检索结果-内蒙古大学图书馆

蚌埠医学院学报 2011年第10期36卷 1041-1042,1046页

作者：王小莉李亮方强崔洁郭凯沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠学院食品与生物工程系安徽蚌埠233000

目的:探讨快速鉴别旋毛形线虫成虫死活的染色方法。方法:分别以0.5%番红、1.0%中性红和0.5%甲基蓝3种染液,对死或活旋毛形线虫成虫进行染色。结果:0.5%番红、1.0%中性红染液能使死亡旋毛形线虫成虫着色;旋毛形线虫活成虫对3种染液均不... 详细信息

目的:探讨快速鉴别旋毛形线虫成虫死活的染色方法。方法:分别以0.5%番红、1.0%中性红和0.5%甲基蓝3种染液,对死或活旋毛形线虫成虫进行染色。结果:0.5%番红、1.0%中性红染液能使死亡旋毛形线虫成虫着色;旋毛形线虫活成虫对3种染液均不着色。结论:0.5%番红、1.0%中性红染液染色均可快速鉴别旋毛形线虫成虫死活。

关键词：旋毛形线虫成虫番红中性红甲基蓝

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三峡建坝后水位变化对皖江流域血吸虫病流行影响的预测研究

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中国媒介生物学及控制杂志 2002年第6期13卷 448-449页

作者：何家昶张世清张功华潘新平赵志贤汪学龙安徽省血吸虫病防治研究所芜湖241000 铜陵县血吸虫病防治站安徽医科大学病原生物学教研室

目的 :研究三峡建坝后长江安徽段水位变化对钉螺分布和血吸虫病流行的影响。方法 :根据长江水利委员会提供的三峡建坝前后大通水文站丰、平、枯各典型水文年的水位数据 ,用内插法推算安徽省铜陵县胥坝铁锚洲水位变化规律 ;结合现场调查... 详细信息

目的 :研究三峡建坝后长江安徽段水位变化对钉螺分布和血吸虫病流行的影响。方法 :根据长江水利委员会提供的三峡建坝前后大通水文站丰、平、枯各典型水文年的水位数据 ,用内插法推算安徽省铜陵县胥坝铁锚洲水位变化规律 ;结合现场调查不同高程滩地钉螺分布及人群活动情况进行分析。结果 :1～ 4月建坝后较建坝前水位上升 ,5～ 9月建坝前后水位变化较小 ,10～ 12月建坝后较建坝前水位下降 ;秋季退水时间提前 ;有螺带分布于整个高程的滩地 ;居民上滩活动主要分布于滩地的较低和较高两个部分高程带。结论

关键词：钉螺分布安徽段长沙三峡建坝水位变化皖江流域血吸虫病流行影响预测

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猪囊尾蚴抗原基因GP50的表达及鉴定

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热带病与寄生虫学 2007年第2期5卷 85-87页

作者：周天祥汪学龙张衍兴郑胜生王旭旭丁言荣安徽省淮北职业技术学院安徽医科大学病原生物学教研室

目的为了寻找猪囊尾蚴病新的免疫学候选诊断分子,克隆猪囊尾蚴抗原GP50编码基因,并进行表达、鉴定。方法设计合成引物,用PCR法从猪囊尾蚴cDNA文库中扩增出猪囊尾蚴抗原GP50基因编码序列,将其克隆入pGEM-T载体,然后在真核表达载体pBKCMV... 详细信息

目的为了寻找猪囊尾蚴病新的免疫学候选诊断分子,克隆猪囊尾蚴抗原GP50编码基因,并进行表达、鉴定。方法设计合成引物,用PCR法从猪囊尾蚴cDNA文库中扩增出猪囊尾蚴抗原GP50基因编码序列,将其克隆入pGEM-T载体,然后在真核表达载体pBKCMV中亚克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot观察表达结果。结果RT-PCR法扩增出一条大小约897bp的特异性片段,克隆质粒pGEM-GP50和真核表达质粒pBKCMV作BamHⅠ和XhoⅠ双酶切和以重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段。诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约36kDa大小的融合蛋白条带,Western blot结果显示其可与猪囊尾蚴病人血清起反应。结论本实验成功地克隆了猪囊尾蚴抗原GP50编码基因,并在原核细胞中进行了表达及鉴定,为进一步的免疫诊断研究奠定了基础。

关键词：猪囊尾蚴抗原基因克隆表达

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猪囊尾蚴cC1蛋白的原核表达及其特异性鸡卵黄抗体的制备与鉴定

