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临床与实验病理学杂志 2017年第4期33卷 403-407页

作者：朱霞鲁康洋江燕尹玉胡勇蔡永萍安徽医科大学基础医学院病理学教研室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院骨科合肥230032

目的探讨FoxM1是否调控DNA修复基因Rad51参与顺铂(CDP)对骨肉瘤耐药细胞化疗抑制作用。方法采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导骨肉瘤耐药细胞系并分别命名为MG-63/R和HOS-MNNG/R。qRT-PCR、Western blot法检测耐药细胞与亲本细胞FoxM1... 详细信息

目的探讨FoxM1是否调控DNA修复基因Rad51参与顺铂(CDP)对骨肉瘤耐药细胞化疗抑制作用。方法采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导骨肉瘤耐药细胞系并分别命名为MG-63/R和HOS-MNNG/R。qRT-PCR、Western blot法检测耐药细胞与亲本细胞FoxM1和Rad51的mRNA及蛋白表达;耐药细胞中4μmol/L Thiostrepton处理后qRT-PCR、Western blot法检测FoxM1和Rad51的mRNA及蛋白表达。细胞计数法检测单独或联合运用4μmol/L Thiostrepton和2μg/m L CDP对骨肉瘤耐药细胞增殖率的影响。结果建立在2μg/mL CDP浓度中稳定生长的耐药细胞系MG-63/R和HOS-MNNG/R,耐药指数分别为30.52和37.87(均重度耐药)。FoxM1和Rad51的mRNA及蛋白水平在耐药细胞中表达较亲本细胞明显增高;在耐药细胞中联合运用4μmol/L Thiostrepton和2μg/mL CDP组较单独应用4μmol/L Thiostrepton组或2μg/mL CDP组细胞增殖率明显降低;耐药细胞4μmol/L Thiostrepton处理后FoxM1及Rad51的mRNA和蛋白表达均明显降低。结论 FoxM1及Rad51高表达可能参与骨肉瘤细胞对CDP耐药,FoxM1抑制剂Thiostrepton可能通过下调Rad51增强CDP对骨肉瘤耐药细胞的抑制作用。

关键词：骨肉瘤化疗耐药顺铂 FoxM1 Rad51

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探讨TRPP2和基质相互作用因子1在高盐诱导高血压大鼠脑血管平滑肌细胞中的变化及对血管收缩的调节作用

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中国药理学与毒理学杂志 2018年第9期32卷 670-670页

作者：姜婉叶立杨欣玥沈兵汪凯安徽医科大学第一附属医院神经内科安徽合肥230000 安徽医科大学基础医学院生理学教研室安徽合肥230000

目的研究高盐诱导高血压大鼠基底动脉血管平滑肌细胞收缩功能的改变,探讨钙库操纵的钙内流(SOCE)及其组成分子TRPP2和基质相互作用因子1(STIM1)对血管收缩的调节作用。方法应用鼠尾血压测量仪检测不同时间大鼠血压的变化;应用离体血管... 详细信息

目的研究高盐诱导高血压大鼠基底动脉血管平滑肌细胞收缩功能的改变,探讨钙库操纵的钙内流(SOCE)及其组成分子TRPP2和基质相互作用因子1(STIM1)对血管收缩的调节作用。方法应用鼠尾血压测量仪检测不同时间大鼠血压的变化;应用离体血管培养技术,分别特异性地敲低基底动脉血管中TRPP2和STIM1的蛋白表达;应用离体血管张力检测实验,利用内皮素1(ET-1)清空细胞内钙库,并用维拉帕米阻断L型钙离子通道,观察基底动脉平滑肌中SOCE的变化;应用Western蛋白印迹法和免疫组化法检测脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平。结果高盐饮食4周后,与对照组(123.7±3.6)mmH g相比,高盐摄入组收缩压(161.5±3.2)mmHg显著升高。张力结果显示,高盐摄入增强了ET-1诱导的SOCE引起的收缩。如果TRPP2和STIM1被特异性siRNA敲低,则激动剂诱导的SOCE引起的收缩显著降低。Western蛋白印迹法和免疫组化结果显示,高血压组脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平较对照组增高。结论高盐诱导高血压大鼠基底动脉平滑肌中SOCE所引起的收缩显著增强,可能与TRPP2和STIM1蛋白表达增加有关。

