检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2021年第6期56卷 980-985页

作者：高越刘伯玉任翠平高勇朱禹杨莉温萌钱振芦宝静柳燕安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 阜阳市第二人民医院阜阳236015

目的建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)荧光型RT-RAA快速检测方法。方法以体外转录SARS-CoV-2的RNA为模板,利用单链DNA结合蛋白、重组酶和DNA聚合酶,在40.5℃恒温下,快速完成orf1ab基因和S基因序列片段的扩增,并用已知新冠核酸阳性和其他呼... 详细信息

目的建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)荧光型RT-RAA快速检测方法。方法以体外转录SARS-CoV-2的RNA为模板,利用单链DNA结合蛋白、重组酶和DNA聚合酶,在40.5℃恒温下,快速完成orf1ab基因和S基因序列片段的扩增,并用已知新冠核酸阳性和其他呼吸道病毒感染患者咽拭子标本进行初步评价。结果该研究建立的方法分别检测SARS-CoV-2两种基因的所需时长均在20 min以内,检测2种基因的灵敏度均为2拷贝数/反应管,特异性为100%,2种引物的最低检出限3次重复实验扩增反应起峰时间一致,曲线形态接近。结论该研究建立的方法灵敏性高,特异性强,重复性良好,临床标本检测结果符合率高,且不需要昂贵的仪器,适用于现场快速检测。

关键词： SARS-CoV-2 RT-RAA 核酸快速检测

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早老素在日本血吸虫生殖发育中的作用

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安徽医科大学学报 2021年第10期56卷 1590-1594页

作者：杨旭晗杨菲沈际佳刘淼安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室合肥230032

目的探讨早老素在日本血吸虫生殖发育及产卵中的作用。方法分别收集日本血吸虫尾蚴感染小鼠后16、18、24 d后虫体,首先通过荧光定量PCR分析早老素在上述3个阶段表达;从感染后28 d雌虫中分离卵巢,荧光定量PCR分析早老素在卵巢的表达量。... 详细信息

目的探讨早老素在日本血吸虫生殖发育及产卵中的作用。方法分别收集日本血吸虫尾蚴感染小鼠后16、18、24 d后虫体,首先通过荧光定量PCR分析早老素在上述3个阶段表达;从感染后28 d雌虫中分离卵巢,荧光定量PCR分析早老素在卵巢的表达量。体外培养28 d雌雄合抱的成虫,应用siRNA对早老素进行干扰,10 d后,观察早老素被敲降后对血吸虫产卵量,雌雄合抱及生殖系统的影响。结果荧光定量PCR结果显示,早老素在24 d雌虫表达量明显上调,同时证实该基因在卵巢组织高表达。当早老素被敲降后,雌雄合抱率和雌虫的产卵量也有明显下降。激光共聚焦结果显示相对于对照组和Mock组,RNA干扰组的生殖细胞减少,生殖系统形态出现异常。结论早老素在日本血吸虫生殖发育和产卵中起重要调控作用。

关键词：日本血吸虫早老素 RNA干扰生殖

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过表达OPTN和TAU-P301-L基因腺相关病毒构建与鉴定

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安徽医科大学学报 2020年第11期55卷 1649-1654页

作者：陈曦王鹏徐恰刘会郭若文刘芸许尹秦宜德安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学基础医学院免疫学教研室合肥230032

目的获得能够过表达OPTN和TAU-P301-L基因的重组腺相关病毒,检测其在体外对293T细胞的感染,并且为阿尔茨海默氏病(AD)研究提供新思路。方法从含有目的基因的大肠杆菌中提取包涵目的基因的质粒,利用PCR扩增获得目的基因,目的基因OPTN构建... 详细信息

