检索结果-内蒙古大学图书馆

标记免疫分析与临床 2025年第3期32卷 656-660页

作者：李虎杨春秋王楠楠朱进进余莉太和县人民医院检验科安徽阜阳236600 安徽医科大学基础医学院医学生物化学与分子生物学实验室安徽合肥230032 动物源性传染病安徽省重点实验室安徽省高校人畜共患病重点实验室安徽医科大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室安徽合肥230032

目的通过病原学检测并结合患者临床症状以及影像学检查排除弓形虫感染,通过实验设计以及查阅文献分析患者血清弓形虫IgM抗体假阳性原因,并总结归纳处理流程,为临床提供全面的诊疗思路。方法通过外周血涂片镜检、弓形虫核酸检测以及影像... 详细信息

目的通过病原学检测并结合患者临床症状以及影像学检查排除弓形虫感染,通过实验设计以及查阅文献分析患者血清弓形虫IgM抗体假阳性原因,并总结归纳处理流程,为临床提供全面的诊疗思路。方法通过外周血涂片镜检、弓形虫核酸检测以及影像学脑部磁共振成像(MRI)检测排除弓形虫感染;通过不同检测平台复检,增加类风湿因子(RF)、嗜异性抗体、冷凝集素的检测,以及动态监测弓形虫IgM抗体变化趋势分析假阳原因。结果患者血清中升高的弓形虫IgM抗体为假阳性,其血清中存在的EBV-IgM抗体和检测试剂发生交叉反应,干扰了检测结果。结论发现弓形虫IgM抗体异常升高时,应参考相应处理流程,增加相关检测,分析原因,避免误诊。

关键词：弓形虫病假阳性 IgM抗体传染性单核细胞增多症

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日本血吸虫感染鼠巨噬细胞IL-13Rα2的表达

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中国人兽共患病学报 2011年第7期27卷 597-600,609页

作者：王维郑胜生祁瑶闻惠琴刘丽丽沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室人畜共患病安徽省重点实验室合肥230032

目的检测IL-13的诱骗受体IL-13Rα2在血吸虫病巨噬细胞的表达,为从细胞水平探讨Th2型免疫性疾病分子病理机制奠定基础。方法建立日本血吸虫病鼠模型,采用免疫荧光标记法分别检测肝肉芽肿和原代巨噬细胞IL-13Rα2蛋白的表达情况。结果荧... 详细信息

目的检测IL-13的诱骗受体IL-13Rα2在血吸虫病巨噬细胞的表达,为从细胞水平探讨Th2型免疫性疾病分子病理机制奠定基础。方法建立日本血吸虫病鼠模型,采用免疫荧光标记法分别检测肝肉芽肿和原代巨噬细胞IL-13Rα2蛋白的表达情况。结果荧光显微镜下观察:肝肉芽肿内可见似"咖啡豆样"散在分布的IL-13Rα2免疫阳性信号,巨噬细胞膜内缘呈异常增强的环状荧光。结论巨噬细胞是IL-13Rα2阳性表达细胞,IL-13Rα2是血吸虫病重要的免疫病理调节分子。

关键词：血吸虫病肉芽肿巨噬细胞 IL-13Rα2 CD68 免疫荧光染色技术

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弓形虫肌动蛋白抗原表位抗体的制备及应用

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中国动物传染病学报 2024年第4期32卷 73-78页

作者：庄宝灿朱进进余莉安徽医科大学病原生物学教研室、病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室合肥230032

制备弓形虫肌动蛋白(TgActin)多肽表位抗体并探讨其应用价值。BepiPred 1.0 Server在线分析设计TgActin抗原表位,并与多种属Actin进行同源比对,选取并合成高特异性多肽片段序列免疫新西兰兔。末次免疫后收集兔血清并使用Protein G纯化抗... 详细信息

