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全国第十一次生化与分子药理学学术会议

作者：阮晶晶陈飞虎徐佼沈娟石静波吴繁荣汪渊安徽医科大学药学院安徽医科大学分子生物学实验室、生物化学教研室和安徽省/省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室合肥 230032

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Marie Unna型遗传性稀毛症的基因突变研究

Marie Unna型遗传性稀毛症的基因突变研究

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2009全国中西医结合皮肤性病学术会议

作者：蔡丽琼王培光高敏陆闻生徐生新方巧云周文明林达杜文辉张书梅杨森张学军安徽医科大学皮肤病研究所、安徽医科大学第一附属医院皮肤性病科教育部“重要遗传病基因资源利用”重点实验室(省部共建) 安徽医科大学生物教研室

研究背景:Marie Unna型遗传性稀毛症(MUHH)是临床上一种罕见的常染色体显性遗传性毛发疾病。受累个体临床表现为粗糙,扭曲,呈金属丝样外观头发;从青春期开始,头发弥漫性脱落,逐渐加重。迄今为止,该病已有两个位点分别被定位在8p21和1p21... 详细信息

研究背景:Marie Unna型遗传性稀毛症(MUHH)是临床上一种罕见的常染色体显性遗传性毛发疾病。受累个体临床表现为粗糙,扭曲,呈金属丝样外观头发;从青春期开始,头发弥漫性脱落,逐渐加重。迄今为止,该病已有两个位点分别被定位在8p21和1p21.1-1q21.3上,其中8p21已被多个研究小组证实。最近,在一个MUHH家系的U2HR区域鉴定了一个致病的起始密码突变并在祖先来源不同的MUHH家系中建立了U2HR的突变缺陷谱,U2HR是人类无毛基因(HR)的5'非翻译区域(5′UTR)的一个抑制上游开放阅读框(uORF)。目的:研究和报告一中国散发的MUHH病例U2HR区域的基因突变情况,并进一步验证该病的这一新的致病机理。方法:收集整理患者的临床资料,采用聚合酶链反应(PCR)扩增患者和健康对照个体的U2HR区域,直接测序法进行DNA测序,100例无亲缘关系的正常人作为对照。结果:在该散发患者的U2HR区域中检测到1个错义突变c.A77C,导致其编码的第26位谷氨酸变成丙氨酸(E26A)。患者的健康父亲及其他无亲缘关系的正常对照均未发现该突变。结论:我们的结果增加了MUHH的新的U2HR突变缺陷谱。更为重要的是,我们的研究首次验证了该病的这种新的致病机理。

关键词：稀毛症基因突变 Marie Unna

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社区获得性肺炎的病原体调查与药物敏感性分析

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中华疾病控制杂志 2009年第3期13卷 273-276页

作者：陈光福胡元生沈继龙石杜鹃刘丽丽李若梅汪学龙温和教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032 安徽医科大学第三附属医院检验科安徽合肥230061 安徽医科大学第一附属医院检验科安徽合肥230022

目的研究社区获得性肺炎CAP病原体种类、药物敏感性等,为临床有效诊断、治疗提供依据。方法对154名社区获得性肺炎患者的标本进行细菌培养和血清学检测,并进行药物敏感性试验。用PCR检测社区获得性肺炎非典型病原体。结果在社区获得性... 详细信息

目的研究社区获得性肺炎CAP病原体种类、药物敏感性等,为临床有效诊断、治疗提供依据。方法对154名社区获得性肺炎患者的标本进行细菌培养和血清学检测,并进行药物敏感性试验。用PCR检测社区获得性肺炎非典型病原体。结果在社区获得性肺炎患者中多重感染十分常见;在典型病原体感染中,以肺炎链球菌最为常见;在非典型病原体感染中,以肺炎支原体最为常见,非典型病原体感染在8～14岁阶段检出率最高;明确了各种病原体对常用抗菌药物的敏感性。结论明确了该地区社区获得性肺炎的病原谱,及其对药物敏感性的差异,为临床有效治疗提供了依据。

关键词：肺炎社区获得性感染病原微生物敏感性试验

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维生素D受体基因多态性与汉族儿童氟斑牙易感性的关系研究

维生素D受体基因多态性与汉族儿童氟斑牙易感性的关系研究

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全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会

作者：章润贞潘莉岳岚余晨晓李颂安徽医科大学口腔医学院牙体牙髓科重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室凤台县人民医院口腔科凤台县疾病控制中心

目的:观察维生素D受体(VDR)基因多态性在汉族儿童中的分布情况,探讨VDR基因多态性与汉族儿童氟斑牙易感性的关系方法:Dean氏法检查8-12岁凤台县关店乡儿童氟斑牙患病情况,收集氟斑牙患者101例及正常对照者102例,采集外周静脉血提取DNA,... 详细信息

