论金丝桃素具有显著的体外抗弓形虫效应,效果与时间和剂量呈依赖关系.

关键词：金丝桃素刚地弓形虫体外

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创新型医学科研人才培养模式探索

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基础医学教育 2015年第8期17卷 743-745页

作者：庄敏李迪李妍王甲业姚岚钟照华凌虹哈尔滨医科大学基础医学院医学微生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院寄生虫学教研室

面对日益竞争激烈的国际环境,医学人才除了具备基本的专业素质外,创新能力变得尤为重要。如何培养高层次创新型医学科研人才是医学高校面临的新挑战。通过以学校、学院和学科支撑、导师引领与科研训练相结合的教学模式,培养具有宽厚知... 详细信息

面对日益竞争激烈的国际环境,医学人才除了具备基本的专业素质外,创新能力变得尤为重要。如何培养高层次创新型医学科研人才是医学高校面临的新挑战。通过以学校、学院和学科支撑、导师引领与科研训练相结合的教学模式,培养具有宽厚知识面、敏锐的科研洞察力、怀疑和批判性思维的创新型医学科研人才,探索一条具有学校和学科特色的人才培养道路。

关键词：医学教育创新能力学科支撑导师引领科研训练

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黑龙江省桦川县华支睾吸虫病调查分析

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中华地方病学杂志 2013年第6期32卷 651-653页

作者：韩甦张晓丽董云霞凌虹张凤民葛涛哈尔滨医科大学基础医学院人体寄生虫学和微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室及普通高校病原生物学重点实验室 150081 黑龙江省疾病预防控制中心病媒寄生虫病防治所

目的探讨黑龙江省桦川县居民华支睾吸虫的感染情况，为制定防治策略提供依据。方法2011、2012年，在桦川县通过整群随机抽样，采集粪便标本，采用改良加藤厚涂片法粪检华支睾吸虫虫卵，通过问卷调查收集调查对象年龄、性别、职业、饮食... 详细信息

目的探讨黑龙江省桦川县居民华支睾吸虫的感染情况，为制定防治策略提供依据。方法2011、2012年，在桦川县通过整群随机抽样，采集粪便标本，采用改良加藤厚涂片法粪检华支睾吸虫虫卵，通过问卷调查收集调查对象年龄、性别、职业、饮食习惯等信息，分析感染特点。结果共计调查了2248名居民．华支睾吸虫感染患者884例，感染率为39.32％。男性感染率[47．15％（611／1296）]明显高于女性[28．68％（273／952），X^2=34．55，P〈0．01]。感染率随年龄增长而上升，20～69岁人群感染率较高，其中50～59岁人群感染率最高[45．34％（219／483）]。职业分布以农民感染率最高[47．24％（420／889）]，其次为干部职员[38．38％（190／495）]。有明确的食鱼生史的居民中，华支睾吸虫感染率为53．38％（150／281）。结论桦川县的华支睾吸虫感染率较高，建议积极开展健康教育和群体化疗为主的综合防治策略，降低人群感染率。

关键词：华支睾吸虫病寄生虫病数据收集

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317例华支睾吸虫病流行特征分析

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热带医学杂志 2013年第4期13卷 489-491页

作者：韩甦张晓丽文景山李懿宏舒晶董云霞凌虹张凤民哈尔滨医科大学基础医学院人体寄生虫学和微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室及普通高校病原生物学重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨华支睾吸虫病的临床流行病学特征变化,为制定进一步的防治策略提供理论基础。方法于2010年收集哈尔滨医科大学人体寄生虫病研究所就诊的疑似患者875人,采用Kato-Katz方法和酶联免疫方法分别对受检者的1 950份粪便样本和875份血... 详细信息

