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2012年安徽省医学会微生物与免疫学、热带病与寄生虫病学会换届改选与学术研讨会

作者：王花王腾霍星星王林罗庆礼刘婷婷徐修才余莉沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室安徽省病原生物学实验室安徽省人兽共患病重点实验室

为了评估人在摄入猪肉这一中国最普遍的肉制品后弓形虫传播给人的风险并确定其主要基因型，本文从安徽省四个地区的零售肉摊购买新鲜猪瘦肉样本416份，其中合肥101份，肥东100份，肥西114份，长丰101份。每个样本通过荧光定量PCR检测组... 详细信息

为了评估人在摄入猪肉这一中国最普遍的肉制品后弓形虫传播给人的风险并确定其主要基因型，本文从安徽省四个地区的零售肉摊购买新鲜猪瘦肉样本416份，其中合肥101份，肥东100份，肥西114份，长丰101份。每个样本通过荧光定量PCR检测组织样本中弓形虫DNA及ELISA检测组织液中抗弓形虫抗体。14个组织液ELISA和荧光定量PCR同时阳性的组织接种小鼠分离虫株。最后获得1个分离株，为了观察这株的毒力，10只6周龄的小雌鼠，每只小鼠腹腔注射1000个速殖子。逐日观察并记录小鼠的死亡情况。为了确定这一猪肉中分离的弓形虫基因型，对1个分离株和7个具有较高弓形虫浓度的阳性DNA样本使用9个基因位点SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, L358, PK1, c22-8, c29-2和Apico的PCR-RFLP方法进行分型。
　　结果：416份样本中ELISA阳性的有一42个，阳性率为10.1%：荧光定量PCR阳性有75个，阳性率为18.03%0 14个荧光定量PCR和ELISA同时阳性的样本接种小鼠后分离到一个虫株((Tgpkix 171)，腹腔接种10只小鼠均在5-10天内死亡，提示该分离株为强毒株。在PCR-RFLP的分型结果中只有分离株和两个阳性DNA样本在所有位点具有完整数据。分离株(Tgpkfxl7l)属于ToxoDB#9(基因型Chinese 1)。两个阳性的DNA样本(Tgpkhf2和Tgpkhf3)属于ToxoDB#213，该基因型为首次报道。另外5个阳性DNA样本只能在部分位点被分型。
　　结论：安徽省市售猪肉弓形虫感染PCR阳性率为10.1%，同时从猪肉中分离到活的弓形虫，提示人在摄入未经检验检疫的未熟猪肉后有感染弓形虫的风险;ToxoDB#9 (Chinese 1)和ToxoDB#213基因型可能是这一区域猪肉中弓形虫的主要基因型。

关键词：猪肉弓形虫感染阳性率基因分型传播风险荧光定量PCR技术

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FasL反义寡核苷酸对舌鳞癌细胞Tca8113增殖和凋亡的影响

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安徽医科大学学报 2012年第11期47卷 1300-1303页

作者：方丽陈乔尔任翠平沈际佳安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院安徽省口腔临床医学重点学科安徽省口腔疾病研究省级实验室中央与地方共建口腔医学中心实验室合肥230032 安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的探讨Fas配体(FasL)反义寡核苷酸(ASO)对舌鳞癌细胞系Tca8113细胞增殖和凋亡的影响。方法设计合成特异性的FasL ASO,并用阳离子脂质体介导转染Tca8113细胞。荧光倒置显微镜观察及流式细胞术(FCM)检测转然前后的转染效率,四甲基偶氮唑... 详细信息

目的探讨Fas配体(FasL)反义寡核苷酸(ASO)对舌鳞癌细胞系Tca8113细胞增殖和凋亡的影响。方法设计合成特异性的FasL ASO,并用阳离子脂质体介导转染Tca8113细胞。荧光倒置显微镜观察及流式细胞术(FCM)检测转然前后的转染效率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度ASO在转染后不同时间对Tca8113细胞增殖的影响;FCM测定转染前后诱导Tca8113细胞的凋亡情况。结果通过荧光倒置显微镜观察及FCM检测发现在脂质体的量一定的情况下,在一定范围内,ASO的浓度越高,转染效率越高。MTT结果显示ASO对Tca8113细胞的增殖有明显抑制作用(P<0.05),FCM对细胞凋亡的检测结果显示反义链组与正义链组、空白对照组及脂质体组相比,总凋亡率有明显差异(P<0.05)。结论 FasL ASO对Tca8113细胞的增殖有一定的抑制作用,能够促进其凋亡,因此FasL ASO有望成为舌鳞癌的潜在的基因治疗方法。

