检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第2期26卷 81-85页

作者：储德勇李丛磊李静罗飞郑美娟吴强罗庆礼沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室教育部省部共建和安徽省重要遗传病基因资源利用重点实验室人畜共患病安徽省重点实验室合肥230032 安徽医科大学病理学教研室合肥230032

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PAE)对血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)刺激小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)产生转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法研磨法制备SEA,分别加入含有小鼠PMs的培养板、培养瓶及培养皿中,培养24h,ELISA法测定TGF-β1含量,RT... 详细信息

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PAE)对血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)刺激小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)产生转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法研磨法制备SEA,分别加入含有小鼠PMs的培养板、培养瓶及培养皿中,培养24h,ELISA法测定TGF-β1含量,RT-PCR检测PMs内TGF-β1基因的表达,Western blotting检测PMs内TGF-β1蛋白的表达;在含PMs的培养瓶和培养皿中分别加入10mg/LSEA5ml,培养12h,再分别加入不同浓度的PAE(0、7.5、15、30、60及120mg/L),继续培养12h和24h。RT-PCR与蛋白质印迹(Westernblotting)分别检测PAE对SEA刺激的PMs内TGF-β1基因与蛋白的表达。结果10mg/L的SEA可明显刺激PMs产生TGF-β1(235.86±3.43ng/L),PAE呈浓度依赖性地抑制TGF-β1mRNA的表达(r=-0.827,P<0.01)和TGF-β1蛋白的表达(r=-0.952,P<0.01)。结论PAE能抑制SEA刺激的PMs产生TGF-β1。

关键词：芍药苷日本血吸虫虫卵可溶性抗原肝纤维化转化生长因子β1 巨噬细胞

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猪囊尾蚴cDNA文库的筛选与重组蛋白的初步鉴定

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中国人兽共患病学报 2008年第7期24卷 644-646,650页

作者：郑胜生汪学龙沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室(安徽医科大学)合肥230032

目的从猪囊尾蚴cDNA文库中免疫学筛选阳性蛋白的编码基因,以期获得囊尾蚴病新的免疫学诊断候选分子。方法免疫学筛选cDNA文库,用PCR法扩增出猪囊尾蚴候选蛋白基因编码序列,T载体连接,鉴定后将其亚克隆入pET28a(+)载体中,经酶切、测序证... 详细信息

目的从猪囊尾蚴cDNA文库中免疫学筛选阳性蛋白的编码基因,以期获得囊尾蚴病新的免疫学诊断候选分子。方法免疫学筛选cDNA文库,用PCR法扩增出猪囊尾蚴候选蛋白基因编码序列,T载体连接,鉴定后将其亚克隆入pET28a(+)载体中,经酶切、测序证实正确后,转化入大肠杆菌BL21并用IPTG对该重组菌诱导表达,SDS-PAGE和Western blot方法观察表达结果。结果通过cDNA文库免疫筛选、测序和EXPASY软件分析,其一个684bp ORF DNA序列为新基因(命名为Ts1),录入号为EU009656;将Ts1基因克隆入pET28a(+)载体中诱导表达,可得到一分子量约28.0kDa融合蛋白,并能被囊尾蚴病人血清识别。结论本试验成功筛选、克隆出一个新囊尾蚴编码基因,并在原核细胞中表达,为进一步验证其免疫诊断价值奠定了基础。

关键词：猪囊尾蚴免疫学筛选克隆表达鉴定

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基于IgY的ELISA用于日本血吸虫病循环抗原的检测

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安徽医科大学学报 2008年第4期43卷 372-376页

作者：周银娣罗庆礼余轶婧张诗海李静沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室人畜共患病安徽省重点实验室重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室合肥230032

目的以鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)替代哺乳动物来源的IgG抗体,建立双抗体夹心ELISA用于日本血吸虫病的诊断。方法制备并纯化抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的卵黄抗体IgY和抗SEA的兔多克隆IgG抗体;以抗SEA的IgG为捕获抗体,IgY为检测抗体... 详细信息

目的以鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)替代哺乳动物来源的IgG抗体,建立双抗体夹心ELISA用于日本血吸虫病的诊断。方法制备并纯化抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的卵黄抗体IgY和抗SEA的兔多克隆IgG抗体;以抗SEA的IgG为捕获抗体,IgY为检测抗体的双抗体夹心ELISA诊断方法,共检测血清443份,其中急性血吸虫病患者血清68例,慢性血吸虫病患者180例,正常人100例,肺吸虫感染者20例,华支睾吸虫感染者48例和钩虫感染者血清27例。探讨基于IgY的循环抗原检测的应用价值。结果成功制备并鉴定了特异性IgY和IgG抗体,建立了双抗体夹心ELISA检测体系;检测急性血吸虫病患者和慢性血吸虫病患者血清的阳性率分别为79.4%和64.4%,最低灵敏度为9.3μg/L;正常人血清的阴性率为92%;与肺吸虫、华支睾吸虫、钩虫感染者血清的交叉反应分别为20%、20.8%、14.8%。结论建立了基于IgY的双抗夹心ELISA检测体系,用于日本血吸虫SEA的检测具有一定特异性和较高的敏感性,可试用于日本血吸虫病的辅助诊断。

