检索结果-内蒙古大学图书馆

临床输血与检验 2005年第1期7卷 15-17页

作者：钟政荣沈继龙李兴武张凡 230032 合肥安徽医科大学病原生物学教研室安徽省基因研究重点实验室蚌埠医学院附属医院检验科

目的分析在CD-1700型血液分析仪上作白细胞(WBC)计数检测时,在35 fl线附近出现一匕首样峰的异常白细胞直方图和不准确的白细胞计数结果的原因.方法对20例(肝病患者18例,新生儿2例)异常白细胞直方图的可能原因进行逐一分析;采用制片染色... 详细信息

目的分析在CD-1700型血液分析仪上作白细胞(WBC)计数检测时,在35 fl线附近出现一匕首样峰的异常白细胞直方图和不准确的白细胞计数结果的原因.方法对20例(肝病患者18例,新生儿2例)异常白细胞直方图的可能原因进行逐一分析;采用制片染色作显微镜检查,用稀释液洗涤红细胞后再用仪器检测和进行红细胞渗透脆性试验,同时对这些标本用显微镜目测法计数WBC,并与计数法结果进行配对t检验.结果出现异常直方图的WBC计数结果与目测法结果的差异有显著性(P＜0.01),仪器法结果显著增高,且这些标本的红细胞渗透脆性均显著降低. 结论白细胞计数假性增高与红细胞膜脆性变化密切相关.建议出现异常白细胞直方图时,须用显微镜目测法计数白细胞.

关键词：红细胞膜脆性直方图白细胞计数

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日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)及其单克隆抗体用于诊断的价值

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中国人兽共患病杂志 2004年第10期20卷 847-850页

作者：查任远沈继龙汪学龙安徽医科大学病原生物学教研室安徽省基因研究重点实验室合肥230032

目的探讨纯化的日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)及其相应单克隆抗体对日本血吸虫病的诊断价值。方法利用纯化的rSj14-3-3抗原和可溶性虫卵抗原(SEA)间接ELISA方法检测急、慢性日本血吸虫病患者血清中特异性抗体;以纯化的抗rSj1... 详细信息

目的探讨纯化的日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)及其相应单克隆抗体对日本血吸虫病的诊断价值。方法利用纯化的rSj14-3-3抗原和可溶性虫卵抗原(SEA)间接ELISA方法检测急、慢性日本血吸虫病患者血清中特异性抗体;以纯化的抗rSj14-3-3单克隆抗体包板,以兔抗rSj14-3-3多抗和酶标羊抗兔多抗为检测系统的酶标夹心法检测患者血清中的循环抗原。结果用rSj14-3-3检测急、慢性血吸虫病患者血清中特异性抗体的阳性率分别为100%和933%,用抗rSj14-3-3单克隆抗体检测循环抗原的阳性率分别为100%和956%,两者联合检测的总阳性率分别为100%和978%;经治疗后2、4、6、12个月,抗体转阴率分别为387%、548%、75%、90%,血清循环抗原转阴率分别为177%、419%、55%、85%,两者联合检测的总转阴率分别为452%、63%、85%、90%;对正常人血清的检测未见假阳性反应,与华支睾吸虫病和钩虫病患者血清出现轻微的交叉反应;用SEA检测抗体的阳性率分别为978%和956%,与正常人及华支睾吸虫病和钩虫病患者血清均有不同程度的交叉反应,治疗后2、4、6、12个月阴转率分别为32%、65%、125%、15%。结论rSj14-3-3检测急慢性血吸虫病患者血清中的特异性抗体和利用抗rSj14-3-3单克隆抗体检测循环抗原具有高度的特异性和敏感性。

关键词：日本血吸虫病免疫诊断重组sj14-3-3 单克隆抗体

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弓形虫表面抗原SAG1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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临床输血与检验 2004年第1期6卷 4-7页

作者：都建沈继龙汪学龙王维安徽医科大学病原生物学教研室安徽省基因研究重点实验室合肥230032

目的　体外扩增弓形虫 RH株膜表面抗原 SAG1编码基因 ,构建原核表达质粒 ,并表达 SAG1编码基因序列。方法　收集、纯化 RH株速殖子 ,提取 RNA,据已知的 SAG1基因序列 ,在设计合成的 1对引物中引入 Eco RI和 Hind 酶切位点。应用 RT-PCR... 详细信息

目的　体外扩增弓形虫 RH株膜表面抗原 SAG1编码基因 ,构建原核表达质粒 ,并表达 SAG1编码基因序列。方法　收集、纯化 RH株速殖子 ,提取 RNA,据已知的 SAG1基因序列 ,在设计合成的 1对引物中引入 Eco RI和 Hind 酶切位点。应用 RT-PCR技术 ,扩增 SAG1基因片段 ,插入原核表达质粒 p ET2 8a中 ,转化大肠杆菌 BL2 1 感受态细胞 ,重组子经 Eco RI和 Hind 双酶切、PCR鉴定 ,转化宿主菌 BL2 1 ,并以 IPTG诱导表达。结果　从弓形虫 RH株 RNA中扩增出 10 1 1 bp的 SAG1基因片段 ,构建重组质粒 p ET2 8a/ SAG1 ,酶切和 PCR鉴定产物大小均与预期值相符 ;IPTG诱导 ,SDS-PAGE显示表达产物的大小约 3 4.8k D。结论　成功地从弓形虫 RH株 RNA中获取 SAG1基因 ,构建了 p ET2 8a/ SAG1重组质粒并获得了高效表达。

