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PI3K/AKT/GSK-3β信号通路在高尿酸血症大鼠尿酸、血糖及脂质代谢中的作用机制

新疆医科大学学报 2024年第8期47卷 1066-1072页

作者：巩雪俐王金洋杨烨新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学临床医学部乌鲁木齐830017 新疆医科大学第二附属医院老年科干部病房乌鲁木齐:830063

目的研究PI3K/AKT/GSK-3β信号通路在高尿酸血症大鼠尿酸、血糖及脂质代谢中的作用机制。方法取40只SD大鼠随机分为4组,其中2组为未建模SD大鼠,分别为模型对照组(C组)、LY294002组(L组),剩余2组为建模成功的SD大鼠,分为高尿酸血症组(H... 详细信息

目的研究PI3K/AKT/GSK-3β信号通路在高尿酸血症大鼠尿酸、血糖及脂质代谢中的作用机制。方法取40只SD大鼠随机分为4组,其中2组为未建模SD大鼠,分别为模型对照组(C组)、LY294002组(L组),剩余2组为建模成功的SD大鼠,分为高尿酸血症组(H组)和高尿酸血症加LY294002干预组(HL组)。C组大鼠经口给予纯水(10 mL/kg体重)和腹腔注射0.2%二甲基亚砜溶液(6 mL/kg体重);L组大鼠给予相同剂量的纯水和腹腔注射LY294002溶液(6 mL/kg体重);H组大鼠经口给予腺嘌呤(100 mg/kg体重)和乙胺丁醇(250 mg/kg体重);HL组大鼠在给予相同剂量的腺嘌呤和乙胺丁醇的同时腹腔注射LY294002溶液(6 mL/kg体重)。各组持续干预15 d,每3天从眼眶静脉丛采集血样,测定血尿酸(Uric Acid, UA)、肌酐(Serum Creatinine, Scr)、尿素氮(Blood Urea Nitrogen, BUN)、血糖(Glucose, GLU)、甘油三酯(Triglyceride, TG)、胆固醇(Total Cholesterol, TC)。第15天麻醉后采集各组大鼠肾脏组织,采用荧光定量PCR法和Western blotting法检测大鼠肾脏组织中PI3K/AKT/GSK-3β的表达水平。结果 4组C组、L组、H组和HL组大鼠实验前血清尿酸、肌酐、尿素氮、血糖、甘油三酯和胆固醇水平差异无统计学意义(P<0.05)。H组和HL组大鼠UA、Scr、BUN水平在实验后均高于C组和L组,与C组第6天比较,H组和HL组UA水平降低,第9天至第15天UA水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。L组、H组和HL组GLU水平较C组升高,其中L组在第12天,GLU水平高于C组,H组和HL组在实验第6天,GLU水平高于L组,差异有统计学意义(P均<0.05)。H组和HL组TC、TG水平较H组和L组升高,其中HL组在实验第9天,TG水平高于H组,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光定量PCR检测结果显示,与C组比较,H组和HL组PI3K、AKT、GSK-3β增大,L组AKT减小,差异有统计学意义(P均<0.05)。与L组比较,H组和HL组PI3K、AKTGSK-3β增大,差异有统计学意义(P均<0.05)。与H组比较,HL组PI3K、AKT和GSK-3β增大,差异有统计学意义(P均<0.05)。Western-Blot结果显示,与C组比较,H组和HL组PI3K、AKT、GSK-3β增大,差异有统计学意义(P均<0.05)。与L组比较,H组和HL组PI3K、AKTGSK-3β增大,差异有统计学意义(P均<0.05)。与H组比较,HL组PI3K、AKT和GSK-3β增大,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 PI3K/AKT/GSK-3β信号通路与高尿酸血症之间存在联系,提示该通路对治疗和预防高尿酸血症具有重要意义。

关键词：高尿酸血症尿酸 PI3K/AKT/GSK-3β信号通路代谢作用机制

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五年制临床医学专业生命的化学课程整合探索

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基础医学教育 2022年第5期24卷 323-325页

作者：鲁云霞张利平胡金兰许功林查晓军李静耿慧武贾雪梅安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学生命科学学院细胞生物学教研室安徽医科大学基础医学院生理学教研室安徽医科大学基础医学院/临床医学院组织胚胎学教研室

