检索结果-内蒙古大学图书馆

中华预防医学杂志 2011年第9期45卷 859-860页

作者：周银娣温和汪六庆沈继龙合肥市第一人民医院检验科安徽省230032 徐州医学院病原生物学教研室安徽医科大学病原生物学教研室人畜共患病安徽省重点实验室

目前，血吸虫病循环抗原的检测敏感度和特异度均不理想，交叉反应有待解决[1]。免疫检测体系中，探针的特异度和亲和力是影响检测效果的主要因素。IgY是卵黄免疫球蛋白的简称，是用特异性抗原免疫产蛋母鸡后母鸡血液中的抗体转移到蛋黄... 详细信息

目前，血吸虫病循环抗原的检测敏感度和特异度均不理想，交叉反应有待解决[1]。免疫检测体系中，探针的特异度和亲和力是影响检测效果的主要因素。IgY是卵黄免疫球蛋白的简称，是用特异性抗原免疫产蛋母鸡后母鸡血液中的抗体转移到蛋黄中去的，且是蛋黄中惟一存在的抗体，和哺乳动物的IgG相比，IgY具有高特异、高灵敏度，

关键词： IgG-ELISA 循环抗原检测日本血吸虫病卵黄免疫球蛋白特异度交叉反应抗原免疫哺乳动物

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Th17细胞因子及炎症趋化因子在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的表达

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安徽医科大学学报 2011年第11期46卷 1124-1129页

作者：谷玉清张玉侠黄大可侯昕刘淼任翠平沈际佳安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032 安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 安徽医科大学综合实验室合肥230032

目的观察日本血吸虫感染C57BL/6小鼠肝脏Th17细胞因子及其相关炎症趋化因子动态变化和肝脏虫卵肉芽肿病变,探讨其在日本血吸虫虫卵肉芽肿病变形成中的作用。方法建立日本血吸虫感染C57BL/6小鼠模型,感染后2、4、6、8、10和12周剖杀小鼠... 详细信息

目的观察日本血吸虫感染C57BL/6小鼠肝脏Th17细胞因子及其相关炎症趋化因子动态变化和肝脏虫卵肉芽肿病变,探讨其在日本血吸虫虫卵肉芽肿病变形成中的作用。方法建立日本血吸虫感染C57BL/6小鼠模型,感染后2、4、6、8、10和12周剖杀小鼠,用实时荧光定量PCR法检测小鼠肝脏白介素17(IL-17)、IL-6、转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-23、炎症趋化因子(CX-CL1、CXCL2和CCL11)mRNA水平;ELISA法检测肝脏IL-17、CXCL1、CXCL2和CCL11蛋白水平;肝脏石蜡切片,HE染色后动态观察小鼠肝脏虫卵肉芽肿大小。结果 IL-17、IL-6、TNF-α、IL-23、CXCL1、CXCL2、CCL11 mRNA水平于感染后6、8周明显高于正常对照;且细胞因子IL-17及趋化因子CXCL1、CXCL2和CCL11蛋白分泌水平显著升高(P<0.05);HE染色显示感染第4周小鼠肝脏出现虫卵肉芽肿,第6周肉芽肿反应达高峰,第8、10周虫卵肉芽肿缩小,周围出现成纤维细胞,第12周时肉芽肿明显缩小,部分肝细胞变性、坏死、有炎症细胞浸润,虫卵周围可见到少量梭形的成纤维细胞及类上皮细胞。结论 IL-17在日本血吸虫感染小鼠肝脏肉芽肿病变过程中可能是一种具有重要作用的调节因子,参与肝脏肉芽肿形成。

关键词：日本血吸虫 Th17/IL-17 细胞因子炎症趋化因子肉芽肿

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血吸虫感染诱导的免疫负调节及作用机制

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中国人兽共患病学报 2011年第2期27卷 144-147页

作者：汪雪峰(综述) 苏川(审校) 安徽理工大学医学院医学检验教研室淮南232052 南京医科大学病原生物学系江苏省病原生物学实验室南京210029

血吸虫病（schistosomiasis）是一种严重危害人类健康的寄生虫病,全球大约2亿人口受到威胁,其中日本血吸虫病主要分布在中国和东南亚,近1亿人口受影响。血吸虫感染免疫的一个基本特征,是伴随成虫产卵宿主逐渐表现出免疫下调的状态,使感... 详细信息

血吸虫病（schistosomiasis）是一种严重危害人类健康的寄生虫病,全球大约2亿人口受到威胁,其中日本血吸虫病主要分布在中国和东南亚,近1亿人口受影响。血吸虫感染免疫的一个基本特征,是伴随成虫产卵宿主逐渐表现出免疫下调的状态,使感染呈现慢性化。

