检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2012年第10期28卷 1016-1019页

作者：程里陈立建安然都建安徽医科大学、基础医学院生物化学与分子生物学教研室安徽医科大学、第一附属医院麻醉科安徽合肥230032

目的:研究Plk的330/597位丝氨酸的模拟磷酸化突变体Plk1S330/597D和不能磷酸化突变体Plk1S330/597A的绿色荧光融合蛋白在HeLa细胞中的定位以及对有丝分裂的影响。方法:将野生型Plk1-GFP质粒、模拟磷酸化型突变体Plk1S330/597D-GFP质粒... 详细信息

目的:研究Plk的330/597位丝氨酸的模拟磷酸化突变体Plk1S330/597D和不能磷酸化突变体Plk1S330/597A的绿色荧光融合蛋白在HeLa细胞中的定位以及对有丝分裂的影响。方法:将野生型Plk1-GFP质粒、模拟磷酸化型突变体Plk1S330/597D-GFP质粒和不能磷酸化突变体Plk1S330/597A-GFP质粒分别转染HeLa细胞株,免疫荧光法检测突变体融合蛋白Plk1S330/597D-GFP和Plk1S330/597A-GFP的细胞定位的定位,West-ern blot法检测上述突变体融合蛋白的表达。通过有丝分裂期的细胞计数,流式细胞仪检测细胞周期,观察转染突变体后HeLa细胞的有丝分裂进程。结果:模拟磷酸化突变体Plk1S330/597D和不能磷酸化突变体Plk1S330/597A的融合蛋白能正确表达。突变体在细胞有丝分裂过程中均能正确定位于动点和中体,但不能磷酸化突变体Plk1S330/597A融合蛋白对HeLa细胞的有丝分裂有明显的抑制作用,使胞质分裂期的细胞数量较对照组明显增多,产生G2/M期阻滞(P<0.01),并造成染色体分离滞后的现象。结论:Plk1激酶自身的磷酸化状态对其有丝分裂期功能具有重要作用,其330和597位丝氨酸去磷酸化能抑制细胞的有丝分裂,使细胞周期发生G2/M期阻滞。

关键词： Plk1激酶磷酸化突变体有丝分裂肿瘤发生 HeLa细胞

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高脂组和正常组兔肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量测定和对比分析

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光谱学与光谱分析 2012年第11期32卷 3142-3145页

作者：吴允凯曹洪毛昌杰顾志红汪渊安徽医科大学基础医学院化学教研室安徽合肥230032 安徽大学化学系安徽合肥230039 安徽省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽合肥230032

讨论实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量的变化。采用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,获取肝脏,用HNO3-H2O2混合液微波消解样品,采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd的含量。正常组肝脏组织Z... 详细信息

讨论实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量的变化。采用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,获取肝脏,用HNO3-H2O2混合液微波消解样品,采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd的含量。正常组肝脏组织Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量分别为137.6,362.3 14.39,***-1和159.3,355.0,290.0μ***-1,高脂组肝脏组织Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量分别为86.09,277.1,11.07,***-1和115.2,286.0,210.5μ***-1。高脂兔肝脏Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量降低,可能与食物摄取和脂蛋白代谢异常有关。

关键词：高脂组正常组肝脏微量元素

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与14-3-3ζ相互作用的蛋白Polo样激酶1的筛选与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第8期28卷 804-807页

作者：都建程里陈立建陈滢安然安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室安徽合肥230032 安徽医科大学第一附属医院麻醉科安徽合肥230032 安徽医科大学药学院安徽合肥230032

目的:应用酵母双杂交系统筛选与14-3-3ζ相互作用的蛋白,进一步鉴定其与Polo样激酶1(Plk1)相互作用。方法:构建pGBKT7-14-3-3ζ诱饵表达载体,筛选HeLa细胞cDNA文库中与14-3-3ζ相互作用蛋白,进一步通过共转酵母、免疫荧光以及外源性和... 详细信息

目的:应用酵母双杂交系统筛选与14-3-3ζ相互作用的蛋白,进一步鉴定其与Polo样激酶1(Plk1)相互作用。方法:构建pGBKT7-14-3-3ζ诱饵表达载体,筛选HeLa细胞cDNA文库中与14-3-3ζ相互作用蛋白,进一步通过共转酵母、免疫荧光以及外源性和内源性的细胞免疫共沉淀实验验证两者的相互作用。结果:通过酵母双杂交系统筛选出的阳性相互作用蛋白中包括Plk1,进一步通过共转酵母,外源性和内源性的细胞免疫共沉淀实验证实两者的相互作用,免疫荧光实验证实两者共定位于有丝分裂过程中胞质分裂期的中体。结论:Plk1是高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在中体的成熟,有丝分裂期染色体的分离,胞质分裂以及DNA的损伤应答等环节发挥重要作用,其与14-3-3ζ的相互作用为14-3-3蛋白家族参与有丝分裂(M期)的调控提供了直接证据。