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安徽医科大学学报 2011年第3期46卷 205-209页

作者：宇芙蓉潘丽红姚湧汪学龙安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032 安徽医学高等专科学校医学技术系合肥230601 安徽省安庆医药高等专科学校微生物教研室安庆246052

目的制备并鉴定特异性抗猪囊尾蚴鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),为猪囊尾蚴病的免疫学诊断提供新的途径。方法原核表达猪囊尾蚴抗原cC1蛋白,纯化后经皮下和肌肉多点注射免疫25周产蛋海兰母鸡,200μg/只,首次免疫28d后加强免疫3次,每次间隔10 d... 详细信息

目的制备并鉴定特异性抗猪囊尾蚴鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),为猪囊尾蚴病的免疫学诊断提供新的途径。方法原核表达猪囊尾蚴抗原cC1蛋白,纯化后经皮下和肌肉多点注射免疫25周产蛋海兰母鸡,200μg/只,首次免疫28d后加强免疫3次,每次间隔10 d。ELISA法检测IgY抗体效价,Akita法和EGGstractTM IgY Purification System纯化试剂盒分别提取纯化鸡卵黄抗体,考马斯亮蓝法测定抗体含量,Western blot检测抗体特异性。结果 cC1蛋白能有效刺激海兰母鸡产生抗体,首次免疫后第5天左右出现抗体,免疫后第55天为高峰,效价高达1∶105以上,表明制备的鸡卵黄抗体IgY具有较强免疫特异性。结论纯化的猪囊尾蚴cC1蛋白免疫海兰母鸡能产生高效价、特异性的IgY,为进一步研究猪囊尾蚴病的免疫学诊断奠定了实验基础。

关键词：猪囊尾蚴免疫球蛋白类囊虫病/诊断

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弓形虫致密颗粒蛋白GRA15Ⅱ原核表达及对巨噬细胞偏移的影响

弓形虫致密颗粒蛋白GRA15Ⅱ原核表达及对巨噬细胞偏移的影响

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会

作者：胡晓东李源玲王聪徐元宏沈继龙安徽病原生物学省级实验室人兽共患病安徽省重点实验室(安徽医科大学)安徽医科大学病原生物学教研室安徽医科大学第一附属医院检验科

目的:构建能够表达弓形虫致密颗粒蛋白 GRA15 的工程菌,获得纯化的目的蛋白刺激巨噬细胞,借以观察弓形虫基因型相关的效应分子对巨噬细胞偏移的影响。方法:从Ⅱ型弓形虫 PRU 株中提取总 RNA,扩增该基因型弓形虫的 GRA15 编码基因,连接 T... 详细信息

目的:构建能够表达弓形虫致密颗粒蛋白 GRA15 的工程菌,获得纯化的目的蛋白刺激巨噬细胞,借以观察弓形虫基因型相关的效应分子对巨噬细胞偏移的影响。方法:从Ⅱ型弓形虫 PRU 株中提取总 RNA,扩增该基因型弓形虫的 GRA15 编码基因,连接 T 载体,构建重组质粒;将重组质粒转化至 XL-Blue（Top10）感受态大肠杆菌,扩增培养,提取菌种质粒测序;重组质粒与表达载体经双酶切、连接得到 pet28a-gra15Ⅱ;将 pet28a-gra15 Ⅱ转化至 DH5α感受态大肠杆菌中扩增培养,提取质粒测序。将测序正确的 pet28a-gra15 Ⅱ转化至 BL21 感受态大肠杆菌中,挑取单克隆扩增培养,得到目的工程菌;加 IPTG 诱导工程菌进行蛋白表达。经 Western Blot鉴定、纯化后得到目的蛋白 GRA15。体外分别用 GRA15（A 组）、LPS（B 组）、PBS（C 组）、小牛血清白蛋白（D 组）分别刺激小鼠巨噬细胞 RAW264.7,观察细胞形态的变化;分别收集各组细胞上清与贴壁巨噬细胞。ELISA 检测细胞上清中IL-10、IL-12、Arg-1 和 iN OS 的表达;qR T-PCR 检测巨噬细胞 IL-10、IL-12、Arg-1和 iN OS 的 mRNA 表达。结果:1.通过原核表达及分离纯化成功得到目的蛋白 GRA15。经 Western blotting鉴定,确认 GRA15。2.体外细胞刺激实验显示,GRA15（A 组）与 LPS（B 组）中 RAW264.7 发生了显著变化,具体表现为细胞外形由圆形变为多边形、有伪足伸出。3. A 组与 B 组结果见到,GRA15 和 LPS 可驱动巨噬细胞向经典途径活化为M1;C 组与 D 组对巨噬细胞偏移方向未见显著影响。ELISA 显示,A 组与 B 组的细胞上清中 iN OS 与 IL-12 含量均显著高于 C 组与 D 组,而四组细胞上清中 IL-10与 Arg-1 含量无显著差别;qRT-PCR 结果显示,A 组与 B 组细胞中 iN OS 与 IL-12的 mRNA 明显上调、C 组与 D 组无明显变化,而四组细胞中 IL-10 与 Arg-1 的 mRNA较低且均无显著变化。结论:通过体外原核表达获得了弓形虫致密颗粒蛋白 GRA15。 GRA15 可驱使RAW264.7 向 M1 方向发生偏移。

