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中国老年学杂志 2012年第18期32卷 3952-3954页

作者：王鹏许洁安恩训于顺何欣北华大学医学院基础医学院人体解剖学教研室吉林吉林132013 吉林化工学院理学院首都医科大学宣武医院北京老年病研究所神经生物学研究室

目的观察α-突触核蛋白(α-Syn)和其家族性突变型A30P和A53T对大鼠皮质神经元原代培养存活率的影响。方法取大鼠前脑皮质神经元进行分组培养。在培养基中添加α-Syn和其突变体A30P、A53T,培养至1 h、2 h和4 h进行观察,比较A30P、A53T与... 详细信息

目的观察α-突触核蛋白(α-Syn)和其家族性突变型A30P和A53T对大鼠皮质神经元原代培养存活率的影响。方法取大鼠前脑皮质神经元进行分组培养。在培养基中添加α-Syn和其突变体A30P、A53T,培养至1 h、2 h和4 h进行观察,比较A30P、A53T与α-Syn对原代培养神经元生长的影响。神经元以成像显微镜观察并计数,Western印迹法、免疫荧光法、单克隆抗体阻断实验鉴定各蛋白作用的特异性。结果添加α-Syn组的神经元培养至1 h、2 h和4 h时,其神经元的平均存活率大于对照组和添加A30P、A53T组(P<0.05)。A30P组和A53T组的神经元存平均活率与对照组无差异(P>0.05)。增加蛋白的浓度,α-Syn组神经元存活率与添加A30P和A53T组差异越大(P<0.01)。western blot和免疫荧光实验证实α-Syn可由培养基进入到神经元内,而A30P和A53T不能进入神经元。结论α-Syn在大鼠皮质原代神经元培养初期对其存活率具有促进作用,而其突变体A30P和A53T无这一作用,这一现象与其发生家族性突变有关,并可能成为导致PD发病原因之一。

关键词：突触核蛋白原代神经元突起生长帕金森病

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白介素-1β在缓激肽开放血脑屏障过程中的作用及其机制

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中国药理学通报 2012年第1期28卷 58-61页

作者：秦丽娟薛一雪谷艳婷张志勇张田孙娜王东春宋鸿艳中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001 河北联合大学基础医学院生理学教研室河北唐山063000 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院生理学教研室辽宁沈阳110016 河北联合大学附属医院神经外科河北联合大学附属唐山工人医院神经外科河北唐山063000 赤峰市松山医院内科内蒙古赤峰024005

目的探讨白介素-1β(IL-1β)在缓激肽(BK)开放血脑屏障(BBB)过程中的作用及其机制。方法缓激肽处理C6细胞后,动态观察培养液中IL-1β含量(放射免疫法)、C6细胞内热休克因子1(HSF1)蛋白的表达(Western blot法)及IL-1β的mRNA水平(RT-PCR... 详细信息

目的探讨白介素-1β(IL-1β)在缓激肽(BK)开放血脑屏障(BBB)过程中的作用及其机制。方法缓激肽处理C6细胞后,动态观察培养液中IL-1β含量(放射免疫法)、C6细胞内热休克因子1(HSF1)蛋白的表达(Western blot法)及IL-1β的mRNA水平(RT-PCR法)。利用伊文思蓝检测C6恶性胶质瘤大鼠经颈内动脉给予IL-1β及缓激肽后血脑屏障的通透性。结果缓激肽作用于C6细胞后,培养液中IL-1β的含量明显增加,于120 min含量最多,其后开始减少。C6细胞内HSF1的表达及IL-1β的mRNA水平也在给予缓激肽后明显增加,并分别于干预后的30 min和60 min达高峰后逐渐减少。缓激肽与IL-1β单独作用于C6动物后均可引起胶质瘤大鼠的血脑屏障通透性增加,且IL-1β对肿瘤模型动物血脑屏障通透性的影响与C6细胞培养液中IL-1β的含量相一致。结论 IL-1β可能介导了缓激肽开放血脑屏障的作用,此作用可能是由于缓激肽诱导C6细胞内HSF1的表达增加,增加的HSF1促进神经胶质瘤细胞释放IL-1β所致。