医学课程体系的整合是培养21世纪复合型医学人才的必由之路。2013年以来,安徽医科大学开始了五年制临床医学专业整合课程的教学改革试点,其中生物化学与分子生物学和细胞生物学被整合为生命的化学。整合课程在实施过程中组织了跨学科教... 详细信息

医学课程体系的整合是培养21世纪复合型医学人才的必由之路。2013年以来,安徽医科大学开始了五年制临床医学专业整合课程的教学改革试点,其中生物化学与分子生物学和细胞生物学被整合为生命的化学。整合课程在实施过程中组织了跨学科教学团队,在原有生物化学和细胞生物学整合的基础上添加了原生理学中细胞的生物电专业知识,创新了教学内容,贯彻了以学生为中心和自主学习的教学理念;逐渐摸索建立了形成性评价体系进行课程考核和成绩评定,取得了较好的教学效果。

关键词：生命的化学生物化学细胞生物学课程整合教学改革

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中药大承气汤改良方对术后肠梗阻小鼠胃肠功能的影响及机制研究

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中国病理生理杂志 2021年第3期37卷 466-474页

作者：李敏林思思刘胜远徐晓娟李琨李永渝刘晓红遵义医科大学基础医学院生理教研室贵州遵义563000 遵义医药高等专科学校生理教研室贵州遵义563000 同济大学医学院病理生理教研室上海200092 遵义医科大学附属医院外科贵州遵义563000

目的:探讨中药大承气汤改良方(Da-Cheng-Qi-Tang,DCQT)对实验性术后肠梗阻(postoperative ileus,POI)小鼠胃肠功能的影响及机制。方法:实验设24 h和48 h两个观测时点,用成年C57BL/6小鼠各24只,雌雄不拘,随机均分成4组:对照(control)组(n... 详细信息

目的:探讨中药大承气汤改良方(Da-Cheng-Qi-Tang,DCQT)对实验性术后肠梗阻(postoperative ileus,POI)小鼠胃肠功能的影响及机制。方法:实验设24 h和48 h两个观测时点,用成年C57BL/6小鼠各24只,雌雄不拘,随机均分成4组:对照(control)组(n=6)、假手术(sham)组(n=6)、POI组(n=6)和POI+DCQT组(n=6)。通过经典小肠干扰术诱导POI模型。术后以饮用水(control、sham和POI组)或DCQT(POI+DCQT组)灌胃,每天2次。术后24 h和48 h观测小鼠胃肠运动功能、肠道组织结构、局部神经递质及血清胃肠肽水平;用16S rRNA高通量测序检测肠黏膜菌群结构及其多样性,用高通量液体芯片检测血清促炎细胞因子的水平。结果:与control组或sham组比较,POI组小鼠胃肠排推运动减慢,肠黏膜充血水肿,肠道细菌结构和多样性发生改变,这些变化在DCQT处理后有不同程度减轻。在POI组,无论术后24 h或48 h,血清促炎细胞因子白细胞介素1α(interleukin-1α,IL-1α)、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平均较control组或sham组显著升高(P<0.05或P<0.01),单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和IL-17水平在24 h显著升高(P<0.05);同时,POI组小鼠血清血管活性肠肽(vasoactive inestinal peptide,VIP)水平显著升高,胃动素(motilin,MTL)水平显著降低,回肠和结肠组织中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)水平显著降低,组胺(histamine,HIS)水平显著升高(P<0.05或P<0.01);用DCQT处理后上述变化均有不同程度逆转(P<0.05或P<0.01)。结论:DCQT可有效改善POI小鼠的胃肠道运动功能,减轻炎症反应,调节肠道黏膜细菌的变化和胃肠肽的失衡。

关键词：大承气汤术后肠梗阻肠道菌群胃肠运动胃肠肽

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生理性和病理性心肌肥厚组织中心钠素表达的差异研究

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中国临床新医学 2022年第7期15卷 614-617页