制备弓形虫肌动蛋白(TgActin)多肽表位抗体并探讨其应用价值。BepiPred 1.0 Server在线分析设计TgActin抗原表位,并与多种属Actin进行同源比对,选取并合成高特异性多肽片段序列免疫新西兰兔。末次免疫后收集兔血清并使用Protein G纯化抗体,SDS-PAGE检测抗体纯度,ELISA测定抗体效价,Western blot分析抗体的特异性及TgActin表位抗体作为内参抗体的可能性,免疫荧光观察胞内速殖子形态。结果显示,ELISA测定抗体效价为1∶128000,Western blot结果显示抗体特异性识别弓形虫Actin,免疫荧光染色显示TgActin表位抗体可以标记纳虫泡内速殖子。结果表明,成功制备了TgActin多肽表位抗体,可用做弓形虫蛋白检测的内参抗体及其在细胞内的免疫荧光检测,为后续弓形虫研究提供了便利条件。

关键词：弓形虫肌动蛋白表位抗体内参抗体免疫荧光

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芍药苷对日本血吸虫感染小鼠肝组织免疫病理的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第1期26卷 10-15,20页

作者：储德勇李丛磊杨枫吴强李静丁向东罗庆礼沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室教育部省部共建和安徽省重要遗传病基因资源利用重点实验室人畜共患病安徽省重点实验室合肥230032 安徽医科大学病理学教研室合肥230032

目的观察芍药苷(paeoniflorin)对日本血吸虫病小鼠肝组织免疫病理的影响,探索芍药苷预防血吸虫病肝虫卵肉芽肿和肝纤维化的作用机制。方法日本血吸虫尾蚴感染昆明小鼠,制成肝虫卵肉芽肿和肝纤维化小鼠模型。然后随机分为4组:模型组(A组)... 详细信息

目的观察芍药苷(paeoniflorin)对日本血吸虫病小鼠肝组织免疫病理的影响,探索芍药苷预防血吸虫病肝虫卵肉芽肿和肝纤维化的作用机制。方法日本血吸虫尾蚴感染昆明小鼠,制成肝虫卵肉芽肿和肝纤维化小鼠模型。然后随机分为4组:模型组(A组)(15只),吡喹酮治疗前(B组)、治疗同时(C组)及治疗后(D组)给予芍药苷组(各45只)。其中后3组又各分为低剂量组[芍药苷30mg/(kg·d)×30d]、高剂量组[芍药苷120mg/(kg·d)×30d]及对照组(0.5%羧甲基纤维素钠溶剂2ml×30d)。B组感染后第12天起、C及D组分别于感染后第42及72天起,灌胃芍药苷或0.5%羧甲基纤维素钠溶剂。B、C和D等3组均于感染后第42天起灌胃吡喹酮[500mg/(kg·d)×2d]。感染后第102天处死取血及肝脏。用竞争放射免疫法检测血清透明质酸(HA)含量,苏木素-伊红(HE)及Masson胶原纤维染色观察肝虫卵肉芽肿面积及纤维化程度,用免疫组化技术评价α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)表达情况。结果B组HA水平,低剂量组及高剂量组均显著低于对照组(F=9.429,P值均<0.01);肉芽肿面积及肝纤维化程度,低剂量组及高剂量组均显著低于对照组(F=862.540、F=29.738,P值均<0.01);α-SMA阳性细胞表达强度(F=12.323,P值均<0.01)、TGF-β1表达强度(F=148.990,P值均<0.01)、ColⅠ含量(F=180.881,P值均<0.01),低剂量组和高剂量组均显著低于对照组。C组及D组各项检测数据与其相应的对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论吡喹酮治疗前给予芍药苷,能明显降低肝虫卵肉芽肿和肝纤维化程度,减少肝组织TGF-β1、α-SMA的表达。

关键词：芍药苷日本血吸虫肝纤维化 α平滑肌肌动蛋白转化生长因子β1

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DAPK2调控I型干扰素启动子的初步研究

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中国动物传染病学报 2023年

作者：孙悦潘利洁孙文泽朱进进庄宝灿沈继龙余莉曹苑苑安徽医科大学微生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室

为揭示RLR信号通路中激酶对I型干扰素的调控作用，本研究利用双荧光素酶报告系统及qRT-PCR实验鉴定出一个可以负调控I型干扰素信号通路的激酶：DAPK2；并对其调控特异性，激酶活性以及调控位置进行了探索。结果表明，通过使用不同的荧... 详细信息