目的探讨华支睾吸虫病的临床流行病学特征变化,为制定进一步的防治策略提供理论基础。方法于2010年收集哈尔滨医科大学人体寄生虫病研究所就诊的疑似患者875人,采用Kato-Katz方法和酶联免疫方法分别对受检者的1 950份粪便样本和875份血清样本进行检测,同时收集患者的基本信息。结果受检者中华支睾吸虫感染患者317例,感染率为36.23%,该病的流行多为散发病例。男性感染率为39.94%,明显高于女性的26.36%,差异有统计学意义(P<0.001)。感染率随年龄增长而上升,20～69岁人群感染率较高,其中40～49岁人群感染率最高(42.71%)。农村患者感染率(42.27%)高于城市(20.33%),反复感染患者常见,吃生鱼(虾)习惯具有最高的感染风险(OR=28.507)。结论华支睾吸虫感染率较高,揭示该病流行病学特征和风险因素,将为加速控制和消灭华支睾吸虫病提供依据。

关键词：华支睾吸虫流行特征感染率

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病原体感染与铁代谢

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热带病与寄生虫学 2011年第4期9卷 240-242页

作者：韩甦张晓丽陈小贝张凤民哈尔滨医科大学基础医学院人体寄生虫学和微生物学教研室、黑龙江省病原生物学感染与免疫重点实验室哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生检验中心

铁(Iron)是人体必需的微量元素,广泛参与机体生命代谢活动,如通过催化氧化-还原反应参与细胞线粒体内电子传递和能量的代谢:参与构成血红蛋白、肌红蛋白在组织间协助氧和二氧化碳的运输:参与免疫反应、遗传物质DNA的合成等。铁缺乏会导... 详细信息

铁(Iron)是人体必需的微量元素,广泛参与机体生命代谢活动,如通过催化氧化-还原反应参与细胞线粒体内电子传递和能量的代谢:参与构成血红蛋白、肌红蛋白在组织间协助氧和二氧化碳的运输:参与免疫反应、遗传物质DNA的合成等。铁缺乏会导致机体贫血和免疫系统的损害;而铁沉积通过Fenton反应可增强自由基介导的氧化应激对组织和细胞造成损伤。由此可见,铁代谢与机体的生命活动密切相关。铁代谢的变化与病原体感染导致的疾病之间的关系正受到更多的关注。

关键词：铁代谢铁蛋白金属蛋白铁沉积病原体病原物

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日本血吸虫rSj14-3-3疫苗和rSj26 GST疫苗联合免疫保护作用研究

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中国人兽共患病学报 2010年第9期26卷 825-829,834页

作者：蒋就喜房修罗沈继龙胡婷婷桂林医学院附属医院感染性疾病科桂林541001 安徽医科大学微生物与寄生虫学教研室合肥230032

目的观察日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)疫苗和重组M r2600谷胱甘肽S转移酶(rSj26GST)疫苗联合免疫对小鼠的保护作用。方法将含有Sj14-3-3和Sj26GST编码基因的菌株***21/p ET28a涂布LB/Kana/IPTG/X-gal平板,培养、收集细菌、... 详细信息

目的观察日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)疫苗和重组M r2600谷胱甘肽S转移酶(rSj26GST)疫苗联合免疫对小鼠的保护作用。方法将含有Sj14-3-3和Sj26GST编码基因的菌株***21/p ET28a涂布LB/Kana/IPTG/X-gal平板,培养、收集细菌、超声碎菌、分离、纯化,分别取5μL进行SDS-PAGE,观察纯化结果,采用BCA法测定重组蛋白的浓度。联合免疫组BALB/c小鼠分别在第0、2、4周用rSj14-3-3疫苗rSj26GST疫苗联合免疫;而单独免疫的rSj14-3-3组及rSj26GST组,与上组同步各自免疫3次。末次免疫后2周进行感染攻击,45d后剖杀,计数成虫及肝内虫卵。同时设PBS对照组。计算各组间的减虫率和减卵率,以及虫卵肉芽肿的大小。结果联合免疫组的减虫率为38.38%,显著高于rSj14-3-3(16.98%)和rSj26GST组(26.80%)(P<0.01)。联合免疫组以及rSj14-3-3、rSj26GST组减卵率分别为48.81%、25.27%、41.41%;联合免疫组rSj14-3-3和rSj26GST组,肝组织中每条雌虫平均产卵数显著低于PBS对照组(P<0.01)。联合组小鼠虫卵肉芽肿的直径为(173.9±35.0μm),显著小于对照组(267.7±28.6μm)(P<0.01),联合组亦明显低于rSj14-3-3和rSj26GST组(P<0.01)。结论联合免疫组的保护作用优于rSj14-3-3和rSj26GST单独免疫组。且联合免疫疫苗具有一定的抗虫卵肉芽肿及抗肝纤维化作用。

