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ToxoROP16Ⅰ/Ⅲ诱导M2型巨噬细胞偏移抑制M1分泌炎性细胞因子的研究

安徽医科大学学报 2019年第9期54卷 1354-1360页

作者：徐永伟李路武艺章文慧邢瑞欣罗庆礼沈继龙陈熙安徽医科大学第一附属医院消化内科合肥230022 安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032

目的研究慢病毒介导弓形虫效应分子ROP16 Ⅰ/Ⅲ( Toxo ROP16 Ⅰ/Ⅲ)经旁路途径诱导巨噬细胞RAW264.7(Mφ)向M2型巨噬细胞偏移(M2),抑制经典途径激活巨噬细胞(M1)炎性因子的产生。方法构建表达ROP16 Ⅰ/Ⅲ的重组慢病毒,转染Mφ,通过激活... 详细信息

目的研究慢病毒介导弓形虫效应分子ROP16 Ⅰ/Ⅲ( Toxo ROP16 Ⅰ/Ⅲ)经旁路途径诱导巨噬细胞RAW264.7(Mφ)向M2型巨噬细胞偏移(M2),抑制经典途径激活巨噬细胞(M1)炎性因子的产生。方法构建表达ROP16 Ⅰ/Ⅲ的重组慢病毒,转染Mφ,通过激活旁路途径向M2型细胞偏移。脂多糖(LPS)诱导Mφ通过经典途径向M1型巨噬细胞细胞偏移。M1和M2细胞进行混合培养。用qRT-PCR检测TNF-α、IL-1β、TGF-β1、IL-10、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)的表达。Western blot检测ROP16 Ⅰ/Ⅲ、iNOS、Arg-1和PD-L2的蛋白表达。结果构建ROP16 Ⅰ/Ⅲ重组慢病毒并成功稳转Mφ,观察可见绿色荧光表达;Arg-1、PD-L2蛋白和TGF-β1、IL-10、Arg-1的mRNA表达升高,表明ROP16 Ⅰ/Ⅲ诱导了M2的偏移。LPS刺激后, qRT-PCR检测巨噬细胞的TNF-α和IL-1β mRNA表达上调,iNOS mRNA和蛋白表达同时升高,显示M1表型细胞特征。在M1和M2细胞混合培养中,M1型细胞分泌的上述促炎因子表达显著降低。结论 Toxo ROP16 Ⅰ/Ⅲ可驱动巨噬细胞向M2型偏移,能明显下调M1型细胞分泌炎性细胞因子。

关键词： ToxoROP16Ⅰ/Ⅲ 经典激活途径旁路激活途径偏移

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3-巯基丙酮酸硫转移酶产生的硫化氢在大鼠脑血管张力和脑血管内皮细胞缺氧损伤中的作用

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安徽医药 2019年第12期23卷 2342-2347页

作者：李梦李亚男刘欣王香溢郭岩陈志武安徽医科大学基础医学院药理教研室

目的研究3 巯基丙酮酸硫转移酶(3 mercaptopyruvate sulfurtransferase,3 MST)产生的硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)在大鼠脑血管张力和血管内皮细胞缺氧损伤中的作用。方法将大鼠脑基底动脉血管按随机数字表法分为Krebs Henseleit缓... 详细信息

目的研究3 巯基丙酮酸硫转移酶(3 mercaptopyruvate sulfurtransferase,3 MST)产生的硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)在大鼠脑血管张力和血管内皮细胞缺氧损伤中的作用。方法将大鼠脑基底动脉血管按随机数字表法分为Krebs Henseleit缓冲液对照组、3MP组、ASP组、SIN 1组、ASP+SIN 1组、3MP+SIN 1组。通过微血管张力仪来测量大鼠脑基底动脉血管的张力,收集张力仪浴槽中的灌注液并测定灌注液中硫化氢含量。原代培养大鼠脑血管内皮细胞,将细胞按随机数字表法分为对照组、模型组、3MP组、ASP组、SIN 1组、3MP+SIN 1组。除对照组外,其他5组建造急性缺氧4 h模型,用药组分别给予相应的药物预处理。然后测定缺氧损伤后内皮细胞活力,上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,以及活性氧的含量。结果 3 MST底物硫基丙酮酸二水合物(3 mercaptopyruvate,3MP)和 3 MST激动剂5 氨基 3 ( 4 吗啉基) 1, 2, 3 恶二唑鎓盐酸盐(3 morpholino sydnonimine hydrochloride,SIN 1)能够舒张血栓素A2受体激动剂U46619预收缩的大鼠脑基底动脉,最大收缩率为(94.67± 3.99) %;与单独使用SIN 1相比,3 MST抑制剂天门冬氨酸(L aspartic acid,ASP)能够减弱SIN 1舒张血管的作用,而3MP能增强SIN 1的血管舒张作用。同时,3MP和SIN 1可以增加血管灌注液中的硫化氢的含量(90.09±5.36) μmol,而ASP可以减少 SIN 1增加的硫化氢。与急性缺氧组相比,3 MST抑制剂ASP能够进一步降低细胞活力,升高LDH活性;而3 MST激动剂SIN 1 和底物3MP能够改善细胞损伤,提高细胞活力,降低LDH活性(112.63±8.08) U/L,降低活性氧。结论 3 MST产生的硫化氢可介导脑血管舒张,保护脑血管内皮细胞。