目的获得能够过表达OPTN和TAU-P301-L基因的重组腺相关病毒,检测其在体外对293T细胞的感染,并且为阿尔茨海默氏病(AD)研究提供新思路。方法从含有目的基因的大肠杆菌中提取包涵目的基因的质粒,利用PCR扩增获得目的基因,目的基因OPTN构建到pAAV-IRES-ZsGreen1载体,目的基因TAU-P301L-V5构建到pAAV-CMV-mkate-IRES载体。鉴定质粒阳性克隆并测序。重组质粒pAAV-IRES-ZsGreen1-AAV9-OPTN和pAAV-CMV-mkate-IRES-AAV9-TAU-P301L-V5分别与包装质粒pAAV-RC9、辅助质粒pHelper通过Lipofiter^(TM)2000共转染293T细胞,获得AAV9病毒。利用相同方法,不使用目的基因构建对应绿色和红色AAV9对照病毒。qPCR法测定重组腺相关病毒载体滴度,病毒载体感染293T细胞进行病毒有效性及安全性鉴定,Western blotting和RT-PCR进行蛋白表达的鉴定,MTT检测OPTN蛋白与TAU-P301-L蛋白对293T细胞活力的影响。结果测序结果显示成功构建pAAV-IRES-ZsGreen1-AAV9-OPTN和pAAV-CMV-mkate-IRES-AAV9-TAU-P301L-V5腺相关病毒载体,qPCR测得病毒滴度为1.0×10^(12) vg/ml,病毒载体感染293T细胞转染效率为33.6%和20.5%, Western blot和RT-PCR显示蛋白过量表达。MTT结果显示OPTN组挽救了TAU-P301-L组的细胞凋亡。结论成功构建过表达OPTN和TAU-P301-L基因的腺相关病毒。OPTN蛋白可以减弱TAU-P301-L蛋白的细胞毒性。

关键词： OPTN TAU-P301-L 腺相关病毒 AAV9

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基于转录组学分析昆布多糖对C57BL/6小鼠非增生性糖尿病视网膜病变的影响

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安徽医科大学学报 2025年第3期60卷 392-398页

作者：张蕾张素梅杨振胡韦康白红枚周文静王子涵李名聪张胜权廖荣丰安徽医科大学第一附属医院眼科安徽医科大学附属阜阳市人民医院眼科安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室安徽医科大学附属合肥医院(合肥市第二人民医院)病理科

目的采用高通量测序技术(RNA-seq)探讨昆布多糖(LAM)对非增生性糖尿病视网膜病变(NPDR)的影响。方法采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病模型，观察LAM对糖尿病小鼠的影响。将C57BL/6小鼠随机分为对照(Control)、模型(Model)、昆... 详细信息

目的采用高通量测序技术(RNA-seq)探讨昆布多糖(LAM)对非增生性糖尿病视网膜病变(NPDR)的影响。方法采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病模型，观察LAM对糖尿病小鼠的影响。将C57BL/6小鼠随机分为对照(Control)、模型(Model)、昆布多糖治疗(LAM)组，每组8只小鼠。在建模8周后，LAM组接受为期4周的LAM腹腔注射治疗。记录3组小鼠血糖体质量变化，HE染色检查视网膜病变情况，采用RNA-seq挖掘STZ及LAM作用下糖尿病视网膜病变(DR)的关键差异基因(DEGs)。结果使用STZ可以成功建立DR模型，而LAM可以在一定程度上降低糖尿病小鼠血糖并改善糖尿病小鼠视网膜结构疏松的病理形态。经过RNA-seq对DEG挖掘发现与Control组相比，Model组小鼠视网膜共有214个DEGs,通过富集分析发现DR可通过PI3K-Akt信号通路加重病变程度。Model组与LAM组小鼠视网膜共有DEGs 42个，富集后显示LAM通过中性粒细胞胞外陷阱通路改善其病变程度。早期生长反应因子1 (Egr1),FBJ骨肉瘤致癌基因(Fos),核受体亚家族4A成员1(Nr4a1),盐诱导激酶1 (Sik1)受STZ调节，而LAM能显著回调其表达，可能与LAM对糖尿病视网膜病变的治疗密切相关。结论 DEG可通过PI3K-Akt信号通路加重糖尿病视网膜病变程度。LAM可以通过中性粒细胞胞外陷阱通路减轻糖尿病视网膜病变，Egr1、Fos、Nr4a1、Sik1是LAM治疗STZ诱导DR的关键基因。

关键词：高通量测序昆布多糖糖尿病视网膜病变 C57BL/6

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敲低和敲除OPTN基因SKOV3细胞的构建及其对抗癌药物敏感性的影响

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安徽医科大学学报 2020年第9期55卷 1315-1320页

作者：王鹏陈曦徐恰刘会郭若文刘芸许尹秦宜德安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学基础医学院免疫学教研室合肥230032

