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褪黑素通过p38／MAPK信号通路调控oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞MLCK的表达

安徽医科大学学报 2008年第1期43卷 16-20页

作者：肖林林朱华庆程筱雯江志奎左莉周青桂淑玉汪渊安徽医科大学分子生物学实验室生物化学教研室和安徽省/省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室合肥230032

目的探讨褪黑素(MLT)通过p38/MAPK信号通路调控oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),分空白对照组、DMSO对照组、DMSO+oxLDL组、DM-SO+oxLDL+SB203580组、DMSO+oxLDL+MLT组... 详细信息

目的探讨褪黑素(MLT)通过p38/MAPK信号通路调控oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),分空白对照组、DMSO对照组、DMSO+oxLDL组、DM-SO+oxLDL+SB203580组、DMSO+oxLDL+MLT组、DMSO+oxLDL+MLT+SB203580组。RT-PCR、Western blot、γ-32P-ATP掺入法分别检测各组HUVEC MLCK转录、表达和活性及MLT对p38磷酸化的影响。结果RT-PCR显示oxLDL组MLCK转录增强,MLT组与SB203580组均抑制MLCK的转录;Western blot结果表明oxLDL组MLCK表达、p38磷酸化增强,MLT组与SB203580组均抑制MLCK的表达及p38磷酸化;γ-32P-ATP掺入法检测MLCK活性提示oxLDL组MLCK活性增强,MLT与SB203580降低MLCK活性。结论MLT可能通过p38/MAPK通路调控MLCK的转录、表达和活性。

关键词：肌球蛋白轻链激酶褪黑激素磷酰化脐静脉/细胞学

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重组Endocan转染MDCK细胞对其表达骨桥蛋白的影响

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安徽医科大学学报 2008年第4期43卷 381-384页

作者：陈孝宇胡超杰左莉刘超张素梅胡若磊朱华庆周青桂淑玉汪渊安徽医科大学分子生物学实验室、生物化学教研室和安徽省／省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院呼吸内科合肥230022

目的构建Endocan真核表达载体pcDNA3.1-En-docan,转染犬肾小管上皮细胞MDCK,观察其在MDCK中的表达并初步分析其对骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法应用PCR从pET28-Endocan中扩增出Endocan cDNA全长序列,酶切后导入pcDNA 3.1/myc-his A多... 详细信息

目的构建Endocan真核表达载体pcDNA3.1-En-docan,转染犬肾小管上皮细胞MDCK,观察其在MDCK中的表达并初步分析其对骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法应用PCR从pET28-Endocan中扩增出Endocan cDNA全长序列,酶切后导入pcDNA 3.1/myc-his A多克隆位点,构建真核表达载体pcDNA3.1-Endocan;瞬时转染MDCK细胞,Western blot检测Endocan和OPN表达。结果经双酶切鉴定及测序分析表明Endocan已经克隆到pcDNA 3.1/myc-his A中。Western blot结果表明转染成功,Endocan表达量增加,且OPN随其而增加。结论Endocan可促进MDCK表达OPN。

关键词：转染基因表达肾肿瘤/遗传学

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阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白表达的影响

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安徽医科大学学报 2008年第6期43卷 670-673页

作者：刘超江志奎程筱雯肖林林朱华庆左莉张素梅胡若磊陈孝宇周青汪渊安徽医科大学分子生物学实验室、生物化学教研室和安徽省／省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室合肥230032 安徽医科大学解放军临床学院(解放军第105医院) 合肥230023

目的探讨阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法18只4周龄ApoE基因敲除小鼠,随机分为正常组、高胆固醇组、高胆固醇+阿伐他汀组。高胆固醇+阿伐他汀组给予阿伐他汀5mg/(kg·d),12周后获取血和... 详细信息

目的探讨阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法18只4周龄ApoE基因敲除小鼠,随机分为正常组、高胆固醇组、高胆固醇+阿伐他汀组。高胆固醇+阿伐他汀组给予阿伐他汀5mg/(kg·d),12周后获取血和肝脏。分析血清胆固醇和低密度脂蛋白浓度。肝脏组织切片用于HE染色以观察肝脏组织学病变;应用免疫组化PV法检测肝脏组织中OPN的表达;从冰冻肝脏组织中提取蛋白,用Western blot方法检测OPN变化。结果阿伐他汀有显著降血清胆固醇和抑制肝脏的脂肪病变的作用;免疫组织化学和Western blot检测结果显示,高胆固醇+阿伐他汀组OPN表达比高胆固醇组显著降低(P<0.05)。结论阿伐他汀可降低高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠血清胆固醇浓度,抑制肝脂肪变性,下调OPN的表达。