关键词： 14-3-3蛋白 Polo样激酶1 酵母双杂交蛋白质相互作用有丝分裂

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日本血吸虫感染小鼠肝脏组织纤维化染色方法的比较

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中国血吸虫病防治杂志 2012年第4期24卷 468-470,F0003页

作者：黄大可张玉侠满素勤余发智沈际佳安徽医科大学综合实验室合肥230032 安徽医科大学病原生物学教研室安徽医科大学病理生理学教研室安徽医科大学基础医学院

目的比较Van Gieson氏染色和Masson氏三色染色法用于日本血吸虫感染小鼠肝脏纤维化染色的效果。方法建立日本血吸虫感染小鼠肝脏组织纤维化模型,取肝脏标本,常规切片,进行Van Gieson氏染色和Masson氏三色染色,应用图像分析软件统计虫卵... 详细信息

目的比较Van Gieson氏染色和Masson氏三色染色法用于日本血吸虫感染小鼠肝脏纤维化染色的效果。方法建立日本血吸虫感染小鼠肝脏组织纤维化模型,取肝脏标本,常规切片,进行Van Gieson氏染色和Masson氏三色染色,应用图像分析软件统计虫卵肉芽肿纤维化面积。结果染色时间为3～7 min时,2种方法显示肉芽肿纤维化面积差异无统计学意义(P>0.05);染色时间为10 min时,由于非特异性因素使得Masson氏染色法着色面积明显大于Van Gieson氏染色法,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论Van Gieson氏染色法比Masson氏三色操作过程相对简单,易于掌握,染色结果稳定、可靠,可以作为评价日本血吸虫感染小鼠肝脏纤维化程度的较好染色方法。

关键词：日本血吸虫肝脏纤维化 VanGieson氏染色 Masson染色

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心肌尔康对异丙肾上腺素致小鼠心室重构的保护作用及其机制

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中西医结合学报 2012年第3期10卷 330-336页

作者：高杉汪星辉黄玲玲余婷婷杜苏明郭言伟贾媛王键安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032 安徽中医学院安徽合肥230038

目的:研究心肌尔康对异丙肾上腺素致小鼠心室重构的保护作用并探讨其机制。方法:采用连续7 d皮下注射小剂量异丙肾上腺素的方法诱导小鼠心室重构模型。小鼠随机分为空白对照组,模型组,心肌尔康低、中、高剂量组,心肌尔康萃取水层组,心... 详细信息

目的:研究心肌尔康对异丙肾上腺素致小鼠心室重构的保护作用并探讨其机制。方法:采用连续7 d皮下注射小剂量异丙肾上腺素的方法诱导小鼠心室重构模型。小鼠随机分为空白对照组,模型组,心肌尔康低、中、高剂量组,心肌尔康萃取水层组,心肌尔康萃取正丁醇组和美托洛尔组,灌胃给药。实验结束时计算小鼠心脏质量指数,观察心肌病理形态学改变,比色法测定心肌组织中羟脯氨酸含量及血清中超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量。结果:与空白对照组相比,模型组小鼠心脏质量指数明显升高(P<0.01),血清超氧化物歧化酶活性下降,血清丙二醛含量升高(P<0.01)。与异丙肾上腺素组相比,心肌尔康能明显降低心脏质量指数(P<0.01),改善心肌病理学改变,抑制心肌组织中羟脯氨酸含量的增加(P<0.05),提高血清超氧化物歧化酶活性,降低血清丙二醛含量(P<0.01)。水层成分能明显抑制心肌细胞肥大(P<0.01),而正丁醇成分对心肌细胞肥大和心肌纤维化均有明显的抑制作用(P<0.01)。结论:心肌尔康对异丙肾上腺素诱导的小鼠心室重构具有保护作用,其机制可能与清除氧自由基,提高机体的抗氧化能力有关,而水层组和正丁醇组的药理学效应可能是通过非抗氧化应激途径产生。

