目的:探讨内质网氧化还原酶-1α(endoplasmic reticulum oxidoreductin 1α,ERO1α)在同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的肝细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)中的作用及机制.方法:培养人肝细胞,用Hcy(100μmol/L)干预,同时设对照组,使用酶联免疫法(ELISA)检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein 78,GRP78)、X盒结合蛋白-1(X-box binding protein-1,XBP-1)、内质网类似激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic r e t i c u l u m k i n a s e,P E R K)及激活转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)的水平;用不同浓度Hcy(0、50、100、200、500μmol/L)和100μmol/L Hcy+叶酸+维生素B12(VB12)干预,运用实时定量PCR和Western blot检测ERO1αm RNA和蛋白水平;构建ERO1α基因重组质粒和RNA干扰片段并感染肝细胞,检测ERO1αm RNA和蛋白表达变化;采用ELISA法检测其对ERS相关蛋白的调控作用.结果:与对照组比较,Hcy组GRP78、ATF6、P E R K、X B P-1水平升高(P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01);不同浓度Hcy干预后,肝细胞内ERO1αm RNA及蛋白水平呈下降趋势,且随着Hcy浓度的增加而减少(P<0.01),呈剂量依赖关系;将ERO1α重组质粒转染肝细胞后,ERO1αm RNA及蛋白表达明显增加(P<0.01);将三个不同的ERO1αsi RNA片段转染肝细胞后,ERO1αm RNA及蛋白表达降低(P<0.01),其中si RNA2作用最明显(P<0.01);与Hcy组相比,Hcy+p ERO1α组GRP78、XBP-1、PERK及ATF6均明显降低(P<0.01),而Hcy+si RNA2组均明显升高(P<0.01).结论:Hcy可能通过下调ERO1α引起肝细胞GRP78-XBP-1/PERK/ATF6表达增加促进ERS发生.
国际医学院校生理学竞赛(inter-medical school physiology quiz,IMSPQ)由马来亚大学组织发起,目前是亚洲地区最具影响力的医学类国际赛事之一。安徽医科大学连续四年组织学生参加了国际生理学竞赛大陆地区热身赛和国际生理学竞赛,均取...
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国际医学院校生理学竞赛(inter-medical school physiology quiz,IMSPQ)由马来亚大学组织发起,目前是亚洲地区最具影响力的医学类国际赛事之一。安徽医科大学连续四年组织学生参加了国际生理学竞赛大陆地区热身赛和国际生理学竞赛,均取得优异成绩。在辅导学生竞赛期间,从学生选拔到教材选择、题库建设以及辅导内容等方面摸索了一些经验:如进行有针对性的训练,增加逻辑推理能力、病例分析等内容的比重,并加强与运动生理学以及病理生理学的紧密联系,以逐步增强培训老师和学生的生理学教与学竞争力。
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