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中华放射医学与防护杂志 2023年第5期43卷 373-378页

作者：余威悦洪兵卢棚梁立振陈妮安徽医科大学基础医学院核医学教研室合肥230032 合肥综合性国家科学中心能源研究院安徽省能源实验室合肥230031

目的基于微剂量学方法计算钆中子俘获治疗(157GdNCT)中释放低能电子的相对生物效应(RBE)值。方法使用蒙特卡罗(MC)程序Geant4-DNA包模拟钆中子俘获治疗中释放的低能电子在不同敏感靶标体积和物理模型中径迹结构的能量沉积分布情况及微... 详细信息

目的基于微剂量学方法计算钆中子俘获治疗(157GdNCT)中释放低能电子的相对生物效应(RBE)值。方法使用蒙特卡罗(MC)程序Geant4-DNA包模拟钆中子俘获治疗中释放的低能电子在不同敏感靶标体积和物理模型中径迹结构的能量沉积分布情况及微剂量学参数,并基于微剂量动力学模型(MKM)获取其RBE值。结果低能电子RBE值在不同的敏感靶标体积下差异性较大,且随着敏感靶标体积增大而减小。以敏感靶标直径6 nm的RBE值1.77为参考,敏感靶标直径10 nm的RBE值1.53,相比于6 nm的差异百分比为13%,而直径15 nm的RBE值1.40,相比于6 nm的差异百分比高达21%。不同Geant4-DNA物理模型对低能电子RBE影响较小。以物理模型option2的RBE值1.53作为参考,option6和option7的RBE值分别为1.49和1.52,相比于option2的差异百分比分别为2.6%和0.6%。结论利用MKM计算157GdNCT释放低能电子在不同敏感靶标体积及物理模型下的RBE值为1.40~1.77。

关键词：钆中子俘获治疗 Geant4 微剂量学相对生物效应

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大鼠牙髓神经胞体在三叉神经节内分布特点

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安徽医科大学学报 2016年第1期51卷 64-68页

作者：肖芳莉李国超马腾飞黄姗姗徐文华王烈成王元银安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院安徽省口腔疾病研究中心实验室合肥230032 安徽医科大学基础医学院生理学教研室合肥230032

目的了解正常及三叉神经痛(TN)模型大鼠的牙髓神经胞体在三叉神经节(TG)内分布情况及其投射关系,为临床通过TG治疗TN提供解剖学依据。方法本实验分为模型组和假手术组,在两组大鼠不同牙髓腔内注入逆行荧光探针,用荧光显微镜观察TG中荧... 详细信息

目的了解正常及三叉神经痛(TN)模型大鼠的牙髓神经胞体在三叉神经节(TG)内分布情况及其投射关系,为临床通过TG治疗TN提供解剖学依据。方法本实验分为模型组和假手术组,在两组大鼠不同牙髓腔内注入逆行荧光探针,用荧光显微镜观察TG中荧光标记神经元的分布情况。结果两组大鼠分别在右下及左上中切牙髓腔内注入绿色荧光探针Fast Di O 72 h后,分别在右侧TG后外侧区、左侧TG中段区观察到数个、成簇分布带有绿色荧光标记神经元;将两组大鼠右下及左上中切牙髓腔内分别注入Fast Di O、Fast Di I两种荧光探针,72 h后在其同侧TG的后外侧区和中间区分别观察到成簇分布的带有绿色和红色荧光的神经元;两组大鼠左侧上中切牙及下颌第一磨牙髓腔内分别注入荧光探针Fast Di I和Fast Di O,72 h后在同侧TG的后外侧区和中段区分别观察到成簇分布带有绿色和红色荧光的神经元。经统计学比较,两组之间相应牙髓神经胞体在TG内分布区域、数量及荧光强度没有明显区别。结论三叉神经上、下颌支神经胞体投射于同侧TG,并有一定区域性;TN产生不改变TG内神经元数量及投射联系,其可能与三叉神经功能活动改变有关。

关键词：三叉神经节三叉神经痛逆行荧光标记神经束路追踪法

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三叉神经痛患者部分促炎因子水平变化及意义

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安徽医科大学学报 2015年第5期50卷 711-713页

作者：黄姗姗徐文华马腾飞肖芳莉刘衍钊王烈成王元银安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院安徽省口腔疾病研究中心实验室合肥230032 安徽医科大学基础医学院生理学教研室合肥230032

收集30例三叉神经痛(TN)患者、17例恶性肿瘤患者、17例普通炎症患者及20例健康患者空腹静脉血,ELISA法检测血清中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。TN组患者血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达... 详细信息

