检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2019年第3期35卷 402-407页

作者：刘亭毕竟王盼任丽莉张露允隋汝波锦州医科大学附属第一医院神经内科三病区辽宁锦州121000 锦州医科大学辽宁省神经退行性疾病重点实验室辽宁锦州121000 锦州医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁锦州121000

目的观察褪黑素能否通过MAPK/ERK信号通路,发挥对阿尔茨海默病大鼠小脑的神经保护作用。方法将32只♂SD大鼠随机分为4组:对照组、Aβ_(1-42)侧脑室注射组(AD)、褪黑素腹腔注射组(MT)、Aβ_(1-42)侧脑室注射结合褪黑素腹腔注射组(AD+MT)... 详细信息

目的观察褪黑素能否通过MAPK/ERK信号通路,发挥对阿尔茨海默病大鼠小脑的神经保护作用。方法将32只♂SD大鼠随机分为4组:对照组、Aβ_(1-42)侧脑室注射组(AD)、褪黑素腹腔注射组(MT)、Aβ_(1-42)侧脑室注射结合褪黑素腹腔注射组(AD+MT)。HE染色观察各组大鼠小脑皮层的病理学变化;免疫荧光染色观察各组颗粒细胞标记物NeuN、浦肯野细胞标记物Calbindle和p-ERK蛋白的表达情况;Western blot检测各组小脑组织中p-ERK蛋白的表达。结果 HE染色结果显示,AD组大鼠小脑皮层的神经元数量减少,细胞排列紊乱,细胞形态改变,褪黑素可明显减轻侧脑室注射Aβ_(1-42)对小脑的病理学损害;免疫荧光结果显示,与AD组相比,AD+MT组颗粒细胞标记物NeuN的蛋白表达增加,以Calbindin标记的浦肯野细胞个数明显增多(P<0.01), p-ERK蛋白表达减少(P<0.01);Western blot结果显示,与AD组相比,AD+MT组小脑组织中p-ERK蛋白表达水平降低。结论褪黑素可能通过抑制MAPK/ERK信号通路的激活,发挥对小脑皮层神经原的保护作用。

关键词：褪黑素 MAPK/ERK信号通路小脑阿尔茨海默病神经保护浦肯野细胞

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ToxoROP16Ⅰ/Ⅲ诱导M2型巨噬细胞偏移抑制M1分泌炎性细胞因子的研究

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安徽医科大学学报 2019年第9期54卷 1354-1360页

作者：徐永伟李路武艺章文慧邢瑞欣罗庆礼沈继龙陈熙安徽医科大学第一附属医院消化内科合肥230022 安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032

目的研究慢病毒介导弓形虫效应分子ROP16 Ⅰ/Ⅲ( Toxo ROP16 Ⅰ/Ⅲ)经旁路途径诱导巨噬细胞RAW264.7(Mφ)向M2型巨噬细胞偏移(M2),抑制经典途径激活巨噬细胞(M1)炎性因子的产生。方法构建表达ROP16 Ⅰ/Ⅲ的重组慢病毒,转染Mφ,通过激活... 详细信息

目的研究慢病毒介导弓形虫效应分子ROP16 Ⅰ/Ⅲ( Toxo ROP16 Ⅰ/Ⅲ)经旁路途径诱导巨噬细胞RAW264.7(Mφ)向M2型巨噬细胞偏移(M2),抑制经典途径激活巨噬细胞(M1)炎性因子的产生。方法构建表达ROP16 Ⅰ/Ⅲ的重组慢病毒,转染Mφ,通过激活旁路途径向M2型细胞偏移。脂多糖(LPS)诱导Mφ通过经典途径向M1型巨噬细胞细胞偏移。M1和M2细胞进行混合培养。用qRT-PCR检测TNF-α、IL-1β、TGF-β1、IL-10、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)的表达。Western blot检测ROP16 Ⅰ/Ⅲ、iNOS、Arg-1和PD-L2的蛋白表达。结果构建ROP16 Ⅰ/Ⅲ重组慢病毒并成功稳转Mφ,观察可见绿色荧光表达;Arg-1、PD-L2蛋白和TGF-β1、IL-10、Arg-1的mRNA表达升高,表明ROP16 Ⅰ/Ⅲ诱导了M2的偏移。LPS刺激后, qRT-PCR检测巨噬细胞的TNF-α和IL-1β mRNA表达上调,iNOS mRNA和蛋白表达同时升高,显示M1表型细胞特征。在M1和M2细胞混合培养中,M1型细胞分泌的上述促炎因子表达显著降低。结论 Toxo ROP16 Ⅰ/Ⅲ可驱动巨噬细胞向M2型偏移,能明显下调M1型细胞分泌炎性细胞因子。