关键词：缺氧缺血,脑 3 巯基丙酮酸硫转移酶基底动脉硫化氢内皮细胞大鼠

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我国弓形虫病我国弓形虫病流行概况及防治基础研究进展

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中国血吸虫病防治杂志 2019年第1期31卷 71-76页

作者：沈继龙余莉安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室人兽共患病安徽省高校重点实验室病原生物学安徽省重点实验室合肥230032

弓形虫是一种重要的人兽共患病原体,弓形虫病严重危害人体健康及畜牧业生产。本文综述了我国弓形虫感染流行情况、基因分型、致病机制、诊断、治疗和疫苗研发等研究进展,旨在为我国弓形虫和弓形虫病研究提供参考。

关键词：弓形虫基因型致病机制诊断治疗疫苗

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维拉帕米逆转人食管鳞状细胞癌细胞株对顺铂耐药性的研究

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中华全科医学 2019年第12期17卷 1984-1988页

作者：王旭毛艺文汤丽莉张腾跃范平生安徽医科大学第一附属医院消化内科安徽合肥230022 安徽医科大学基础医学院核医学教研室安徽合肥230031 中国科学技术大学附属第一医院西区肿瘤内科安徽合肥230031

目的观察维拉帕米逆转人食管癌细胞株对顺铂耐药程度,探讨维拉帕米逆转耐药与多药耐药蛋白P-gp的关系。方法CCK-8法测5-氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂对2种食管癌细胞株(KYSE-150、KYSE-510)的IC50值(IC501);联合维拉帕米的IC50值(IC502),以IC... 详细信息

目的观察维拉帕米逆转人食管癌细胞株对顺铂耐药程度,探讨维拉帕米逆转耐药与多药耐药蛋白P-gp的关系。方法CCK-8法测5-氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂对2种食管癌细胞株(KYSE-150、KYSE-510)的IC50值(IC501);联合维拉帕米的IC50值(IC502),以IC501/IC502结果判定维拉帕米逆转耐药能力。实时荧光定量PCR测各组多药耐药基因hMDR-1表达。Western-blotting测各组P-gp表达。结果阿霉素、顺铂在KYSE-150的IC50值为7.33±0.67、3.23±0.06均小于KYSE-510的IC50值11.57±0.98、17.25±0.08,5-氟尿嘧啶在KYSE-150的IC50值24.33±1.67大于KYSE-510的IC50值14.67±1.02。联用维拉帕米后,各组IC50值均下降,提示维拉帕米提高药物敏感性。其中,顺铂组加入维拉帕米后,KYSE-510的IC50值变化较大(4.7倍)提示逆转敏感,KYSE-150的IC50值变化较小(1.84倍)提示逆转耐受。应用维拉帕米前后,各组hMDR1/P-gp表达没有明显变化。结论KYSE-510对维拉帕米联合顺铂逆转敏感,而KYSE-150逆转耐受。维拉帕米逆转人食管癌细胞株耐顺铂不是通过改变hMDR1/P-gp的数量,而可能通过阻碍hMDR1/P-gp作用或其他未知机制来实现。

关键词：维拉帕米食管癌耐药性逆转能力

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病理学网络平台互动学习教学模式和教学策略新探

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医学信息 2019年第13期32卷 4-6页

作者：黄山吴正升安徽医科大学基础医学院病理教研室

信息技术深度应用到教育教学环境中,催生出不断成长的医学教学网站与医学网络精品课,引发病理学教学模式和教学策略发生一系列重要转变。本文对病理学课程网络平台互动学习教学模式和教学策略进行探讨,期冀为病理学教学方法改革提供新... 详细信息

信息技术深度应用到教育教学环境中,催生出不断成长的医学教学网站与医学网络精品课,引发病理学教学模式和教学策略发生一系列重要转变。本文对病理学课程网络平台互动学习教学模式和教学策略进行探讨,期冀为病理学教学方法改革提供新的教学思路。

关键词：病理学网络平台教学模式教学策略

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烧伤大鼠血清对血管内皮细胞通透性的影响

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安徽医科大学学报 2019年第6期54卷 930-933页

作者：段声梁胡子健孟承颖黄海良蒋智永蒋薇王欢余又新孙业祥方林森胡德林安徽医科大学第一附属医院烧伤科合肥230022 安徽医科大学第一临床医学院合肥230022 安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230022