关键词： TRPP2 基质相互作用因子1 高盐高血压脑血管

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滇重楼巴布剂对大鼠急性痛风性关节炎及炎症的调控机制

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昆明医科大学学报 2018年第2期39卷 21-24页

作者：董玮袁小淋李皎李争艳刘维统余晓玲张颖昆明市中医院骨科云南昆明650032 昆明医科大学基础医学院病理生理学教研室云南昆明650500

目的拟改进云南省中医学院第三附属医院骨科传统外敷药剂型,筛选其中重要有效成分滇重楼制成巴布剂,并对其炎症调控机制进行研究.方法 SD雄性大鼠随机分为对照组和治疗组2组,于大鼠足内踝胫跗关节腔局部注射5%尿酸钠混悬液50μL,制成急... 详细信息

目的拟改进云南省中医学院第三附属医院骨科传统外敷药剂型,筛选其中重要有效成分滇重楼制成巴布剂,并对其炎症调控机制进行研究.方法 SD雄性大鼠随机分为对照组和治疗组2组,于大鼠足内踝胫跗关节腔局部注射5%尿酸钠混悬液50μL,制成急性痛风性关节炎模型.对照组外敷无任何药物的巴布剂,治疗组外敷滇重楼巴布剂,分别检测4、24、48、72 h后2组大鼠踝关节直径、周长指标的变化.ELISA法检测外周血白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化,Western blotting法检测单核细胞TLR4的表达水平.结果与对照组相比,滇重楼巴布剂外敷治疗组,足踝直径及周径在各时间点增加值明显减少,IL-1β在4、24、72 h下降,TLR4表达在48 h降低.结论重楼巴布剂可通过降低炎症因子IL-1β与TLR4的表达,减轻大鼠急性痛风性关节炎症反应.

关键词：滇重楼巴布剂痛风性关节炎炎症因子疗效评价

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肿瘤坏死因子对体外培养三叉神经节细胞的影响

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安徽医科大学学报 2017年第3期52卷 343-347页

作者：姚育智赵利张越韩良王烈成王元银安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院合肥230032 安徽医科大学基础医学院生理学教研室合肥230032

目的体外培养完整三叉神经节(TG)组织,建立一种能够易于控制的类似于TG的体内活性体系。探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α对体外培养TG细胞中降钙素基因相关肽(CGRP)的影响。方法将SD大鼠麻醉后取双侧TG,将一部分样本用4%多聚甲醛固定,然后通... 详细信息

目的体外培养完整三叉神经节(TG)组织,建立一种能够易于控制的类似于TG的体内活性体系。探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α对体外培养TG细胞中降钙素基因相关肽(CGRP)的影响。方法将SD大鼠麻醉后取双侧TG,将一部分样本用4%多聚甲醛固定,然后通过HE染色观察其与体外培养TG的神经元之间形态学差异。其余的TG分为常规培养组和添加TNF-α培养组,再通过免疫组化和Western blot观察常规培养组和添加TNF-α培养组TG细胞中CGRP的水平变化,分析TNF-α对体外培养TG细胞的影响。结果与新鲜分离组相比,体外培养的TG神经元细胞未发生明显的组织细胞水肿、变性、坏死和细胞凋亡等病理学改变。TNF-α培养组与常规培养组相比,TNF-α可使CGRP表达水平上调,且CGRP阳性反应细胞数表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论细胞形态学分析结果显示离体培养的TG组织方法可行,且易于实施形态学和分子生物学研究;TNF-α可使离体培养的TG细胞CGRP表达水平显著增加。

关键词：三叉神经痛三叉神经节离体培养肿瘤坏死因子α 降钙素基因相关肽

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声动力疗法引起的细胞自噬在肿瘤和动脉粥样硬化中的研究进展