作者：李正宽孙湛包雅丽麦丽克扎提·阿不都热西提新疆医科大学基础医学院病理生理教研室乌鲁木齐830054

目的研究心钠素(ANP)在生理性和病理性心肌肥厚组织中表达的差异及其在心肌肥厚发生、发展中的作用。方法选择无特定病原体(SPF)级8周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠15只,随机分为对照组(CON组)、异丙肾上腺素组(ISO组)和运动组(EXE组),... 详细信息

目的研究心钠素(ANP)在生理性和病理性心肌肥厚组织中表达的差异及其在心肌肥厚发生、发展中的作用。方法选择无特定病原体(SPF)级8周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠15只,随机分为对照组(CON组)、异丙肾上腺素组(ISO组)和运动组(EXE组),每组5只。ISO组通过颈部多点皮下注射异丙肾上腺素构建病理性心肌肥厚模型。EXE组采用有氧运动(游泳)诱导生理性心肌肥厚。CON组不予特殊干预。在第8周末采用过量麻醉法处死大鼠,取心脏组织。采用HE染色法观察心脏组织病理、生理改变情况。采用Western-blot法和免疫组化染色法检测三组心肌组织中ANP的表达情况。结果与CON组相比,EXE组和ISO组的心肌纤维明显增粗,且ISO组还出现了心肌纤维间隙增宽、排列紊乱等结构受损的特征,而EXE组的心肌纤维则排列整齐,结构完整。ANP主要表达于心肌细胞的胞浆中,ISO组ANP表达水平高于EXE组和CON组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ANP在病理性心肌肥厚组织中表达升高,可作为鉴别生理性和病理性心肌肥厚的辅助性指标。

关键词：生理性心肌肥厚病理性心肌肥厚心钠素

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乳腺癌HER-2免疫组化简易质控芯片的应用

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临床与实验病理学杂志 2021年第5期37卷 618-619页

作者：王弦江冬瑞李晓灿黄成晨吴强安徽医科大学第二附属医院病理科合肥230601 安徽医科大学基础医学院病理学教研室合肥230032

HER-2基因属于原癌基因,HER-2阳性乳腺癌恶性程度较高且易复发转移。目前国内外已有针对HER-2基因过表达的靶向药物(赫赛汀),可大大降低乳腺癌患者的恶性风险。因此,确定乳腺癌HER-2的状态非常重要。针对HER-2的检测方法主要有免疫组化... 详细信息

HER-2基因属于原癌基因,HER-2阳性乳腺癌恶性程度较高且易复发转移。目前国内外已有针对HER-2基因过表达的靶向药物(赫赛汀),可大大降低乳腺癌患者的恶性风险。因此,确定乳腺癌HER-2的状态非常重要。针对HER-2的检测方法主要有免疫组化法和原位杂交法,原位杂交法中荧光原位杂交法效果最佳,其是直接针对HER-2基因扩增检测,并设置了17号染色体着丝粒作为内对照[1-2],但该方法对实验设备、操作人员要求均较高,检测费用是免疫组化法的10~15倍。因此,乳腺癌患者应先行HER-2免疫组化检测,如果判读为2+,可再行荧光原位杂交法检测。然而,国内医院病理科因检测水平参差不齐、主观判读因素及抗体原因,导致HER-2判读为2+的检测可重复性不高。因此,免疫组化法检测乳腺癌患者HER-2表达添加质控对照显得尤为重要。本科室在多年标准化检测HER-2的基础上,利用组织芯片的原理并借鉴成功经验[3],摸索出制作乳腺癌HER-2免疫组化简易芯片对照的方法,可使染色结果判读更为客观,效果良好,现介绍如下。

关键词：乳腺肿瘤 HER-2基因免疫组织化学质控芯片

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基于串联质谱标签技术结合IPA生物信息学平台的弱精子症患者精子蛋白质组学研究