关键词： Fas Fas配体反义寡核苷酸技术舌鳞癌细胞

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外源性一氧化氮体外杀伤旋毛虫成虫的实验研究

外源性一氧化氮体外杀伤旋毛虫成虫的实验研究

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2012年安徽省医学会微生物与免疫学、热带病与寄生虫病学会换届改选与学术研讨会

作者：王小莉王媛媛方强薛玉芹夏惠沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室，蚌埠 233030 安徽医科大学病原生物学教研室，合肥 230032

目的：探讨外源性一氧化氮(NO)对旋毛虫成虫的杀伤作用。　　方法：取感染旋毛虫的BALB/c小鼠肠组织，分离成虫，配制成虫悬液(1000条/ml)。48孔板中每孔加入100 μl成虫悬液，再加入各组试剂，终浓度分别为：亚硝基铁氰化钠(SNP)0.02、... 详细信息

目的：探讨外源性一氧化氮(NO)对旋毛虫成虫的杀伤作用。
　　方法：取感染旋毛虫的BALB/c小鼠肠组织，分离成虫，配制成虫悬液(1000条/ml)。48孔板中每孔加入100 μl成虫悬液，再加入各组试剂，终浓度分别为：亚硝基铁氰化钠(SNP)0.02、0.05、0.10、0.20、0.50和1.00 mmol/L，1.00 mmoFL SNP+0.15mmol/L血红蛋白(Hb)、1.00 mmol/LSNP+0.15 mmol/L FeSO4、1.00 mmol/L SNP+1.00mmol/LL-cyst、1.00 mmol/LSNP+0.15mmol/L FeSO4+1.00mmol/L L-cyst，设空白对照组和阳性对照组(1.00 mmol/LSNP+100 μl肌幼虫悬液)，每组设3个复孔。置37℃ 5％CO2培养箱中孵育。第4天收集各孔成虫，镜检并作番红染色，计算各组虫体死亡率。
　　结果：SNP 0.02 mmol/L和0.05mmo儿组旋毛虫死亡率分别为(1.4±1.2)％和(3.2±1.0)％，这两组与空白对照组的死亡率之间的差异无统计学意义(P>0.05)。SNP 0.10、0.20、0.50和1.00 mmol/L组虫体死亡率分别为为(9.9±1.8)％、(37.7±2.5)％、(50.1±3.5)％和(80.84±1.1)％，与空白对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。旋毛虫成虫死亡率与sNP浓度呈线性趋势(P<0.05)，且呈正相关(P<0.05)。在加入1.00 mmol/L SNP的孔中分别加入Hb、L-cyst、FeSO4和FeSO4+L-cyst与仅SNP1.00mmol/L实验组比较，成虫死亡率均有所下降，分别为(56.54±3.7)％、(72±74.5±6)％、(74.8±2.4)％和(69.84±2.3)％。SNP1.00 mmol/L组与SNP+Hb、sNP+FeSO4+L-cyst组旋毛虫成虫死亡率间的差异有统计学意义(P<0.05)。
　　结论：外源性NO对体外培养的旋毛虫成虫有杀伤作用，而Hb、L-cyst+FeSO4可抑制该杀伤作用。

关键词：外源性一氧化氮体体外培养杀伤实验旋毛虫成虫

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匹多莫德对小鼠弓形虫感染活化的防治作用研究

匹多莫德对小鼠弓形虫感染活化的防治作用研究

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2012年安徽省医学会微生物与免疫学、热带病与寄生虫病学会换届改选与学术研讨会

作者：霍星星都建蔡亦红伦照荣吕芳丽王勇沈继龙王林陈鹤徐修才张爱梅宋晓蓉罗庆礼徐元宏余莉安徽医科大学病原生物学教研室安徽省病原生物学实验室安徽省人兽共患病重点实验室中山大学生命科学院寄生生物国家重点实验室中山大学中山医学院病原生物学教研室南京医科大学病原生物学教研室