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基础医学与临床 2018年第11期38卷 1620-1624页

作者：李贺田野田振哈尔滨医科大学基础医学院病理生理教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科黑龙江哈尔滨150001

声动力疗法(SDT)通过增加细胞内活性氧簇(ROS)细胞自噬。肿瘤细胞自噬会增强其自身存活能力,促进肿瘤的发生;而巨噬细胞自噬却能够减轻动脉粥样硬化斑块脂质聚积和炎性反应,抑制斑块进展。本文对声动力疗法引起的细胞自噬机制及其在肿... 详细信息

声动力疗法(SDT)通过增加细胞内活性氧簇(ROS)细胞自噬。肿瘤细胞自噬会增强其自身存活能力,促进肿瘤的发生;而巨噬细胞自噬却能够减轻动脉粥样硬化斑块脂质聚积和炎性反应,抑制斑块进展。本文对声动力疗法引起的细胞自噬机制及其在肿瘤和动脉粥样硬化疾病中的作用进行了介绍,并指出其面临的问题和展望。

关键词：细胞自噬声动力疗法动脉粥样硬化肿瘤

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受体酪氨酸激酶Axl高表达促进鼻咽癌临床进展

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中国病理生理杂志 2017年第8期33卷 1386-1392页

作者：贾亚楠李汝佳王可可雷洪哈艳平王思思廖晓敏揭伟申志华广东医科大学基础医学院病理生理教研室广东湛江524023 广东医科大学基础医学院病理学系广东湛江524023 广东医科大学附属医院病理诊断与研究中心广东湛江524001

目的:探讨受体酪氨酸激酶anexelekto(Axl)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测78例NPC和32例鼻咽黏膜慢性炎中Axl的表达,分析Axl蛋白表达与NPC患者临床参数的相关性。常规培养NPC细胞,免疫... 详细信息

目的:探讨受体酪氨酸激酶anexelekto(Axl)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测78例NPC和32例鼻咽黏膜慢性炎中Axl的表达,分析Axl蛋白表达与NPC患者临床参数的相关性。常规培养NPC细胞,免疫荧光法检测不同分化NPC细胞系CNE1、CNE2Z及C666-1中Axl的蛋白表达情况。应用Axl特异性抑制剂TP-0903处理CNE1和C666-1细胞,CCK-8实验检测细胞的活力,流式细胞术检测细胞周期的分布,q PCR检测Axl和增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA表达,Western blot检测Axl及p-Axl蛋白的表达。结果:Axl蛋白定位于胞膜和胞质。NPC中Axl高表达阳性率显著高于鼻咽黏膜慢性炎(P<0.01)。Axl高表达与患者年龄、性别及M分期无关,与临床分期、T分期和N分期呈正相关(P<0.05)。Axl在高分化CNE1细胞中低表达,在低分化CNE2Z细胞和未分化C666-1细胞中表达水平明显增高。TP-0903呈浓度和时间依赖性抑制NPC细胞的活性,2 nmol/L TP-0903即具有显著抑制效应,能阻滞细胞周期于G0期,在降低Axl活性的同时也显著抑制PCNA的表达。结论:Axl高表达可促进NPC的临床进展;TP-0903显著抑制NPC细胞的增殖,提示Axl可能在NPC靶向治疗中具有一定的价值。

关键词：鼻咽癌 Anexelekto TP4903 细胞增殖细胞周期

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免疫蛋白酶体β2i亚基在DOCA/盐敏感小鼠血管炎症反应中的作用

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中国病理生理杂志 2017年第5期33卷 930-934页

作者：李南南周春宇刘立新侯翠柳王红霞徐爱丽李汇华首都医科大学基础医学院病理生理学系北京100069 首都医科大学燕京医学院形态学教研室北京101300

目的:探讨免疫蛋白酶体β2i亚基在醋酸脱氧皮质酮(DOCA)/盐敏感小鼠血管炎症反应中的作用。方法:将β2i基因敲除小鼠和同窝对照野生雄性小鼠的右侧肾脏切除并在皮下植入DOCA药片,然后饮用Na Cl溶液(1%)3周,建立盐敏感高血压小鼠模型。3... 详细信息

