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安徽医科大学学报 2017年第4期52卷 471-475页

作者：施鹏陶辉张家贵曹炜钱鹏占红英石开虎安徽医科大学第二附属医院心胸外科合肥230601 安徽医科大学心血管病研究中心合肥230601

目的探究沉默信息调节因子1(SIRT1)对乳鼠心肌成纤维细胞增殖的影响作用。方法应用转化生长因子-β1处理乳鼠原代心肌成纤维细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测SIRT1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达水平;Western ... 详细信息

目的探究沉默信息调节因子1(SIRT1)对乳鼠心肌成纤维细胞增殖的影响作用。方法应用转化生长因子-β1处理乳鼠原代心肌成纤维细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测SIRT1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达水平;Western blot法检测SIRT1、α-SMA的蛋白表达水平;MTT法检测心肌成纤维细胞的细胞增殖活性;使用LipofectamineTM2000 Reagent向乳鼠原代心肌成纤维细胞中转染siRNA-SIRT1。结果转染siRNA-SIRT1的心肌成纤维细胞,SIRT1蛋白和mRNA表达下降,同时α-SMA蛋白和mRNA表达下降;转染siRNA-SIRT1明显抑制心肌成纤维细胞的增殖活性。结论 siRNA-SIRT1对心肌成纤维细胞增殖活性有明显抑制作用,SIRT1可能成为心脏结构重构防治的新靶点,其调控剂的应用将为心肌纤维化的防治提供新的思路和方案。

关键词： SIRT1 心肌成纤维细胞 α-SMA

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LncRNA-MEG3在心肌纤维化过程中的表达变化研究

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安徽医科大学学报 2021年第9期56卷 1356-1360页

作者：蒋书美施鹏王立超王璨徐盛松石开虎安徽医科大学第二附属医院心胸外科合肥230601 安徽医科大学心血管病研究中心合肥230601

目的研究LncRNA-MEG3在大鼠心肌纤维化及心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖过程中的表达变化。方法用异丙肾上腺素(ISO)腹部皮下注射SD大鼠构造心肌纤维化动物模型为实验组(ISO组),对照组注射等量的生理盐水;提取乳鼠CFs,采用转化生长因子β1... 详细信息

目的研究LncRNA-MEG3在大鼠心肌纤维化及心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖过程中的表达变化。方法用异丙肾上腺素(ISO)腹部皮下注射SD大鼠构造心肌纤维化动物模型为实验组(ISO组),对照组注射等量的生理盐水;提取乳鼠CFs,采用转化生长因子β1(TGF-β1)作用CFs构建细胞水平纤维化模型为实验组(TGF-β1组),对照组为未经TGF-β1作用正常培养的CFs;HE、Masson染色观察心肌组织胶原变化;用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原分子(CollagenⅠ)蛋白的表达;qRT-PCR法检测CollagenⅠ、α-SMA mRNA和MEG3的表达;CCK-8法检测经TGF-β1作用CFs后的吸光度(OD)值。结果与对照组比较,ISO组的心肌细胞体积变大、紊乱,组织胶原面积明显增加;ISO组和TGF-β1组中CollagenⅠ、α-SMA蛋白和mRNA表达都显著增多,LncRNA-MEG3表达显著减少;CCK-8实验结果提示使用TGF-β1刺激CFs 24、48 h后较对照组的细胞OD值明显增加,即细胞增殖活性增强。结论 LncRNA-MEG3在大鼠心肌纤维化组织及CFs细胞活化增殖中的表达显著降低,提示MEG3在大鼠心肌纤维化及CFs活化增殖中可能发挥了负调控作用,为临床心肌纤维化防治和研究提供新的思路。

关键词： LncRNA-MEG3 α-SMA CollagenⅠ 心肌纤维化心肌成纤维细胞

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DNA甲基化转移酶3A调控心肌成纤维细胞活化过程中胶原的表达

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医学研究生学报 2018年第12期31卷 1237-1241页