关键词：日本血吸虫信号蛋白14-3-3 谷胱甘肽S转移酶重组蛋白联合免疫

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CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对啮齿类疟原虫感染过程及结局的影响

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中国人兽共患病学报 2008年第6期24卷 491-494页

作者：陈光吴忆刘军郑丽冯辉刘英杰曹雅明中国医科大学基础医学院免疫学教研室沈阳110001 佳木斯大学基础医学院寄生虫学教研室佳木斯154000 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032 中国医科大学基础医学院微生物教研室沈阳110001

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞数量在约氏疟原虫(致死型)和夏氏疟原虫混合感染小鼠免疫应答中的动态变化。方法DBA/2和BALB/c小鼠分别经腹腔注射致死型约氏疟原虫(P.y17XL)、夏氏疟原虫(***)和P.y17XL+***(1∶1)混合感染的红细胞,计数... 详细信息

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞数量在约氏疟原虫(致死型)和夏氏疟原虫混合感染小鼠免疫应答中的动态变化。方法DBA/2和BALB/c小鼠分别经腹腔注射致死型约氏疟原虫(P.y17XL)、夏氏疟原虫(***)和P.y17XL+***(1∶1)混合感染的红细胞,计数红细胞感染率;采用流式细胞术动态检测脾细胞中Tregs细胞数量的变化。结果P.y17XL+***感染的DBA/2小鼠于感染后18d自愈;而BALB/c小鼠于感染过程中虽然出现死亡(8d),但与P.y17XL感染小鼠(5d)相比,死亡时间明显延迟;P.y17XL和P.y17XL+***感染的DBA/2鼠于感染后第5d CD4+CD25+调节性T细胞数量均达峰值,随后缓慢下降,相比***感染的DBA/2鼠于感染后第10d达峰值,是其它两种同天感染鼠的3倍和2倍,且小鼠全部死亡;而P.y17XL和P.y17XL+***感染的BALB/c小鼠CD4+CD25+调节性T细胞数量于感染后均迅速升高,分别于感染后第5d和第8d达30%左右,小鼠全部死亡,相比***感染的BALB/c小鼠CD4+CD25+调节性T细胞数量于感染后缓慢升高,于感染后第5d达14%,随后开始下降。结论①P.y17XL+***混合感染DBA/2鼠后CD4+CD25+调节性T细胞数量的动态变化与P.y17XL单独感染表现出完全相同的模式;BALB/c鼠:CD4+CD25+调节性T细胞数量的动态变化与P.y17XL单独感染也表现出完全相同的模式,但变化的时间明显被滞后;②CD4+CD25+调节性T细胞的异常升高与感染结局密切相关。

关键词： CD4^+CD25^+调节性T细胞啮齿类疟原虫感染过程感染结局

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小鼠隐孢子虫感染动物模型的建立

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牡丹江医学院学报 2007年第2期28卷 26-28页

作者：于新慧凌虹张晓莉牡丹江医学院动物实验中心 157011 哈尔滨医科大学基础医学院微生物学寄生虫学教研室牡丹江医学院病原生物学教研室

目的:建立稳定的隐孢子虫(CPS)感染小鼠动物模型,为其防治研究奠定基础。方法:经口灌服醋酸地塞米松(DEX)抑制BALB/C小鼠免疫功能,7d后经口灌服CSO感染小鼠。结果:使用三组不同剂量的DEX免疫抑制小鼠都能感染隐孢子虫,DEX(6mg/kg)免疫... 详细信息