目的:观察维生素D受体(VDR)基因多态性在汉族儿童中的分布情况,探讨VDR基因多态性与汉族儿童氟斑牙易感性的关系方法:Dean氏法检查8-12岁凤台县关店乡儿童氟斑牙患病情况,收集氟斑牙患者101例及正常对照者102例,采集外周静脉血提取DNA,采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定两组儿童VDR ApaI,BsmI,FokI和TaqI的基因型,观察汉族儿童VDR各基因型分布情况,并分析两组间基因型分布差异结果:汉族儿童中存在维生素D受体(VDR)基因多态性,且基因型的分布以Aa、bb、Ff、TT居多,分别占51.7%、89.7%、52.7%、93.1%;aa、Bb、FF、Tt次之,分别占39.9%、7.9%、31.5%、6.9%;AA、BB、ff、tt最少,分别占8.4%、2.4%、15.8%、0.0%。VDR ApaI基因型分布频率为:氟斑牙患者AA占7.9%、Aa占55.4%、aa占36.7%;正常对照组AA占8.8%、Aa占48.0%、aa占43.3%,两组基因型分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。VDRBsmI基因型分布频率为:氟斑牙患者BB占3.0%、Bb占5.9%、bb占91.1%;正常对照组BB占2.0%、Bb占9.8%、bb占88.2%,两组基因型分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。VDR FokI基因型分布频率为:氟斑牙患者FF占28.7%、Ff占56.4%、ff占14.9%;正常对照组FF占34.3%、Ff占49.0%、ff占16.7%,两组基因型分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。VDRTaqI基因型分布频率为:氟斑牙患者TT占93.1%、Tt占6.9%、tt占0.0%;正常对照组TT占93.1%、Tt占6.9%、tt占0.0%,两组基因型分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:VDR ApaI,BsmI,FokI和TaqI四个位点的多态性与所调查儿童氟斑牙发生无明显关系。

关键词：受体,骨化三醇氟中毒,牙多态性,单核苷酸

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脂多糖诱导肺微血管内皮细胞SSeCKS mRNA表达的研究

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中国危重病急救医学 2008年第2期20卷 65-68页

作者：李惠孙耕耘费黎明沈继龙安徽医科大学第一附属医院呼吸内科合肥230022 安徽医科大学重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室人畜共患病安徽省重点实验室

目的研究脂多糖（LPS）对体外培养大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）中Src抑制的蛋白激酶C底物（SSeCKS）mRNA表达的影响，以及甲泼尼龙对其的干预作用。方法体外培养大鼠PMVEC，根据与LPS孵育时间和LPS剂量不同随机分组，并用逆转录-聚合... 详细信息

目的研究脂多糖（LPS）对体外培养大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）中Src抑制的蛋白激酶C底物（SSeCKS）mRNA表达的影响，以及甲泼尼龙对其的干预作用。方法体外培养大鼠PMVEC，根据与LPS孵育时间和LPS剂量不同随机分组，并用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测PMVEC中SSeCKS mRNA的表达变化。结果正常情况下，PMVEC中SSeCKS mRNA低表达。LPS在体外可诱导SSeCKS mRNA的表达明显增高，表达水平变化与LPS呈剂量和时间依赖关系：LPS孵育1h后，PMVEC中SSeCKS mRNA的表达量随LPS剂量增加而逐渐增高（正常对照组为0．263±0．033；LPS0．1mg／L时为0．529±0．066，1mg／L时为1．391±0．048，10mg／L时为2．339±0．055，100mg／L时为2．861±0．069），组间比较差异有统计学意义（F=639．096，P〈0．05）；10mg／L的LPS与PMVEC共用孵育，0．5hSSeCKS mRNA表达开始增高，1h时达峰值，之后逐渐降低，12h表达仍高于正常水平（正常对照组为0．301±0．022；LPS0．5h为1．617±0．018，1h为2．378±0．031，3h为2．148±0．056，6h为1．322±0．042，12h为0．772±0．044），组间比较差异有统计学意义（F=726．346，P〈0．05）。甲泼尼龙干预后可显著抑制LPS诱导的SSeCKS mRNA表达增高（2．664±0．104比1．759±0．151，F=156．000，P〈0．05）。结论①LPS可诱导大鼠PMVEC中SSeCKS mRNA表达上调，并呈剂量和时间的依赖关系，提示SSeCKS与LPS诱导的大鼠PMVEC损伤有关。②甲泼尼龙参与可抑制LPS诱导的SSeCKS mRNA表达增高。