关键词：血吸虫病日本/诊断

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血清透明质酸和层粘蛋白检测在日本血吸虫性肝纤维化程度判断的作用

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安徽医科大学学报 2008年第2期43卷 225-226页

作者：贾中伟罗庆礼陆琼沈继龙安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230022 人畜共患病安徽省重点实验室教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽医科大学安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的观察晚期日本血吸虫患者血清中透明质酸(HA)与层粘蛋白(LN)水平,探讨HA与LN在日本血吸虫性肝纤维化中诊断价值。方法358例晚期血吸虫患者,采用B超对肝纤维化程度进行分级。随机选取HBsAg阴性的早期肝纤维化患者39例、晚期肝纤维化患... 详细信息

目的观察晚期日本血吸虫患者血清中透明质酸(HA)与层粘蛋白(LN)水平,探讨HA与LN在日本血吸虫性肝纤维化中诊断价值。方法358例晚期血吸虫患者,采用B超对肝纤维化程度进行分级。随机选取HBsAg阴性的早期肝纤维化患者39例、晚期肝纤维化患者29例,检测患者血清HA与LN水平。结果日本血吸虫性晚期肝纤维化患者血清HA与LN水平分别为(273.42±216.54)g/L、(152.48±43.32)g/L,其浓度显著高于早期肝纤维化组(P<0.01)和正常对照组(P<0.01)。早期肝纤维化患者血清HA与LN水平分别为(48.88±30.96)g/L、(125.05±19.72)g/L,与正常对照组差异无显著性(P>0.05)。结论在日本血吸虫性肝纤维化患者中,血清HA与LN水平不能作为肝纤维化的早期实验室诊断指标,但是可以作为肝纤维化发展的重要标志物。

关键词：透明质酸层粘连蛋白血吸虫病日本肝硬化

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siRNA抑制弓形虫次黄嘌呤-黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶的表达

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安徽医科大学学报 2008年第4期43卷 376-380页

作者：余莉李霞郜玉峰罗庆礼乔增培沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室人兽共患病安徽省重点实验室教育部省部共建重点实验室(安徽医科大学)合肥230032 安徽中医学院第二附属医院检验科合肥230061 安徽医科大学第一附属医院感染病科合肥230022

目的探讨小干扰RNA(siRNA)在弓形虫体内的对目的基因的表达调节作用。方法以弓形虫嘌呤代谢过程中的关键酶——次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HXGPRT)编码基因为靶标,合成3对siRNA,以电穿孔的方式将不同的浓度的siRNA转染弓... 详细信息

目的探讨小干扰RNA(siRNA)在弓形虫体内的对目的基因的表达调节作用。方法以弓形虫嘌呤代谢过程中的关键酶——次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HXGPRT)编码基因为靶标,合成3对siRNA,以电穿孔的方式将不同的浓度的siRNA转染弓形虫。采用荧光定量PCR及[3H]-次黄嘌呤摄入量分别检测弓形虫HXGPRT mRNA及酶合成量。结果在针对HXGPRT编码基因设计的3对21nt的siRNA中,有1对(siRNA415)能明显降低HXGPRT mRNA水平及酶合成量。在转染后24h,4μmol/LsiRNA415电转弓形虫的HXGPRT mRNA水平及[3H]-次黄嘌呤摄入量分别降为模拟电转弓形虫的0.36±0.04及0.51±0.03倍(P<0.05)。结论21nt的siRNA在弓形虫体内能有效抑制目的基因的表达。siRNA在弓形虫体内的应用将为阐明未知基因的功能和抗弓形虫药物的筛选提供有力的工具。

关键词：嘌呤类/代谢次黄嘌呤磷酸核糖转移酶 RNA 小分子干扰

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IL-13及其诱饵受体IL-13Rα2在血吸虫病肝纤维化中的作用

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国际医学寄生虫病杂志 2008年第5期35卷 260-264页

作者：李静储德勇沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室人兽共患病安徽省重点实验审教育部省部共建基因资源利用重点实验室合肥230032

虽然目前对血吸虫病肝纤维化的分子机制尚不太明确,但许多研究表明,细胞因子IL-13对血吸虫病肝纤维化起关键性的促进作用,而其IL-13α2受体(IL-13Rα2)是一个诱饵蛋白,起重要的抑制作用.这些研究结果为今后更全面、明确地了解血吸虫病... 详细信息

虽然目前对血吸虫病肝纤维化的分子机制尚不太明确,但许多研究表明,细胞因子IL-13对血吸虫病肝纤维化起关键性的促进作用,而其IL-13α2受体(IL-13Rα2)是一个诱饵蛋白,起重要的抑制作用.这些研究结果为今后更全面、明确地了解血吸虫病肝纤维化的分子机制提供了极其重要的线索.为阐明诱饵受体IL-13Rα2与血吸虫病肝纤维化之间的关系,该文综述了IL-13以及IL-13Rα2在血吸虫病肝纤维化形成及其信号转导中的作用.