目的利用RNA干扰技术建立稳定敲低OPTN蛋白的人SKOV3细胞株和利用CRISPR/Cas 9基因编辑技术建立稳定敲除OPTN蛋白的人SKOV3细胞株,并研究降低OPTN基因表达对细胞抗癌药物敏感性的影响。方法针对OPTN基因设计shRNA和sgRNA的序列,并与慢... 详细信息

目的利用RNA干扰技术建立稳定敲低OPTN蛋白的人SKOV3细胞株和利用CRISPR/Cas 9基因编辑技术建立稳定敲除OPTN蛋白的人SKOV3细胞株,并研究降低OPTN基因表达对细胞抗癌药物敏感性的影响。方法针对OPTN基因设计shRNA和sgRNA的序列,并与慢病毒载体质粒pGPU 6_GFP_Neo和敲除质粒PX 459载体连接产生重组载体。并将重组的质粒测序验证,将测序成功的重组质粒载体与包装质粒(psPAX 2、pMD 2.G)共转染293 T细胞进行病毒包装,收集病毒上清液并感染SKOV3细胞,获得稳定敲低和稳定敲除OPTN基因的SKOV3细胞株。RT-PCR检测敲低组OPTN基因的表达的变化,PCR检测敲除组的基因组DNA的变化,Western blot法分析检测OPTN蛋白的表达情况。MTT法检测DDP对卵巢癌细胞增殖的影响,qRT-PCR检测caspase3、Bax、Bcl-2的mRNA的表达情况,Western blot检测caspase3、Bax、和Bcl-2蛋白的表达情况。结果成功构建慢病毒载体和基因敲除载体,在SKOV3细胞中的OPTN蛋白表达降低(敲减细胞株)或完全敲除(敲除细胞株)。OPTN基因被敲减和敲除的卵巢癌细胞(SKOV3)对顺铂(DDP)的敏感性降低;与对照组相比,DDP对细胞抑制率降低(P<0.05,P<0.01),基因敲除的细胞效果更好。通过qRT-PCR和Western blot检测稳定敲减和敲除OPTN蛋白的SKOV3细胞其凋亡相关基因caspase3、Bax的mRNA和蛋白的表达量降低,而Bcl-2的表达量上升(P<0.05,P<0.01)。结论在卵巢癌中降低或去除OPTN基因表达,能够降低卵巢癌细胞对抗癌药物DDP的敏感性,OPTN可能通过影响凋亡相关途径实现的。

关键词：卵巢癌 OPTN 基因敲减基因敲除细胞耐药性

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大黄联合益生菌治疗老年重度急性脑梗死的临床疗效研究

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老年医学与保健 2023年第1期29卷 30-34页

作者：王莹肖贺刘春华山东第一医科大学第二附属医院肝病诊疗中心山东泰安271000 泰安市中医医院脑病中心脑病科山东泰安271000 山东第一医科大学临床与基础医学院(基础医学研究所)生理与神经生物学教研室山东济南250000

目的探究大黄联合益生菌治疗对老年重度急性脑梗死患者肠道菌群、胃肠道功能、炎症指标及预后的影响。方法选取2020年1月—2021年12月收治的老年重度急性脑梗死患者128例,随机分为观察组(n=64)和对照组(n=64)。所有患者入组后接受心电... 详细信息

目的探究大黄联合益生菌治疗对老年重度急性脑梗死患者肠道菌群、胃肠道功能、炎症指标及预后的影响。方法选取2020年1月—2021年12月收治的老年重度急性脑梗死患者128例,随机分为观察组(n=64)和对照组(n=64)。所有患者入组后接受心电监护与常规对症治疗。在此基础之上,对照组接受益生菌肠内营养支持,观察组接受益生菌肠内营养支持联合大黄治疗,2组均连续治疗4周。比较2组治疗前后的肠道菌群、胃肠道功能、炎症指标及预后情况。结果2组治疗前后双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌和大肠杆菌的菌群数差值比较,差异有统计学意义(均P<0.001)。2组治疗前后降钙素基因相关肽和胃动素的差值比较,差异有统计学意义(均P<0.001)。2组治疗前后白介素-6、C反应蛋白和肿瘤坏死因子-α的差值比较,差异有统计学意义(均P<0.001)。2组美国国立卫生研究院脑卒中量表评分治疗前后的差值比较,差异有统计学意义(P<0.001)。结论大黄联合益生菌可能通过维持肠道菌群平衡、恢复胃肠道功能和减轻炎症反应等,改善老年重度急性脑梗死患者的预后。