目的：免疫功能正常的人体感染弓形虫常呈现为隐性感染状态，而当免疫功能缺陷或受到抑制时，弓形虫隐性感染活化常导致严重后果。随着医学界对本病认识的加深、人们饮食习惯的改变和宠物饲养的增多，加之艾滋病、肿瘤化疗、器官移植以... 详细信息

目的：免疫功能正常的人体感染弓形虫常呈现为隐性感染状态，而当免疫功能缺陷或受到抑制时，弓形虫隐性感染活化常导致严重后果。随着医学界对本病认识的加深、人们饮食习惯的改变和宠物饲养的增多，加之艾滋病、肿瘤化疗、器官移植以及自身性免疫性疾病患者的增加，弓形虫感染和弓形虫病的发病率有增高的趋势。近年来的研究表明，匹多莫德(Pidotimod，PT)具有明显的正相免疫调节作用。本研究试图通过细胞毒制剂和免疫抑制剂环磷酰胺(cY)建立隐性弓形虫感染活化的模型;利用匹多莫德恢复免疫抑制小鼠的免疫功能;观察不同处理组宿主虫血症以及存活时间的变化，检测匹多莫德对小鼠CD4+T细胞亚群以及相关细胞因子的网络调节。本文旨在探讨匹多莫德对于临床隐形弓形虫感染活化的预防和治疗作用。
　　方法：BALB/c小鼠经口灌胃给予弓形虫包囊，6W后形成稳定的弓形虫隐性感染。随机分成实验组和对照组。实验组腹腔注射免疫抑制剂CY诱导免疫抑制动物模型，实验组又分为PT处理组和非PT处理组，对照组给予生理盐水。所有小鼠SPF级环境饲养，观察不同处理组小鼠的存活时间。隔天每组麻醉处死三只小鼠。取外周血提取全血DNA，荧光定量PCR检测弓形虫核酸，监测虫血症，比较匹多莫德对隐性感染活化时的虫血症变化的影响;流式细胞技术(FCM)检测不同处理组小鼠脾淋巴细胞CD4+T细胞亚群，分析匹多莫德对免疫抑制状态下T细胞免疫应答的调节作用：Real time PCR检测鼠脾淋巴细胞转录因子的mRNA表达水平;流式微球阵列技术(CBA)检测血清Th1，Th2以及Th17细胞相关细胞因子，比较匹多莫德对免疫抑制状态下细胞因子表达谱的影响;取不同处理组小鼠脑组织，观察匹多莫德对免疫抑制状态下脑组织病理变化以及荧光定量PCR检测弓形虫核酸比较不同处理组小鼠脑组织虫荷的差异。
　　结果：同时给予匹多莫德干预的小鼠(PT+CY组)相对于单用免疫抑制剂处理组(NS+CY组)的小鼠存活时间明显延长;虫血症明显延迟出现;脑部病理学评分以及脑组织虫荷明显降低;脾淋巴细胞CD4+T细胞亚群、Th1细胞亚群及相应的转录因子T-bet明显恢复。在小鼠血清细胞因子表达谱中，IL-2、IFN-γ和TNF-α表达量明显得到恢复;而Th2、Th17细胞亚群及其相关细胞因子、转录因子恢复不明显。与此同时匹多莫德干预的小鼠调节性T细胞亦有所恢复。
　　结论：免疫调节剂匹多莫德能够明显恢复免疫抑制小鼠的Th1免疫应答，恢复前炎性细胞因子表达，从而推迟弓形虫虫血症的再次出现，延长免疫抑制小鼠的存活时间，明显改善因隐性感染活化引起的脑组织病理损害。

关键词：隐形弓形虫匹多莫德免疫抑制感染活化临床治疗

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我国弓形虫分离株SAG3基因的比较及其毒力分析

我国弓形虫分离株SAG3基因的比较及其毒力分析

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2012年安徽省医学会微生物与免疫学、热带病与寄生虫病学会换届改选与学术研讨会

