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安徽医药 2014年第8期18卷 1405-1409页

作者：兰潮棕高杉安徽中医药大学药学院安徽合肥230031 安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032

GTP结合蛋白（GTP binding protein,G protein）,简称G蛋白,是细胞外信号通过膜受体转入胞内的重要转导分子,体内众多信号转导途径均有G蛋白参与。小分子G蛋白的分子量一般在2.0×10^4-3.0×10^4,为G蛋白分子量的1/4至1/3,因此... 详细信息

GTP结合蛋白（GTP binding protein,G protein）,简称G蛋白,是细胞外信号通过膜受体转入胞内的重要转导分子,体内众多信号转导途径均有G蛋白参与。小分子G蛋白的分子量一般在2.0×10^4-3.0×10^4,为G蛋白分子量的1/4至1/3,因此得名,简称小G蛋白。小G蛋白为单链结构,同时具有GTP酶活性和与GTP、GDP结合的特性。Rho是小G蛋白（small GTPases）家族中的重要成员,而且它是最早被发现的Ras同源蛋白（Ras homologue）。Rac1是Rho家族的成员之一,它作为eNOS和Nox的一个共同的控制元件,协调参与了内皮细胞中NO和O-2产生的信号转导。

关键词： Rac1 NADPH氧化酶 eNOS 综合调节

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不同品系小鼠心肌肥厚模型标志性基因表达变化的比较

不同品系小鼠心肌肥厚模型标志性基因表达变化的比较

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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：阚红卫司文文汪春彦何灿尹艳艳杨雁梁燕安徽医科大学基础医学院药理教研室合肥 230022 安徽省药物研究所药理室合肥 230032 安徽省食品药品审评认证中心合肥 230051 安徽省药物研究所药理室合肥 230032 安徽医科大学基础医学院药理教研室合肥 230022

目的:探索不同品系小鼠心肌肥厚模型间肥厚性标志基因ANP、BNP、β-MHC基因表达的差异. 方法:将KM、BALB/c、ICR和C57BL/6小鼠用肾上腹主动脉缩窄法建立心肌肥厚模型.造模后,称取各小鼠体重、心脏重量和左室重量,计算心脏重量指数和... 详细信息

目的:探索不同品系小鼠心肌肥厚模型间肥厚性标志基因ANP、BNP、β-MHC基因表达的差异. 方法:将KM、BALB/c、ICR和C57BL/6小鼠用肾上腹主动脉缩窄法建立心肌肥厚模型.造模后,称取各小鼠体重、心脏重量和左室重量,计算心脏重量指数和左心室指数;组织HE染色,观察心肌病理变化;免疫组织化学染色,观察心肌ANP、BNP和β-MHC蛋白表达;Real-time PCR检测心肌ANP、BNP和β-MHC基因表达. 结果:与对照组比较,KM、BALB/c和C57BL/6心肌肥厚小鼠心脏重量指数和左心室指数升高(P＜0.01～0.05),光镜下各模型小鼠心肌呈现不同程度的肥厚性变化,ANP、BNP和β-MHC在蛋白和基因表达水平均不同程度增加.与C57BL/6心肌肥厚小鼠比较,KM、ICR和C57BL/6小鼠心肌组织ANP、BNP和β-MHC在蛋白和基因表达水平均降低(P＜0.01). 结论:KM、BALB/c和C57BL/6小鼠心肌肥厚模型造模成功,C57BL/6小鼠在腹主动脉缩窄心肌肥厚模型心肌组织在同时表达肥厚性标志基因ANP、BNP和β-MHC时具有一定的相对优势.

关键词：心肌肥厚心房利钠肽基因脑钠肽基因 β-主要组织相容性复合体基因表达差异性

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ZNF300基因在肝癌耐药细胞HepG2/VCR中的表达及功能初探

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中国药理学通报 2013年第7期29卷 951-955页

作者：李静王涛安徽医科大学基础医学院机能实验中心安徽合肥230032 安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室安徽合肥230032

目的建立人肝癌HepG2/VCR耐药细胞株,检测ZNF300基因在HepG2/VCR中的表达并初步分析其在肝癌多药耐药(MDR)中发挥的功能。方法采用体外低浓度梯度递增的诱导方法建立长春新碱(VCR)获得性HepG2/VCR耐药细胞株。MTT法检测确定HepG2/VCR耐... 详细信息