关键词：血吸虫病肝硬化白细胞介素13 白细胞介素13Rα2 诱饵受体

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胃癌14-3-3sigma mRNA的表达及其临床意义

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中国肿瘤 2008年第7期17卷 627-628页

作者：王凤超钟政荣姜丛桥胡建国沈继龙蚌埠医学院第一附属医院安徽蚌埠233004 安徽省基因研究重点实验室安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032

[目的]探讨胃癌14-3-3sigma mRNA的表达及其与胃癌生物行为学关系。[方法]用半定量RT-PCR检测胃癌患者肿瘤组织和远癌组织标本中的14-3-3sigma mRNA。[结果]39.6%(21/54)的胃癌组织中的14-3-3sigma mRNA出现低表达,但14-3-3sigma mRNA... 详细信息

[目的]探讨胃癌14-3-3sigma mRNA的表达及其与胃癌生物行为学关系。[方法]用半定量RT-PCR检测胃癌患者肿瘤组织和远癌组织标本中的14-3-3sigma mRNA。[结果]39.6%(21/54)的胃癌组织中的14-3-3sigma mRNA出现低表达,但14-3-3sigma mRNA的低表达与患者的性别、年龄以及胃癌的病理分型、分期以及淋巴结转移均无显著性相关。[结论]14-3-3sigmamRNA的低表达与胃癌的发生相关。

关键词：胃肿瘤 14-3-3 sigma RT-PCR

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卵黄抗体IgY用于诊断和治疗的研究进展

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热带病与寄生虫学 2008年第4期6卷 239-242页

作者：周银娣沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室人畜共患病安徽省重点实验室重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室

鸡卵黄免疫球蛋白(egg yolk immunoglobulin)又称IgY或卵黄抗体,是用特异性抗原注射未经免疫的产蛋母鸡后,母鸡血液中的抗体转移到蛋黄中,成为蛋黄中唯一存在的抗体。近年来卵黄抗体逐渐引起人们的注意,而且得到越来越广泛

关键词： IgY 特异性哺乳动物卵黄抗体交叉反应性抗体滴度弗氏完全佐剂

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血吸虫病免疫诊断抗原研究进展

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临床输血与检验 2008年第3期10卷 281-285页

作者：郑辉吴赟沈继龙安徽医科大学附属安徽省立医院合肥230001 安徽医科大学重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室人畜共患病安徽省重点实验室安徽医科大学病原生物学教研室

血吸虫病仍然是我国重要的公共卫生问题之一,诊断抗原一直是血吸虫病诊断研究热点。随着分子生物学技术的发展,血吸虫病的诊断抗原已由最初的粗抗原发展成为组分抗原及由基因重组的方法生产合成的重组抗原。本文综述了近年来血吸虫免疫... 详细信息

血吸虫病仍然是我国重要的公共卫生问题之一,诊断抗原一直是血吸虫病诊断研究热点。随着分子生物学技术的发展,血吸虫病的诊断抗原已由最初的粗抗原发展成为组分抗原及由基因重组的方法生产合成的重组抗原。本文综述了近年来血吸虫免疫诊断抗原的研究进展,并分析了诊断抗原存在的问题及将来的发展趋势。

关键词：血吸虫病诊断抗原重组抗原

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猪囊尾蚴Ts2基因的免疫筛选克隆及生物信息学分析

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中国血吸虫病防治杂志 2008年第3期20卷 201-203页

作者：郑胜生汪学龙沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室、安徽省人兽共患病重点实验室、教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室合肥230032

目的筛选并分析猪囊尾蚴新基因,为猪囊尾蚴病患者的免疫学诊断提供特异的重组抗原及有效的疫苗候选分子。方法用猪囊尾蚴病患者血清抗体筛选猪囊尾蚴cDNA文库,将所获阳性克隆的插入片段进行扩增并测序,通过互联网NCBI Gen Bank和蛋白质... 详细信息

目的筛选并分析猪囊尾蚴新基因,为猪囊尾蚴病患者的免疫学诊断提供特异的重组抗原及有效的疫苗候选分子。方法用猪囊尾蚴病患者血清抗体筛选猪囊尾蚴cDNA文库,将所获阳性克隆的插入片段进行扩增并测序,通过互联网NCBI Gen Bank和蛋白质分析软件进行分析。结果筛选阳性克隆,经分析具有738bp完整开放阅读框,是1个新基因,登录号EU221317,命名为Ts2。结论成功克隆了猪囊尾蚴Ts2基因片段,为进一步实验提供了条件。

关键词：囊尾蚴 cDNA文库免疫学筛选克隆

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