作者：代晨陶辉石开虎徐盛松安徽医科大学心血管病研究中心/安徽医科大学第二附属医院心胸外科合肥医学硕士230601

目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试... 详细信息

目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试剂分为5组:DNMT3A组(CFs转染重组的DNMT3A基因过表达质粒)、空载体组(CFs转染p EGFP-C3空载体质粒)、DNMT3A siRNA组(CFs转染小干扰DNMT3A siRNA)、DNMT3A siRNA NC组(CFs转染DNMT3A siRNA NC空载体质粒)、空白对照组(CFs不作转染处理)。ELISA检测空白对照组、DNMT3A组、DNMT3A siRNA组细胞上清液胶原变化。qRT-PCR检测5组相关mRNA的表达,Western blot法检测除DNMT3A siRNA NC组外其余4组CFs中ColⅠ、ColⅢ和DNMT3a蛋白的表达及CCK8法检测4组细胞的增殖活性。结果 DNMT3A组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原明显高于空白对照组(P<0.05),DNMT3A siRNA组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量明显低于空白对照组(P<0.05)。DNMT3A组的ColⅠ、ColⅢ及DNMT3A表达量较空白对照组、空载体组明显升高(P<0.05),而DNMT3A siRNA组明显低于空白对照组及空载体组(P<0.05)。DNMT3A组细胞活力(2.087±0.317)明显高于空载体组(1.063±0.223)、空白对照组(1.082±0.207),差异有统计学意义(P<0.05); DNMT3A siRNA组(0.463±0.087)明显低于空载体组、空白对照组(P<0.05)。结论 DNMT3A可以促进CFs的活化增殖,并且能够增加胶原的表达,从而对心肌纤维化产生促进作用。

关键词：心肌成纤维细胞心肌纤维化 DNA甲基化转移酶3A 增殖 ColⅠ ColⅢ

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化学合成microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响

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安徽医科大学学报 2015年第5期50卷 577-581页

作者：张猛陶辉陈泽文张家贵宣海洋占红英石开虎安徽医科大学第二附属医院心胸外科合肥230601 安徽医科大学心血管病研究中心合肥230601

目的探究microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法应用LipofectamineTM2000Reagent向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染microRNA-21 inhibitors 24、48 h后,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测microRNA-21、I型胶原前胶原A1(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;Western blot法检测Col1A1和α-SMA的表达水平;MTT法检测microRNA-21 inhibitors对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。结果转染microRNA-21 inhibitors的心肌成纤维细胞中,microRNA-21表达下调,Col1A1和α-SMA的表达下降;转染microRNA-21 inhibitors的心肌成纤维细胞增殖活性明显减弱。结论 microRNA-21 inhibitors可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,提示microRNA-21是心肌成纤维细胞活化增殖的潜在靶向分子,有利于为干预和预防心肌纤维化的发生发展提供新思路。

关键词： microRNA-21 心肌成纤维细胞 Col1A1 α-平滑肌肌动蛋白

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风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动患者中DNMT3A与Kv1.5蛋白的表达变化及相关性研究

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安徽医科大学学报 2015年第1期50卷 105-108页

作者：随志辉石开虎吴君旭徐盛松陶辉宣海洋曹炜沙纪名占红英安徽医科大学第二附属医院心胸外科合肥230601 安徽医科大学心血管病研究中心合肥230032

目的探讨风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动(AF)患者DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)与超速延迟整流性钾通道蛋白(Kv1.5)表达水平变化及其相关性研究。方法将20例风湿性心脏瓣膜病接受瓣膜置换手术患者于体外循环前切取的右心耳组织作为研究对象,根... 详细信息

目的探讨风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动(AF)患者DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)与超速延迟整流性钾通道蛋白(Kv1.5)表达水平变化及其相关性研究。方法将20例风湿性心脏瓣膜病接受瓣膜置换手术患者于体外循环前切取的右心耳组织作为研究对象,根据AF的定义将标本分为AF组(n=10)和窦性心律(SR)组(n=10),分别应用免疫组化、Western blot法检测心房肌组织中DNMT3A和Kv1.5蛋白表达水平变化。结果免疫组化检测显示AF组与SR组相比,DNMT3A蛋白表达增加(P<0.05);而Kv1.5蛋白表达减少(P<0.05)。同时,Western blot检测显示AF组与SR组相比,DNMT3A蛋白表达增加(P<0.05),而Kv1.5蛋白表达减少(P<0.05)。相关性分析显示DNMT3A与Kv1.5之间存在一定负相关性(r=-0.64,P<0.01)。结论 DNMT3A与Kv1.5之间存在负相关性,提示DNMT3A可能参与调控Kv1.5通道蛋白的表达。

关键词：风湿性心脏病心房颤动 DNA甲基转移酶3A 超速延迟整流性钾通道蛋白

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pcDNA3.1/hVEGF165的构建及其在COS-7细胞中的表达

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安徽医科大学学报 2005年第1期40卷 16-19页

作者：周正春陈兵张胜权罗欣徐从贞汪思应葛建军安徽医科大学第一附属医院心血管外科安徽医科大学生化教研室合肥230022 安徽医科大学病理生理学教研室合肥230022

　目的　克隆人血管内皮生长因子基因VEGF165片段,构建pcDNA3·1 /hVEGF165,观察其在COS 7细胞中的表达,为基因治疗缺血性心脏病奠定基础。方法　从胎儿心肌组织中提取总RNA,应用RT PCR方法获得hVEGF165基因,将其重组入T载体,PCR法... 详细信息