关键词：日本血吸虫病免疫负调节感染诱导寄生虫病人类健康感染免疫成虫产卵东南亚

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Tsunagi蛋白调节日本血吸虫成虫生殖器官及虫卵的发育

Tsunagi蛋白调节日本血吸虫成虫生殖器官及虫卵的发育

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十三次全国学术会议暨第四次国际寄生虫学学术研讨会

作者：任翠平张鹏张薇娜刘淼沈际佳安徽医科大学病原生物学教研室安徽病原生物学省级实验室

目的鉴定日本血吸虫Tsunagi蛋白在虫体生殖器官发育方面的功能。方法体外PCR法合成Tsunagi基因的双链RNA,将其电穿孔转染入日本血吸虫童虫体内。电转后部分童虫进行体外培养,于培养后第1、3、5天收集童虫,提取童虫总RNA及总蛋白,分别检... 详细信息

目的鉴定日本血吸虫Tsunagi蛋白在虫体生殖器官发育方面的功能。方法体外PCR法合成Tsunagi基因的双链RNA,将其电穿孔转染入日本血吸虫童虫体内。电转后部分童虫进行体外培养,于培养后第1、3、5天收集童虫,提取童虫总RNA及总蛋白,分别检测Tsunagi基因和蛋白表达水平的变化;电转后部分童虫感染小鼠,6周后剖杀小鼠检获成虫,激光共聚焦显微镜观察虫体内部各器官形态特征;小鼠部分肝脏观察虫卵大小、虫卵计数和单个虫卵肉芽肿情况。结果在电击转染后的第1、3和5天,Tsunagi ds RNA组目的基因的转录水平下降16%、57%、75%;蛋白水平下降15%、38%、52%。体内实验发现Tsunagi ds RNA组:雄虫睾丸内有大量精子出现,呈泛雄性化表现;雌虫卵巢内成熟的卵细胞与对照组比较明显减少,体积较小,界限不清,排列紊乱;雌虫卵黄腺内卵黄细胞明显发育不良,排列紊乱,形态不规则;而且成虫睾丸长和宽、卵巢长和宽均明显缩小(P<0.05)。实验组小鼠肝脏虫卵数明显少于对照组(P<0.01),且其虫卵导致的单个虫卵肉芽肿面积也小于对照组(P<0.01)。结论Tsunagi ds RNA可特异性的抑制日本血吸虫靶基因及其编码蛋白的表达。RNA干扰后虫体睾丸、卵巢和卵黄腺等生殖器官明显发育不良,并进一步影响血吸虫产卵及虫卵的发育。Tsunagi蛋白是日本血吸虫生殖相关蛋白之一,调节日本血吸虫成虫生殖器官及虫卵的发育。

关键词：日本血吸虫生殖生物学 Tsunagi 蛋白质功能

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基于2-DE和蛋白质组技术筛选的日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶的表达及其诊断应用

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中国人兽共患病学报 2011年第6期27卷 484-488页

作者：胡梅梅钟政荣罗庆礼方婷娜沈继龙人兽共患病安徽省重点试验室安徽病原生物学省级实验室(安徽医科大学)合肥230032 蚌埠医学院第一附属医院检验科蚌埠233004

目的扩增并表达日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶(SjOAT),评价其在日本血吸虫病免疫诊断中的应用价值。方法构建pET28a/SjOAT质粒,转化至***21,IPTG诱导表达;应用Ni2+亲和层析法纯化OAT;SDS-PAGE和Western blot分析、鉴定表达产物;应用ELISA... 详细信息

目的扩增并表达日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶(SjOAT),评价其在日本血吸虫病免疫诊断中的应用价值。方法构建pET28a/SjOAT质粒,转化至***21,IPTG诱导表达;应用Ni2+亲和层析法纯化OAT;SDS-PAGE和Western blot分析、鉴定表达产物;应用ELISA法检测待检患者血清,比较SjOAT与日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)对血吸虫和其它寄生虫感染的检测结果。结果成功克隆表达了SjOAT,Western blot检测结果表明rSjOAT能被血吸虫病患者血清识别;以rSjOAT-ELISA和SjSEA-ELISA分别检测急/慢性血吸虫病患者和其它寄生虫感染者血清的结果经校正χ2检验,差异无统计学意义(P>0.05);对于正常对照者血清和疫区粪检阴性者血清,两种检测方法的特异性比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 rSjOAT在体外获得表达,用于诊断人血吸虫病具有高度敏感性和特异性。