作者：王林蔡亦红张爱梅沈继龙黄开泉宋晓蓉徐修才余莉罗庆礼陈兆武霍星星安徽病原生物学省级实验室，人兽共患病安徽省重点实验室，安徽医科大学病原生物学教研室，合肥 230032 安徽中医学院第一附属医院检验中心，合肥 230031 安徽病原生物学省级实验室，人兽共患病安徽省重点实验室，安徽医科大学病原生物学教研室，合肥 230032 安徽医科大学附属省立医院安徽中医学院第一附属医院检验中心，合肥 230031

目的：探明流行我国刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)基因型分布及其对小鼠毒力，观察我国强毒株在感染小鼠体内的动态分布，以期为我国刚地弓形虫种群进化研究和弓形虫病的诊断防治提供思路。　　方法：采用PCR-RFLP和DNA序列分析对来源... 详细信息

目的：探明流行我国刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)基因型分布及其对小鼠毒力，观察我国强毒株在感染小鼠体内的动态分布，以期为我国刚地弓形虫种群进化研究和弓形虫病的诊断防治提供思路。
　　方法：采用PCR-RFLP和DNA序列分析对来源于国内不同地域的12株刚地弓形虫以及基因型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型虫株的SAG3基因进行比较分析;弓形虫TgCatwh1、1gCatwh3、TgCatwh6、TgCatys2、TgCatsx1和TgCatgd1速殖子1×103个腹腔感染SPF级KM小鼠，观察小鼠的存活率和死亡时间;同时取TgCatwh3感染小鼠，于感染后第2、4、6、8天，荧光定量PCR方法检测弓形虫在血液、心、肝、脑和淋巴结组织中的动态分布。
　　结果：来源于国内不同地域的12株刚地弓形虫SAG3经PCR-RFLP分型只显示为一种带型，与基因Ⅲ型虫株一致;SAG3基因序列分析显示我国12个弓形虫虫株的NciI酶切位点与国外报道的VEG株一致，同属于基因Ⅲ型，与PCR-RFLP分析结果结果相吻合。除酶切位点外，12个弓形虫株与ToxoDB注册的GT1株及ME49和VEG株进行序列比对分析发现，不同基因型弓形虫株SAG3基因有个别碱基的差异，可能为地理隔离所致的遗传变异。弓形虫TrgCatwh3、TgCatys2、TgCatsx1和TgCatgd株速殖子1×103个腹腔感染KM小鼠，小鼠于5-10天内死亡，腹腔冲洗液涂片可见大量速殖子，为强毒株;弓形虫TgCatwhl和TgCatwh6速殖子经腹腔感染KM小鼠，小鼠只出现一过性的炎症反应，存活小鼠脑组织压片可见大量包囊，为弱毒株。感染后第2天，TgCatwh3虫体即出现在淋巴结和肝组织中，拷贝数分别为2.56±0.097和3.24±0.297，感染后第4天见于血液(4.35±0.507)、心(4.97±0.318)和脑组织(4.89±0.395);血液中虫体随时间推移逐渐增多，第6天时显著增多(P<0.05)，第8天达到高峰(7.75±0.299);心和脑组织中虫体量各时间点之间没有显著性差异(P>0.05)，并以恒定水平持续到实验结束。
　　结论：我国刚地弓形虫具有有限的基因型，即使在相同的基因型内也存在不同毒力的虫株;弓形虫强毒株经腹腔感染KM小鼠，虫体首先侵入腹腔内器官，然后通过血液循环到达全身各器官。

关键词：刚地弓形虫基因型分布毒力分析 DNA序列 SAG3基因

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重组果糖二磷酸醛缩酶SjLAP和亮氨酸氨基肽酶SjFBPA用于日本血吸虫病的诊断和疗效考核的评价(英文)

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第5期29卷 339-347页

作者： Faustina Halm-Lai 罗庆礼钟政荣宋晓蓉陈兆武王林胡梅梅储德勇沈继龙安徽病原生物学省级实验室安徽省人兽共患病重点实验室安徽医科大学病原生物学教研室合肥230022 Cape Coast大学微生物学教研室加纳