目的建立人肝癌HepG2/VCR耐药细胞株,检测ZNF300基因在HepG2/VCR中的表达并初步分析其在肝癌多药耐药(MDR)中发挥的功能。方法采用体外低浓度梯度递增的诱导方法建立长春新碱(VCR)获得性HepG2/VCR耐药细胞株。MTT法检测确定HepG2/VCR耐药细胞株对VCR的耐药性,用Western blot方法检测人锌指蛋白ZNF300基因编码的ZNF300及多药耐药基因编码的P糖蛋白(P-gp)在HepG2和HepG2/VCR细胞中的表达差异;在HepG2/VCR细胞中转染ZNF300基因正向或反向cDNA质粒后,MTT法检测VCR对耐药细胞IC50值的变化,Westernblot方法检测细胞内P-gp表达的影响。结果 MTT检测确认HepG2/VCR耐药细胞构建成功,Western blot检测发现耐药细胞中ZNF300及P-gp的表达相对于HepG2细胞明显增高。在HepG2/VCR细胞中转染正向ZNF300 cDNA质粒后,MTT和Western blot检测发现ZNF300过表达可使VCR对耐药细胞的IC50值增高,并使细胞内P-gp表达上调;在转染反向cDNA质粒Knockdown ZNF300基因表达后得到相反的结果。结论 ZNF300基因在HepG2/VCR耐药细胞中表达明显增高,并能通过上调耐药蛋白P-gp的表达促进肝癌细胞耐药性,可以作为逆转肝癌多药耐药的分子作用靶点。

关键词： ZNF300 肝癌多药耐药 P-糖蛋白化疗锌指蛋白

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过氧硝酸分解势能面的理论研究

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CHINESE JOURNAL OF CHEMICAL PHYSICS 2014年第6期 659-662页

作者：韦文美郑仁慧吴允凯杨帆洪石安徽医科大学基础医学院化学教研室中国科学院化学研究所分子动态与稳态国家重点实验室北京分子科学国家实验室

使用密度泛函理论B3LYP/6-311＋ G（2d,2p）研究了过氧硝酸的最低能量结构．采用耦合簇方法CCSD（T）/aug-cc-pVDZ首次分别扫描了过氧硝酸沿氧-氮和氧-氧键的分解势能面．计算结果表明在氧-氮势能面上，当O3—N4键长是2.82A^°时，... 详细信息

使用密度泛函理论B3LYP/6-311＋ G（2d,2p）研究了过氧硝酸的最低能量结构．采用耦合簇方法CCSD（T）/aug-cc-pVDZ首次分别扫描了过氧硝酸沿氧-氮和氧-氧键的分解势能面．计算结果表明在氧-氮势能面上，当O3—N4键长是2.82A^°时，对应的疏松过渡态的能垒是25.6 kcal/mol；在氧-氧键的势能面上，当O2—O3键长是2.35A^°时，对应的疏松过渡态的能垒是37.4 kcal/mol．这表明过氧硝酸更容易分解为HO2和NO2．

关键词：过氧硝酸结构势能面理论研究

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CDX2基因高表达对胃癌细胞生物学行为的影响

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中国组织化学与细胞化学杂志 2013年第3期22卷 217-223页

作者：秦蓉储婧陈宗科陈晓双王娜娜安徽医科大学基础医学院病理教研室合肥230032

目的探讨尾侧型同源转录因子-2(CDX2)基因过表达对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移、凋亡等生物学特征的影响。方法采用脂质体转染法建立CDX2基因过表达的胃癌BGC-823稳定细胞株,分别采用RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学等方法检测... 详细信息

目的探讨尾侧型同源转录因子-2(CDX2)基因过表达对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移、凋亡等生物学特征的影响。方法采用脂质体转染法建立CDX2基因过表达的胃癌BGC-823稳定细胞株,分别采用RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学等方法检测转染重组表达载体pEGFP-C1/CDX2后,BGC-823细胞中CDX2基因及其蛋白的表达。MTT法检测CDX2基因过表达对细胞的增殖能力的影响;划痕实验检测CDX2过表达对细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测CDX2过表达对细胞的凋亡的影响;应用基因芯片技术检测转染前后相关基因的差异表达。结果 RT-PCR及Western blotting检测结果显示,与对照组相比,转染pEGFP-C1/CDX2后,BGC-823细胞中CDX2基因和蛋白均呈高表达;CDX2过表达能明显降低转然组BGC-823细胞增殖能力和迁移能力;但对细胞凋亡影响不明显;基因芯片结果提示CDX2基因高表达能影响某些基因的表达。结论 CDX2过表达能明显抑制胃癌细胞增殖、降低迁移能力,提示CDX2在胃癌中可能发挥抑癌基因的作用。

关键词：胃肿瘤尾侧型同源转录因子-2 基因转染

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基于核磁共振的甲状腺乳头状癌患者血浆的代谢组学研究

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新疆医科大学学报 2014年第9期37卷 1130-1134页

