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河北医科大学学报 2010年第1期31卷 13-15页

作者：董秀杰李淑琴阎雪武宇洲祖秀光都军河北医科大学第二医院心内科河北石家庄050000 河北省枣强县人民医院内科河北枣强053100 河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北石家庄050017

目的观察银杏叶提取物对健康绝经后女性冠状动脉血流的影响。方法 60例冠状动脉造影正常的健康绝经后女性分为银杏叶提取物注射液治疗组和对照组(各30例),2组均于用药前、后采用经胸超声心动图检测冠状动脉左前降支血流的变化。结果银... 详细信息

目的观察银杏叶提取物对健康绝经后女性冠状动脉血流的影响。方法 60例冠状动脉造影正常的健康绝经后女性分为银杏叶提取物注射液治疗组和对照组(各30例),2组均于用药前、后采用经胸超声心动图检测冠状动脉左前降支血流的变化。结果银杏叶提取物注射液显著增加健康绝经后女性冠状动脉左前降支收缩期峰值流速、舒张期峰值流速和舒张期时间速度积分;而对照组冠状动脉左前降支血流无明显变化,治疗组优于对照组(P<0.01)。结论银杏叶提取物注射液可增加健康绝经后女性冠状动脉血流。

关键词：银杏叶冠状血管绝经后期

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热应激小鼠肝癌细胞(H_(22))源Exosomes的抗肿瘤免疫机制

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复旦学报（医学版） 2009年第6期36卷 681-686,691页

作者：孙迪杨麟沈宜汪少华向自武重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以E... 详细信息

目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以Exosomes为对照,观察HS-Exo的蛋白组分、产量及其激发宿主抗肝癌免疫应答效应,用Western blot方法检测两者所含有的相关蛋白情况。用MTT法检测免疫小鼠脾细胞增殖和脾淋巴细胞的细胞毒活性。用免疫组化法检测经两者免疫后小鼠肿瘤组织中CD4+、CD8+淋巴细胞浸润情况。结果HS-Exo与Exosomes形态相似,HS-Exo所含的重要免疫蛋白表达增加(P<0.05),用HS-Exo免疫小鼠后比用Exosomes免疫小鼠能更有效地抑制肿瘤生长,更好地诱导淋巴细胞增殖,更显著增强小鼠脾淋巴细胞的细胞毒活性以及更明显的肿瘤治疗作用(P<0.05)。结论热应激制备HS-Exo的方法具有可行性,HS-Exo比Exosomes具有更强的免疫活性和肿瘤治疗作用。

关键词： Exosomes 小鼠肝癌细胞(H22) HS-Exo 肿瘤免疫

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甲醛炎性痛诱导大鼠海马神经元凋亡

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中国应用生理学杂志 2009年第2期25卷 190-194页

作者：胡玉燕李清君李文斌郭莉华褚赛纯河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北石家庄050017

目的:观察甲醛炎性痛是否可诱导大鼠海马神经元凋亡。方法:采用行为学方法观察大鼠自发痛反应,流式细胞术检测海马神经元凋亡率,免疫组织化学法检测海马神经元p53蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,大鼠足底皮下注射甲醛后海马神经元... 详细信息

目的:观察甲醛炎性痛是否可诱导大鼠海马神经元凋亡。方法:采用行为学方法观察大鼠自发痛反应,流式细胞术检测海马神经元凋亡率,免疫组织化学法检测海马神经元p53蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,大鼠足底皮下注射甲醛后海马神经元凋亡率显著增高,海马各区p53蛋白表达明显增加,二者均于注射甲醛后3 d达高峰;足底两次注射甲醛和一次注射甲醛组比较,大鼠自发痛反应增强,并且海马神经元凋亡率进一步增加。结论:甲醛炎性痛可诱导大鼠海马神经元凋亡,这种改变具有一定的时程特征;海马神经元凋亡率与疼痛强度有关;p53蛋白的表达增加可能参与了伤害性信息传入对神经元凋亡的诱导。

关键词：甲醛炎性痛海马神经元凋亡 p53

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中国病理生理学会休克专业委员会第八届暨微循环专业委员会第十三届学术会议纪要

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微循环学杂志 2010年第1期20卷 70-70页

作者：郭晓华中国病理生理学会休克专业委员会中国病理生理学会微循环专业委员会南方医科大学基础医学院病理生理学教研室

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三氧化二砷诱导小鼠肝癌细胞H_(22)外泌exosome及相关机制研究

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第三军医大学学报 2009年第3期31卷 216-219页