收集30例三叉神经痛(TN)患者、17例恶性肿瘤患者、17例普通炎症患者及20例健康患者空腹静脉血,ELISA法检测血清中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。TN组患者血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而与恶性肿瘤组和普通炎症组比较,差异无统计学意义。IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子与TN发病有一定关联。

关键词：三叉神经痛白介素-1β 白介素-6 肿瘤坏死因子-α 酶联免疫吸附试验

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微生物组学的法医学应用新进展、挑战和机遇

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法医学杂志 2022年第5期38卷 625-639页

作者：雷梵章陈曼梅书燕方雅婷朱波峰南方医科大学法医学院、广州市法医多组学精准鉴识重点实验室广东广州510515 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230031

微生物群落演替与样本种族、性别、健康状况、生活方式、死亡时间等重要因素密切相关,具有较大的法医学潜在应用价值。本文总结了近年来微生物组学应用于法医学同一认定、地域特征鉴识、组织或体液来源鉴定以及死亡时间推断等方面的研究... 详细信息

微生物群落演替与样本种族、性别、健康状况、生活方式、死亡时间等重要因素密切相关,具有较大的法医学潜在应用价值。本文总结了近年来微生物组学应用于法医学同一认定、地域特征鉴识、组织或体液来源鉴定以及死亡时间推断等方面的研究,并介绍了基于二代测序数据用于微生物学研究的主要机器学习算法。此外,还分析了当下法医微生物组学面临的检材提取与保存、标准化和数据库建设、伦理审查和实践适用性等问题。未来借助微生物多组学技术将有望以全面动态的角度探索微生态系统,从而推动法医微生物组学的应用发展。

关键词：法医学微生物组学同一认定地域特征鉴识组织或体液来源鉴定死亡时间推断死因分析综述

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tau蛋白的过度表达对非神经源细胞生长与分化的影响

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中国药理学通报 2008年第3期24卷 365-369页

作者：李琪冯利杰王海萍梁燕沈玉先安徽医科大学教育部"重要遗传疾病基因资源利用"重点实验室(省部共建)安徽合肥230032 安徽医科大学临床药理研究所安徽合肥230032 安徽医科大学教育部"重要遗传疾病基因资源利用"重点实验室(省部共建)安徽合肥230032 安徽医科大学基础医学院神经生物学教研室安徽合肥230032

目的观察外源性tau蛋白的过度表达对非神经来源的293T细胞生长与分化的影响.方法构建带有GFP标签的表达人全长tau蛋白的质粒pEGFP-C1-tau,并转染293T细胞,通过荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察及免疫印迹等方法,观察tau的过度表达对2... 详细信息

目的观察外源性tau蛋白的过度表达对非神经来源的293T细胞生长与分化的影响.方法构建带有GFP标签的表达人全长tau蛋白的质粒pEGFP-C1-tau,并转染293T细胞,通过荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察及免疫印迹等方法,观察tau的过度表达对293T细胞的生长与分化的影响.结果在瞬时转染的293T细胞中可以观察到,GFP全细胞分布,而GFP-tau主要定位于胞质.tau的过量表达可引起细胞形态改变,如突起减少或消失,细胞分裂受阻及多核巨细胞的形成等,最后导致细胞死亡.在稳定转染细胞中,tau蛋白的过度表达可诱导细胞出现凋亡的特征性改变.结论 tau蛋白在非神经源性细胞中的过度表达可影响细胞的分裂、分化,并诱导细胞凋亡,提示tau蛋白有直接的细胞毒作用.

关键词： tau蛋白转染基因表达细胞形态

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RNA-蛋白质复合物规模化富集与鉴定新方法

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高等学校化学学报 2024年第11期45卷 209-217页

作者：董沛滢刘彤秦伟捷安徽医科大学基础医学院合肥230032 医学蛋白质组全国重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心(北京)军事科学院军事医学研究院北京102206

RNA-蛋白质复合物调控着生物体内各种生理过程,在RNA从合成到降解的生理活动历程中发挥关键作用.为了更全面解析RNA-蛋白复合物(RNA-protein complexes,RPC)相互作用网络,近年来研究者除了开发RNA直接结合蛋白(RNA-binding proteins,RBP... 详细信息