关键词：弓形虫表面抗原 SAG1基因克隆大肠杆菌表达

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日本血吸虫信号蛋白14-3-3的虫体免疫定位

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2003年第6期21卷 330-332页

作者：刘庆中沈继龙汪学龙温州医学院附属第一医院检验科温州325000 安徽医科大学病原生物学教研室安徽省基因研究重点实验室合肥230032

目的　研究抗重组日本血吸虫信号蛋白 1 4 3 3(rSj1 4 3 3)单克隆抗体对天然Sjl4 3 3的结合活性 ,观察Sj1 4 3 3在虫体内的定位。　方法　从阳性钉螺体内逸出尾蚴 ,感染家兔 ,分别于感染后 1 5d和 4 2d剖杀 ,静脉灌注法收集童虫和... 详细信息

目的　研究抗重组日本血吸虫信号蛋白 1 4 3 3(rSj1 4 3 3)单克隆抗体对天然Sjl4 3 3的结合活性 ,观察Sj1 4 3 3在虫体内的定位。　方法　从阳性钉螺体内逸出尾蚴 ,感染家兔 ,分别于感染后 1 5d和 4 2d剖杀 ,静脉灌注法收集童虫和成虫制备冰冻切片。利用rSj1 4 3 3单克隆抗体 ,间接免疫荧光法探讨信号蛋白 1 4 3 3虫体内的分布。　结果　免疫荧光染色结果显示 ,rSj1 4 3 3单克隆抗体可特异性地结合天然Sj1 4 3 3抗原表位 ,背景清晰 ,Sj1 4 3 3广泛分布在雌、雄成虫的皮层、皮下层、肌层和实质层 ,前三种组织中特异性荧光呈线状分布 ,实质中特异性荧光弥散 ;童虫中Sj1 4 3 3也广泛的分布在皮层、皮下层、肌层和实质层。　结论　免疫荧光染色成功地确定了Sj1 4 3 3蛋白在成虫和 1

关键词：日本血吸虫信号蛋白14-3-3 虫体免疫定位单克隆抗体 Sj14-3-3 成虫童虫

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中医药现代化与中药指纹库的建立

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安徽医科大学学报 2003年第4期38卷 247-248页

作者：沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室安徽省基因研究重点实验室合肥230032

中医药是我国民族文化中的绮葩,是世界医药的重要组成部分.尽快将中医药及中药产品推向世界具有政治、文化和经济的多重意义,也是我国几代人的梦想.为此,国家投入了大量的人力、物力和财力.

关键词：中医药现代化中药指纹库生物技术药物设计基因芯片靶基因谱

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日本血吸虫线粒体大亚基核糖体基因的亚克隆、测序及同源性分析

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细胞与分子免疫学杂志 2000年第4期16卷 321-323页

作者：沈际佳蒋作君余新炳汪渊汪学龙吴忠道周青安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032 中山医科大学病原生物学教研室广州510089 安徽医科大学分子生物学实验室安徽合肥230032

目的将筛选日本血吸虫成虫cDNA文库得到基因克隆并测序。方法体外将以阳性克隆为模板的PCR产物和 pGEM T载体连接 ,转化大肠杆菌XL1 blue,经抗生素及生色底物X gal初筛 ,再用限制性内切酶酶切法进一步鉴定和用DNA自动测序仪测序。序列送... 详细信息

目的将筛选日本血吸虫成虫cDNA文库得到基因克隆并测序。方法体外将以阳性克隆为模板的PCR产物和 pGEM T载体连接 ,转化大肠杆菌XL1 blue,经抗生素及生色底物X gal初筛 ,再用限制性内切酶酶切法进一步鉴定和用DNA自动测序仪测序。序列送blast基因服务站进行同源性分析。结果构建了3个含日本血吸虫cDNA基因片段的重组子 ,其中1个阳性克隆序列为编码日本血吸虫线粒体大亚基核糖体rRNA的基因序列 ,另2个序列与已知的日本血吸虫基因序列无同源性。结论获得了日本血吸虫线粒体大亚基核糖体rRNA基因片段 ,为进一步分析其一级结构和功能打下了基础。

关键词：日本血吸虫线粒体核糖体rRNA 测序亚克隆

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PCR扩增日本血吸虫cDNA

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热带病与寄生虫学 1999年第1期28卷 5-6+65页

作者：汪学龙汪渊蒋作君安徽医科大学病原生物学教研室安徽医科大学病原生物学教研室合肥 230032 安徽医科大学分子生物学实验室

目的扩增日本血吸虫cDNA,以便在质粒载体中克隆化。方法从日本血吸虫成虫中提取总RNA,用Oligo(dT)12-18为引物合成cDNA,并用20个引物PCR法扩增其中的cDNA。结果100mg日本血吸虫成虫(湿重)约可纯化出270ug的总RNA,其总RNA主要呈现18S一... 详细信息

目的扩增日本血吸虫cDNA,以便在质粒载体中克隆化。方法从日本血吸虫成虫中提取总RNA,用Oligo(dT)12-18为引物合成cDNA,并用20个引物PCR法扩增其中的cDNA。结果100mg日本血吸虫成虫(湿重)约可纯化出270ug的总RNA,其总RNA主要呈现18S一条电泳区带,所用引物PCR扩增出了多条范围在180～900bp的cDNA。结论该实验为克隆血吸虫基因及其蛋白表达的研究奠定了基础。

关键词：日本血吸虫 cDNA RNA 聚合酶链反应

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