检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2023年第4期58卷 637-642页

作者：林燕妮吴淑蒙任鑫鑫谢天李玲叶棋浓山西医科大学基础医学院生物学教研室太原030000 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所细胞工程研究室北京100850

目的分析核Dbf2相关激酶1(NDR1)在肝癌中的表达和临床预后的意义,探究NDR1在肝癌细胞中的生物学功能及其调控机制。方法利用ENCORI数据库分析NDR1在肝癌组织及正常组织中的表达水平及其与肝癌患者生存率的关系。构建MYC-NDR1真核表达... 详细信息

目的分析核Dbf2相关激酶1(NDR1)在肝癌中的表达和临床预后的意义,探究NDR1在肝癌细胞中的生物学功能及其调控机制。方法利用ENCORI数据库分析NDR1在肝癌组织及正常组织中的表达水平及其与肝癌患者生存率的关系。构建MYC-NDR1真核表达载体,转染肝癌HepG2细胞,通过蛋白质印迹法(Western blot)验证其表达;利用CCK-8法、细胞克隆形成实验和划痕实验分别检测细胞增殖和迁移能力。利用ENCORI数据库分析NDR1与c-Myc表达的相关性,并利用蛋白质合成抑制剂环己酰亚胺(CHX)加药实验研究NDR1与c-Myc蛋白的关系。结果 ENCORI数据库分析显示,NDR1在肝癌组织中的表达高于正常组织且NDR1高表达患者总生存率低于低表达患者,差异有统计学意义(P<0.001);Western blot检测到MYC-NDR1蛋白条带;CCK-8法结果显示,MYC-NDR1组细胞生长速度快于空载体组(P<0.001);细胞克隆形成实验显示,MYC-NDR1组的克隆数高于空载体组(P<0.001);细胞划痕实验显示,MYC-NDR1组平均迁移距离大于空载体组(P<0.001);ENCORI数据库分析显示,NDR1与c-Myc表达有着相关性(R=0.184,P<0.001);CHX加药实验显示,在相同时间内,MYC-NDR1组中c-Myc蛋白的减少量低于空载体组。结论 NDR1在肝癌组织中高表达,与肝癌患者预后不良紧密相关,并与c-Myc基因的表达呈正相关;该研究成功构建了MYC-NDR1真核表达载体,表达产物MYC-NDR1能够增加c-Myc蛋白的稳定性,促进人肝癌细胞增殖和迁移。

关键词： NDR1 真核表达载体肝癌 c-Myc

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乳铁蛋白六肽降低人卵巢癌细胞的耐药性及其机制

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安徽医科大学学报 2021年第10期56卷 1595-1601,1611页

作者：刘会郭若文徐恰刘力伟刘芸秦宜德安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学基础医学院免疫教研室合肥230032

目的研究乳铁蛋白六肽(LfcinB4-9)降低人卵巢癌细胞的耐药性并探究其作用可能的机制。方法MTT检测顺铂(DDP)联合LfcinB4-9对人卵巢癌细胞SKOV3、SKOV3/DDP、CI3K、CI3K/DDP的增殖抑制;HE细胞染色切片实验检测人卵巢细胞经加药处理后细... 详细信息

目的研究乳铁蛋白六肽(LfcinB4-9)降低人卵巢癌细胞的耐药性并探究其作用可能的机制。方法MTT检测顺铂(DDP)联合LfcinB4-9对人卵巢癌细胞SKOV3、SKOV3/DDP、CI3K、CI3K/DDP的增殖抑制;HE细胞染色切片实验检测人卵巢细胞经加药处理后细胞形态发生的变化;平板克隆实验检测DDP联合LfcinB4-9对人卵巢癌细胞克隆形成能力的影响;Transwell实验检测DDP联合LfcinB4-9对人卵巢癌细胞侵袭能力的影响;qRT-PCR检测人卵巢癌细胞在LfcinB4-9和DDP联合处理下HSF1、HSP70、OPTN等基因的表达情况。结果LfcinB4-9和DDP联合作用对卵巢癌细胞的抑制率明显高于DDP单独作用组(P<0.05或P<0.01),人卵巢细胞经DDP联合LfcinB4-9作用后细胞形态变化显著大于DDP单独作用组,与DDP单独组相比,DDP联合LfcinB4-9作用后人卵巢癌细胞克隆形成能力和侵袭能力均显著降低(P<0.05或P<0.01)。qRT-PCR实验显示,DDP联合LfcinB4-9时HSF1、HSP70、OPTN等耐药相关基因表达显著低于对照组和DDP单独组。结论LfcinB4-9与DDP联合作用后明显增强了卵巢癌细胞对DDP的敏感性,其作用是通过降低HSF1、HSP70、OPTN等基因表达,通过HSF1-HSP70-耐药蛋白的信号途径来实现的。