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中国男科学杂志 2024年第3期38卷 3-10页

作者：沙丽帕·艾尼瓦尔马文静张盼盼王晓军西尔艾力·买买提阿地力江·伊明新疆医科大学基础医学院生物学教研室新疆乌鲁木齐830017 新疆医科大学中心实验室新疆乌鲁木齐830017 新疆医科大学基础医学院人体解剖教研室新疆乌鲁木齐830017 乌鲁木齐市妇幼保健院新疆人类精子库新疆乌鲁木齐830001 新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室新疆乌鲁木齐830017 新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830017

目的应用串联质谱标签(TMT)标记技术结合IPA生物信息分析平台开展弱精子症患者精子蛋白质组学研究,为进一步研究弱精子症发病机制提供新的思路和依据。方法随机选取30例男性健康体检者和弱精子症患者的精子标本,通过TMT技术进行蛋白质... 详细信息

目的应用串联质谱标签(TMT)标记技术结合IPA生物信息分析平台开展弱精子症患者精子蛋白质组学研究,为进一步研究弱精子症发病机制提供新的思路和依据。方法随机选取30例男性健康体检者和弱精子症患者的精子标本,通过TMT技术进行蛋白质组学分析。以P<0.05且表达倍数>1.7或<0.588为标准,构建候选差异蛋白质体系,利用IPA生物信息学分析平台对候选差异蛋白质进行生物信息学分析。结果通过蛋白质组学技术获得89种弱精子症患者精子候选差异蛋白质,73种蛋白质表达上调,16种蛋白质表达下调。通过IPA分析发现弱精子症患者精子候选差异蛋白质中有4种蛋白质与凋亡相关,2种蛋白质与自噬相关,1种蛋白质与雄激素相关,10种蛋白质与免疫相关,2种蛋白质与炎症有关。差异表达的蛋白质参与的主要生物学过程为蛋白质的内质网定位和核转录的mRNA分解等过程,涉及的典型信号通路为Sirtuins、蛋白激酶A和mTOR信号通路等,并获取4种与弱精子症疾病相关的候选标志物。结论弱精子症的发生与凋亡、自噬、雄激素异常、免疫及炎症等改变密切相关,但需在验证的基础上进一步研究,同时弱精子症患者精子差异蛋白质涉及复杂的生物学过程、分子功能和信号通路,为开展其发病机制研究奠定了基础。

关键词：弱精子症计算生物学蛋白质组学

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甘露糖加重载脂蛋白E缺陷小鼠的脂蛋白代谢紊乱

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海军军医大学学报 2023年第8期44卷 925-931页

作者：王珏睿成晓翠余征真刘亚晋章卫平天津医科大学朱宪彝纪念医院&天津市内分泌研究所国家卫生健康委员会激素与发育重点实验室天津300134 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院病理生理学教研室上海200433

目的探讨甘露糖暴露对载脂蛋白(Apo)E缺陷小鼠高脂血症的影响及机制。方法10只6周龄雄性ApoE基因缺陷小鼠采用高脂高胆固醇纯化饲料建立小鼠高脂血症模型,并分为对照组和甘露糖干预组,每组5只。对照组饲喂普通饮用水,甘露糖干预组饲喂含... 详细信息

目的探讨甘露糖暴露对载脂蛋白(Apo)E缺陷小鼠高脂血症的影响及机制。方法10只6周龄雄性ApoE基因缺陷小鼠采用高脂高胆固醇纯化饲料建立小鼠高脂血症模型,并分为对照组和甘露糖干预组,每组5只。对照组饲喂普通饮用水,甘露糖干预组饲喂含2%(质量体积分数)甘露糖的饮用水,持续4周。利用试剂盒检测小鼠血浆总胆固醇及甘油三酯水平,采用快速蛋白液相色谱法分离小鼠血浆脂蛋白并检测Apo和胆固醇水平,采用qPCR和蛋白质印迹法分别检测小鼠肝脏和肠道组织中脂蛋白代谢相关基因的mRNA和蛋白水平。结果与对照组相比,甘露糖干预组小鼠的血浆甘油三酯和总胆固醇水平升高(P<0.05,P<0.01),同时伴有极低密度脂蛋白中胆固醇和ApoB100蛋白水平显著升高、高密度脂蛋白中ApoA1和ApoA4水平降低。甘露糖干预组小鼠肝脏和肠道中ApoA1蛋白表达较对照组下调,而ApoA4蛋白表达下调仅见于肠道。结论甘露糖暴露可影响ApoE基因缺陷小鼠的脂蛋白代谢,加重高脂血症。