关键词：老年脑梗死大黄益生菌肠道菌群

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低温和短日照诱导白纹伊蚊滞育的代谢适应研究

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中国媒介生物学及控制杂志 2024年第2期35卷 145-149页

作者：王淼简藓懿刘庆梁国锐谢静文王明姜玉庭赵彤言郭晓霞安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室北京100071

目的检测白纹伊蚊滞育期间成蚊及卵内总糖、糖原、总胆固醇、甘油三酯、山梨醇、海藻糖指标含量的变化,为白纹伊蚊的滞育生理学研究提供理论基础。方法在实验室条件下,通过设置短日照和低温诱导白纹伊蚊滞育,取产卵后雌蚊及滞育维持期蚊... 详细信息

目的检测白纹伊蚊滞育期间成蚊及卵内总糖、糖原、总胆固醇、甘油三酯、山梨醇、海藻糖指标含量的变化,为白纹伊蚊的滞育生理学研究提供理论基础。方法在实验室条件下,通过设置短日照和低温诱导白纹伊蚊滞育,取产卵后雌蚊及滞育维持期蚊卵,对总糖、糖原、海藻糖、甘油三酯、总胆固醇、山梨醇等生化物质进行提取,通过酶标仪检测其含量。运用GraphPad 8.0软件对实验数据进行非配对t检验统计分析。结果在滞育诱导条件下,白纹伊蚊成蚊总糖、糖原、海藻糖、山梨醇、甘油三酯、总胆固醇含量分别为(21.60±2.21)、(28.23±0.16)、(6.89±0.28)、(21.71±3.89)、(52.54±4.98)mg/g和(19.08±1.68)μmol/g,总糖、糖原、山梨醇较正常发育组高(均P<0.05)。蚊卵内总糖、糖原、海藻糖、总胆固醇生化指标含量分别为(103.94±8.06)、(8.61±1.54)、(1.35±0.07)mg/g和(13.58±0.28)μmol/g,均高于正常发育组(均P<0.01)。结论白纹伊蚊在滞育诱导条件下,卵内及成蚊体内生化指标发生不同程度的升高。总糖、糖原、海藻糖、总胆固醇等生化指标在蚊虫滞育生理中的作用在接下来的实验中可以进一步研究。

关键词：滞育白纹伊蚊滞育卵代谢

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中国优势基因型弓形虫Wh3株诱导人单核巨噬细胞THP-1偏移极化的研究

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安徽医科大学学报 2021年第2期56卷 169-175页

作者：张芳芳王聪罗庆礼沈继龙安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室合肥230032 安徽医科大学附属妇幼保健院(安徽省妇幼保健院) 合肥230001 合肥市第二人民医院检验科合肥230011 安徽医科大学基础医学院病原与免疫学实验中心合肥230032

目的研究弓形虫Wh3株感染巨噬细胞后,诱导巨噬细胞偏移分化情况。方法获取弓形虫Wh3株、RH株和ME49株,感染人巨噬细胞THP-1,感染后6、24 h分别收集培养上清液和巨噬细胞。ELISA检测培养上清液中巨噬细胞分泌的白细胞介素(IL)-6、IL-10... 详细信息

目的研究弓形虫Wh3株感染巨噬细胞后,诱导巨噬细胞偏移分化情况。方法获取弓形虫Wh3株、RH株和ME49株,感染人巨噬细胞THP-1,感染后6、24 h分别收集培养上清液和巨噬细胞。ELISA检测培养上清液中巨噬细胞分泌的白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、TGF-β等细胞因子浓度。qRT-PCR分析M1/M2相关基因iNOS、Arginase-1和TNF-α、IL-12、TGF-β、IL-10等细胞因子mRNA转录水平。Western blot分析巨噬细胞iNOS和Arginase-1蛋白表达水平。结果ELISA检测培养上清液中细胞因子含量,发现弓形虫ME49株感染巨噬细胞6、24 h后,IL-6和TNF-α含量最高(P<0.01);弓形虫RH株感染后IL-10和TGF-β含量最高(P<0.01);弓形虫Wh3株感染后培养上清液细胞因子含量介于RH株和ME49株之间(P<0.01)。感染ME49株弓形虫的巨噬细胞24 h后iNOS转录水平及感染6、24 h后TNF-α和IL-12转录水平均升高(P<0.001);RH株感染6、24 h后巨噬细胞的IL-10和Arginase-1的转录水平及感染6 h后TGF-β转录水平升高(P<0.05);同样发现弓形虫Wh3株介于RH株和ME49株之间。Western blot测定iNOS、Arginase-1也得到相似的结果。在感染Wh3株和ME49株弓形虫24 h后,iNOS蛋白表达增高(P<0.0001),而在感染RH株24 h后,Arginase-1表达量升高(P<0.001)。结论弓形虫Wh3株感染后,巨噬细胞表现出介于M1和M2之间的极化方向,且更接近于M2极化方向。