作者：向自武沈宜汪少华范维珂陈黎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的探讨三氧化二砷在小鼠肝癌细胞H22外泌exosome中的影响。方法MTT法筛选三氧化二砷的合适药物浓度;密度梯度离心和超速离心法提纯exosome,Bradford法对exosome总蛋白进行定量分析;Western blot检测影响小囊泡vesicle分泌的复合体SNAR... 详细信息

目的探讨三氧化二砷在小鼠肝癌细胞H22外泌exosome中的影响。方法MTT法筛选三氧化二砷的合适药物浓度;密度梯度离心和超速离心法提纯exosome,Bradford法对exosome总蛋白进行定量分析;Western blot检测影响小囊泡vesicle分泌的复合体SNARE的重要组成及调节蛋白Syntaxin的表达;结合钙荧光探针Fura-2、荧光倒置定量显微镜测定细胞内游离钙的相对浓度。结果维持小鼠肝癌细胞H2290%存活48h的药物浓度为1.25μmmol/L;药物作用前后,细胞数为5×104ml-1的H22细胞常规培养48h所得细胞悬液200ml,经密度梯度离心和超速离心所得exosome的总蛋白浓度分别为(0.85±0.13)、(0.96±0.10)mg/ml,差异具有统计学意义(P<0.05);三氧化二砷作用前后,H22细胞均有Syntaxin蛋白表达,三氧化二砷处理后,其表达明显增加(P<0.05)。结论SNARE复合体假说也适用于小鼠肝癌细胞H22的exosome外泌过程,三氧化二砷在exosome的外泌过程中有一定的促进作用。

关键词：三氧化二砷 exosome 胞吐作用 SNARE假说 Syntaxin

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以精品课程建设为契机,推动病理生理学教学改革

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中国病理生理杂志 2009年第11期25卷 2250-2251页

作者：张丽莙张利军叶静刘欣天津医科大学基础医学院病理生理学教研室天津300070

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11,12-环氧二十碳三烯酸对缺氧/复氧诱导的内皮细胞损伤及细胞间黏附因子-1表达的影响

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首都医科大学学报 2009年第6期30卷 805-808页

作者：邱笑违王珏王红霞王雯蒋东桥芦玲巧唐朝枢张立克首都医科大学基础医学院病理生理学教研室

目的观察11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoic acids,11,12-EET)对缺氧/复氧诱导的内皮细胞损伤以及黏附分子表达的影响,了解环氧二十碳三烯酸发挥血管保护作用的可能途径,初步探讨其作用机制。方法采用原代培养人脐静脉... 详细信息

目的观察11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoic acids,11,12-EET)对缺氧/复氧诱导的内皮细胞损伤以及黏附分子表达的影响,了解环氧二十碳三烯酸发挥血管保护作用的可能途径,初步探讨其作用机制。方法采用原代培养人脐静脉内皮细胞,用数字表法将其随机分为对照组、11,12-EET对照组、缺氧/复氧组和11,12-EET缺氧/复氧组。通过向培养瓶内通入混合气体(2%O2,5%CO2,93%N2)3h,复氧1h,复制缺氧/复氧损伤模型。采用MTT法检测细胞活力,用比色法检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的变化,用RT-PCR法检测细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达,用酶联免疫吸附实验测定细胞间黏附分子-1蛋白表达,用Western blotting方法检测蛋白激酶B(Akt)。结果11,12-EET在常氧条件下可对细胞造成轻度损伤,在缺氧/复氧条件下能显著提高内皮细胞的存活率,提高SOD的活性,降低MDA的含量,抑制细胞间黏附分子-1 mRNA和蛋白的表达,提高Akt的表达。结论11,12-EET具有减轻内皮细胞缺氧/复氧损伤作用,这可能与其能提高缺氧/复氧条件下内皮细胞SOD活性、清除氧自由基、抑制细胞间黏附分子-1 mRNA和蛋白的表达和促进Akt的表达有关。

关键词： 11 12-环二十碳三烯酸内皮细胞缺氧/复氧损伤

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显示肠肌间神经丛的全层铺片技术

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首都医科大学学报 2009年第2期30卷 256-258页

作者：纪托薛红朱进霞首都医科大学基础医学院生理学与病理生理学系生理学教研室

自1921年Langley提出“肠道神经系统”(entericnervous system,ENS)的概念以来,ENS对肠道运动的控制和功能调节的重要性日益引起人们的注意[1]。本实验室长期从事胃肠功能调节等方面的研究[2-3],深感消化道全层铺片技术[4-5]是研究肠道... 详细信息