关键词：复方异丙肾上腺素心室重构氧化性应激超氧化物歧化酶丙二醛小鼠

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原子吸收光谱法测定瑞舒伐他汀治疗组兔肝脏中的微量元素

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光谱实验室 2013年第2期30卷 536-540页

作者：吴允凯王虎韦文美顾志红汪渊安徽医科大学基础医学院化学教研室合肥市梅山路81号230032 安徽大学分析测试中心合肥市合肥市肥西路3号230039 安徽省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室合肥市梅山路81号230032

探讨实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn、Fe、Cu、Mn、Cr、Pb和Cd含量的变化。高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,然后给予瑞舒伐他汀建立治疗组模型,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn、F... 详细信息

探讨实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn、Fe、Cu、Mn、Cr、Pb和Cd含量的变化。高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,然后给予瑞舒伐他汀建立治疗组模型,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn、Fe、Cu、Mn、Cr、Pb和Cd的含量。高脂组肝脏组织Zn、Fe、Cu、Mn和Cr、Pb、Cd含量分别为86.09、277.1、11.07、5.366mg/kg和115.2、286.0、210.5μg/kg,治疗组肝脏组织Zn、Fe、Cu、Mn和Cr、Pb、Cd含量分别为102.1、239.3、9.442、5.911mg/kg和85.52、288.1、216.3μg/kg。经过瑞舒伐他汀治疗后,Zn、Mn含量升高,Fe、Cu、Cr含量下降,Pb和Cd基本不变。

关键词：原子吸收光谱法瑞舒伐他汀肝脏微量元素

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模块方式在蛋白质工程教学中的应用

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科技创新导报 2013年第2期10卷 163-163页

作者：左莉汪渊安徽医科大学基础医学院生物化学教研室安徽合肥230032

蛋白质工程是生物技术专业的专业课。医学院校的生物技术专业学生要结合临床,采用模块式教学,提出临床问题并解决问题。培养有专业特色的生物技术本科生。该文结合工作实践,探讨如何提高教学效果,激发学生的学习热情。

关键词：蛋白质工程生物技术模块教学

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睡眠剥夺大鼠腹外侧视前区腺苷水平的变化

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安徽医科大学学报 2012年第7期47卷 763-767页

作者：江传玮赵乐章张瑾尹豆吴芳王烈成安徽医科大学基础医学院生理学教研室合肥230032 安徽中医学院生理学教研室合肥230038

目的研究睡眠剥夺大鼠促睡眠中枢腹外侧视前区(VLPO)内腺苷变化规律。方法将SD大鼠随机分为对照组和睡眠剥夺组。采用脑立体定位、微透析、多导睡眠描计技术和高效液相色谱法观察两组大鼠的睡眠剥夺前、睡眠剥夺期以及睡眠剥夺后恢复期V... 详细信息

目的研究睡眠剥夺大鼠促睡眠中枢腹外侧视前区(VLPO)内腺苷变化规律。方法将SD大鼠随机分为对照组和睡眠剥夺组。采用脑立体定位、微透析、多导睡眠描计技术和高效液相色谱法观察两组大鼠的睡眠剥夺前、睡眠剥夺期以及睡眠剥夺后恢复期VLPO内腺苷含量变化。结果与对照组比较,睡眠剥夺组睡眠剥夺前觉醒(W)、非快速眼动(NREM)睡眠和快速眼动(REM)睡眠无明显变化;而在睡眠剥夺期W时间增加58.5%(P<0.01),NREM时间减少55.7%(P<0.01),REM时间差异无统计学意义;在睡眠剥夺后恢复期W时间减少18.4%(P<0.05),NREM时间增加17.4%(P<0.05),REM时间差异无统计学意义。与对照组比较,睡眠剥夺开始的2 h内睡眠剥夺组的VLPO内腺苷相对含量无显著变化。而随后的4 h VLPO内腺苷相对含量明显升高(P<0.05)。睡眠剥夺后恢复期的3 h内睡眠剥夺组的VLPO内腺苷相对含量显著减少(P<0.05)。结论腺苷在VLPO内参与睡眠-觉醒周期的调节。

关键词：腹外侧视前区腺苷睡眠觉醒

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晚期糖化终产物受体在小鼠急性肝损伤中的表达及意义

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安徽医科大学学报 2012年第2期47卷 116-121页

作者：胡梅琮胡涛靳小可黄大可张梅李群胡春松黄保军安徽医科大学免疫学教研室合肥230032 安徽医科大学病原和免疫学实验室合肥230032 安徽医科大学基础医学院综合实验室合肥230032