关键词： ToxoROP16Ⅰ/Ⅲ 经典激活途径旁路激活途径偏移

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乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

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安徽医科大学学报 2019年第8期54卷 1247-1251,1257页

作者：朱宁束军张梅沈继龙安徽医科大学第四附属医院呼吸内科合肥230022 安徽病原生物学省级实验室和人兽共患病安徽重点实验室(安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室) 合肥230022

目的探讨不同浓度乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin(GF)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法体外培养肺腺癌A549细胞,实验分为对照组(无GF处理组)和实验组(GF处理组,浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L),分别使用CCK-8、... 详细信息

目的探讨不同浓度乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin(GF)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法体外培养肺腺癌A549细胞,实验分为对照组(无GF处理组)和实验组(GF处理组,浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L),分别使用CCK-8、划痕实验、Transwell法检测不同浓度GF在不同作用时间条件下对A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响;分别使用乳酸脱氢酶活性检测试剂盒、乳酸定量试剂盒检测不同浓度GF对乳酸脱氢酶活性、乳酸生成量的影响。结果 CCK-8结果表明,GF对A549细胞具有增殖抑制作用,并且在一定浓度和时间范围内呈现出依赖性(P<0.05)。划痕实验结果表明,实验组细胞迁移率小于对照组(P<0.05),随着GF浓度的增加,迁移率逐渐降低(P<0.05)。Transwell结果表明,实验组细胞侵袭细胞数小于对照组(P<0.05),随着GF浓度的增加,侵袭细胞数逐渐减少(P<0.05)。乳酸脱氢酶活性检测结果表明,实验组乳酸脱氢酶活性较对照组显著降低(P<0.05),随着GF浓度的增加,乳酸脱氢酶活性逐渐降低(P<0.05)。乳酸检测结果表明,实验组乳酸生成量较对照组显著减少(P<0.05),随着GF浓度的增加,乳酸生成量逐渐减少(P<0.05)。结论 GF在体外能够抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,其机制可能是通过抑制乳酸脱氢酶活性从而抑制肺癌细胞糖酵解。

关键词： Galloflavin 肺腺癌增殖迁移侵袭

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miR-411-5p对胶质瘤微血管内皮细胞迁移和管形成的影响

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解剖科学进展 2020年第5期26卷 575-578页

作者：卞静喻俊吴冰薛一雪赵丽妮沈阳医学院基础医学院辽宁沈阳110034 沈阳医学院药学院辽宁沈阳110034 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110122 沈阳医学院药理学教研室辽宁沈阳110034

目的研究miR-411-5p对胶质瘤微血管内皮细胞迁移和管形成的影响。方法qRT-PCR方法检测miR-411-5p在正常脑微血管内皮细胞和胶质瘤微血管内皮细胞中的表达水平。在微血管内皮细胞中瞬时转染miR-411-5p agomir及NC、miR-411-5p antagomir... 详细信息

目的研究miR-411-5p对胶质瘤微血管内皮细胞迁移和管形成的影响。方法qRT-PCR方法检测miR-411-5p在正常脑微血管内皮细胞和胶质瘤微血管内皮细胞中的表达水平。在微血管内皮细胞中瞬时转染miR-411-5p agomir及NC、miR-411-5p antagomir及NC,采用qRT-PCR方法验证其转染效率。划痕实验检测miR-411-5p对胶质瘤微血管内皮细胞迁移能力的影响。Matrigel胶三维血管形成实验检测miR-411-5p对胶质瘤微血管内皮细胞管形成能力的影响。结果miR-411-5p在胶质瘤微血管内皮细胞中的表达水平显著低于在正常脑微血管内皮细胞中的表达。miR-411-5p agomir抑制胶质瘤微血管内皮细胞的迁移和管形成能力,miR-411-5p antagomir促进胶质瘤微血管内皮细胞的迁移和管形成能力。结论miR-411-5p在胶质瘤微血管内皮细胞中低表达,过表达miR-411-5p能够抑制胶质瘤微血管内皮细胞的迁移和管形成能力。

关键词： miR-411-5p 胶质瘤微血管内皮细胞迁移管形成

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实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠体内免疫细胞变化的动态检测

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国际免疫学杂志 2019年第2期42卷 136-141页

作者：孙博刘江恒刘宇汪丹丹李呼伦王广友哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室 150081

目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠体内CD4^+和CD8^+T细胞动态变化.方法 C57BL/6小鼠用MOG35-55多肽和完全弗式佐剂皮下两点免疫,并设立对照组,在EAE小鼠免疫后的不同时间点检测淋... 详细信息

目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠体内CD4^+和CD8^+T细胞动态变化.方法 C57BL/6小鼠用MOG35-55多肽和完全弗式佐剂皮下两点免疫,并设立对照组,在EAE小鼠免疫后的不同时间点检测淋巴结中活化的CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的比例变化,检测脊髓内浸润的CD4^+T细胞和CD8^+T细胞.结果成功建立EAE动物模型,在免疫后第11天开始发病,病理学检测发现脊髓内有大量淋巴细胞浸润和脱髓鞘的现象,免疫荧光染色发现在发病高峰期脊髓内开始出现CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的浸润,而外周免疫器官淋巴结里,活化的CD4^+T细胞比例明显增多(P<0.05).结论 EAE中虽然外周活化的CD4^+T细胞比例升高,但CD4^+T细胞和CD8^+T细胞都会浸润到脊髓中.