关键词：白介素-1β 热休克因子1 缓激肽血脑屏障血肿瘤屏障胶质瘤

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α-突触核蛋白功能片段对大鼠原代培养神经元的促生长作用

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中国老年学杂志 2012年第24期32卷 5476-5478页

作者：王鹏许洁安思训于顺何欣北华大学基础医学院人体解剖学教研室吉林吉林132013 吉林化工学院理学院首都医科大学宣武医院北京老年病研究所神经生物学研究室

目的研究α-突触核蛋白(α-Syn)对Wistar大鼠原代培养神经元的促生长作用。方法培养新生24 h的Wistar大鼠大脑皮质神经元,以一定密度接种至培养皿中。设计分组,在各组别培养基中加入α-Syn和它的功能片段NAC段、N端和C端。培养至1、2、... 详细信息

目的研究α-突触核蛋白(α-Syn)对Wistar大鼠原代培养神经元的促生长作用。方法培养新生24 h的Wistar大鼠大脑皮质神经元,以一定密度接种至培养皿中。设计分组,在各组别培养基中加入α-Syn和它的功能片段NAC段、N端和C端。培养至1、2、4 h固定观察,计数存活神经元的数目。Western印迹法、免疫荧光法进行特异性鉴定。结果当原代神经元培养至第1、2小时,α-Syn组和C端组的神经元数目比对照组多(P<0.05),N端组和NAC段组与对照组无差异(P>0.05);培养至第4小时,α-Syn组和C端组的存活神经元数目比对照组明显增多(P<0.01),而N端组和NAC段组与对照组无差异(P>0.05)。增加C端浓度,可以提高神经元的存活率(P<0.05)。Western印迹法和免疫荧光法证实蛋白质片段N端和C端可由培养基进入到原代神经元中,而NAC片段不能进入神经元。结论α-Syn在原代神经元培养初期对其生长有促进作用,具有这一功能的蛋白片段为C端,其可能的机制是进入到神经元内,促进胞内代谢活动,从而利于神经元的生长。

关键词：突触核蛋白原代神经元帕金森病

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C57BL／6J及NIH Swiss小鼠在抑郁模型中的行为学表现

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中华生物医学工程杂志 2012年第3期18卷 182-185页

作者：李亮萍王倩潘彦伶张怡慧魏佳优陈翌华高天明南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515 南方医科大学基础医学院基础医学系广州510515 南方医科大学基础医学院实验技术系广州510515

目的探讨两种不同遗传背景的小鼠C57BL／6J及NIH Swiss在抑郁模型中的行为学差异，为抗抑郁药物研究的实验动物选择提供参考，为研究遗传学因素在抑郁症发病过程中的作用提供有用的动物模型。方法C57BL／6J、NIH Swiss小鼠各14只，利用... 详细信息

目的探讨两种不同遗传背景的小鼠C57BL／6J及NIH Swiss在抑郁模型中的行为学差异，为抗抑郁药物研究的实验动物选择提供参考，为研究遗传学因素在抑郁症发病过程中的作用提供有用的动物模型。方法C57BL／6J、NIH Swiss小鼠各14只，利用强迫游泳实验和悬尾实验检测两种小鼠在应激条件下的抑郁样行为表现；利用旷场实验检测两种小鼠的自主运动能力。结果强迫游泳实验中，C57BL／6J小鼠的不动时间明显长于NIH Swiss小鼠[（133．198±5．749）s比（80．265±10．939）s，P=0．000]。悬尾实验中，C57BL／6J小鼠的不动时间高于NIH Swiss小鼠[（151．315±12．161）s比（95．107±14．649）s，P=0．007]。而在旷场实验中，两种品系的小鼠运动总路程、站立次数、运动时间、边缘区运动路程、边缘区运动时间、中央区运动路程、中央区运动时间差异均无统计学意义。结论C57BL／6J小鼠在急性应激的情况下更容易表现出抑郁样行为，而NIH Swiss小鼠则表现出一定的抑郁抗性，两种不同品系小鼠的不同行为学表现可能由于遗传因素导致。