目的探讨晚期糖化终产物受体(RAGE)在刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠急性肝损伤中的表达及意义。方法将72只昆明种小鼠随机分为对照(NS)组、ConA组,分别于注射后2、6、12、18、24、48 h眼球取血并留取肝脏标本,用赖氏法检测血清中谷氨酸氨... 详细信息

目的探讨晚期糖化终产物受体(RAGE)在刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠急性肝损伤中的表达及意义。方法将72只昆明种小鼠随机分为对照(NS)组、ConA组,分别于注射后2、6、12、18、24、48 h眼球取血并留取肝脏标本,用赖氏法检测血清中谷氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)活力;HE染色法检查肝组织病理学改变;RT-PCR技术检测肝组织高迁移率族蛋白1(HMGB1)、RAGE、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-lβ)mRNA的表达;免疫组化法检测肝组织HMGB1蛋白的表达;Westernblot法检测肝组织RAGE蛋白的表达;ELISA法检测血清中TNF-α、IL-lβ含量。结果成功构建ConA诱导小鼠肝损伤模型;注射ConA 2 h肝组织中HMGB1 mRNA表达即增加,至18 h达峰值(P<0.01);HMGB1蛋白表达明显聚集于坏死区域;肝组织RAGE mRNA于12 h表达上调;RAGE蛋白的表达于24 h达到峰值,与NS组相比差异有统计学意义(P<0.01);肝组织TNF-αmRNA表达分别在6、24 h出现2个峰值,血清TNF-α含量在注射ConA 2 h达峰值(455.25 ng/L),随后逐渐减低,至48 h与NS组相比无明显差异;注射ConA各时间点小鼠肝组织与血清中IL-1β水平均显著高于NS组(P<0.01)。结论在ConA诱导小鼠急性肝损伤模型中,损伤肝组织RAGE的表达显著增加,这可能与诱导肝组织损伤中炎症因子的进一步产生有关。

关键词：刀豆蛋白A 肝损伤高迁移率族蛋白1 晚期糖化终产物受体肿瘤坏死因子α 白介素-1β

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^(153)Sm半乳糖多聚赖氨酸肝细胞靶向全肝照射治疗肝癌的实验研究

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中国肿瘤临床 2012年第14期29卷 949-951,961页

作者：刘艳迪刘江刘印忠常克力何景华天津市人民医院消化科天津市300121 天津医科大学附属肿瘤医院核医学科天津医科大学基础医学院药理教研室

目的:探讨利用乳糖化赖氨酸作为肝细胞靶向载体,将放射性核素^(153)Sm特异性地浓集至肝脏,用全肝内照射的方法治疗肝癌的可行性,为原发性肝癌的治疗提供依据方法:聚赖氨酸(poly-L-Lysine,PLL)和乳糖(lactose,Lac)经过常规偶联与纯化,合... 详细信息

目的:探讨利用乳糖化赖氨酸作为肝细胞靶向载体,将放射性核素^(153)Sm特异性地浓集至肝脏,用全肝内照射的方法治疗肝癌的可行性,为原发性肝癌的治疗提供依据方法:聚赖氨酸(poly-L-Lysine,PLL)和乳糖(lactose,Lac)经过常规偶联与纯化,合成产物采用环二乙基三胺五乙酸(Diethylene triamine pentacetate acid,DTPA)法标记^(153)Sm,得到放射性药物Lac-PLL-DT-PA-^(153)Sm,并进行了家免血浆药物代谢动力学检测构建大鼠肝癌模型,并观测Lac-PLL-DTPA-★★Sm在体内的分布情况。随后将模型随机分为两组,实验组尾静脉注入Lac-PLL-DTPA-^(153)Sm 3.64MBq,对照组注入Lac-PLL-DTPA。第14天处死大鼠剥离肿瘤结节,计算肿瘤体积。结果:静脉注射Lac-PLL-DTPA-^(153)Sm很快从血中分布到组织脏器中,其血浆药物浓度半衰期T_(1/2)为10 min结合内照射辐射计量学确定放射性药物的给药剂量为:1 091 MBq,与对照组比较,Lac-PLL-DTPA-^(153)Sm确实可以引起肿瘤缩小(P<0.01),而对肝功能无明显影响。结论:此方法治疗肝癌安全有效,为临床晚期肝癌的治疗提供了一种新方法,值得进一步研究。

关键词： ~153Sm 乳糖多聚赖氨酸肝癌

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