关键词：卵巢癌细胞乳铁蛋白六肽顺铂耐药性基因表达

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弓形虫MIC1、MIC6和ROP18混合蛋白对小鼠的免疫保护作用

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中国动物传染病学报 2024年第3期32卷 34-41页

作者：李虎朱进进李婧旸韩成建余莉病原生物学安徽省重点实验室安徽省高校人畜共患病重点实验室安徽医科大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室合肥230032 安徽医科大学合肥第三临床学院合肥市第三人民医院检验科合肥230032

为评估弓形虫微线体蛋白MIC1、MIC6和棒状体蛋白ROP18组成的重组疫苗对BALB/c小鼠的免疫保护作用,我们将重组表达的MIC1、MIC6和ROP18三种蛋白进行不同的组合,并联合弗氏佐剂通过皮下注射的方式免疫小鼠。用ELISA技术检测免疫后小鼠血... 详细信息

为评估弓形虫微线体蛋白MIC1、MIC6和棒状体蛋白ROP18组成的重组疫苗对BALB/c小鼠的免疫保护作用,我们将重组表达的MIC1、MIC6和ROP18三种蛋白进行不同的组合,并联合弗氏佐剂通过皮下注射的方式免疫小鼠。用ELISA技术检测免疫后小鼠血清特异性抗体,以及免疫蛋白刺激后脾细胞培养上清中各细胞因子的水平,通过脾淋巴细胞增殖实验检测脾淋巴细胞增殖情况。最后一次免疫后,用弓形虫WH3强毒株攻击,观察并记录小鼠的存活情况。结果表明,与对照PBS组相比,蛋白免疫组产生高滴度的IgG和IgG亚型(IgG1和IgG2a)抗体,滴度可高达1∶128000。细胞因子IL-4、IL-10和IFN-γ表达水平不同程度地升高,并且重组蛋白能够诱导淋巴细胞特异性增殖。免疫组小鼠的生存时间较对照组有所延长,其中MIC6-ROP18组延长时间最长(P<0.01)。MIC1、MIC6和ROP18组成的重组疫苗能诱导小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫应答,其中MIC6-ROP18蛋白组合的免疫保护效果更为明显,但仍需进一步改进。本研究为弓形虫疫苗的研发提供了思路。

关键词：弓形虫疫苗重组蛋白 MIC1 MIC6 ROP18

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去泛素化酶JOSD2促进肝癌细胞的存活和转移

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中国生物化学与分子生物学报 2022年第6期38卷 762-771页

作者：韩祯祯刘禹辰王建安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 军事医学研究院生命组学研究所北京102206

蛋白质泛素化是一种可逆的蛋白质翻译后修饰,在信号转导和蛋白质稳定性调控中发挥关键作用。去泛素化酶调控在许多种肿瘤中的作用机制尚不清楚。本文对63种去泛素化酶在肝细胞癌病人的生存和预后进行分析,发现去泛素化酶JOSD2(josephin ... 详细信息

蛋白质泛素化是一种可逆的蛋白质翻译后修饰,在信号转导和蛋白质稳定性调控中发挥关键作用。去泛素化酶调控在许多种肿瘤中的作用机制尚不清楚。本文对63种去泛素化酶在肝细胞癌病人的生存和预后进行分析,发现去泛素化酶JOSD2(josephin domain containing 2)在肝细胞癌组织中表达显著高于癌旁(P<0.0001),且与总生存期相关(P<0.05)。JOSD2属于去泛素化酶MJD(machado josephin domain)亚家族成员,该家族其它成员与肝细胞癌发生无显著的相关性。对TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据中JOSD2高表达样本和低表达样本的差异基因进行功能富集分析,显示JOSD2高表达样本中与细胞增殖相关通路显著富集(FDR<0.05)。在肝癌细胞系中过表达JOSD2,发现其能促进肝癌细胞的存活、迁移和侵袭(P<0.01)。综上所述,本文发现去泛素化酶JOSD2在肝细胞癌组织中高表达,高表达JOSD2的肝细胞癌病人总生存期显著降低(P=0.041),过表达JOSD2能促进肝癌细胞的存活和转移,提示JOSD2可能促进肝细胞癌的转移。