关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎 CD4^+T细胞 CD8^+T细胞单核细胞

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烧伤大鼠血清对血管内皮细胞通透性的影响

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安徽医科大学学报 2019年第6期54卷 930-933页

作者：段声梁胡子健孟承颖黄海良蒋智永蒋薇王欢余又新孙业祥方林森胡德林安徽医科大学第一附属医院烧伤科合肥230022 安徽医科大学第一临床医学院合肥230022 安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230022

目的探讨烧伤大鼠血清对血管内皮细胞(EC)通透性的影响及作用机制。方法将原代培养的大鼠主动脉EC根据是否应用烧伤血清干预分为正常组和血清干预组,血清干预组应用烧伤12h大鼠血清干预大鼠主动脉内皮细胞24h,应用细胞通透性实验检测单... 详细信息

目的探讨烧伤大鼠血清对血管内皮细胞(EC)通透性的影响及作用机制。方法将原代培养的大鼠主动脉EC根据是否应用烧伤血清干预分为正常组和血清干预组,血清干预组应用烧伤12h大鼠血清干预大鼠主动脉内皮细胞24h,应用细胞通透性实验检测单层细胞膜通透性变化,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot分别检测细胞通透性相关基因内皮素-1(ET-1)、内皮因子受体A(ETA)、ETB和带状闭合蛋白1(ZO-1)的mRNA和蛋白表达的变化。结果与正常组相比,烧伤大鼠血清干预组EC通透性系数明显升高(P<0.01),血清干预组ET-1、ETA和ETB的mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01)、ZO-1的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论烧伤大鼠血清可引起血管EC通透性的增加,通透性增加可能与ET-1、ET-A、ET-B表达升高和ZO-1表达降低有关。

关键词：烧伤内皮细胞血管通透性 ET-1 ZO-1

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HIF-1α对大鼠内皮细胞通透性的影响及作用机制

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安徽医科大学学报 2019年第7期54卷 1061-1065页

作者：蒋智永胡子健孟承颖黄海良段声梁蒋薇王欢余又新孙业祥方林森胡德林安徽医科大学第一附属医院烧伤科合肥230022 安徽医科大学第一临床医学院合肥230022 安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230022

目的探讨低氧诱导因子-1 (HIF-1α)对大鼠主动脉内皮细胞通透性的影响及作用机制。方法构建HIF-1α干扰及过表达载体,应用Lipofectamine 2000转染原代大鼠主动脉内皮细胞,浓度为200μg/ml遗传霉素(G418)筛选稳转细胞株,实时荧光定量PCR(... 详细信息

目的探讨低氧诱导因子-1 (HIF-1α)对大鼠主动脉内皮细胞通透性的影响及作用机制。方法构建HIF-1α干扰及过表达载体,应用Lipofectamine 2000转染原代大鼠主动脉内皮细胞,浓度为200μg/ml遗传霉素(G418)筛选稳转细胞株,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot检测HIF-1α、内皮素-1(ET-1)、内皮素受体A(ETA)、内皮素受体B(ETB)和闭锁小带(ZO-1)的表达;应用ET-1信号通路抑制剂BQ123及BQ788预处理HIF-1α过表达细胞株1 h,RT-PCR和Western blot检测HIF-1α、ET-1、ETA、ETB和ZO-1的表达,细胞膜通透性实验检测单层内皮细胞膜通透系数变化。结果与转染短发夹RNA-阴性对照组(shRNA-NC组)相比,转染shRNA-Ⅱ组HIF-1α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),ZO-1的表达则明显升高(P<0.01)。与转染GV230组比较,稳转GV230/HIF-1α组HIF-1α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),ZO-1的表达则明显降低(P<0.01);同时细胞膜通透性系数亦明显升高(P<0.01);应用BQ123和BQ788处理能够抑制HIF-1α诱导的ETA和ETB表达、增强ZO-1的表达,同时细胞膜通透性系数明显降低(P<0.01)。结论 HIF-1α可通过上调ET-1的表达进而增加大鼠主动脉内皮细胞的通透性,HIF-1α/ET-1信号轴在调控烧伤大鼠血管通透性方面具有重要作用。