作者：阿布都沙拉木.阿布力艾力.赛丁哈力木拉提.木尔扎提热娜.米吉提阿布来提.麦麦提艾力夏米西努尔.伊力克新疆医科大学基础医学院生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆维吾尔自治区人民医院乳腺甲状腺外科乌鲁木齐830001 新疆医科大学第一附属医院甲状腺外科乌鲁木齐830054 新疆医科大学第二附属医院核医学科乌鲁木齐830028

目的通过核磁共振代谢组学方法进行甲状腺乳头状癌患者与健康对照者血浆代谢组研究,并探讨甲状腺乳头状癌组代谢组学上的变化及意义。方法收集健康对照组(n=29)和甲状腺乳头状癌组(n=31)血浆样品,进行核磁共振氢谱(1 H-NMR)检测。通过... 详细信息

目的通过核磁共振代谢组学方法进行甲状腺乳头状癌患者与健康对照者血浆代谢组研究,并探讨甲状腺乳头状癌组代谢组学上的变化及意义。方法收集健康对照组(n=29)和甲状腺乳头状癌组(n=31)血浆样品,进行核磁共振氢谱(1 H-NMR)检测。通过最小二乘判别分析(OPLS-DA)方法得到两组血浆的差异性代谢物,并探讨相关生化过程的改变。结果两组血浆代谢物有明显的差异,与健康对照组相比,甲状腺乳头状癌组血浆中的极低密度脂蛋白、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、低密度脂蛋白、乳酸、丙氨酸、糖蛋白、谷氨酰胺、肉碱、α-酮戊二酸、肌酸、甘氨酸、不饱和脂类、酪氨酸、甲基组氨酸、苯丙氨酸的含量降低,丙酮酸、柠檬酸、肌酸酐、胆碱、鲨肌醇、β-葡萄糖、肌醇、α-葡萄糖和甲酸的含量增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论根据血浆代谢物的差异可以分辨健康对照组与甲状腺乳头状癌组血浆中的差异性代谢物。这种基于核磁共振氢谱技术的代谢组学方法可为甲状腺乳头状癌的诊断提供可靠代谢依据。

关键词：甲状腺乳头状癌代谢组学核磁共振

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酵母双杂交筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第1期31卷 18-22页

作者：都建安然程里陈滢沈继龙安徽医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学药学院合肥230032 安徽医科大学省部级基因研究重点实验室病原生物学教研室合肥230032

目的利用酵母双杂交方法,筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白。方法 RT-PCR扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因片段,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母AH109菌株中,检测诱饵载体有无毒性和自... 详细信息

目的利用酵母双杂交方法,筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白。方法 RT-PCR扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因片段,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母AH109菌株中,检测诱饵载体有无毒性和自激活作用,利用酵母双杂交系统从人胚胎脑cDNA文库中筛选与ROP18相互作用的宿主蛋白。结果构建了诱饵载体pGBKT7-ROP18,ROP18具有自激活功能。用ROP18^(25-25lan)为诱饵,筛选获得一系列与ROP18相互作用的宿主蛋白:DNA损伤特异性结合蛋白1(DDB1)、torsin A相互作用蛋白1(TOR1AIP1)、整联蛋白β1(integrinβ1)、溶质运载蛋白3(SLC3A2)、酪氨酸硫化转移酶2(TPST2)、Derl样域家族成员2(DERL2)和OCIA结构域蛋白1(OCIAD1)。结论通过酵母双杂交技术筛选出与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的多种宿主蛋白。

关键词：弓形虫 ROP18^25-251aa 酵母双杂交相互作用宿主蛋白

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miR-24和miR-22在胃癌中的表达及其临床意义

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安徽医科大学学报 2013年第2期48卷 167-171页

作者：陈宗科秦蓉储婧王娜娜安徽医科大学基础医学院病理学教研室合肥230032

目的探讨miR-24和miR-22在胃癌细胞与组织中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系。方法应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-24和miR-22在人正常胃黏膜细胞株(GES-1)、4株人胃癌细胞株以及胃癌组织和相应的癌旁胃黏膜组织中的表达,分... 详细信息