为揭示RLR信号通路中激酶对I型干扰素的调控作用，本研究利用双荧光素酶报告系统及qRT-PCR实验鉴定出一个可以负调控I型干扰素信号通路的激酶：DAPK2；并对其调控特异性，激酶活性以及调控位置进行了探索。结果表明，通过使用不同的荧光素酶启动子以及qRT-PCR试验发现，DAPK2可以特异性地负调控RLR信号通路中I型干扰素的产生，并且主要集中在IRF3介导的通路上，对NF-κB控制的炎症因子无明显调控作用。利用不同阶段的信号蛋白激活IFN-β启动子发现DAPK2的作用位点在VISA和TBK1之间。其激酶活性突变体对RLR通路调控作用的缺失表明DAPK2的调控作用依赖其激酶活性。本研究为DAPK2在未来应用于治疗病毒引起的动物传染病提供了可能的药物靶标及理论指导。

关键词： RLR DAPK2 I型干扰素天然免疫

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我国弓形虫Chinese 1优势基因型感染对小鼠脑组织铁代谢影响

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第4期34卷 361-369页

作者：王崇蔡亦红安徽医科大学公共卫生学院卫生检验与检疫安徽合肥230032 安徽医科大学病原生物学安徽省重点实验室安徽合肥230032 安徽医科大学人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032

目的探讨我国弓形虫Chinese 1优势基因型感染对宿主脑组织铁代谢及脑损伤的影响。方法将20只C57BL/6(体质量15~17 g)小鼠随机分为对照组和感染组,每组10只。感染组每只小鼠腹腔注射4 000个弓形虫Chinese 1优势基因型TgCtwh3虫株速殖子... 详细信息

目的探讨我国弓形虫Chinese 1优势基因型感染对宿主脑组织铁代谢及脑损伤的影响。方法将20只C57BL/6(体质量15~17 g)小鼠随机分为对照组和感染组,每组10只。感染组每只小鼠腹腔注射4 000个弓形虫Chinese 1优势基因型TgCtwh3虫株速殖子,对照组小鼠注射等量无菌PBS,饲养6 d后处死小鼠并取其脑组织。采用电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry, ICP-MS)检测小鼠脑组织铁元素水平;采用RNA芯片检测两组小鼠脑组织差异基因数目并对功能基因表达情况进行基因本体论(Gene Ontology, GO)功能富集;采用实时荧光定量PCR(fluorescent quantitative real-time PCR, qPCR)技术检测小鼠脑组织中弓形虫表面抗原1(Toxoplasma gondii surface antigen1,TgSAG1)基因及部分锌铁调控蛋白(Zrt-and Irt-like protein, ZIP)家族mRNA表达水平;采用光镜和电镜观察小鼠脑组织海马齿轮回(dentate gyrus, DG)超微结构;采用Western blotting检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPx4)蛋白表达水平;采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平;采用免疫组化检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)蛋白表达光密度(optical density, OD)值。结果光镜下可见感染组小鼠脑组织海马DG区细胞坏死,电镜下见感染组小鼠脑组织海马区出现胞质空泡化、核皱缩坏死、线粒体嵴断裂消融、自噬小体增加等超微结构变化。与对照组相比,感染组小鼠脑组织中铁元素水平上调([32.92±0.90)μg/g vs(.37.72±1.10)μg/g;t=3.397, P <0.01];RNA芯片检测感染组小鼠脑组织发现721个基因上调、276个基因下调,差异表达基因在金属离子结合能力上有明显富集。与对照组相比,感染组小鼠脑组织金属元素转运体ZIP2 mRNA表达水平上调(t=8.659,P <0.05)、GPx4表达下降([1.046±0.025)vs.(0.720±0.101);t=3.129,P <0.01])、MDA水平升高([4.37±0.33)nmol/mgprot vs(.5.93±0.54)nmol/mgprot;t=2.451,P <0.05)]、VEGF蛋白平均OD值上调([0.348 3±0.017 8)vs.(0.490 6±0.010 5);t=6.641,P <0.01]。结论 Chinese 1优势基因型弓形虫感染后,小鼠脑组织中铁元素蓄积、抗氧化能力下调、氧化应激水平升高,提示弓形虫感染可影响宿主脑组织铁代谢而导致脑损伤。