关键词：脂多糖血管内皮细胞炎症 Src抑制的蛋白激酶C底物大鼠

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血管祖细胞与动脉粥样硬化

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中华心血管病杂志 2008年第12期36卷 1134-1137页

作者：李庆汪渊安徽医科大学附属省立医院中心实验室合肥230001 安徽医科大学分子生物学实验室安徽省/省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室

动脉粥样硬化（artherosclerosis，AS）的发生是复杂的、综合性的长期过程，其发病机制至今尚未完全明了。在世界范围内，因AS血栓形成导致死亡的人数占全部死亡人数的52％，远远超过了列第2位死因的肿瘤；在我国，近年来AS的发病率有... 详细信息

动脉粥样硬化（artherosclerosis，AS）的发生是复杂的、综合性的长期过程，其发病机制至今尚未完全明了。在世界范围内，因AS血栓形成导致死亡的人数占全部死亡人数的52％，远远超过了列第2位死因的肿瘤；在我国，近年来AS的发病率有明显增加的趋势。

关键词：动脉粥样硬化祖细胞血管死亡人数发病机制世界范围血栓形成发病率

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传播结膜吸吮线虫的果蝇[Amiota(Phortica)okadai]生态习性研究

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中国人兽共患病学报 2008年第6期24卷 548-550页

作者：罗庆礼周银娣闻慧琴王增贤沈继龙安徽省人畜共患病重点实验室(安徽医科大学) 教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室(安徽医科大学)合肥230032

目的为进一步了解结膜吸吮线虫不同地区媒介果蝇某些生态习性差异。方法用实验室饲养的媒介果蝇在食物上产卵,以产卵数代表对食物的亲疏的关系;观察和捕获现场媒介果蝇绕眼次数及侵袭人眼的数量,测定侵袭眼的频率和强度;初冬季节用结膜... 详细信息

目的为进一步了解结膜吸吮线虫不同地区媒介果蝇某些生态习性差异。方法用实验室饲养的媒介果蝇在食物上产卵,以产卵数代表对食物的亲疏的关系;观察和捕获现场媒介果蝇绕眼次数及侵袭人眼的数量,测定侵袭眼的频率和强度;初冬季节用结膜吸吮线虫初产蚴,喂饲感染媒介果蝇,经越冬(150d)后剖检,获得感染期幼虫感染家兔,观察其感染力。结果实验表明媒介果蝇嗜食水果类如苹果、梨、香蕉、油桃等和瓜蔬类如冬瓜、胡萝卜等。厌恶大蒜、韭菜等芳香蔬菜和鸡肠、鱼肠等动物内脏。各地区媒介果蝇绕眼、袭眼特性不同:山区果蝇袭眼更频繁;媒介果蝇感染结膜吸吮线虫后能越冬,其寿命长达150 d,幼虫在蝇体内能保持完好的感染力。结论各地区的媒介果蝇食性近似;山区的果蝇绕眼、袭眼能力较强;果蝇感染结膜吸吮线虫后能够越冬至次年仍保持传病能力。本文还讨论了亚欧果蝇的属种名问题。

关键词：结膜吸吮线虫果蝇生态习性

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4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯诱导K562细胞分化的作用及细胞周期阻滞的作用机制

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中国药理通讯 2009年第2期26卷 27-27页

作者：阮晶晶陈飞虎徐佼沈娟石静波吴繁荣汪渊安徽医科大学药学院安徽医科大学分子生物学实验室、生物化学教研室和安徽省／省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室合肥230032

目的：本研究探讨新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（4-amino-2-trifluoromethyl—phenylretinate，ATPR）对K562细胞株的抑制增殖的和诱导分化活性并对其发生的细胞周期G1期阻滞的机制进行研究。方法：ATPR作用于K562细... 详细信息

目的：本研究探讨新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（4-amino-2-trifluoromethyl—phenylretinate，ATPR）对K562细胞株的抑制增殖的和诱导分化活性并对其发生的细胞周期G1期阻滞的机制进行研究。方法：ATPR作用于K562细胞3d后，通过MTT法检测细胞的增殖，NBT还原实验法分析细胞的分化指标，FCM检测分析细胞周期和细胞表面分化抗原CD45、CD73、CD117变化。RT—PCR法检测细胞周期蛋白cyclinE、cyclinD1，细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2、CDK4、CDK6，周期蛋白抑制蛋白／激酶抑制蛋白（CIP／KIP）P21（cipl）、P27（kipl）、P57（kip2）mRNA的变化情况。WesternBlot法检测cyclinDl和CDK4蛋白表达的改变。结果：ATPR呈浓度依赖性抑制K562细胞增殖的作用。