关键词：大鼠内皮细胞血管通透性缺氧诱导因子-1α

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3-溴丙酮酸对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白表达水平的影响

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安徽医科大学学报 2019年第8期54卷 1174-1178页

作者：张梅束军朱宁沈继龙安徽医科大学第四附属医院呼吸内科合肥230032 安徽病原生物学省级实验室和人兽共患病安徽重点实验室(安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室) 合肥230032

目的观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白-9(MMP-9)表达能力的影响。方法划痕实验和Transwell实验检测A549细胞的迁移、侵袭能力;己糖激酶-2(HK2)活性试剂盒检测A54... 详细信息

目的观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白-9(MMP-9)表达能力的影响。方法划痕实验和Transwell实验检测A549细胞的迁移、侵袭能力;己糖激酶-2(HK2)活性试剂盒检测A549细胞内的HK2活性;ELISA检测试剂盒检测不同浓度3-BrPA对A549细胞培养上清液中和细胞内MMP-9、Vimentin表达水平的影响。结果划痕实验和Transwell结果显示,3-BrPA干预组的A549细胞迁移距离、迁移细胞数和侵袭细胞数均显著低于阴性对照组(P<0.05);HK2活性结果显示,3-BrPA干预组A549细胞内HK2活性明显低于阴性对照组(P<0.05);ELISA实验结果显示,3-BrPA干预组MMP-9、Vimentin表达水平明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论 3-BrPA能显著抑制人肺腺癌A549细胞的迁移和侵袭能力,能显著抑制肿瘤转移相关蛋白MMP-9和Vimentin的表达水平。

关键词： 3-溴丙酮酸肺腺癌迁移侵袭

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地摊经济背景下我国食源性寄生虫病防控工作的思考

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热带病与寄生虫学 2020年第4期18卷 247-250页

作者：计永胜姚湧刘淼沈继龙病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室

地摊经济是指通过摆地摊获得收入来源的一种经济形式。地摊经济对缓解就业压力,改善低收入人群的生活具有一定的现实意义,是我国市场经济的补充,有助于促进经济的发展,但也可能为食源性寄生虫病的防控带来一定的挑战。本文简要介绍了当... 详细信息

地摊经济是指通过摆地摊获得收入来源的一种经济形式。地摊经济对缓解就业压力,改善低收入人群的生活具有一定的现实意义,是我国市场经济的补充,有助于促进经济的发展,但也可能为食源性寄生虫病的防控带来一定的挑战。本文简要介绍了当前我国地摊美食中常见食材的食源性寄生虫感染情况以及人群中食源性寄生虫病的流行情况,为地摊经济背景下我国食源性寄生虫病的防控提出了建议。

关键词：地摊经济食源性寄生虫病防控措施

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肠道病毒71型感染C57BL/6J小鼠原代神经元模型建立

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中国组织化学与细胞化学杂志 2025年第1期34卷 39-45页

作者：王倩云汤仁树刘雪娟方伟朱彬彬张文艳芦宝静安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 合肥市疾病预防控制中心微生物检验科合肥230091 嘉兴市疾病预防控制中心嘉兴314001

目的本研究旨在探讨C57BL/6J小鼠原代神经元的分离培养方法,并建立肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)感染原代神经元的模型。方法采用新生24 h C57BL/6J小鼠,通过断头取脑,结合物理剪切与胰酶消化的方式分离神经元。通过光学显微镜观... 详细信息

目的本研究旨在探讨C57BL/6J小鼠原代神经元的分离培养方法,并建立肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)感染原代神经元的模型。方法采用新生24 h C57BL/6J小鼠,通过断头取脑,结合物理剪切与胰酶消化的方式分离神经元。通过光学显微镜观察不同培养时间点神经元的形态变化,并使用免疫荧光法鉴定细胞类型。在EV71感染原代神经元48 h后,观察细胞病变现象。利用共聚焦显微镜,通过免疫荧光法观察VP1蛋白与β-Ⅲtubulin的共定位,从而确认病毒感染情况。此外,采用不同感染时间点收集细胞上清液,检测半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective doses,TCID_(50)),以确定EV71感染原代神经元的增殖动力学。结果第6 d培养的原代神经元在显微镜下能够清晰地观察到细胞胞体及轴突,且神经元形成相互连接的网络结构;EV71感染48 h后,神经元出现典型的细胞病变效应(cytopathic effects,CPE),VP1与β-Ⅲtubulin显示出明显的共标现象。感染过程中,EV71病毒滴度呈现先升高后降低的趋势。结论通过物理剪切与胰酶消化联合方法成功分离并培养了原代神经元,成功建立了EV71感染原代神经元模型。该模型为后续研究EV71致病机制提供了新的平台和研究方法。

关键词：肠道病毒71型原代神经元细胞培养感染模型

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