关键词： C57BL/6J小鼠 NIH Swiss小鼠抑郁行为症状模型动物

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异柠檬酸脱氢酶突变和神经胶质瘤

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分子诊断与治疗杂志 2012年第5期4卷 343-346页

作者：李银王启琼张兴梅南方医科大学第一临床医学院广东广州510515 南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515

异柠檬酸脱氢酶(IDHs)单密码子发生的突变与胶质瘤的发生发展密切相关。目前认为IDHs的突变使其原有的酶活性丧失,但却能将α-酮戊二酸(α-KG)转变为双加氧酶抑制剂——2-羟戊二酸(2-HG),导致HIF-1α的表达增加和全基因组表观遗传学的改... 详细信息

异柠檬酸脱氢酶(IDHs)单密码子发生的突变与胶质瘤的发生发展密切相关。目前认为IDHs的突变使其原有的酶活性丧失,但却能将α-酮戊二酸(α-KG)转变为双加氧酶抑制剂——2-羟戊二酸(2-HG),导致HIF-1α的表达增加和全基因组表观遗传学的改变,从而诱导神经胶质瘤的发生。自2008年IDH1突变在胶质瘤中被发现以来,对这种肿瘤相关代谢分子的突变研究越来越多。本文综述近年来关于IDHs突变在胶质瘤的筛查、鉴别诊断、预后及治疗方面的研究进展。

关键词：神经胶质瘤异柠檬酸脱氢酶 2-羟戊二酸突变

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医学院校《生物化学与分子生物学》教学质量控制体系的建设

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中华医学教育探索杂志 2012年第9期11卷 931-933页

作者：秦宜德许功林石天霞安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室合肥230032 基础医学院科教办

《生物化学与分子生物学》是医学院校最重要的专业基础课之一，建立科学的教学质量控制体系对提高该课程教学质量至关重要。在此，探讨在医学院校建设《生物化学与分子生物学》质量控制体系应遵循的原则；阐述建立该体系的学校、院系和... 详细信息

《生物化学与分子生物学》是医学院校最重要的专业基础课之一，建立科学的教学质量控制体系对提高该课程教学质量至关重要。在此，探讨在医学院校建设《生物化学与分子生物学》质量控制体系应遵循的原则；阐述建立该体系的学校、院系和教研室质量监控三级框架结构；论述了《生物化学与分子生物学》质量控制体系的主要内容、实施办法、组织体系、评价体系和奖惩措施。

关键词：生物化学与分子生物学教学质量控制体系措施

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肿瘤坏死因子-α在缓激肽开放血肿瘤屏障过程中的作用

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实用医学杂志 2012年第6期28卷 899-902页

作者：秦丽娟薛一雪谷艳婷王东春张志勇张田孙娜中国医科大学基础医学院神经生物学教研室沈阳市110001 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院生理学教研室 110016 河北联合大学附属唐山工人医院神经外科唐山市063000 河北联合大学附属医院神经外科唐山市063000 河北联合大学基础医学院生理学教研室唐山市063000

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在缓激肽(BK)开放血肿瘤屏障(BTB)过程中的作用。方法:缓激肽处理C6细胞和胶质瘤大鼠后,放射免疫法动态监测培养液和脑胶质瘤组织内TNF-α浓度。利用伊文思蓝连续监测缓激肽/TNF-α处理后的C6恶性胶质... 详细信息