关键词：刚地弓形虫弓形虫脑病铁代谢氧化应激 Chinese 1优势基因型小鼠

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芍药苷对小鼠巨噬细胞产生TGF-β1的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第2期26卷 81-85页

作者：储德勇李丛磊李静罗飞郑美娟吴强罗庆礼沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室教育部省部共建和安徽省重要遗传病基因资源利用重点实验室人畜共患病安徽省重点实验室合肥230032 安徽医科大学病理学教研室合肥230032

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PAE)对血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)刺激小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)产生转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法研磨法制备SEA,分别加入含有小鼠PMs的培养板、培养瓶及培养皿中,培养24h,ELISA法测定TGF-β1含量,RT... 详细信息

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PAE)对血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)刺激小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)产生转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法研磨法制备SEA,分别加入含有小鼠PMs的培养板、培养瓶及培养皿中,培养24h,ELISA法测定TGF-β1含量,RT-PCR检测PMs内TGF-β1基因的表达,Western blotting检测PMs内TGF-β1蛋白的表达;在含PMs的培养瓶和培养皿中分别加入10mg/LSEA5ml,培养12h,再分别加入不同浓度的PAE(0、7.5、15、30、60及120mg/L),继续培养12h和24h。RT-PCR与蛋白质印迹(Westernblotting)分别检测PAE对SEA刺激的PMs内TGF-β1基因与蛋白的表达。结果10mg/L的SEA可明显刺激PMs产生TGF-β1(235.86±3.43ng/L),PAE呈浓度依赖性地抑制TGF-β1mRNA的表达(r=-0.827,P<0.01)和TGF-β1蛋白的表达(r=-0.952,P<0.01)。结论PAE能抑制SEA刺激的PMs产生TGF-β1。

关键词：芍药苷日本血吸虫虫卵可溶性抗原肝纤维化转化生长因子β1 巨噬细胞

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弓形虫棒状体蛋白ROP18表位肽抗体的制备与初步应用

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中国动物传染病学报 2023年第1期31卷 48-54页

作者：朱进进程正阳余莉安徽医科大学微生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室合肥230032

设计并制备兔抗弓形虫棒状体蛋白ROP18的特异性表位肽抗体,并对其进行鉴定及初步应用。运用在线蛋白质分析软件Bepi Pred 1.0 Server预测和分析ROP18的抗原表位,人工合成选定的两段优势表位肽,与载体蛋白BSA偶联后分别免疫新西兰兔制备... 详细信息

设计并制备兔抗弓形虫棒状体蛋白ROP18的特异性表位肽抗体,并对其进行鉴定及初步应用。运用在线蛋白质分析软件Bepi Pred 1.0 Server预测和分析ROP18的抗原表位,人工合成选定的两段优势表位肽,与载体蛋白BSA偶联后分别免疫新西兰兔制备抗ROP18血清,通过ELISA鉴定其效价,Western blot鉴定其特异性,并将这两种抗体应用于免疫荧光和免疫共沉淀技术。间接ELISA结果显示两种抗体效价分别为1∶16 000、1∶64 000;Western blot结果显示,两种抗体均能够特异性识别弓形虫速殖子中的内源性天然ROP18蛋白和外源重组ROP18蛋白;免疫荧光检测到ROP18定位于弓形虫速殖子顶端及感染细胞的纳虫泡膜上;免疫共沉淀未能成功下拉目标蛋白。成功获得ROP18的两种表位肽多克隆抗体,效价高且特异性强,并成功应用于免疫荧光定位,为进一步探究ROP18在弓形虫中的功能和作用奠定了基础。

关键词：弓形虫 ROP18 免疫荧光免疫共沉淀

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赖氨酰氧化酶样蛋白1在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达