目的评价重组亮氨酸氨基肽酶(rSjLAP)和重组果糖二磷酸醛缩酶(rSjFBPA)抗原用于诊断人血吸虫感染以及疗效考核的价值。方法异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导pET-28a-rSjLAP/BL21和pET-28a-rSjFBPA/BL21表达目的蛋白,组氨酸标签亲和... 详细信息

目的评价重组亮氨酸氨基肽酶(rSjLAP)和重组果糖二磷酸醛缩酶(rSjFBPA)抗原用于诊断人血吸虫感染以及疗效考核的价值。方法异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导pET-28a-rSjLAP/BL21和pET-28a-rSjFBPA/BL21表达目的蛋白,组氨酸标签亲和纯化柱纯化rSjLAP和rSjFBPA蛋白。88只BALB/c雌性小鼠随机分为4组,A、B和C组(各21只小鼠),D组(25只小鼠)。A、B和C组分别感染5、15和25条日本血吸虫尾蚴。D组为不感染对照组,在实验的第1天全部处死。A、B和C组在感染后第3、7、10、14、20、30和60天,分别处死小鼠3只,采眼球血制备血清,检测其抗体水平。采用单独或联合rSjLAP和rSjFBPA为抗原,ELISA法检测小鼠血清、急性血吸虫病(38份)和慢性血吸虫病患者(96份)血清中的抗体,以健康人(90份)血清为对照,同时检测华支睾吸虫病(33份)、卫氏并殖吸虫病(40份)和钩虫病患者(37份)血清,并检测急性血吸虫病患者吡喹酮治疗(60 mg/kg,2次/d×2 d)后1年的血清(36份)、慢性血吸虫病患者吡喹酮治疗(剂量,疗程同前)后1年(36份)和2年(64份)的血清。结果 BALB/c小鼠在感染后第10天,rSjLAP和rSjFBPA单独或联合使用均可检测到小鼠血清中的IgG抗体;B组(0.535±0.053,0.595±0.033,0.696±0.104)和C组(0.548±0.060,0.608±0.063,0.621±0.090)早期抗体水平明显高于A组(0.415±0.038,0.455±0.056,0.498±0.077)(P<0.05)。用rSjLAP为抗原可检测急性血吸虫病和慢性血吸虫病患者血清,阳性率分别为97.4%(37/38)和87.5%(84/96)(P>0.05);用rSjFBPA为抗原检测,其阳性率分别为94.7%(36/38)和88.5%(85/96)(P>0.05);用rSjLAP和rSjFBPA联合为抗原检测,则其阳性率分别为94.7%(36/38)和85.4%(82/96)(P>0.05)。rSjLAP或联合抗原的特异性均为96.7%(87/90),而rSjFBPA的特异性为97.8%(88/90)。给予吡喹酮治疗后,rSjLAP和rSjFBPA单独或联合使用检测急性血吸虫病血清(0.236±0.212,0.287±0.191,0.235±0.120)和慢性血吸虫病患者(0.266±0.124,0.261±0.143,0.265±0.140;0.204±0.074,0.176±0.074,0.176±0.073),抗体滴度普遍下降,与对照组(0.188±0.056,0.173±0.045,0.184±0.051)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。rSjLAP和rSjFBPA单独为抗原检测华支睾吸虫病患者血清,交叉反应率为15.2%(5/33)和12.1%(4/33),两者联合则为9.2%(3/33)。rSjLAP检测卫氏并殖吸虫的交叉反应率为15.0%(6/40),rSjFBPA为12.5%(5/40),两种抗原联合检测为15.0%(6/40)。上述抗原单独或联合检测钩虫的交叉反应率均为8.1%(3/37)。上述各组阳性率与健康人群之间差异有统计学意义(P<0.05),显示该重组抗原在其他蠕虫检测中存在一定的交叉反应。结论用rSjFBPA和rSjLAP作为抗原的ELISA法诊断血吸虫病具有良好的敏感性和特异性。

关键词：日本血吸虫病免疫诊断亮氨酸氨基肽酶果糖二磷酸醛缩酶

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芍药苷通过IL-13/STAT6信号转导通路抑制成纤维细胞产生胶原

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第2期29卷 93-98页

作者：杜明占沈继龙吴强胡向阳储德勇安徽医科大学病理学教研室合肥230032 安徽医科大学病原生物学教研室安徽病原生物学省级实验室人兽共患病安徽省重点实验室合肥230032