关键词：巨噬细胞极化经典激活途径旁路激活途径弓形虫

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社交环境下小鼠超声发声特征及机制的研究进展

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神经解剖学杂志 2021年第2期37卷 226-230页

作者：莫辉明赵秋影黄鑫陈娣刘海鹰王文挺杨彦玲延安大学医学院生理学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室西安710032 空军军医大学西京医院神经内科西安710032 广州医科大学附属第二医院神经研究所广州510220

小鼠能够发出的超出人耳听域范围(>20 kHz)的声音,称之为超声发声(USVs),幼鼠在母婴分离、受到低温刺激和触觉刺激下可发出USVs,从而引起母鼠探索、哺乳和筑巢等母性行为。成年小鼠在求偶行为、领地社交和等级社交时发出USVs。作为... 详细信息

小鼠能够发出的超出人耳听域范围(>20 kHz)的声音,称之为超声发声(USVs),幼鼠在母婴分离、受到低温刺激和触觉刺激下可发出USVs,从而引起母鼠探索、哺乳和筑巢等母性行为。成年小鼠在求偶行为、领地社交和等级社交时发出USVs。作为一种无创的、灵敏的、可量化的以及在出生后即可记录的实验指标,小鼠US-Vs被广泛用于社会行为、情感表达以及相关神经系统疾病模型研究中。本文就实验室用小鼠USVs的发声特征、社交环境下的诱发因素和发声机制做一综述,为进一步加深对相关社交行为特征的认识和其内在神经机制的理解提供新思路。

关键词：超声发声社交隔离求偶行为小鼠

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选择性神经损伤小鼠不同阶段情感障碍与运动功能评估

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神经解剖学杂志 2023年第3期39卷 309-315页

作者：卢伊凡蔡国洪万向东黄静武胜昔白占涛延安大学生命科学学院多肽资源药物研究中心陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心延安716099 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室西安710032 河北医科大学神经与血管生物学教育部重点实验室石家庄050011

目的:通过对选择性神经损伤(SNI)模型小鼠不同时期的疼痛阈值、运动功能和情绪状态等进行研究,系统性分析SNI模型在不同阶段的机体状态。方法:将腓总神经和胫神经进行结扎并远端切除约2 mm,保留腓肠神经以建立SNI模型。分别在术后7、14... 详细信息

目的:通过对选择性神经损伤(SNI)模型小鼠不同时期的疼痛阈值、运动功能和情绪状态等进行研究,系统性分析SNI模型在不同阶段的机体状态。方法:将腓总神经和胫神经进行结扎并远端切除约2 mm,保留腓肠神经以建立SNI模型。分别在术后7、14、30、60 d利用von Frey丝对小鼠进行机械痛敏检测,利用步态分析以检测小鼠运动功能。在术后30 d和60 d进行旷场实验(OFT)、高架十字迷宫实验(EPM)以检测小鼠焦虑样行为,利用悬尾实验(TST)和糖水偏好实验(SPT)检测抑郁样行为。结果:小鼠在SNI术后产生长期稳定的机械痛敏现象,术后60 d产生稳定的焦虑样和抑郁样行为,而绝望相关的抑郁样行为比快感缺失相关的抑郁样行为出现更早,在术后30 d即可出现。SNI模型小鼠出现长期稳定的步态行为异常,且运动功能恢复缓慢。结论:本研究系统性地评估SNI术后不同时期疼痛状态、运动功能和情绪状态,为后续相关的研究提供参考。

关键词：神经病理性痛选择性神经损伤步态分析情感障碍小鼠

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