关键词：日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶 ELISA 诊断

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结膜吸吮线虫病一例

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国际医学寄生虫病杂志 2011年第4期38卷 255-256页

作者：魏莉罗庆礼王增贤淮北市人民医院检验科 235000 安徽医科大学病原生物学教研室安徽病原生物学省级实验室合肥223003

淮北市人民医院于2010年1月接诊了一名眼内寄生结膜吸吮线虫患者，现报告如下。患儿：女，14个月，淮北市百善镇人。因“发现眼内不明虫体1天”于2010年1月22日就诊。患儿家长于两月前发现女儿左眼分泌物增多、喜揉眼，于当地卫生所就... 详细信息

淮北市人民医院于2010年1月接诊了一名眼内寄生结膜吸吮线虫患者，现报告如下。患儿：女，14个月，淮北市百善镇人。因“发现眼内不明虫体1天”于2010年1月22日就诊。患儿家长于两月前发现女儿左眼分泌物增多、喜揉眼，于当地卫生所就诊，未能明确诊断。2010年1月21日患儿父母发现女儿左眼外眦处有乳白色线状虫体活动，当地卫生所医生用棉签挑出虫体3条，并用生理盐水保存，未给患儿其他治疗。患儿家住淮北农村，周围居民饲养犬、猫较为普遍。

关键词：结膜吸吮线虫病患儿家长眼分泌物增多生理盐水淮北农村淮北市卫生所虫体

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染色法鉴别旋毛形线虫成虫死活的实验观察

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蚌埠医学院学报 2011年第10期36卷 1041-1042,1046页

作者：王小莉李亮方强崔洁郭凯沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠学院食品与生物工程系安徽蚌埠233000

目的:探讨快速鉴别旋毛形线虫成虫死活的染色方法。方法:分别以0.5%番红、1.0%中性红和0.5%甲基蓝3种染液,对死或活旋毛形线虫成虫进行染色。结果:0.5%番红、1.0%中性红染液能使死亡旋毛形线虫成虫着色;旋毛形线虫活成虫对3种染液均不... 详细信息

目的:探讨快速鉴别旋毛形线虫成虫死活的染色方法。方法:分别以0.5%番红、1.0%中性红和0.5%甲基蓝3种染液,对死或活旋毛形线虫成虫进行染色。结果:0.5%番红、1.0%中性红染液能使死亡旋毛形线虫成虫着色;旋毛形线虫活成虫对3种染液均不着色。结论:0.5%番红、1.0%中性红染液染色均可快速鉴别旋毛形线虫成虫死活。

关键词：旋毛形线虫成虫番红中性红甲基蓝

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猪囊尾蚴cC1蛋白的原核表达及其特异性鸡卵黄抗体的制备与鉴定

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安徽医科大学学报 2011年第3期46卷 205-209页

作者：宇芙蓉潘丽红姚湧汪学龙安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032 安徽医学高等专科学校医学技术系合肥230601 安徽省安庆医药高等专科学校微生物教研室安庆246052

目的制备并鉴定特异性抗猪囊尾蚴鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),为猪囊尾蚴病的免疫学诊断提供新的途径。方法原核表达猪囊尾蚴抗原cC1蛋白,纯化后经皮下和肌肉多点注射免疫25周产蛋海兰母鸡,200μg/只,首次免疫28d后加强免疫3次,每次间隔10 d... 详细信息

目的制备并鉴定特异性抗猪囊尾蚴鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),为猪囊尾蚴病的免疫学诊断提供新的途径。方法原核表达猪囊尾蚴抗原cC1蛋白,纯化后经皮下和肌肉多点注射免疫25周产蛋海兰母鸡,200μg/只,首次免疫28d后加强免疫3次,每次间隔10 d。ELISA法检测IgY抗体效价,Akita法和EGGstractTM IgY Purification System纯化试剂盒分别提取纯化鸡卵黄抗体,考马斯亮蓝法测定抗体含量,Western blot检测抗体特异性。结果 cC1蛋白能有效刺激海兰母鸡产生抗体,首次免疫后第5天左右出现抗体,免疫后第55天为高峰,效价高达1∶105以上,表明制备的鸡卵黄抗体IgY具有较强免疫特异性。结论纯化的猪囊尾蚴cC1蛋白免疫海兰母鸡能产生高效价、特异性的IgY,为进一步研究猪囊尾蚴病的免疫学诊断奠定了实验基础。

关键词：猪囊尾蚴免疫球蛋白类囊虫病/诊断

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日本血吸虫P14基因纳米微球-DNA疫苗的免疫保护作用

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热带病与寄生虫学 2011年第4期9卷 187-189页