目的观察芍药苷通过白细胞介素13(IL-13)信号转导通路调控3T3成纤维细胞的细胞激活、增殖和胶原产生。方法分别用不同浓度的芍药苷(200、400、600、800和1 000 mg/L)或重组白介素13(rIL-13,6.25、12.5、50、100和200μg/L),在体外刺激... 详细信息

目的观察芍药苷通过白细胞介素13(IL-13)信号转导通路调控3T3成纤维细胞的细胞激活、增殖和胶原产生。方法分别用不同浓度的芍药苷(200、400、600、800和1 000 mg/L)或重组白介素13(rIL-13,6.25、12.5、50、100和200μg/L),在体外刺激经无血清培养基培养12 h的3T3细胞,同时设空白对照组。培养24 h后,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测rIL-13和芍药苷对细胞增殖的影响,并根据其结果选择1个适宜的rIL-13刺激浓度。用该浓度rIL-13(100μg/L)刺激无血清培养基培养12 h的3T3细胞12 h后,再分别加入不同浓度的芍药苷(200、400、600、800和1 000 mg/L),继续培养24 h,同时设空白对照组。用CCK-8法检测细胞增殖情况,碱裂解法测定培养上清羟脯氨酸含量。蛋白质印迹(Western blotting)分析α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、白介素13受体α1(IL-13Rα1)和信号转导和转录激活因子6(STAT6)的表达情况。RT-PCR检测细胞Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)、IL-13Rα1和STAT6的mRNA水平。结果芍药苷能浓度依赖性地抑制3T3细胞增殖(r=-0.980,P<0.01),且各浓度组间差异有统计学意义(F=198.599,P<0.01)。rIL-13能明显促进3T3细胞增殖(r=0.538,P<0.05)。芍药苷(200、400、600、800和1 000mg/L)能浓度依赖性地抑制rIL-13刺激的3T3细胞增殖(1.780±0.177、1.636±0.073、0.965±0.066、0.623±0.037和0.337±0.022,r=-0.971,P<0.01),且各浓度组间差异有统计学意义(F=198.537,P<0.01)。芍药苷还能浓度依赖性地抑制rIL-13刺激的3T3细胞分泌羟脯氨酸(3.030±0.094、2.976±0.047、2.814±0.047、2.652±0.124和2.408±0.124,r=-0.916,P<0.01),且各浓度组间差异有统计学意义(F=13.642,P<0.01)。Western blotting分析结果显示,芍药苷能抑制rIL-13刺激的3T3细胞α-SMA、IL-13Rα1和STAT6蛋白的表达。RT-PCR结果显示,芍药苷能抑制rIL-13刺激的3T3细胞Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、IL-13Rα1和STAT6 mRNA的转录水平。结论芍药苷通过IL-13/STAT6信号转导通路抑制成纤维细胞增殖、激活和胶原的产生,可能是芍药苷抗日本血吸虫病肝纤维化的机制之一。

关键词：芍药苷成纤维细胞 IL-13 IL-13Rα1 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原

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芍药苷通过IL-13信号通路抑制日本血吸虫病小鼠肝脏纤维化

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安徽医科大学学报 2011年第4期46卷 314-320页

目的观察芍药苷(PAE)对日本血吸虫感染小鼠肝脏纤维化及白介素13(IL-13)信号转导通路中的IL-13、信号转导蛋白和转录激活子6(STAT6)、白介素-13受体α1(IL-13Rα1)和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)mRNA表达的影响,探讨PAE预防血吸... 详细信息