关键词：高胆固醇血症小鼠,基因敲除

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基于IgY的EUSA用于日本血吸虫病循环抗原的检测

基于IgY的EUSA用于日本血吸虫病循环抗原的检测

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中华医学会第七次全国检验医学学术会议

作者：周银娣罗庆礼余轶婧张诗海李静沈继龙人兽共患病安徽省重点实验室教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室(安徽医科大学)

目的以鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)替代哺乳动物来源的IgG抗体,建立双抗体夹心ELISA用于日本血吸虫病的诊断。方法制备并纯化抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的卵黄抗体IgY和兔抗SEA的多克隆IgG抗体:以抗SEA的IgG为捕获抗体,IgY为检测抗体... 详细信息

目的以鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)替代哺乳动物来源的IgG抗体,建立双抗体夹心ELISA用于日本血吸虫病的诊断。方法制备并纯化抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的卵黄抗体IgY和兔抗SEA的多克隆IgG抗体:以抗SEA的IgG为捕获抗体,IgY为检测抗体的双抗体夹心ELISA诊断方法,共检测血清443份,其中急性血吸虫病患者血清68例,慢性血吸虫病患者180例,正常人100例,肺吸虫感染者20例,华支睾吸虫感染者48例和钩虫感染者血清27例。探讨基于IgY的循环抗原检测的应用价值。结果成功制备并鉴定了特异性IgY和IgG抗体,建立了双抗体夹心ELISA检测体系:检测急性血吸虫病患者和慢性血吸虫病患者血清的阳性率分别为79.4%和64.4%,最低灵敏度为9.3ng/ml,;正常人血清的阴性率为92%;与肺吸虫、华支睾吸虫、钩虫感染者血清的交叉反应分别为20%,20.8%。14.8%。结论建立了基于IgY的双抗夹心ELISA检测体系,用于日本血吸虫SEA的检测具有高度特异性和较高的敏感性,可试用于日本血吸虫病的辅助诊断。

关键词： IgY 卵黄抗体 SEA

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卵黄抗体IgY用于诊断和治疗的研究进展

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热带病与寄生虫学 2008年第4期6卷 239-242页

作者：周银娣沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室人畜共患病安徽省重点实验室重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室

鸡卵黄免疫球蛋白(egg yolk immunoglobulin)又称IgY或卵黄抗体,是用特异性抗原注射未经免疫的产蛋母鸡后,母鸡血液中的抗体转移到蛋黄中,成为蛋黄中唯一存在的抗体。近年来卵黄抗体逐渐引起人们的注意,而且得到越来越广泛

关键词： IgY 特异性哺乳动物卵黄抗体交叉反应性抗体滴度弗氏完全佐剂

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猪囊尾蚴Ts2基因的免疫筛选克隆及生物信息学分析

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中国血吸虫病防治杂志 2008年第3期20卷 201-203页

作者：郑胜生汪学龙沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室、安徽省人兽共患病重点实验室、教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室合肥230032

目的筛选并分析猪囊尾蚴新基因,为猪囊尾蚴病患者的免疫学诊断提供特异的重组抗原及有效的疫苗候选分子。方法用猪囊尾蚴病患者血清抗体筛选猪囊尾蚴cDNA文库,将所获阳性克隆的插入片段进行扩增并测序,通过互联网NCBI Gen Bank和蛋白质... 详细信息

目的筛选并分析猪囊尾蚴新基因,为猪囊尾蚴病患者的免疫学诊断提供特异的重组抗原及有效的疫苗候选分子。方法用猪囊尾蚴病患者血清抗体筛选猪囊尾蚴cDNA文库,将所获阳性克隆的插入片段进行扩增并测序,通过互联网NCBI Gen Bank和蛋白质分析软件进行分析。结果筛选阳性克隆,经分析具有738bp完整开放阅读框,是1个新基因,登录号EU221317,命名为Ts2。结论成功克隆了猪囊尾蚴Ts2基因片段,为进一步实验提供了条件。

关键词：囊尾蚴 cDNA文库免疫学筛选克隆

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胰岛素对糖尿病大鼠肾小管骨桥蛋白表达的影响

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中华疾病控制杂志 2008年第4期12卷 343-346页