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安徽医科大学学报 2023年第3期58卷 386-391页

作者：戴冰心龚澧杨旭晗沈际佳刘淼安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室合肥230032

目的观察赖氨酰氧化酶(LOX)家族中的赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)及相关胶原蛋白在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达,探讨其在日本血吸虫肝纤维化形成中的作用。方法采用日本血吸虫感染的小鼠肝纤维化模型,于感染后第6、9、12周剖杀小... 详细信息

目的观察赖氨酰氧化酶(LOX)家族中的赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)及相关胶原蛋白在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达,探讨其在日本血吸虫肝纤维化形成中的作用。方法采用日本血吸虫感染的小鼠肝纤维化模型,于感染后第6、9、12周剖杀小鼠,收集其血清和肝脏标本;以HE和天狼星红两种染色方法分别观察并评价小鼠肝脏纤维化的进展程度;同时检测小鼠血清转氨酶水平。以免疫印迹(Western blot)和荧光定量PCR(qPCR)方法分别检测肝组织LOXL1、Ⅰ型胶原蛋白(Col1)及α-肌动蛋白(α-SMA)的表达并分析其含量的变化;并对血清中的可溶性和不可溶性胶原进行测定,以判断胶原交联情况。结果HE和天狼星红染色结果显示,随感染时间延长,小鼠肝纤维化也随之进展,在感染第9周肝纤维化程度最为严重,随后进入慢性肝纤维化期,纤维化程度减轻。Western blot和qPCR结果显示,LOXL1和其他纤维化指标表达情况类似,均在感染第9周时表达量明显上调;可溶性胶原含量在感染第9周时达峰值后下降,而不可溶性胶原含量则持续上升。结论LOXL1与血吸虫肝脏纤维化过程中纤维交联存在相关关系,可能在肝纤维化进程中起到促进作用。

关键词：日本血吸虫赖氨酰氧化酶样蛋白1 肝纤维化胶原交联

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弓形虫钙依赖蛋白激酶CDPK3多克隆抗体的制备与初步应用

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中国病原生物学杂志 2023年第8期18卷 922-926页

作者：李丹韩萌都建安然安徽医科大学基础医学院生物化学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032

目的制备抗弓形虫钙依赖蛋白激酶(TgCDPK3)多克隆抗体,为进一步探究TgCDPK3在弓形虫中的作用奠定基础。方法将酶切鉴定正确的原核重组表达载体pET28a-TgCDPK3转化BL21,使用IPTG诱导表达重组TgCDPK3蛋白,利用His-Ni Beads亲和层析法纯化... 详细信息

目的制备抗弓形虫钙依赖蛋白激酶(TgCDPK3)多克隆抗体,为进一步探究TgCDPK3在弓形虫中的作用奠定基础。方法将酶切鉴定正确的原核重组表达载体pET28a-TgCDPK3转化BL21,使用IPTG诱导表达重组TgCDPK3蛋白,利用His-Ni Beads亲和层析法纯化重组pET-28a-TgCDPK3蛋白。取纯化蛋白用弗氏佐剂乳化后通过皮下多点注射免疫新西兰大白兔,一周后加强免疫,共2次。末次免疫后1周取血,分离血清,通过ELISA测定抗体效价,Western blot检测抗血清与内源天然TgCDPK3蛋白以及重组表达蛋白TgCDPK3的反应性。同时以该抗血清为一抗采用免疫荧光法进行TgCDPK3蛋白的定位。结果pET-28a-TgCDPK3转化BL21后表达相对分子质量为59×103的His-TgCDPK3蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,制备的抗血清抗体效价为1∶64000。Western blot检测该抗血清能识别来源于弓形虫ME-49株的TgCDPK3蛋白及外源重组TgCDPK3蛋白。免疫荧光检测显示TgCDPK3定位于弓形虫速殖子膜表面。结论成功制备TgCDPK3多克隆抗体,该抗体效价高且特异性强,可用于相关基础实验,为进一步探究TgCDPK3在弓形虫中的作用奠定了基础。

关键词：弓形虫 TgCDPK3 多克隆抗体免疫荧光

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