目的:探讨免疫蛋白酶体β2i亚基在醋酸脱氧皮质酮(DOCA)/盐敏感小鼠血管炎症反应中的作用。方法:将β2i基因敲除小鼠和同窝对照野生雄性小鼠的右侧肾脏切除并在皮下植入DOCA药片,然后饮用Na Cl溶液(1%)3周,建立盐敏感高血压小鼠模型。3周后分别提取各实验组新鲜胸主动脉组织中总的RNA和蛋白,或用福尔马林固定和石蜡包埋组织后进行切片。采用Western blot、实时荧光定量PCR和免疫组化法分别检测胸主动脉中β2i、巨噬细胞标志物Mac-2、NF-κB及促炎症因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的表达水平。结果:与假手术组相比,DOCA/盐处理明显增高血管组织中β2i的mRNA和蛋白表达水平、巨噬细胞浸润数、NF-κB及促炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平;相反,敲除β2i基因明显抑制了DOCA/盐诱导的这些改变。结论:免疫蛋白酶体β2i亚基可能通过激活NF-κB信号通路促进DOCA/盐诱导的血管炎症反应。

关键词：免疫蛋白酶体β2i亚基血管炎症醋酸脱氧皮质酮/盐

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胃癌组织中NLRC5表达的意义及其影响胃癌侵袭转移的可能机制

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安徽医科大学学报 2017年第10期52卷 1455-1462页

作者：徐徽吴文涌张震孟刚安徽医科大学基础医学院病理学教研室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院普外科合肥230022

目的观察核苷酸结合结构域受体家族含CARD结构域-5(NLRC5)、β-catenin在胃癌组织中的表达情况。分析NLRC5与胃癌临床病理特征及预后的关系。并初步探讨NLRC5与Wnt/β-catenin信号通路间的关系。方法收集根治性胃癌切除术患者石蜡标本93... 详细信息

目的观察核苷酸结合结构域受体家族含CARD结构域-5(NLRC5)、β-catenin在胃癌组织中的表达情况。分析NLRC5与胃癌临床病理特征及预后的关系。并初步探讨NLRC5与Wnt/β-catenin信号通路间的关系。方法收集根治性胃癌切除术患者石蜡标本93例,免疫组化检测胃癌组织中NLRC5和β-catenin的表达情况;分析NLRC5的表达与胃癌临床病理特征的关系。采用胃癌细胞株MKN-45和MGC-803分别转染p EGFP-C2-NLRC5重组质粒,qRT-PCR法和Western blot法验证NLRC5转染效率。采用MTT细胞增殖和细胞划痕实验对NLRC5进行功能分析,观察体外实验中NLRC5表达变化对胃癌细胞的生物学行为的影响,采用Western blot法检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的变化。结果 NLRC5在93例胃癌标本中阳性表达67例(72.04%),阴性表达26例(27.96%)。NLCR5的表达情况与胃癌的TNM分期、淋巴结转移和复发情况密切相关。Kaplan-merier生存分析结果显示NLCR5阴性表达的患者预后好于阳性表达患者(P<0.05)。93例胃癌标本中β-catenin阳性表达63例(67.74%),阴性表达30例(32.26%)。Cox多因素回归分析显示,NLRC5和β-catenin的阳性表达、低TNM分期、淋巴结转移是影响胃癌患者预后的独立危险因素。胃癌细胞在过表达NLRC5后,MTT细胞增殖和划痕实验结果显示,细胞的增殖和迁移能力显著增强(P<0.05,P<0.01),Western blot实验结果显示,Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白β-catenin和下游关键靶蛋白C-myc、金属基质蛋白酶-7的表达水平明显提高。结论 NLRC5广泛表达于胃癌组织中,其表达与胃癌的TNM分期和淋巴结转移密切相关。Kaplan-merier生存分析显示:NLRC5高表达是影响胃癌预后的危险因素。Cox多因素回归分析显示:NLRC5高表达是影响胃癌预后的独立危险因素。NLRC5与β-catenin的表达呈正相关性,NLRC5的表达变化影响胃癌细胞的生物学行为和Wnt/β-catenin信号通路的关键蛋白的表达。提示NLRC5可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌的浸润和转移。