作者：魏敏汪礼文姚湧唐小牛汪学龙安徽医科大学病原生物学教研室安徽省肿瘤医院检验科合肥市第一人民医院检验科皖南医学院病原生物学教研室

目的探讨日本血吸虫碱性调宁蛋白样蛋白P14基因的重组真核表达载体(pcDNA3.1(+)-Sj P14)对小鼠血吸虫感染的免疫保护作用。方法制备无内毒素pcDNA3.1(+)-Sj p14及纳米微球-DNA疫苗,将雌性BALB/c小鼠随机分为3组,每组10只,分别为生理盐... 详细信息

目的探讨日本血吸虫碱性调宁蛋白样蛋白P14基因的重组真核表达载体(pcDNA3.1(+)-Sj P14)对小鼠血吸虫感染的免疫保护作用。方法制备无内毒素pcDNA3.1(+)-Sj p14及纳米微球-DNA疫苗,将雌性BALB/c小鼠随机分为3组,每组10只,分别为生理盐水对照组、pcDNA3.1(+)-SjP14组及纳米微球-DNA疫苗组。各组小鼠分别肌肉注射生理盐水和pcDNA3 1(+)-Sj P14、纳米微球-DNA疫苗100μg/鼠·次,每2周免疫一次,共3次。末次免疫后2周,尾蚴攻击,6w后处死小鼠,收集成虫,计算减虫率;同时留取肝脏,部分消化后在显微镜下行虫卵计数,计算减卵率结果pcDNA3.1(+)-Sj P14p核酸疫苗能明显提高小鼠的抗血吸虫感染能力,减虫率和减卵率分别达到44.6%和61.6%;纳米微球-DNA疫苗免疫能进一步提高小鼠抗血吸虫感染作用,减虫率和减卵率分别提高至56.2%和73.5%。结论 pcDNA3.1(+)-Sj P14核酸疫苗有一定程度的抗血吸虫感染作用,pcDNA3 1(+)-Sj p14-纳米微球复合物疫苗免疫能增强小鼠对血吸虫感染的免疫保护作用

关键词：血吸虫核酸疫苗纳米微球免疫保护

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抗肠道病毒71型外壳蛋白1卵黄抗体的制备和鉴定

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徐州医学院学报 2011年第5期31卷 300-305页

作者：汪六庆胡元生沈继龙刘宜升徐州医学院病原生物学教研室江苏徐州221002 合肥市第一人民医院检验科安徽合肥223002 安徽医科大学病原生物学教研室教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽合肥230032

目的克隆肠道病毒71型（EV71）BrCr株外壳蛋白1（VP1）基因,构建原核表达载体PET28a/VP1,表达VP1重组蛋白,以VP1免疫产蛋母鸡,获得抗VP1的鸡免疫球蛋白（IgY）.方法培养Vero细胞,利用Vero细胞增殖肠道病毒EV71 BrCr株,提取病毒总RNA,... 详细信息

目的克隆肠道病毒71型（EV71）BrCr株外壳蛋白1（VP1）基因,构建原核表达载体PET28a/VP1,表达VP1重组蛋白,以VP1免疫产蛋母鸡,获得抗VP1的鸡免疫球蛋白（IgY）.方法培养Vero细胞,利用Vero细胞增殖肠道病毒EV71 BrCr株,提取病毒总RNA,利用RT-PCR扩增出VP1目的基因,目的基因插入克隆载体pGEM-T,提取重组质粒,经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切获得目的基因,插入原核表达载体pET-28a,重组子同时BamHⅠ,EcoRⅠ双酶切和测序鉴定,转化入感受态工程菌*** BL21（DE3）,获得阳性重组工程菌,经IPTG诱导获得表达融合蛋白,试剂盒纯化蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,用VP1蛋白免疫开产母鸡,收集鸡蛋,利用EGG stractTM IgY Purification System试剂盒提取卵黄抗体IgY,间接ELISA测滴度,SDS-PAGE和Western blotting验证其表达量和免疫活性.结果本实验成功扩增出肠道病毒EV71 BrCr株VP1基因,获得了含重组表达质粒pET28a/VP1的阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1蛋白,VP1经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,利用纯化后VP1蛋白免疫产蛋母鸡,提取的IgY经ELISA 鉴定后其滴度为1：104,SDS-PAGE和Western blotting证实为抗VP1的特异性IgY.结论成功的从EV71 BrCr株扩增出VP1基因,构建了PET28a/VP1表达载体,获得高效表达融合蛋白,免疫产蛋母鸡后制备高效价抗VP1蛋白的特异性IgY.

关键词：人肠道病毒71型外壳蛋白1 卵黄抗体 IgY

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