关键词：肝细胞癌去泛素化酶泛素化 JOSD2

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刚地弓形虫致密颗粒蛋白3基因缺陷虫株的构建及毒力鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2025年

作者：王佩豪吴敏敏都建安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室感染性疾病研究中心安徽医科大学人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽医科大学第一附属医院检验科

目的构建刚地弓形虫ME49株致密颗粒蛋白3（dense granule protein 3,GRA3）基因缺陷虫株并鉴定其毒力。方法利用规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白9 [clustered regularly interspaced short palindromic repeats（C RISPR）/CR... 详细信息

目的构建刚地弓形虫ME49株致密颗粒蛋白3（dense granule protein 3,GRA3）基因缺陷虫株并鉴定其毒力。方法利用规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白9 [clustered regularly interspaced short palindromic repeats（C RISPR）/CRISPR-associated protein9,CRISPR/Cas9]技术构建基因缺陷虫株。使用E-CRISPR软件设计向导RNA（guide RNA,gRNA）,利用Q5定点突变试剂盒突变pSAG1::Cas9-U6::sgUPRT质粒上的gRNA,构建pSAG1::Cas9-U6::sgGRA3质粒。构建一个含有GRA3基因上游序列、乙胺嘧啶抗性基因二氢叶酸还原酶胸苷酸合酶（dihydrofolate reductase-thymidylate synthase,DHFR-TS）和GRA3基因下游序列的GRA3基因供体质粒,并通过PCR扩增出GRA3基因供体DNA。将pSAG1::Cas9-U6::sgGRA3质粒和GRA3基因供体DNA电穿孔转染野生型刚地弓形虫ME49速殖子,电转后的虫株悬液接种于人包皮成纤维（human foreskin fibroblast,HFF）细胞中,并用乙胺嘧啶进行筛选,获得乙胺嘧啶抗性虫株后进行单克隆筛选,采用PCR和Western blotting鉴定弓形虫GRA3基因缺陷单克隆株ME49Δgra3,采用Western blotting检测弓形虫ME49Δgra3株中GRA3蛋白表达水平。将新鲜裂解的弓形虫ME49株和ME49Δgra3株速殖子各1 000个加入接种有HFF细胞的12孔板中,置于37℃含5%CO2的细胞培养箱中培养7d,以结晶紫染液染色法计数空斑数量。采用吉姆萨染色法对弓形虫ME49株和ME49Δgra3株速殖子感染的HFF细胞染色,计数细胞中含有1、2、4个和>4个弓形虫纳虫泡数量的细胞。比较弓形虫ME49株和ME49Δgra3株感染的C57BL/6小鼠35 d存活率。结果 PCR扩增发现,DHFR-TS基因上、下游同源臂条带在弓形虫ME49Δgra3株中均成功扩增,ME49株未扩增出相应条带;GRA3基因条带在弓形虫ME49株中成功扩增,ME49Δgra3株未扩增出GRA3基因条带但扩增出含DHFR-TS基因的条带。Western blotting检测发现,弓形虫ME49Δgra3株中未见GRA3蛋白表达。弓形虫ME49株平均形成（352.67±26.39）个空斑、ME49Δgra3株平均形成（235.00±26.29）个空斑,差异有统计学意义（t=5.472,P<0.01）。吉姆萨染色结果显示,弓形虫ME49株感染的HFF细胞中,纳虫泡内至少含有4个弓形虫速殖子的比例为（75.67±2.52）%,高于ME49Δgra3株感染组的（59.67±2.31）%（t=8.113,P<0.01）;纳虫泡内含有1个或2个弓形虫速殖子的比例为（24.33±2.52）%,低于ME49Δgra3株感染组的（40.33±2.31）%（t=-8.113,P<0.01）。感染弓形虫ME49株和ME49Δgra3株的小鼠分别自感染后第8、9天开始死亡,感染后第35 d存活率分别为10%（1/10）和70%（7/10）,差异具有统计学意义（χ2=6.762,P<0.01）。结论成功构建了刚地弓形虫ME49Δgra3株,GRA3蛋白可能增强弓形虫ME49株毒力。