关键词：胃癌 NLRC5 临床病理特征侵袭转移

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多巴酚丁胺对顺铂作用下人肺癌细胞株A549生物学行为及YAP蛋白表达的影响

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肿瘤研究与临床 2017年第2期29卷 73-78页

作者：高小云李夏樊静华米小芳梁钢郑绘霞肖虹武丽娜梁建芳山西医科大学基础医学院太原 030001 山西医科大学第一医院病理科太原030001 山西职工医学院病理生理教研室晋中030600

目的研究多巴酚丁胺对顺铂（DDP）作用下人肺腺癌细胞株A549生物学行为及YAP和磷酸化YAP（P-YAP）蛋白表达的影响.方法体外培养人肺腺癌细胞株A549,实验分为对照组、多巴酚丁胺组、DDP组和多巴酚丁胺与DDP联合组.用CCK-8法检测各组细... 详细信息

目的研究多巴酚丁胺对顺铂（DDP）作用下人肺腺癌细胞株A549生物学行为及YAP和磷酸化YAP（P-YAP）蛋白表达的影响.方法体外培养人肺腺癌细胞株A549,实验分为对照组、多巴酚丁胺组、DDP组和多巴酚丁胺与DDP联合组.用CCK-8法检测各组细胞的增殖抑制率,Transwell法和划痕愈合实验检测各组细胞的体外侵袭能力和迁移能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞YAP和P-YAP蛋白的表达.结果多巴酚丁胺或DDP能够抑制A549细胞增殖,呈浓度和时间依赖性（P〈0.05）.对照组、多巴酚丁胺组、DDP组及多巴酚丁胺与DDP联合组的划痕愈合率分别为（41.22±0.70）%、（16.11±0.39）%、（14.49±0.25）%、（7.24±0.30）%,差异有统计学意义（P〈0.05）;穿膜细胞数分别为（262.91±2.81）、（115.03±4.26）、（81.88±3.91）、（48.51±3.99）个,差异有统计学意义（P〈0.05）;凋亡率分别为（22.28±0.61）%、（27.92±1.36）%、（32.16±1.80）%、（36.70±1.87）%,差异有统计学意义（P〈0.05）.与多巴酚丁胺组相比,多巴酚丁胺与DDP联合作用能够抑制YAP的表达及促进P-YAP的表达（P〈0.05）.结论多巴酚丁胺可能通过抑制YAP的表达来增强DDP的作用,进而抑制人肺腺癌A549细胞增殖、体外侵袭能力,并促进细胞凋亡.

关键词：肺腺癌多巴酚丁胺顺铂 Yes相关蛋白

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乳腺癌预后分子生物标志物的研究进展

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现代肿瘤医学 2018年第19期26卷 3150-3154页

作者：熊荣国田野田振哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科黑龙江哈尔滨150001

乳腺癌是女性较常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率均居恶性肿瘤前列,严重威胁女性的健康。乳腺癌预后生物标志物对预测乳腺肿瘤恶性程度、转移情况和复发情况,以及指导临床治疗方案等具有重要意义。近年来,乳腺癌预后相关分子生物标志物... 详细信息

乳腺癌是女性较常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率均居恶性肿瘤前列,严重威胁女性的健康。乳腺癌预后生物标志物对预测乳腺肿瘤恶性程度、转移情况和复发情况,以及指导临床治疗方案等具有重要意义。近年来,乳腺癌预后相关分子生物标志物的研究不断取得进展,为有效预测乳腺癌预后状况提供了更多依据。本文将对乳腺癌预后分子生物标志物进行综述。

关键词：生物标志物侵袭性预后

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