目的观察芍药苷(PAE)对日本血吸虫感染小鼠肝脏纤维化及白介素13(IL-13)信号转导通路中的IL-13、信号转导蛋白和转录激活子6(STAT6)、白介素-13受体α1(IL-13Rα1)和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)mRNA表达的影响,探讨PAE预防血吸虫病肝纤维化的作用机制。方法 BALB/c小鼠感染血吸虫尾蚴12 d开始,药物组每天灌胃给予PAE[0.2 ml,60 mg/(kg.d)×30 d],正常和模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠,并于感染后第42天起所有各组灌胃给予吡喹酮[500 mg/(kg.d)×2 d]以杀虫。在感染后第8、12周末,分别处死小鼠,取血及肝脏,分别用竞争放射免疫法检测血清透明质酸(HA)含量;碱裂解法测量肝脏羟脯氨酸(HYP)含量;苏木精-伊红(HE)和Masson胶原纤维染色法观察肝虫卵性肉芽肿面积和评价肝纤维化程度;免疫组化染色观察α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、IL-13、STAT6、IL-13Rα1的表达情况;RT-PCR检测Col–Ⅰ、Col-ⅢmRNA的表达情况。结果感染后第8、12周时,模型组小鼠血清HA水平和肝脏HYP水平显著高于正常组和药物组(P<0.01);肝脏虫卵肉芽肿面积和纤维化程度显著高于药物组(P<0.01);肝脏α-SMA阳性细胞的表达强度显著高于正常组和药物组(P<0.01);肝脏IL-13表达水平显著高于药物组(P<0.01);肝脏Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA水平显著高于正常组和药物组(P<0.01)。感染后第8周时模型组小鼠STAT6、IL-13Rα1表达水平显著高于药物组(P<0.01)。结论 PAE可能通过抑制IL-13信号转导通路而抑制日本血吸虫病肝纤维化。

关键词：芍药苷血吸虫日本肝硬化白细胞介素13

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日本血吸虫感染鼠巨噬细胞IL-13Rα2的表达

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中国人兽共患病学报 2011年第7期27卷 597-600,609页

作者：王维郑胜生祁瑶闻惠琴刘丽丽沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室人畜共患病安徽省重点实验室合肥230032

目的检测IL-13的诱骗受体IL-13Rα2在血吸虫病巨噬细胞的表达,为从细胞水平探讨Th2型免疫性疾病分子病理机制奠定基础。方法建立日本血吸虫病鼠模型,采用免疫荧光标记法分别检测肝肉芽肿和原代巨噬细胞IL-13Rα2蛋白的表达情况。结果荧... 详细信息

目的检测IL-13的诱骗受体IL-13Rα2在血吸虫病巨噬细胞的表达,为从细胞水平探讨Th2型免疫性疾病分子病理机制奠定基础。方法建立日本血吸虫病鼠模型,采用免疫荧光标记法分别检测肝肉芽肿和原代巨噬细胞IL-13Rα2蛋白的表达情况。结果荧光显微镜下观察:肝肉芽肿内可见似"咖啡豆样"散在分布的IL-13Rα2免疫阳性信号,巨噬细胞膜内缘呈异常增强的环状荧光。结论巨噬细胞是IL-13Rα2阳性表达细胞,IL-13Rα2是血吸虫病重要的免疫病理调节分子。

关键词：血吸虫病肉芽肿巨噬细胞 IL-13Rα2 CD68 免疫荧光染色技术

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IgY-和IgG-ELISA用于日本血吸虫病循环抗原检测的效果比较

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中华预防医学杂志 2011年第9期45卷 859-860页

作者：周银娣温和汪六庆沈继龙合肥市第一人民医院检验科安徽省230032 徐州医学院病原生物学教研室安徽医科大学病原生物学教研室人畜共患病安徽省重点实验室

目前，血吸虫病循环抗原的检测敏感度和特异度均不理想，交叉反应有待解决[1]。免疫检测体系中，探针的特异度和亲和力是影响检测效果的主要因素。IgY是卵黄免疫球蛋白的简称，是用特异性抗原免疫产蛋母鸡后母鸡血液中的抗体转移到蛋黄... 详细信息

目前，血吸虫病循环抗原的检测敏感度和特异度均不理想，交叉反应有待解决[1]。免疫检测体系中，探针的特异度和亲和力是影响检测效果的主要因素。IgY是卵黄免疫球蛋白的简称，是用特异性抗原免疫产蛋母鸡后母鸡血液中的抗体转移到蛋黄中去的，且是蛋黄中惟一存在的抗体，和哺乳动物的IgG相比，IgY具有高特异、高灵敏度，

关键词： IgG-ELISA 循环抗原检测日本血吸虫病卵黄免疫球蛋白特异度交叉反应抗原免疫哺乳动物

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