关键词：刚地弓形虫致密颗粒蛋白3 基因缺陷规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白9 毒力

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IL-1β诱导甲状腺细胞UGRP1表达及其与Fas/FasL介导凋亡的相关性

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安徽医科大学学报 2022年第7期57卷 1073-1077页

作者：陈翠萍李阿楠任翠平沈际佳左春林安徽医科大学第一附属医院内分泌科合肥230022 安徽医科大学基础医学院微生物与寄生虫学教研室合肥230032

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)诱导甲状腺细胞子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)的表达及其与Fas/FasL介导细胞凋亡的相关性。方法设立对照组、IL-1β组、IL-1β+抗FasL抗体组,体外培养大鼠甲状腺细胞(FRTL-5细胞),采用Real-time PCR法检测... 详细信息

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)诱导甲状腺细胞子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)的表达及其与Fas/FasL介导细胞凋亡的相关性。方法设立对照组、IL-1β组、IL-1β+抗FasL抗体组,体外培养大鼠甲状腺细胞(FRTL-5细胞),采用Real-time PCR法检测各组细胞UGRP1及Fas mRNA表达水平;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果与对照组比较,IL-1β组、IL-1β+抗FasL抗体组UGRP1及Fas mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,IL-1β组甲状腺细胞早期凋亡率升高(7.49%±1.91%vs 28.46%±3.17%),差异有统计学意义(P<0.001),与IL-1β组比较,IL-1β+抗FasL抗体组甲状腺细胞早期凋亡率降低(28.46%±3.17%vs 19.20%±1.75%),差异有统计学意义(P<0.05);与IL-1β组比较,IL-1β+抗FasL抗体组UGRP1 mRNA(2.22±0.31 vs 2.66±0.28)及Fas mRNA(2.75±0.18 vs 3.03±0.16)表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-1β诱导甲状腺细胞UGRP1与Fas高表达以及细胞凋亡,UGRP1高表达与Fas/FasL介导的细胞凋亡不相关。

关键词：白细胞介素-1β 子宫球蛋白相关蛋白1 Fas/FasL通路凋亡自身免疫性甲状腺病

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新型冠状病毒变异株以及疫苗研究现况

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安徽预防医学杂志 2022年第1期28卷 1-8,12页

作者：新宇赵雪柳燕安徽医科大学基础医学院微生物教研室安徽合肥230032

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在世界各地大肆传播,由此感染导致的新型冠状病毒肺炎,其致病性和传播性很强,对全球的公共卫生安全产生了极大威胁。接种新冠疫苗是目前预防新冠病毒感染的最有效途径,针对新冠病毒设计的疫苗类型主要有:灭活... 详细信息

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在世界各地大肆传播,由此感染导致的新型冠状病毒肺炎,其致病性和传播性很强,对全球的公共卫生安全产生了极大威胁。接种新冠疫苗是目前预防新冠病毒感染的最有效途径,针对新冠病毒设计的疫苗类型主要有:灭活疫苗、减毒活疫苗、病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗和核酸疫苗等。新冠病毒为了进一步适应宿主细胞,其基因组发生突变,变异株较原始毒株的传播力、致病力增强,目前对于变异株的突变主要关注于S蛋白上的氨基酸位点变异。世界卫生组织(WHO)将变异株划分为“关切变异株(VOC)”和“关注变异株(VOI)”,主要关切变异株包含Alpha(B.1.1.7)变异株、Beta(B.1351)变异株、Gamma(P.1)变异株、Delta(B.1.617.2)变异株以及Omicron(B.1.1.529)变异株。现有疫苗对变异株的免疫效力降低,因此随变异株的出现,需要改变应对策略,如针对变异株进行疫苗研制、提高加强针接种率等。本文将对SARA-CoV-2的概况、变异株以及疫苗研发等进行综述。

关键词：新型冠状病毒新冠疫苗病毒变异

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新医科背景下对生物化学课堂“以赛促教”教学改革实践策略

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中国科技经济新闻数据库教育 2024年第12期 091-095页

作者：王秀云范新炯王凯安徽医科大学基础医学院生物化学教研室安徽合肥230032 安徽医学高等专科学校医学技术学院生物化学教研室安徽合肥230032

随着《健康中国2030》战略的提出,中国医学教育面临新的挑战与机遇,教育部推动的“四新”建设明确了新医科教育的方向。新医科强调医学与其他学科的交叉融合,特别是在精准医疗和转化医学等创新领域中的应用。本研究聚焦于《生物化学》... 详细信息