目的探讨miR-24和miR-22在胃癌细胞与组织中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系。方法应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-24和miR-22在人正常胃黏膜细胞株(GES-1)、4株人胃癌细胞株以及胃癌组织和相应的癌旁胃黏膜组织中的表达,分析miR-24和miR-22在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系。结果与GES-1比较,miR-24在人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823中表达明显升高(P=0.003、P=0.007),而在MGC-803和AGS中表达差异无统计学意义(P=0.304、P=0.120);与GES-1比较,miR-22在SGC-7901中表达明显升高(P=0.000),在MGC-803中表达显著降低(P=0.000),而在AGS和BGC-823中表达差异无统计学意义(P=0.151、P=0.307);胃癌组织中miR-24的表达明显高于其相应的癌旁胃黏膜组织(P=0.005);miR-22在胃癌组织及其相应的癌旁胃黏膜组织中的表达差异无统计学意义(P=0.501);胃癌组织中除miR-24的表达与性别具有显著相关性外(P=0.029),miR-24、miR-22与其他临床病理特征,如年龄、肿块大小、浸润深度、分化程度、Borrmann分型以及淋巴结转移、TNM分期等均无明显相关性。结论 miR-24在人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-803以及胃癌组织中表达是上调的,可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用。

关键词： miR-24 miR-22 胃肿瘤实时荧光定量PCR

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无患子皂苷对自发性高血压大鼠心肌炎症因子及左心室重构的影响

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中药材 2013年第2期36卷 249-255页

作者：陈明陈志武龙子江刘金林卞海王雅娟王靓安徽中医学院药理学教研室安徽合肥230038 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230031 安庆医药高等专科学校安徽安庆246052

目的:研究无患子皂苷对自发性高血压大鼠(SHR)心肌炎症因子及左心室重构的影响。方法:取SHR40只,随机均分为5组,即模型组、卡托普利组(27 mg/kg)、无患子皂苷27、54、108 mg/kg组,另取8只健康WKY大鼠作为正常对照组,连续给药8 w,检测以... 详细信息

目的:研究无患子皂苷对自发性高血压大鼠(SHR)心肌炎症因子及左心室重构的影响。方法:取SHR40只,随机均分为5组,即模型组、卡托普利组(27 mg/kg)、无患子皂苷27、54、108 mg/kg组,另取8只健康WKY大鼠作为正常对照组,连续给药8 w,检测以下指标:①计算左心室质量指数(LVMI);②HE染色观察左心室心肌组织形态学变化;③Masson染色观察左心室心肌胶原分布情况;④免疫组化法检测心肌组织TGFβ1蛋白表达水平。结果:无患子皂苷可有效逆转SHR左心室肥厚现象,降低LVMI,抑制心肌细胞的肥大及胶原纤维的增生,并可抑制炎症因子TGF-β1在心肌的表达水平,上述指标与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:无患子皂苷可逆转SHR左心室重构的病理状态,其机制可能与抑制心肌组织炎症因子TGF-β1的表达有关。

关键词：无患子皂苷自发性高血压心肌肥厚炎症反应

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无患子皂苷对自发性高血压大鼠Ang Ⅱ/p38MAPK通路介导的炎症反应与心肌肥厚的影响

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中国中药杂志 2013年第7期38卷 1030-1035页

作者：陈明陈志武龙子江刘金林高华武王雅娟安徽中医学院药理学教研室安徽合肥230038 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230031 安庆医药高等专科学校安徽安庆246052

目的:通过观察无患子皂苷对Ang Ⅱ/p38MAPK通路介导的自发性高血压大鼠炎症反应的影响,以论证高血压心肌肥厚与炎症因素的相关性。方法:取16周龄SHR32只,随机均分为4组,即SHR模型组、阳性对照组(卡托普利,27mg·kg-1)、无患子皂苷... 详细信息

目的:通过观察无患子皂苷对Ang Ⅱ/p38MAPK通路介导的自发性高血压大鼠炎症反应的影响,以论证高血压心肌肥厚与炎症因素的相关性。方法:取16周龄SHR32只,随机均分为4组,即SHR模型组、阳性对照组(卡托普利,27mg·kg-1)、无患子皂苷低、高剂量组(27,108mg·kg-1),另取8只健康WKY大鼠作为正常对照组,按剂量连续给药8周,检测指标如下:①左心室质量指数(LVMI)的测定;②ELISA法检测心肌匀浆Ang Ⅱ,hs-CRP的含量;③免疫组化法检测心肌组织AT1R,VEGF的蛋白表达;④Westernblot法检测心肌p-p38MAPK的蛋白表达。结果:无患子皂苷可抑制AngⅡ在心肌局部含量,减少AT1R以及p-p38MAPK的蛋白表达,使炎症因子VEGF,hs-CRP等表达减少,并可降低LVMI,逆转心肌肥厚,上述指标与SHR模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:无患子皂苷对SHR心肌肥厚有一定的抑制作用,其机制与调控Ang Ⅱ/p38MAPK通路诱导的炎症反应有关。

关键词：无患子皂苷自发性高血压炎症反应心肌肥厚

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