RNA-蛋白质复合物调控着生物体内各种生理过程,在RNA从合成到降解的生理活动历程中发挥关键作用.为了更全面解析RNA-蛋白复合物(RNA-protein complexes,RPC)相互作用网络,近年来研究者除了开发RNA直接结合蛋白(RNA-binding proteins,RBP)规模化富集方法,也将目光转向了与RBP存在相互作用的RNA间接结合蛋白(RNA-associated proteins,RAP),二者与RNA共同组成了结构复杂、功能各异的RPC.但以往方法均将RPC中包含的所有蛋白视为整体,统一鉴定,缺乏能够规模化区分RBP和RAP的有效途径.基于此,本文联合使用254 nm紫外交联法和二硫双琥珀酰亚胺丙酸酯(DSP)蛋白交联剂,通过不同反应原理将RBP与RAP分别富集于链霉素磁珠,进而通过分步洗脱方法分别获取纯化的RBP和RAP,并结合质谱分析实现二者的各自独立鉴定.采用该方法在HeLa细胞中共鉴定到2007个高置信RBP,927个高置信RAP,其中有243个RAP为首次鉴定.此方法的建立有助于细化RPC中各组分间的相互作用网络,为后续的生物应用提供方法和数据基础.

关键词： RNA结合蛋白蛋白质组学富集分离质谱

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结核分枝杆菌休眠生存调节子蛋白Rv2628的表达、纯化及其兔多克隆抗体的制备

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第1期39卷 75-80页

作者：汪欣然马文潇孙菀蔚宁星语黄蓉蓉刘淼安徽医科大学第二临床医学院安徽医科大学第一临床医学院安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032

目的表达和纯化结核分枝杆菌休眠生存调节子蛋白Rv2628,制备并鉴定其兔多克隆抗体。方法以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,扩增Rv2628基因,构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌表达菌株中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表... 详细信息

目的表达和纯化结核分枝杆菌休眠生存调节子蛋白Rv2628,制备并鉴定其兔多克隆抗体。方法以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,扩增Rv2628基因,构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌表达菌株中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,利用镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)层析柱纯化目的蛋白,以纯化Rv2628蛋白免疫新西兰大白兔获得兔多克隆抗体,分别利用Western blot法和间接ELISA验证多克隆抗体的特异性。结果成功构建pET-30a-Rv2628重组载体,IPTG诱导后Rv2628蛋白在大肠杆菌主要以包涵体形式表达,Ni-NTA层析柱纯化获得高纯度Rv2628蛋白。免疫兔后获得兔抗Rv2628多克隆抗体具有良好的抗原结合特性,且抗体效价达1∶1093500。结论成功制备高纯度Rv2628蛋白及高效价兔抗Rv2628多克隆抗体。

关键词：结核分枝杆菌休眠生存调节子 Rv2628 多克隆抗体

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激活脊髓小电导钙离子激活钾通道可抑制小鼠吗啡痛觉过敏

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中国药理学通报 2017年第4期33卷 547-551页

作者：朱骏生章功良杜雷姬宁宁黄思婷张咏梅花嵘徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室江苏徐州221002 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230032 徐州医科大学附属医院急救中心江苏徐州221002

目的探究脊髓小电导钙离子激活钾通道(small conductance Ca^(2+)-activated K^+channels,SK通道)激活后对小鼠吗啡所致痛觉过敏的影响。方法选用♂C57BL6/N小鼠,建立吗啡痛觉过敏模型,鞘内注射SK通道激活剂1-EBIO后,测量小鼠热甩尾潜伏... 详细信息

目的探究脊髓小电导钙离子激活钾通道(small conductance Ca^(2+)-activated K^+channels,SK通道)激活后对小鼠吗啡所致痛觉过敏的影响。方法选用♂C57BL6/N小鼠,建立吗啡痛觉过敏模型,鞘内注射SK通道激活剂1-EBIO后,测量小鼠热甩尾潜伏期(tail withdrawal latency,TWL),机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和内脏痛阈的变化。结果吗啡痛觉过敏模型小鼠与生理盐水对照组小鼠相比,热甩尾潜伏期、机械缩足阈值和内脏痛阈均降低;而鞘内注射SK通道激活剂1-EBIO后,与给药前相比,小鼠的痛阈热甩尾潜伏期,机械缩足阈值和内脏痛阈均升高;吗啡模型组小鼠的脊髓SK2膜蛋白表达量较对照组明显降低,而给予1-EBIO后,脊髓SK2膜蛋白表达量较模型组明显升高。结论脊髓SK通道参与小鼠吗啡引起的痛觉过敏。

关键词： SK通道 1-EBIO 吗啡痛觉过敏脊髓小鼠

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刚地弓形虫致密颗粒蛋白24多克隆抗体的制备与初步应用

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第3期36卷 279-285页

作者：付胜男杨云王聪罗庆礼余莉安徽医科大学基础医学院微生物学教研室、动物源性传染病安徽省重点实验室、人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032