　目的　克隆人血管内皮生长因子基因VEGF165片段,构建pcDNA3·1 /hVEGF165,观察其在COS 7细胞中的表达,为基因治疗缺血性心脏病奠定基础。方法　从胎儿心肌组织中提取总RNA,应用RT PCR方法获得hVEGF165基因,将其重组入T载体,PCR法鉴定并测序,双酶切后克隆入真核表达载体pcDNA3 1 /myc his B中,构建pcDNA3 1 /hVEGF165重组体。用脂质体介导将其转染COS 7细胞,WesternBlotting方法检测rhVEGF165的表达蛋白。结果　RT PCR方法从胎儿心肌组织获得正确的hVEGF165基因序列,成功构建pcDNA3·1 /hVEGF165且实现转染COS 7细胞的瞬时表达。结论　该实验构建的pcDNA3· 1 /hVEGF165转染真核细胞COS 7能够表达rhVEGF蛋白。

关键词：血管内皮生长因子类克隆,分子逆转录聚合酶链反应基因表达

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Stanford B型主动脉夹层腔内修复术后早期死亡患者术前多层螺旋CT特征分析

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介入放射学杂志 2020年第4期29卷 357-361页

作者：王丽娟孙桂芳刘训强王家平刘慧刘斌侯凯昆明医科大学附属延安医院放射科、云南省心血管疾病重点实验室 650051 昆明医科大学附属延安医院血管外科 650051 昆明医科大学第二附属医院放射科

目的探讨术前多层螺旋CT(MSCT)对Stanford B型主动脉夹层血管腔内修复术后早期死亡的预测价值。方法回顾性分析2014年1月至2018年12月采用腔内修复术治疗的158例急性期和亚急性期Stanford B型主动脉夹层患者临床随访资料和术前MSCT图像... 详细信息

目的探讨术前多层螺旋CT(MSCT)对Stanford B型主动脉夹层血管腔内修复术后早期死亡的预测价值。方法回顾性分析2014年1月至2018年12月采用腔内修复术治疗的158例急性期和亚急性期Stanford B型主动脉夹层患者临床随访资料和术前MSCT图像。测量和记录破口位置、破口大小、降主动脉最大直径、气管分叉平面主动脉直径、气管分叉平面假腔面积占该平面主动脉管腔总面积百分比、重要分支血管受累情况、假腔状态、腹主动脉是否受累等CT参数。分析术前CT各参数与患者术后30 d死亡的关系。结果腔内修复术紧急干预88例,非紧急干预70例,术后30 d死亡率为9.5%(15/158)。术后30 d死亡单因素分析显示,紧急干预患者术后30 d死亡率显著高于非紧急干预患者[13.6%(12/88)对4.3%(3/70),χ2=3.967,P=0.046];术后30 d死亡组患者气管分叉平面假腔面积占该平面主动脉管腔总面积≥50%患者[93.3%(14/15)对0.7%(1/143),χ2=135.581,P<0.001]和重要分支血管受累患者[66.7%(10/15)对32.9%(47/143),χ2=6.725,P=0.010]显著高于术后30 d生存组患者;两组患者破口位置、破口大小、降主动脉最大直径、气管分叉平面主动脉直径、假腔状态、腹主动脉是否受累比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归多因素分析显示,紧急干预(OR=1.31,95%CI=1.08~3.53,P=0.026)和气管分叉平面假腔面积占该平面主动脉管腔总面积≥50%(OR=9.53,95%CI=3.69~12.47,P<0.001)是Stanford B型主动脉夹层腔内修复术后30 d死亡的独立危险因素。结论术前MSCT对预测Stanford B型主动脉夹层腔内修复术后患者早期死亡具有重要价值,紧急干预和气管分叉平面假腔面积占主动脉管腔总面积≥50%是术后30 d死亡的独立危险因素。

关键词：主动脉夹层 Stanford B型腔内修复术死亡多层螺旋CT

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干细胞修补缺血性心肌

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现代诊断与治疗 2006年第1期17卷 32-37页

作者：吴胜东安徽医科大学第一附属医院心血管外科安徽合肥230022

在适当的细胞培养条件下,干细胞有分化为心肌细胞和内皮细胞的能力,如果在体内能繁殖出同样的结果,那么对于急、慢性心肌损伤病人,利用干细胞阻断心力衰竭进行性恶化,甚至恢复心功能成为可能,现综述干细胞治疗理论基础的基本观点,并回... 详细信息