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在缓激肽(BK)开放血肿瘤屏障(BTB)过程中的作用。方法:缓激肽处理C6细胞和胶质瘤大鼠后,放射免疫法动态监测培养液和脑胶质瘤组织内TNF-α浓度。利用伊文思蓝连续监测缓激肽/TNF-α处理后的C6恶性胶质瘤大鼠血肿瘤屏障的通透性,同时电镜观察血肿瘤屏障的病理学改变。结果:缓激肽可增加C6细胞培养液和胶质瘤大鼠肿瘤组织内的TNF-α含量,且两者均于给予缓激肽后15min时达高峰(与对照组相比有显著统计学意义,P<0.01)。TNF-α与缓激肽单独作用于C6动物后,均可引起胶质瘤大鼠的血肿瘤屏障紧密连接开放及通透性增加。且肿瘤坏死因子-α对肿瘤模型动物血肿瘤屏障通透性的影响与C6细胞培养液中TNF-α含量相一致。结论:缓激肽开放血肿瘤屏障过程中,可能是通过某种机制引起肿瘤组织内TNF-α增加,增加的TNF-α进而引起了血肿瘤屏障的开放。

关键词：肿瘤坏死因子-α 缓激肽血肿瘤屏障

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内皮-单核细胞激活多肽酶Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性的机制

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解剖科学进展 2012年第1期18卷 33-36页

作者：李振刘云会薛一雪刘立波中国医科大学附属盛京医院神经外科辽宁沈阳110004 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001

目的研究内皮-单核细胞激活多肽II(endothelial monocyte activating polypeptide-II,EMAP-II)选择性开放血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)的作用机制。方法荷瘤大鼠被随机分成4组(每组12只):对照组,EMAP-II组,寡霉素组和寡霉素+EMAP-II组。采用伊文思蓝(Evans blue,EB)渗透性实验评估各组BTB通透性变化情况;Western Blot法检测脑微血管内皮细胞上紧密连接相关蛋白ZO-1的表达水平变化;双重免疫荧光法检测EMAP-II和α-ATP合成酶在脑微血管内皮细胞上的分布。结果 EMAP-II组BTB通透性显著高于对照组和寡霉素组(<0.01),紧密连接相关蛋白ZO-1的表达水平显著降低(<0.01),其作用受到ATP合成酶抑制剂寡霉素(Oligomycin)的显著抑制(<0.05);EMAP-II与α-ATP合成酶在胶质瘤微血管内皮细胞上共定位。结论 EMAP-II可能通过开放紧密连接增强BTB的通透性,脑微血管内皮细胞上的α-ATP合成酶是其可能的作用位点。

关键词：内皮-单核细胞激活多肽酶II 血肿瘤屏障通透性紧密连接 α-ATP合成酶大鼠

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乙酰乳香酸抑制日本血吸虫虫卵肉芽肿形成及对PLA_2、LTB_4、PGE_2和MMP-9的影响

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安徽医科大学学报 2012年第11期47卷 1355-1355页

作者：董胜鉴沈际佳安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室

目的探讨乙酰乳香酸(ABA)抑制日本血吸虫虫卵肉芽肿形成及其对生化介质磷脂酶A2(PLA2)、白三烯B4(LTB4)、前列腺素E2(PGE2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的作用。方法 6周龄SPF级C57鼠随机分成5组:A组为未感染血吸虫尾蚴同期正常鼠,B、C、D... 详细信息