目的制备并鉴定鼠抗刚地弓形虫致密颗粒蛋白24(dense granule protein 24,GRA24)多克隆抗体,并探索其初步应用。方法利用MEGA-X软件比对弓形虫不同虫株GRA24编码区序列,使用Protean软件分析GRA24蛋白优势肽段,通过PCR反应扩增编码该肽... 详细信息

目的制备并鉴定鼠抗刚地弓形虫致密颗粒蛋白24(dense granule protein 24,GRA24)多克隆抗体,并探索其初步应用。方法利用MEGA-X软件比对弓形虫不同虫株GRA24编码区序列,使用Protean软件分析GRA24蛋白优势肽段,通过PCR反应扩增编码该肽段的碱基序列,并连接至p ET-28a载体中。将获得的GRA24截短蛋白原核表达质粒转化于大肠埃希菌BL21感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测蛋白表达与纯化。使用纯化的GRA24截短蛋白皮下注射免疫BALB/c小鼠获得GRA24截短蛋白多克隆抗体,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测抗体效价,采用Western blotting检测抗体特异性,并将该抗体应用于免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)。结果SDS-PAGE结果表明成功构建重组质粒,考马斯亮蓝染色结果显示获得高纯度重组GRA24截短蛋白。ELISA结果显示,GRA24截短蛋白多克隆抗体效价在1∶208400以上;Western blotting检测发现,该抗体可识别弓形虫不同虫株内源性GRA24蛋白,特异性识别重组GRA24截短蛋白;间接IFA检测发现,弓形虫入侵宿主细胞16 h后分泌的GRA24蛋白定位于宿主细胞核中。结论成功制备广适性、高效价、强特异性的抗弓形虫GRA24多克隆抗体,可应用于Western blotting与IFA,为进一步研究GRA24功能奠定了基础。

关键词：刚地弓形虫致密颗粒蛋白24 多克隆抗体免疫荧光

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靶向STAT3通过调控糖酵解及间皮间充质转分化改善腹膜透析相关腹膜纤维化

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安徽医科大学学报 2024年第4期59卷 647-653页

作者：邓启磊符姣李楠何萌萌黄大可张培安徽医科大学第一附属医院肾脏内科合肥230032 安徽医科大学附属阜阳医院肾脏内科阜阳236112 云南省宣威市中医院宣威655499 安徽医科大学基础医学院综合实验中心合肥230032

目的研究高糖对人腹膜间皮细胞系(HMrSV5)间皮-间充质转化(MMT)的影响及机制,以及药理阻断信号转导和转录激活因子(STAT3)对大鼠腹膜的保护作用。方法将动物分为3组:假手术组(Sham组)、模型组和STAT3抑制剂组。在大鼠背侧皮肤下手术植... 详细信息

目的研究高糖对人腹膜间皮细胞系(HMrSV5)间皮-间充质转化(MMT)的影响及机制,以及药理阻断信号转导和转录激活因子(STAT3)对大鼠腹膜的保护作用。方法将动物分为3组:假手术组(Sham组)、模型组和STAT3抑制剂组。在大鼠背侧皮肤下手术植入微型腹膜透析导管,每日注射高糖透析液诱导大鼠腹膜纤维化模型。10周后,苏木精-伊红(HE)染色观察腹膜组织病理改变,免疫组化方法检测腹膜组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。模拟高糖微环境对HMrSV5进行细胞培养,转染si-STAT3,Western blot方法检测STAT3蛋白和磷酸化水平及糖酵解相关代谢酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶-3(PFKFB3)、乳酸脱氢酶A(LDHA)的表达。结果HE染色显示STAT3抑制剂(BP-1-102)可抑制高糖透析大鼠的腹膜下组织增厚及血管增生。模型组大鼠腹膜组织TGF-β1蛋白表达显著高于假手术组,STAT3抑制剂组大鼠腹膜TGF-β1蛋白表达显著低于模型组(P<0.05)。与对照组相比,高糖诱导HMrSV5细胞STAT3激活,以及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的上调和E-钙黏蛋白(E-cadherin)下调(P<0.05)。此外,高糖处理导致间皮细胞糖酵解相关代谢酶(PFKFB3、LDHA)的表达增加(P<0.05)。si-STAT3能有效抑制高糖诱导的间皮细胞STAT3活化,降低高糖诱导的PFKFB3、LDHA和α-SMA高表达,同时升高E-cadherin水平(P<0.05)。结论STAT3信号通路参与高糖诱导的HMrSV5过度糖酵解和MMT的发生,靶向STAT3有助于减轻大鼠腹膜透析液诱导的腹膜纤维化和血管新生。

关键词： STAT3 PFKFB3 腹膜纤维化间皮-间充质转化糖酵解腹膜透析 BP-1-102

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