在适当的细胞培养条件下,干细胞有分化为心肌细胞和内皮细胞的能力,如果在体内能繁殖出同样的结果,那么对于急、慢性心肌损伤病人,利用干细胞阻断心力衰竭进行性恶化,甚至恢复心功能成为可能,现综述干细胞治疗理论基础的基本观点,并回顾支持其潜在价值的当前实验室证据,同时描述干细胞治疗心肌损伤的临床选择和可能的不足,这些还需要随机化临床试验进一步评价。

关键词：心肌梗死心力衰竭重构干细胞

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开窗/分支支架技术在腹主动脉扩张性疾病中的应用体会

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中华血管外科杂志 2024年第3期9卷 166-171页

作者：郑启铜叶琨陶然王文斌孔令尚安徽医科大学第二附属医院血管外科合肥230071

目的评价开窗/分支支架技术在腹主动脉扩张性疾病患者内脏动脉分支重建中的应用价值。方法本研究为回顾性队列研究。回顾性分析2022年5月至2024年1月安徽医科大学第二附属医院血管外科10例医师自制支架应用开窗/分支支架技术重建内脏动... 详细信息

目的评价开窗/分支支架技术在腹主动脉扩张性疾病患者内脏动脉分支重建中的应用价值。方法本研究为回顾性队列研究。回顾性分析2022年5月至2024年1月安徽医科大学第二附属医院血管外科10例医师自制支架应用开窗/分支支架技术重建内脏动脉分支的腹主动脉扩张性疾病患者的临床资料。10例患者中, 夹层术后腹主动脉瘤样扩张6例, 胸腹主动脉瘤Ⅳ型4例。根据术前影像学资料, 行单主干腔内治疗和双主干腔内治疗。收集患者的相关临床资料(基线资料、术前解剖参数、围术期指标、随访结局指标), 分析整体治疗效果。结果 10例患者均成功完成内脏动脉分支的重建, 技术成功率为100%。根据开窗数量分为三开窗组(5例)和四开窗组(5例)。采用单主干技术8例, 双主干技术2例。共重建内脏动脉37条, 包括腹腔干7条, 肠系膜上动脉10条, 左右肾动脉各10条。共植入支架62枚, 每位患者植入支架(6.20±1.14)枚。术中出血量为(128.00±64.60)ml, 术后重症监护时间为(16.58±7.68)h, 三开窗组出血量和监护时间均低于四开窗组, 但差异均无统计学意义(均P>0.05)。围术期出现肝功能不全2例, 移植物综合征3例, 经保守治疗后均好转。10例患者均获得随访, 随访时间为(13.10±3.46)个月。1例因内漏引起瘤体进展给予再干预治疗。结论开窗/分支支架技术重建内脏动脉为腹主动脉扩张性疾病患者实施全腔内治疗提供选择。

关键词：腹主动脉疾病体外开窗分支支架技术腔内修复术

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3D打印技术在复杂主动脉疾病腔内治疗中的应用

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新医学 2021年第7期52卷 524-529页

作者：叶琨万圣云丁洋安徽医科大学第二附属医院血管外科合肥230601

目的探讨三维(3D)打印技术在复杂主动脉疾病腔内治疗中的应用。方法回顾性分析24例复杂主动脉疾病患者的资料,术前根据24例患者的CT血管造影(CTA)进行主动脉3D重建,将病变区域进行3D打印,选择中空透明材料制作3D打印模型并消毒,术中根... 详细信息

目的探讨三维(3D)打印技术在复杂主动脉疾病腔内治疗中的应用。方法回顾性分析24例复杂主动脉疾病患者的资料,术前根据24例患者的CT血管造影(CTA)进行主动脉3D重建,将病变区域进行3D打印,选择中空透明材料制作3D打印模型并消毒,术中根据3D打印模型将支架“预开窗”并缝制铂金弹簧圈,重装支架后在体内完成主体支架的释放和分支支架的选择并释放。术后观察疗效、并发症和随访情况。结果24例包括12例复杂腹主动脉瘤、11例胸主动脉夹层、1例胸腹主动脉瘤,均在术前完成病变段主动脉3D模型打印,根据模型数据辅助制定手术方案,手术均顺利。24例术前3D打印模型测量和术中造影各项数据比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。主动脉夹层患者术后真腔最大直径较术前增大、术后假腔最大直径较术前减小;主动脉瘤患者术后瘤体最大直径较术前减小(P均<0.05)。所有患者术后均未出现出血、脏器功能损害等严重并发症,术后3个月复查CTA显示支架位置良好,无内漏,分支动脉血供良好。结论3D打印技术能使复杂主动脉疾病的腔内治疗更加精准。

关键词：复杂主动脉疾病腔内治疗 3D打印技术

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