关键词：甘露糖载脂蛋白极低密度脂蛋白胆固醇高脂血症

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四君子汤对无水乙醇诱导的小鼠急性胃肠黏膜损伤的保护作用

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药物评价研究 2023年第3期46卷 538-544页

作者：饶廷彩李静童话余晓王璐璐章笑甜刘骅张骏艳安徽医科大学、基础医学院、药理学教研室安徽合肥230032 安徽医科大学药学院安徽合肥230032 安徽省食品药品检验研究院安徽合肥230051

目的研究四君子汤对乙醇诱导的小鼠急性胃肠黏膜损伤的保护作用。方法将60只小鼠随机分为6组:对照组、模型组、奥美拉唑(阳性药,4 mg·kg^(-1))组和四君子汤低、中、高剂量(4、6、8 g·kg^(-1))组,每组10只,连续ig给药14 d后,... 详细信息

目的研究四君子汤对乙醇诱导的小鼠急性胃肠黏膜损伤的保护作用。方法将60只小鼠随机分为6组:对照组、模型组、奥美拉唑(阳性药,4 mg·kg^(-1))组和四君子汤低、中、高剂量(4、6、8 g·kg^(-1))组,每组10只,连续ig给药14 d后,在造模前全部小鼠禁食禁水24 h,末次给药1 h后,除对照组外,其余各组小鼠每只ig无水乙醇10 mL·kg^(-1)诱发急性胃肠黏膜损伤。造模1 h后,脱颈椎处死小鼠后开腹,取出胃及十二指肠,观察胃黏膜的损伤情况并拍照,分析小鼠胃黏膜损伤分数、治疗指数;HE染色观察胃及十二指肠黏膜病理组织学变化;试剂盒法检测血清丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)水平;Western blotting法检测胃肠组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平。结果胃黏膜损伤评价结果显示,与对照组比较,模型组小鼠胃黏膜有明显出血带;与模型组比较,各用药组小鼠胃黏膜损伤有不同程度的改善,损伤分数均显著降低(P<0.05、0.001),四君子汤高剂量组治疗效果最好,治疗指数达到72.54%,与阳性药奥美拉唑治疗效果相当。HE染色结果显示,模型组小鼠胃及十二指肠腺体排列紊乱,黏膜上皮细胞大量坏死、脱落,四君子汤发挥明显改善作用。与模型组比较,四君子汤中、高剂量组以及奥美拉唑组小鼠血清中MDA水平显著下降(P<0.001)、SOD活性显著升高(P<0.05、0.001),胃及十二指肠组织IL-1β、TNF-α蛋白表达显著下降(P<0.05、0.01、0.001),IL-10蛋白表达显著增加(P<0.01)。结论四君子汤可能通过抑制炎症和抗氧化应激反应对乙醇诱导的小鼠急性胃肠黏膜损伤发挥保护作用。

关键词：四君子汤急性胃肠黏膜损伤无水乙醇炎症氧化应激

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Epac1信号介导大鼠噪声暴露后内耳毛细胞损伤作用与机制

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安徽医科大学学报 2022年第1期57卷 1-5页

作者：王成孙凡凡张俊戈孙家强董六一安徽医科大学基础医学院药理学教研室合肥230032 安徽医科大学第一临床医学院物理诊断学教研室合肥230032 中国科学技术大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科合肥230001

目的探究环腺苷酸结合蛋白1(Epac1)信号分子介导噪声暴露大鼠内耳毛细胞损伤作用及其机制。方法20只SPF级SD大鼠均分为对照组和噪声暴露组。噪声暴露组大鼠给予频率为4 kHz,声压级为101 dB SPL,暴露8 h。噪声暴露前后检测大鼠听性脑干反... 详细信息