目的探讨烧伤大鼠血清对血管内皮细胞(EC)通透性的影响及作用机制。方法将原代培养的大鼠主动脉EC根据是否应用烧伤血清干预分为正常组和血清干预组,血清干预组应用烧伤12h大鼠血清干预大鼠主动脉内皮细胞24h,应用细胞通透性实验检测单... 详细信息

目的探讨烧伤大鼠血清对血管内皮细胞(EC)通透性的影响及作用机制。方法将原代培养的大鼠主动脉EC根据是否应用烧伤血清干预分为正常组和血清干预组,血清干预组应用烧伤12h大鼠血清干预大鼠主动脉内皮细胞24h,应用细胞通透性实验检测单层细胞膜通透性变化,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot分别检测细胞通透性相关基因内皮素-1(ET-1)、内皮因子受体A(ETA)、ETB和带状闭合蛋白1(ZO-1)的mRNA和蛋白表达的变化。结果与正常组相比,烧伤大鼠血清干预组EC通透性系数明显升高(P<0.01),血清干预组ET-1、ETA和ETB的mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01)、ZO-1的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论烧伤大鼠血清可引起血管EC通透性的增加,通透性增加可能与ET-1、ET-A、ET-B表达升高和ZO-1表达降低有关。

关键词：烧伤内皮细胞血管通透性 ET-1 ZO-1

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HIF-1α对大鼠内皮细胞通透性的影响及作用机制

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安徽医科大学学报 2019年第7期54卷 1061-1065页

作者：蒋智永胡子健孟承颖黄海良段声梁蒋薇王欢余又新孙业祥方林森胡德林安徽医科大学第一附属医院烧伤科合肥230022 安徽医科大学第一临床医学院合肥230022 安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230022

目的探讨低氧诱导因子-1 (HIF-1α)对大鼠主动脉内皮细胞通透性的影响及作用机制。方法构建HIF-1α干扰及过表达载体,应用Lipofectamine 2000转染原代大鼠主动脉内皮细胞,浓度为200μg/ml遗传霉素(G418)筛选稳转细胞株,实时荧光定量PCR(... 详细信息

目的探讨低氧诱导因子-1 (HIF-1α)对大鼠主动脉内皮细胞通透性的影响及作用机制。方法构建HIF-1α干扰及过表达载体,应用Lipofectamine 2000转染原代大鼠主动脉内皮细胞,浓度为200μg/ml遗传霉素(G418)筛选稳转细胞株,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot检测HIF-1α、内皮素-1(ET-1)、内皮素受体A(ETA)、内皮素受体B(ETB)和闭锁小带(ZO-1)的表达;应用ET-1信号通路抑制剂BQ123及BQ788预处理HIF-1α过表达细胞株1 h,RT-PCR和Western blot检测HIF-1α、ET-1、ETA、ETB和ZO-1的表达,细胞膜通透性实验检测单层内皮细胞膜通透系数变化。结果与转染短发夹RNA-阴性对照组(shRNA-NC组)相比,转染shRNA-Ⅱ组HIF-1α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),ZO-1的表达则明显升高(P<0.01)。与转染GV230组比较,稳转GV230/HIF-1α组HIF-1α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),ZO-1的表达则明显降低(P<0.01);同时细胞膜通透性系数亦明显升高(P<0.01);应用BQ123和BQ788处理能够抑制HIF-1α诱导的ETA和ETB表达、增强ZO-1的表达,同时细胞膜通透性系数明显降低(P<0.01)。结论 HIF-1α可通过上调ET-1的表达进而增加大鼠主动脉内皮细胞的通透性,HIF-1α/ET-1信号轴在调控烧伤大鼠血管通透性方面具有重要作用。

关键词：大鼠内皮细胞血管通透性缺氧诱导因子-1α

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高脂饮食对兔睾丸组织损害机制及光甘草定保护作用研究

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安徽医科大学学报 2019年第6期54卷 899-904页

作者：韦雯雯郭灿丁俊丽吕正梅安徽医科大学基础医学院组织胚胎学教研室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院妇产科合肥230022 安徽医科大学生命科学学院合肥230032 安徽医科大学第一附属医院儿科合肥230022

目的研究光甘草定(GLA)对高脂模型兔睾丸功能的保护作用及机制。方法建立高脂模型兔模型,随机将作为模型兔的新西兰兔分成三组,分别为光甘草定组、高脂模型组以及正常对照组。其中,以高脂饲料喂养高脂组与GLA组,以正常饲料方式喂养正常... 详细信息