关键词：弓形虫致密颗粒蛋白GRA15 蛋白原核表达小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7

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外源性一氧化氮体外杀伤旋毛虫成虫的实验研究

外源性一氧化氮体外杀伤旋毛虫成虫的实验研究

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2012年安徽省医学会微生物与免疫学、热带病与寄生虫病学会换届改选与学术研讨会

作者：王小莉王媛媛方强薛玉芹夏惠沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室，蚌埠 233030 安徽医科大学病原生物学教研室，合肥 230032

目的：探讨外源性一氧化氮(NO)对旋毛虫成虫的杀伤作用。　　方法：取感染旋毛虫的BALB/c小鼠肠组织，分离成虫，配制成虫悬液(1000条/ml)。48孔板中每孔加入100 μl成虫悬液，再加入各组试剂，终浓度分别为：亚硝基铁氰化钠(SNP)0.02、... 详细信息

目的：探讨外源性一氧化氮(NO)对旋毛虫成虫的杀伤作用。
　　方法：取感染旋毛虫的BALB/c小鼠肠组织，分离成虫，配制成虫悬液(1000条/ml)。48孔板中每孔加入100 μl成虫悬液，再加入各组试剂，终浓度分别为：亚硝基铁氰化钠(SNP)0.02、0.05、0.10、0.20、0.50和1.00 mmol/L，1.00 mmoFL SNP+0.15mmol/L血红蛋白(Hb)、1.00 mmol/LSNP+0.15 mmol/L FeSO4、1.00 mmol/L SNP+1.00mmol/LL-cyst、1.00 mmol/LSNP+0.15mmol/L FeSO4+1.00mmol/L L-cyst，设空白对照组和阳性对照组(1.00 mmol/LSNP+100 μl肌幼虫悬液)，每组设3个复孔。置37℃ 5％CO2培养箱中孵育。第4天收集各孔成虫，镜检并作番红染色，计算各组虫体死亡率。
　　结果：SNP 0.02 mmol/L和0.05mmo儿组旋毛虫死亡率分别为(1.4±1.2)％和(3.2±1.0)％，这两组与空白对照组的死亡率之间的差异无统计学意义(P>0.05)。SNP 0.10、0.20、0.50和1.00 mmol/L组虫体死亡率分别为为(9.9±1.8)％、(37.7±2.5)％、(50.1±3.5)％和(80.84±1.1)％，与空白对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。旋毛虫成虫死亡率与sNP浓度呈线性趋势(P<0.05)，且呈正相关(P<0.05)。在加入1.00 mmol/L SNP的孔中分别加入Hb、L-cyst、FeSO4和FeSO4+L-cyst与仅SNP1.00mmol/L实验组比较，成虫死亡率均有所下降，分别为(56.54±3.7)％、(72±74.5±6)％、(74.8±2.4)％和(69.84±2.3)％。SNP1.00 mmol/L组与SNP+Hb、sNP+FeSO4+L-cyst组旋毛虫成虫死亡率间的差异有统计学意义(P<0.05)。
　　结论：外源性NO对体外培养的旋毛虫成虫有杀伤作用，而Hb、L-cyst+FeSO4可抑制该杀伤作用。

关键词：外源性一氧化氮体体外培养杀伤实验旋毛虫成虫

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匹多莫德对小鼠弓形虫感染活化的防治作用研究

匹多莫德对小鼠弓形虫感染活化的防治作用研究

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2012年安徽省医学会微生物与免疫学、热带病与寄生虫病学会换届改选与学术研讨会