关键词： K562细胞株细胞周期阻滞维甲酸酯细胞分化三氟甲基细胞周期蛋白依赖性激酶 WesternBlot法苯基

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芍药苷对日本血吸虫感染小鼠肝组织免疫病理的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第1期26卷 10-15,20页

作者：储德勇李丛磊杨枫吴强李静丁向东罗庆礼沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室教育部省部共建和安徽省重要遗传病基因资源利用重点实验室人畜共患病安徽省重点实验室合肥230032 安徽医科大学病理学教研室合肥230032

目的观察芍药苷(paeoniflorin)对日本血吸虫病小鼠肝组织免疫病理的影响,探索芍药苷预防血吸虫病肝虫卵肉芽肿和肝纤维化的作用机制。方法日本血吸虫尾蚴感染昆明小鼠,制成肝虫卵肉芽肿和肝纤维化小鼠模型。然后随机分为4组:模型组(A组)... 详细信息

目的观察芍药苷(paeoniflorin)对日本血吸虫病小鼠肝组织免疫病理的影响,探索芍药苷预防血吸虫病肝虫卵肉芽肿和肝纤维化的作用机制。方法日本血吸虫尾蚴感染昆明小鼠,制成肝虫卵肉芽肿和肝纤维化小鼠模型。然后随机分为4组:模型组(A组)(15只),吡喹酮治疗前(B组)、治疗同时(C组)及治疗后(D组)给予芍药苷组(各45只)。其中后3组又各分为低剂量组[芍药苷30mg/(kg·d)×30d]、高剂量组[芍药苷120mg/(kg·d)×30d]及对照组(0.5%羧甲基纤维素钠溶剂2ml×30d)。B组感染后第12天起、C及D组分别于感染后第42及72天起,灌胃芍药苷或0.5%羧甲基纤维素钠溶剂。B、C和D等3组均于感染后第42天起灌胃吡喹酮[500mg/(kg·d)×2d]。感染后第102天处死取血及肝脏。用竞争放射免疫法检测血清透明质酸(HA)含量,苏木素-伊红(HE)及Masson胶原纤维染色观察肝虫卵肉芽肿面积及纤维化程度,用免疫组化技术评价α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)表达情况。结果B组HA水平,低剂量组及高剂量组均显著低于对照组(F=9.429,P值均<0.01);肉芽肿面积及肝纤维化程度,低剂量组及高剂量组均显著低于对照组(F=862.540、F=29.738,P值均<0.01);α-SMA阳性细胞表达强度(F=12.323,P值均<0.01)、TGF-β1表达强度(F=148.990,P值均<0.01)、ColⅠ含量(F=180.881,P值均<0.01),低剂量组和高剂量组均显著低于对照组。C组及D组各项检测数据与其相应的对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论吡喹酮治疗前给予芍药苷,能明显降低肝虫卵肉芽肿和肝纤维化程度,减少肝组织TGF-β1、α-SMA的表达。

关键词：芍药苷日本血吸虫肝纤维化 α平滑肌肌动蛋白转化生长因子β1

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芍药苷对小鼠巨噬细胞产生TGF-β1的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第2期26卷 81-85页

作者：储德勇李丛磊李静罗飞郑美娟吴强罗庆礼沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室教育部省部共建和安徽省重要遗传病基因资源利用重点实验室人畜共患病安徽省重点实验室合肥230032 安徽医科大学病理学教研室合肥230032

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PAE)对血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)刺激小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)产生转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法研磨法制备SEA,分别加入含有小鼠PMs的培养板、培养瓶及培养皿中,培养24h,ELISA法测定TGF-β1含量,RT... 详细信息

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PAE)对血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)刺激小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)产生转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法研磨法制备SEA,分别加入含有小鼠PMs的培养板、培养瓶及培养皿中,培养24h,ELISA法测定TGF-β1含量,RT-PCR检测PMs内TGF-β1基因的表达,Western blotting检测PMs内TGF-β1蛋白的表达;在含PMs的培养瓶和培养皿中分别加入10mg/LSEA5ml,培养12h,再分别加入不同浓度的PAE(0、7.5、15、30、60及120mg/L),继续培养12h和24h。RT-PCR与蛋白质印迹(Westernblotting)分别检测PAE对SEA刺激的PMs内TGF-β1基因与蛋白的表达。结果10mg/L的SEA可明显刺激PMs产生TGF-β1(235.86±3.43ng/L),PAE呈浓度依赖性地抑制TGF-β1mRNA的表达(r=-0.827,P<0.01)和TGF-β1蛋白的表达(r=-0.952,P<0.01)。结论PAE能抑制SEA刺激的PMs产生TGF-β1。

关键词：芍药苷日本血吸虫虫卵可溶性抗原肝纤维化转化生长因子β1 巨噬细胞

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