作者：汪枫陈孝宇左莉周青汪渊安徽医科大学分子生物学实验室、生物化学教研室和安徽省／省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽合肥230032

目的研究胰岛素对糖尿病模型肾小管骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法腹腔注射链脲佐菌素(65mg/kg体重)复制大鼠糖尿病模型。治疗组每日注射胰岛素(3U/d),共12w。用不同浓度葡萄糖处理MDCK细胞后,加入胰岛素(100mU/L)。免疫组织化学和Weste... 详细信息

目的研究胰岛素对糖尿病模型肾小管骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法腹腔注射链脲佐菌素(65mg/kg体重)复制大鼠糖尿病模型。治疗组每日注射胰岛素(3U/d),共12w。用不同浓度葡萄糖处理MDCK细胞后,加入胰岛素(100mU/L)。免疫组织化学和Western blot检测OPN表达的变化。结果与正常对照组相比,糖尿病组肾小管OPN表达显著升高,胰岛素治疗组肾小管OPN表达较糖尿病组则明显下降。胰岛素明显降低高糖诱导肾小管上皮细胞OPN的表达。结论胰岛素可明显降低糖尿病模型肾小管OPN的表达。

关键词：糖尿病胰岛素大鼠

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人轮状病毒的主要标志物与疫苗研究

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热带病与寄生虫学 2008年第4期6卷 233-235页

作者：张诗海沈继龙安徽医科大学第一附医院检验科安徽省立儿童医院检验科安徽医科大学、安徽省人兽共患病重点实验室、教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室

已知许多病毒、细菌、寄生虫可引起感染性腹泻。轮状病毒(rotavirus,RV)被证实为发展中和发达国家儿童胃肠炎的一种重要病原体。在美国,1997～2000年间因腹泻而住院的5岁以下患者中,18%～19%是由RV引起的。亚洲监测网最新报

关键词：轮状病毒血清型血清变种标志物内质网衣壳蛋白疫苗菌苗婴幼儿中和抗体 VPS 病毒蛋白电泳型抗原性中和抗原

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血吸虫病免疫诊断抗原研究进展

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临床输血与检验 2008年第3期10卷 281-285页

作者：郑辉吴赟沈继龙安徽医科大学附属安徽省立医院合肥230001 安徽医科大学重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室人畜共患病安徽省重点实验室安徽医科大学病原生物学教研室

血吸虫病仍然是我国重要的公共卫生问题之一,诊断抗原一直是血吸虫病诊断研究热点。随着分子生物学技术的发展,血吸虫病的诊断抗原已由最初的粗抗原发展成为组分抗原及由基因重组的方法生产合成的重组抗原。本文综述了近年来血吸虫免疫... 详细信息

血吸虫病仍然是我国重要的公共卫生问题之一,诊断抗原一直是血吸虫病诊断研究热点。随着分子生物学技术的发展,血吸虫病的诊断抗原已由最初的粗抗原发展成为组分抗原及由基因重组的方法生产合成的重组抗原。本文综述了近年来血吸虫免疫诊断抗原的研究进展,并分析了诊断抗原存在的问题及将来的发展趋势。

关键词：血吸虫病诊断抗原重组抗原

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Peutz-Jeghers综合征的分子遗传学研究进展

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国际遗传学杂志 2008年第3期31卷 227-229+164页

作者：郑厚峰王培光杨森张学军合肥安徽医科大学皮肤病研究所教育部"重要遗传病基因资源利用"重点实验室(省部共建)安徽医科大学第一附属医院皮肤科

Peutz-Jeghers 综合征(PJS)是一种罕见的常染色体显性遗传性皮肤病。目前认为由位于19p13.3的 STK11基因突变所致。随其致病基因的发现,近年来国内外学者对该病进行了深入的研究,本文就近年来的文献对 PJS 致病基因的搜寻,基因型与表型... 详细信息

Peutz-Jeghers 综合征(PJS)是一种罕见的常染色体显性遗传性皮肤病。目前认为由位于19p13.3的 STK11基因突变所致。随其致病基因的发现,近年来国内外学者对该病进行了深入的研究,本文就近年来的文献对 PJS 致病基因的搜寻,基因型与表型的相互关系,PJS 患者的肿瘤易感性,及其动物模型等方面的研究进展作一综述。

关键词： Peutz-Jeghers 综合征 STK11 恶性肿瘤

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