作者：霍星星都建蔡亦红伦照荣吕芳丽王勇沈继龙王林陈鹤徐修才张爱梅宋晓蓉罗庆礼徐元宏余莉安徽医科大学病原生物学教研室安徽省病原生物学实验室安徽省人兽共患病重点实验室中山大学生命科学院寄生生物国家重点实验室中山大学中山医学院病原生物学教研室南京医科大学病原生物学教研室

目的：免疫功能正常的人体感染弓形虫常呈现为隐性感染状态，而当免疫功能缺陷或受到抑制时，弓形虫隐性感染活化常导致严重后果。随着医学界对本病认识的加深、人们饮食习惯的改变和宠物饲养的增多，加之艾滋病、肿瘤化疗、器官移植以... 详细信息

目的：免疫功能正常的人体感染弓形虫常呈现为隐性感染状态，而当免疫功能缺陷或受到抑制时，弓形虫隐性感染活化常导致严重后果。随着医学界对本病认识的加深、人们饮食习惯的改变和宠物饲养的增多，加之艾滋病、肿瘤化疗、器官移植以及自身性免疫性疾病患者的增加，弓形虫感染和弓形虫病的发病率有增高的趋势。近年来的研究表明，匹多莫德(Pidotimod，PT)具有明显的正相免疫调节作用。本研究试图通过细胞毒制剂和免疫抑制剂环磷酰胺(cY)建立隐性弓形虫感染活化的模型;利用匹多莫德恢复免疫抑制小鼠的免疫功能;观察不同处理组宿主虫血症以及存活时间的变化，检测匹多莫德对小鼠CD4+T细胞亚群以及相关细胞因子的网络调节。本文旨在探讨匹多莫德对于临床隐形弓形虫感染活化的预防和治疗作用。
　　方法：BALB/c小鼠经口灌胃给予弓形虫包囊，6W后形成稳定的弓形虫隐性感染。随机分成实验组和对照组。实验组腹腔注射免疫抑制剂CY诱导免疫抑制动物模型，实验组又分为PT处理组和非PT处理组，对照组给予生理盐水。所有小鼠SPF级环境饲养，观察不同处理组小鼠的存活时间。隔天每组麻醉处死三只小鼠。取外周血提取全血DNA，荧光定量PCR检测弓形虫核酸，监测虫血症，比较匹多莫德对隐性感染活化时的虫血症变化的影响;流式细胞技术(FCM)检测不同处理组小鼠脾淋巴细胞CD4+T细胞亚群，分析匹多莫德对免疫抑制状态下T细胞免疫应答的调节作用：Real time PCR检测鼠脾淋巴细胞转录因子的mRNA表达水平;流式微球阵列技术(CBA)检测血清Th1，Th2以及Th17细胞相关细胞因子，比较匹多莫德对免疫抑制状态下细胞因子表达谱的影响;取不同处理组小鼠脑组织，观察匹多莫德对免疫抑制状态下脑组织病理变化以及荧光定量PCR检测弓形虫核酸比较不同处理组小鼠脑组织虫荷的差异。
　　结果：同时给予匹多莫德干预的小鼠(PT+CY组)相对于单用免疫抑制剂处理组(NS+CY组)的小鼠存活时间明显延长;虫血症明显延迟出现;脑部病理学评分以及脑组织虫荷明显降低;脾淋巴细胞CD4+T细胞亚群、Th1细胞亚群及相应的转录因子T-bet明显恢复。在小鼠血清细胞因子表达谱中，IL-2、IFN-γ和TNF-α表达量明显得到恢复;而Th2、Th17细胞亚群及其相关细胞因子、转录因子恢复不明显。与此同时匹多莫德干预的小鼠调节性T细胞亦有所恢复。
　　结论：免疫调节剂匹多莫德能够明显恢复免疫抑制小鼠的Th1免疫应答，恢复前炎性细胞因子表达，从而推迟弓形虫虫血症的再次出现，延长免疫抑制小鼠的存活时间，明显改善因隐性感染活化引起的脑组织病理损害。

关键词：隐形弓形虫匹多莫德免疫抑制感染活化临床治疗

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肝细胞癌患者TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD4^(+)T细胞和TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD8^(+)T细胞免疫耗竭及其与疾病进展的关系

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安徽医科大学学报 2021年第12期56卷 1980-1986页

作者：袁润林郑美娟陈正徐徐元宏安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230022 安徽医科大学附属合肥医院(合肥市第二人民医院)检验科合肥230011 安徽省病原生物学重点实验室合肥230032