目的探讨乙酰乳香酸(ABA)抑制日本血吸虫虫卵肉芽肿形成及其对生化介质磷脂酶A2(PLA2)、白三烯B4(LTB4)、前列腺素E2(PGE2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的作用。方法 6周龄SPF级C57鼠随机分成5组:A组为未感染血吸虫尾蚴同期正常鼠,B、C、D、E组经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(20±2)条,小鼠感染尾蚴21 d后,B组经腹腔注射溶剂环糊精280 mg/(kg.d)×20 d,C组感染后不加治疗,D、E组分别腹腔注射ABA140 mg/(kg.d)×20 d、280 mg/(kg.d)×20 d。所有小鼠12周龄时处死取血,收集血清,转氨酶试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST);ELISA法检测血清LTB4和肝匀浆PGE2;RT-PCR法检测肝匀浆PLA2和MMP-9mRNA的表达量;Western blot检测肝匀浆MMP-9的蛋白含量。取小鼠肝组织中叶固定、切片做HE染色,观察并测量肝虫卵肉芽肿面积,计算与正常肝组织的比值。结果 E组ALT、AST和LTB4的水平均显著低于B、C组(P<0.05),D组ALT、AST和LTB4的水平虽均低于B、C组,但差异无统计学意义。E组虫卵肉芽肿面积与正常肝组织的比值均显著小于B、C组(P<0.05),D组虫卵肉芽肿面积正常肝组织的比值虽均小于B、C组,但差异无统计学意义。另外,D组和E组肝匀浆中PGE2的水平均显著低于B组和C组(P<0.05);D组和E组的MMP-9 mRNA表达量显著低于B组和C组(P<0.05),D组和E组的MMP-9 mRNA的表达量显著高于A组(P<0.05);D组和E组MMP-9的水平显著低于B组和C组(P<0.05),D组和E组MMP-9的水平虽高于A组,但差异无统计学意义。A、B、C、D、E组PLA2mRNA的表达量无明显变化。结论ABA对抑制血吸虫虫卵肉芽肿炎症有一定效果,ABA可降低血清LTB4和肝匀浆中PGE2、MMP-9的生成,是抑制肉芽肿炎症反应的重要生化介质。

关键词：乙酰乳香酸日本血吸虫肉芽肿生化介质

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鞣花酸对血管内皮生长因子介导的新生血管过程的抑制作用及机制研究

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数理医药学杂志 2012年第4期25卷 403-406页

作者：陆楷李亮萍李明松李夏西曹加罗荣城南方医科大学附属南方医院肿瘤中心广州510515 南方医科大学基础医学院神经生物学教研室南方医科大学附属南方医院消化内科

目的:鞣花酸(Ellagic Acid,EA)是存在于多种水果及中草药中的一种多酚类成分,大量研究已经显示其具有显著的抗氧化和潜在的抗肿瘤作用。新生血管作用,是肿瘤发生早期、发展过程中的一个重要因素,对EA在血管内皮生长因子(VEGF)介导的新... 详细信息

目的:鞣花酸(Ellagic Acid,EA)是存在于多种水果及中草药中的一种多酚类成分,大量研究已经显示其具有显著的抗氧化和潜在的抗肿瘤作用。新生血管作用,是肿瘤发生早期、发展过程中的一个重要因素,对EA在血管内皮生长因子(VEGF)介导的新生血管过程中的作用及可能机制进行探讨。方法:使用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究对象,体外培养过程中给予EA10uM,24小时处理,通过细胞增殖实验,刮伤愈合实验,管道形成实验观察EA对于内皮细胞体外增殖,迁移是否具有作用;通过免疫印记实验(western blot)检测EA处理后内皮细胞中磷酸化的2型血管内皮生长因子受体(p-VEGFR2)的蛋白表达量变化。结果:细胞增殖实验中,对照组矫正后570nm吸光度为0.49±0.08,EA处理组为0.27±0.02,差异具有统计学意义(P<0.001);刮伤愈合分析,对照组12小时愈合率为(98.40±2.30)%,EA处理组为(50.61±3.94)%,差异具有统计学意义(P<0.001);管道形成实验中,EA处理组相比对照组管腔形成数量及完整性明显较差;western blot中,EA处理组的细胞中p-VEGFR2含量明显低于对照组,但VEGFR2总量组间无显著差异。结论:EA能够在体外明显抑制血管内皮细胞的增殖、迁移,其作用机制可能为拮抗VEGF介导的VEGFR2的磷酸化过程。

关键词：鞣花酸新生血管血管内皮生长因子

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