目的探究环腺苷酸结合蛋白1(Epac1)信号分子介导噪声暴露大鼠内耳毛细胞损伤作用及其机制。方法20只SPF级SD大鼠均分为对照组和噪声暴露组。噪声暴露组大鼠给予频率为4 kHz,声压级为101 dB SPL,暴露8 h。噪声暴露前后检测大鼠听性脑干反应(ABR)。噪声暴露结束后处死大鼠通过耳蜗基底膜铺片染色、免疫荧光和透射电镜,观察噪声暴露后大鼠内耳毛细胞损伤以及Epac1蛋白在耳蜗中的功能定位。免疫蛋白印迹法检测耳蜗组织中Epac1、Rap1、CaMK-Ⅱ、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3(CC3)、cleaved caspase-9(CC9)等蛋白的表达。结果与对照组比较,噪声暴露组大鼠的ABR阈值增加(P<0.05);耳蜗铺片染色结果显示,噪声暴露组大鼠耳蜗三层外毛细胞的缺失高于对照组(P<0.05);透射电镜检测结果显示,噪声暴露组大鼠毛细胞底部溶解,静纤毛丢失或融合增多,细胞器损伤严重,线粒体外膜破裂,线粒体脊断裂或消失,出现空泡化;免疫荧光检测结果显示,噪声暴露组中大鼠外毛细胞中Epac1呈现高表达(P<0.05);Western blot检测结果显示,噪声暴露组大鼠耳蜗组织中Epac1、Rap1和CaMK-Ⅱ蛋白的表达上调(P<0.05),凋亡相关蛋白Bcl-2表达下调,Bax、CC3和CC9蛋白表达上调(P<0.05)。结论Epac1-Rap1信号通路介导了噪声暴露条件下内耳的早期病理性损伤过程,并参与调控噪声暴露诱导的内耳毛细胞凋亡。Epac1-Rap1通路有望成为新的干预噪声性耳聋的潜在靶点。

关键词：环腺苷酸结合蛋白噪声性耳聋内耳毛细胞凋亡

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牛至挥发油化学成分鉴定及其主要成分对临床病原菌的抑制作用研究

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化学研究与应用 2023年第10期35卷 2470-2476页

作者：宫海燕欧依塔巩雪俐张浩科广东医科大学附属东莞第一医院广东东莞523710 新疆乌鲁木齐市中医医院药剂科新疆乌鲁木齐830011 新疆特殊环境与健康研究重点实验室/新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室新疆乌鲁木齐830011

探索牛至挥发油的化学成分及其主要成分对临床病原菌的抑制作用,筛选有效抑菌活性成分。通过GC-MS联用技术,分析牛至挥发油的化学成分及其含量;利用肉汤稀释法检测牛至挥发油对临床病原菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、生物被膜介导的产ES... 详细信息

探索牛至挥发油的化学成分及其主要成分对临床病原菌的抑制作用,筛选有效抑菌活性成分。通过GC-MS联用技术,分析牛至挥发油的化学成分及其含量;利用肉汤稀释法检测牛至挥发油对临床病原菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、生物被膜介导的产ESBLs耐药大肠杆菌的抑制作用;利用96微孔板法研究牛至挥发油中主要成分1,8-桉树脑对耐药大肠杆菌生物被膜形成的影响。GC-MS联用技术鉴定出牛至挥发油中共有45种化学成分,占总挥发油的99.77%,主要成分是1,8-桉树脑(20.8%)、石竹烯(10.2%)、丁香油酚甲醚(9.8%)、香茅醇乙酸酯(8.8%)。牛至挥发油对临床病原菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌具有一定的抑制作用,其主要成分1,8-桉树脑可显著影响耐药大肠杆菌生物被膜的形成。牛至挥发油鉴定出45种化学成分,并具有较好的抑菌活性,其中1,8-桉树脑可作为潜在的生物被膜介导的耐药菌的耐药抑制活性成分。

关键词：牛至挥发油 1 8-桉树脑临床病原菌生物被膜

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