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者外周血中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞免疫耗竭及其与疾病进展的关系。方法收集30例HCC患者,同时收集健康体检者(HC)20例,利用流式细胞术检测外周血CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞表面抑制性受体PD-1、TIGIT、TIM-... 详细信息

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者外周血中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞免疫耗竭及其与疾病进展的关系。方法收集30例HCC患者,同时收集健康体检者(HC)20例,利用流式细胞术检测外周血CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞表面抑制性受体PD-1、TIGIT、TIM-3以及胞内IL-10表达比例,细胞微球阵列(CBA)检测血清细胞因子(IL-10)的含量。结果HCC患者组外周血TIM-3^(+)CD4^(+)T细胞、TIGIT^(+)CD4^(+)T细胞、PD-1^(+)CD4^(+)T细胞、TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD8^(+)T细胞、IL-10^(+)CD4^(+)T细胞、TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD4^(+)T细胞比例均高于健康对照组(P<0.001),TIM-3^(+)CD8^(+)T细胞、TIGIT^(+)CD8^(+)T细胞、PD-1^(+)CD8^(+)T细胞比例高于健康对照组(P<0.01)。此外,HCC患者组PD-1^(+)TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD4^(+)T细胞、PD-1^(+)TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD8^(+)T细胞比例分别高于PD-1^(+)TIM-3-TIGIT-CD4^(+)T细胞、PD-1^(+)TIM-3-TIGIT-CD8^(+)T细胞比例(P<0.001),且HCC患者组血清IL-10含量高于健康对照组(P<0.05)。工作特征曲线(ROC)分析TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD8^(+)T细胞、TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD4^(+)T细胞比例在HCC的诊断效能均大于单分子阳性细胞比例。高TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD8^(+)T细胞、高TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD4^(+)T细胞比例组中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)结果分别高于低TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD8^(+)T细胞、低TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD4^(+)T细胞比例组(P<0.05)。结论HCC患者外周血TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD4^(+)T细胞及TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD8^(+)T细胞比例均高于对照者,上述细胞均高表达PD-1,并与IL-10的含量密切相关;且高TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD4^(+)T细胞比例及TIM-3^(+)TIGIT^(+)CD8^(+)T细胞比例与HCC疾病进展加快和不良预后有关,提示HCC患者CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞存在免疫耗竭,且有意义的双分子靶向治疗可能会为HCC提供了更新颖、更有效的治疗靶点,促进了HCC患者免疫检查点靶向治疗的发展。

关键词：肝细胞癌 CD4^(+)T细胞 CD8^(+)T细胞免疫耗竭抑制性受体

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基于USMLE的留学生病原生物学教学体会

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基础医学教育 2019年第11期21卷 887-890页

作者：王晓楠王维安徽医科大学基础医学院病原与免疫学实验室合肥230032 安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室

病原生物学作为连接基础与临床的桥梁课程,是医学教学中不可缺少的重要内容。为了提高留学生的教学水平,文章根据留学生的文化差异特点,以美国执业医师考试(United states medical licensing examination,USMLE)为指导,探索教学方法、... 详细信息

病原生物学作为连接基础与临床的桥梁课程,是医学教学中不可缺少的重要内容。为了提高留学生的教学水平,文章根据留学生的文化差异特点,以美国执业医师考试(United states medical licensing examination,USMLE)为指导,探索教学方法、手段、内容等方面的变革,运用多种教学方法开展病原生物学理论课与实验课教学,以期为留学生毕业回国顺利通过执业医师资格考试奠定基础。

关键词：病原生物学留学生教学美国执业医师考试

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弓形虫基因型Chinese 1不同毒力的分离株诱导巨噬细胞偏移应答

弓形虫基因型Chinese 1不同毒力的分离株诱导巨噬细胞偏移应答

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中国动物学会原生动物学分会第十七次学术讨论会

作者：张爱梅李敏闻慧琴陈鹤罗庆礼蔡亦红沈继龙安徽医科大学病原微生物学教研室安徽省病原生物学/人兽共患病重点实验室合肥 230032

刚地弓形虫是一种有核细胞内寄生原虫,可以感染包括人类在内的多种宿主.弓形虫急性感染可诱导强烈的Th1型免疫应答,产生促炎症细胞因子如IL-6,IFN-γ和TNF-α.已知巨噬细胞能够在周围微环境的影响下发生表型的极化,以发挥特定的功能.

关键词：

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