自1921年Langley提出“肠道神经系统”(entericnervous system,ENS)的概念以来,ENS对肠道运动的控制和功能调节的重要性日益引起人们的注意[1]。本实验室长期从事胃肠功能调节等方面的研究[2-3],深感消化道全层铺片技术[4-5]是研究肠道神经系统必需的方法之一。虽然利用该技术显示肌间神经丛的方法已被众多学者广泛接受和使用,但文献中却很少提及此方法的详细操作过程。本研究室在传统铺片制作技术的方法上进行了不断的摸索和改进,本文就制作铺片的细节进行了较为详尽的阐述,谨供同行分享。1材料和方法1.1动物实验动物为成年SD大鼠,体质量200~300g;成年豚鼠,体质量250~350g;成年ICR小鼠,体质量15~25g。动物均来源于首都医科大学实验动物科学部。实验动物编号:SD大鼠:SCXK-(军)2007-004,ICR小鼠:SGXK(京)2007-0001。1.2方法1)取材:大鼠、豚鼠和小鼠均以颈椎脱臼法急性处死。腹部正中切口打开腹腔,取结肠,置4℃、4%多聚甲醛溶液固定2h,用0.1mol/L磷酸缓冲液(PBS)冲洗后再置于4℃、300g/L蔗糖溶液中过夜,次日行全层铺片。2)...

关键词：铺片网络结构小鼠豚鼠大鼠小家鼠荷兰猪肌间神经丛奥尔巴克丛免疫荧光组织化学

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神经丝蛋白质糖基化与磷酸化的相互调节和神经退行性疾病

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生命的化学 2009年第6期29卷 812-816页

作者：崔冉亮胡海燕吕朴戎凯陈宁邓艳秋天津医科大学基础医学院病理生理学教研室天津300070

神经丝(neurofilament,NF)蛋白质是神经元细胞骨架的主要成分,由低(68kDa)、中(160 kDa)和高(200 kDa)分子量的三种亚基聚合而成,在维持细胞骨架、稳定细胞形态和轴突转运方面均有十分重要意义。NF蛋白质存在两个非常重要的翻译后修饰... 详细信息

神经丝(neurofilament,NF)蛋白质是神经元细胞骨架的主要成分,由低(68kDa)、中(160 kDa)和高(200 kDa)分子量的三种亚基聚合而成,在维持细胞骨架、稳定细胞形态和轴突转运方面均有十分重要意义。NF蛋白质存在两个非常重要的翻译后修饰——磷酸化和O位N-乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)糖基化。由于它们修饰同一蛋白质的相同或邻近丝氨酸和苏氨酸羟基,因此磷酸化和糖基化修饰可能存在着竞争性调节,在神经退行性变性疾病如阿尔茨海默病、肌萎缩性脊髓侧索硬化症和进行性肌肉萎缩症等发病机制中可能起十分重要的作用。

关键词：神经丝神经丝蛋白质磷酸化糖基化神经退行性疾病

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微丝相关蛋白HSPC300／hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ相互作用的鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第2期25卷 146-151页

作者：祝敏虞红珍王豫汪思应徐勤枝周平坤军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 安徽医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室安徽合肥230032

为鉴定微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1在肝脏组织的功能,采用GSTpull-down结合质谱技术,检测该蛋白在肝脏中的结合蛋白,结果提示,肌球蛋白Ⅵ与HSPC300/hHBRK1共沉降,Western印迹杂交证实了质谱的结果.构建HSPC300/hHBRK1原核表达载体,诱导... 详细信息

为鉴定微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1在肝脏组织的功能,采用GSTpull-down结合质谱技术,检测该蛋白在肝脏中的结合蛋白,结果提示,肌球蛋白Ⅵ与HSPC300/hHBRK1共沉降,Western印迹杂交证实了质谱的结果.构建HSPC300/hHBRK1原核表达载体,诱导并获得了His-hHBRK1融合蛋白.利用免疫共沉淀证实hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ存在相互作用,激光共聚焦检测显示hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ在肺癌95D细胞的胞浆共定位,提示其相互作用可能是直接结合.肌球蛋白Ⅵ参与细胞迁移、高尔基分泌泡的运输和维持高尔基体稳定性等作用.hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ相互作用,为微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1参与细胞迁移和胞内物质运输提供了进一步佐证.

关键词： BrK1/HSPC300 微丝肌球蛋白Ⅵ 蛋白质相互作用

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