目的:建立稳定的隐孢子虫(CPS)感染小鼠动物模型,为其防治研究奠定基础。方法:经口灌服醋酸地塞米松(DEX)抑制BALB/C小鼠免疫功能,7d后经口灌服CSO感染小鼠。结果:使用三组不同剂量的DEX免疫抑制小鼠都能感染隐孢子虫,DEX(6mg/kg)免疫抑制组的小鼠死亡率比其它组高,DEX(4mg/kg)免疫抑制组收集的卵囊数比其它组的多。小肠组织学及超微结构变化小肠粘膜有虫体定植,肠绒毛出现病理损伤。结论:采用DEX(4mg/kg)免疫抑制小鼠后接种CSO,可以的建立较稳定CPS感染模型。

关键词：隐孢子虫免疫抑制动物模型

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双氢青蒿素对体外蓝氏贾第鞭毛虫的损伤

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第5期23卷 292-295页

作者：田喜凤卢思奇刘业民王凤云黄松军事医学科学院微生物流行病学研究所北京100071 唐山华北煤炭医学院电镜室唐山063000 首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室北京100054

目的探讨双氢青蒿素(DHA)对蓝氏贾第鞭毛虫的损伤作用。方法用含不同浓度DHA的TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体。分别在光镜和电镜下观察药物作用后虫体的形态结构变化。结果随着药物作用时间延长和浓度的增加,虫体死亡率增高... 详细信息

目的探讨双氢青蒿素(DHA)对蓝氏贾第鞭毛虫的损伤作用。方法用含不同浓度DHA的TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体。分别在光镜和电镜下观察药物作用后虫体的形态结构变化。结果随着药物作用时间延长和浓度的增加,虫体死亡率增高。在同一时间内随着药物浓度的增高,虫体死亡率升高(P<0.01)。DHA浓度为100μg/ml,作用12h,虫体死亡率为46.6%,浓度增至200μg/ml时,虫体死亡率为100%;同一药物浓度随着作用时间延长,虫体死亡率也升高(P<0.05),当浓度为100μg/ml,作用12h,虫体死亡率为46.6%,作用24h死亡率增至100%。药物作用后24、48和72h光镜下观察结果显示,虫体变形、肿胀、出现空泡、失去正常的瓢形运动能力;鞭毛摆动迟缓或停止运动。电镜下观察,见虫体变形、肿胀、细胞膜崩解、脱落,表面出现胞质突起;细胞质内核糖体溶解,出现空泡;吸器失去凹状结构,隆起变成大泡;核染色质稀疏,核周间隙变宽,并出现异形核。结论DHA对蓝氏贾第鞭毛虫的质膜及细胞骨架有较强的损伤作用。

关键词：蓝氏贾第鞭毛虫双氢青蒿素损伤

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日本血吸虫亲免素基因的扩增及序列分析

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中山大学学报（医学科学版） 2004年第5期25卷 395-398页

作者：李孜余新炳吴忠道徐劲田春林中山大学基础医学院寄生虫学教研室广州医学院微生物与免疫学教研室广东广州510182 广西医科大学

【目的】研究日本血吸虫亲免素基因编码序列的结构及进行初步的功能预测。【方法】用5'端和3'端锚定PCR从尾蚴文库中扩增,以获取日本血吸虫中国大陆株亲免素基因完整的开放阅读框(openreadingframe,ORF);用生物信息学技术确认... 详细信息

【目的】研究日本血吸虫亲免素基因编码序列的结构及进行初步的功能预测。【方法】用5'端和3'端锚定PCR从尾蚴文库中扩增,以获取日本血吸虫中国大陆株亲免素基因完整的开放阅读框(openreadingframe,ORF);用生物信息学技术确认其是否为亲免素编码基因并进行结构功能的初步分析和预测。【结果】用5'端和3'端锚定PCR从尾蚴文库中获得了亲免素基因5'端和3'端所缺序列,得到的亲免素基因cDNA的总序列长为1438bp,其ORF长1296bp,编码431个氨基酸。利用生物信息学技术鉴定其为日本血吸虫亲免素基因的完整cDNA序列。并用RT-PCR从日本血吸虫尾蚴mRNA扩增出亲免素基因的ORF。【结论】成功获得了日本血吸虫亲免素编码基因的全长cDNA,为进一步的功能研究打下了基础。

关键词：日本血吸虫尾蚴编码基因扩增生物信息学技术尾蚴日本血吸虫中国大陆株 PCR 功能预测文库序列

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