目的研究光甘草定(GLA)对高脂模型兔睾丸功能的保护作用及机制。方法建立高脂模型兔模型,随机将作为模型兔的新西兰兔分成三组,分别为光甘草定组、高脂模型组以及正常对照组。其中,以高脂饲料喂养高脂组与GLA组,以正常饲料方式喂养正常对照组,持续12周;GLA组自第7周开始给予GLA,剂量2 mg/(kg·d),至第12周。分析血脂总胆固醇(TCH)和三酰甘油(TG)变化;免疫组织化学法研究睾丸间质细胞和巨噬细胞的变化;脂质氧化(MDA)检测和总抗氧化能检测试剂盒(ABTS快速法)分别检测睾丸组织脂质氧化水平和总抗氧化能力;Western blot分析睾酮合成相关蛋白/细胞色素P450 胆固醇侧链裂解酶(P450 scc)和类固醇合成快速调节蛋白(StAR)、抗氧化蛋白沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、人谷脱甘肽过氧化酶4(GPx4)及内质网应激标记分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达。结果与正常对照组相比,高脂组血清TCH增高( P <0.05);睾丸间质细胞表达3β-羟类固醇脱氢酶(3β- HSD)水平降低;多克隆抗体(F4/80)标记巨噬细胞数量增加;Western blot示P450 scc、StAR、SIRT1、GPx4和 MnSOD表达降低( P <0.05);机体脂质氧化增加,总抗氧化能力减弱( P >0.05);GRP78表达上调;高脂添加GLA组与高脂组相比,TCH降低( P <0.05);睾丸间质细胞3β- HSD表达增强;巨噬细胞数量减少;P450 scc、StAR、SIRT1、GPx4和 MnSOD表达升高( P <0.05);脂质氧化减少,总抗氧化能力增强;GRP78表达有下降趋势。结论 GLA可以减弱高脂对兔睾丸间质细胞睾酮合成能力的损害,其抗氧化应激作用可能是重要机制。

关键词：肥胖代谢综合征睾丸光甘草定

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慕课在医学机能学实验教学中的应用

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基础医学教育 2019年第4期21卷 325-327页

作者：张骏艳陈昌锋孔勤尹艳艳杜鹃安徽医科大学基础医学院药理学教研室合肥230032 安徽医科大学基础医学院机能实验中心安徽医科大学基础医学院生理学教研室

慕课即大规模开放在线课程,是随着网络信息化发展带来的新型教育模式。安徽医科大学医学机能学实验教学中逐步开始以慕课作为传统教育的辅助手段,发挥了其方便高效、与时俱进、互动性强等优点,同时也发现完成率低、不能满足个体差异性... 详细信息

慕课即大规模开放在线课程,是随着网络信息化发展带来的新型教育模式。安徽医科大学医学机能学实验教学中逐步开始以慕课作为传统教育的辅助手段,发挥了其方便高效、与时俱进、互动性强等优点,同时也发现完成率低、不能满足个体差异性等问题,希望通过加强校际及校企之间的合作,探索慕课平台教育的新途径。

关键词：医学机能学慕课教学改革

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白藜芦醇减轻高脂饮食小鼠肾损伤的作用及机制

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安徽医科大学学报 2019年第10期54卷 1521-1525页

作者：许伶凌梦玉陈超吕正梅安徽医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室合肥230032 合肥职业技术学院护理学院基础医学科合肥238000

目的研究高脂(HL)导致脂质代谢紊乱所引发慢性肾损伤的机制,并探讨白藜芦醇(RSV)在肾脏损伤中起保护作用的机制。方法选取6周龄雄性C57BL/6J小鼠造模,分设正常对照组(CTRL组)、高脂组(HL组)、白藜芦醇干预组(RSV组),18周后检测各组血脂... 详细信息

目的研究高脂(HL)导致脂质代谢紊乱所引发慢性肾损伤的机制,并探讨白藜芦醇(RSV)在肾脏损伤中起保护作用的机制。方法选取6周龄雄性C57BL/6J小鼠造模,分设正常对照组(CTRL组)、高脂组(HL组)、白藜芦醇干预组(RSV组),18周后检测各组血脂、体质量和肾功能,采用HE染色、PAS染色和免疫组化法检测肾组织形态学变化;通过Western blot和RT-PCR方法检测小鼠肾组织氧化应激和内质网应激相关蛋白的表达。结果RSV明显降低高脂饮食小鼠的体质量、血脂和尿酸水平;改善肾小球系膜增生和肾小管纤维化,减少肾小球糖原沉积以及下调纤维黏连蛋白(FN)的表达;RSV明显上调抗氧化相关蛋白沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)的表达、下调内质网应激分子标志葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白的同源蛋白(CHOP)的蛋白和mRNA表达。结论RSV通过抑制肾组织纤维化、氧化应激和内质网应激,减轻高脂饮食导致的慢性肾脏损伤。

关键词：高脂肾脏白藜芦醇氧化应激内质网应激

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