随着《健康中国2030》战略的提出,中国医学教育面临新的挑战与机遇,教育部推动的“四新”建设明确了新医科教育的方向。新医科强调医学与其他学科的交叉融合,特别是在精准医疗和转化医学等创新领域中的应用。本研究聚焦于《生物化学》这一基础医学课程,探讨了“以赛促教”模式在新医科背景下推动教学改革的实践与成效。通过参与全国高校教师教学创新大赛,本研究收集了丰富的经验和教训,提出了一系列课程改革措施。这些措施包括增强课程理论与实践的结合、科研思维的培养以及考核体系的优化,旨在提高教学质量并满足医学人才培养的新要求。研究结果显示,通过课程改革,学生的学习兴趣、自主学习能力和团队协作精神得到了显著提升,同时教学内容与国际医学教育标准更加接轨,为培养符合国情的医学人才奠定了基础。“以赛促教”的方式对于高校教师改进课程设计是必要的,提出了《生物化学》课程的改革,让学生将理论知识做成体系并且可以知道如何运用课堂上学到的《生物化学》理论知识。

关键词：新医科以赛促教生物化学教学改革

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羊毛固醇合成酶抑制剂对KCs细胞分化和凋亡的影响

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安徽医科大学学报 2022年第2期57卷 173-177页

作者：刘莉顾亚男李名聪黄依璇张胜权安徽医科大学科研实验中心基础医学院生物化学与分子生物学教研室第一临床医学院合肥230032

目的探究单独应用羊毛固醇合成酶抑制剂(RO)或联合胆固醇(CH)刺激皮肤角质形成细胞(KCs)后对其分化及凋亡的影响。方法RO单独或联合CH于KCs共培养不同时间后,加入Ca^(2+)(1.8 mmol/L)处理1d,Western blot法分析KCs的分化相关蛋白角皮蛋... 详细信息

目的探究单独应用羊毛固醇合成酶抑制剂(RO)或联合胆固醇(CH)刺激皮肤角质形成细胞(KCs)后对其分化及凋亡的影响。方法RO单独或联合CH于KCs共培养不同时间后,加入Ca^(2+)(1.8 mmol/L)处理1d,Western blot法分析KCs的分化相关蛋白角皮蛋白(INV)和兜甲蛋白的表达;RO单独或联合CH与KCs共培养不同时间后,流式细胞术检测KCs细胞凋亡变化和Western blot法验证凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达。结果RO下调KCs,Ca^(2+)诱导的分化标志蛋白INV的表达,对Loricrin表达抑制作用较弱,而CH没有表现出对RO的拮抗效应;RO诱导KCs细胞凋亡并呈时间依赖性,CH能够拮抗RO对KCs的诱导凋亡作用;RO单独应用时细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达均受到抑制,联合CH应用能部分拮抗RO对Bcl-2表达抑制作用,对Bax的表达抑制无显著影响;RO能时间依赖性降低Bcl-2/Bax的比值,CH能部分减弱RO对Bcl-2/Bax比值的影响。结论RO可能通过下调Loricrin、Bcl-2的表达,进而抑制KCs分化和诱导KCs细胞凋亡。

关键词：毛固醇合成酶抑制剂胆固醇角质形成细胞细胞分化细胞凋亡

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翻转课堂在人体寄生虫学课程线上教学中的应用

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热带病与寄生虫学 2023年第4期21卷 243-245页

作者：邵伟陶芸周倩倩刘淼计永胜沈际佳安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室安徽医科大学临床医学院中国科学技术大学生命科学与医学部

2020年以来，受新型冠状病毒感染疫情的影响，线上教学成为高校的主要教学方式之一。本文以人体寄生虫学课程为例，分析了该课程线上教学的优势和问题，并从课程设计、课堂实践、教学反思等方面对安徽医科大学病原生物学教研室线上翻转... 详细信息

2020年以来，受新型冠状病毒感染疫情的影响，线上教学成为高校的主要教学方式之一。本文以人体寄生虫学课程为例，分析了该课程线上教学的优势和问题，并从课程设计、课堂实践、教学反思等方面对安徽医科大学病原生物学教研室线上翻转课堂的教学实践进行总结，以期为今后高校的线上教学提供参考。

关键词：人体寄生虫学线上教学翻转课堂

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