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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：荣超陈飞虎江晟胡伟张晨晨吴繁荣安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是伴有关节软骨破坏的自身免疫性疾病,由于炎症导致关节局部组织酸化,关节腔内滑液pH显著下降。组织蛋白酶K(cathepsin K)是一种酸性的蛋白内切酶,在关节软骨的破坏过程中发挥重要的作用。本... 详细信息

目的类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是伴有关节软骨破坏的自身免疫性疾病,由于炎症导致关节局部组织酸化,关节腔内滑液pH显著下降。组织蛋白酶K(cathepsin K)是一种酸性的蛋白内切酶,在关节软骨的破坏过程中发挥重要的作用。本文探讨不同胞外pH环境对体外培养的大鼠软骨细胞增殖、凋亡的影响,以及大鼠关节软骨细胞中组织蛋白酶K的表达与胞外酸化的关系。方法Ⅱ型胶原酶消化法从大鼠关节软骨中分离软骨细胞;细胞传代培养后分为4组分别在pH 5.5,pH 6.0,pH 6.5,pH 7.4不同的胞外酸化环境下培养3h,MTT法检测软骨细胞活力,Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态,Annexin-V/PI双染法检测软骨细胞的凋亡率,实时荧光定量PCR和Western blot检测组织蛋白酶K基因与蛋白的表达。结果与pH 7.4组比较其他各组软骨细胞增殖均受到抑制,其中pH 5.5,pH 6.0与pH 7.4相比差异有统计学显著意义(P<0.01),pH 5.5和pH 6.0组可见较多的凋亡细胞,且流式细胞仪检测的凋亡率明显高于pH 7.4组(P<0.01);组织蛋白酶K的表达与酸性程度成正相关。结论胞外酸化环境下能明显抑制体外培养软骨细胞增殖、促进软骨细胞凋亡,并且酸性环境能增加组织蛋白酶K的表达,这为类风湿关节炎中关节软骨的破坏发生机制提供了实验依据。

关键词：关节软骨类风湿关节炎细胞增殖与凋亡组织蛋白酶体外培养

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siRNA介导的佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型的构建

siRNA介导的佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型...

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：江晟陈飞虎荣超胡伟张晨晨葛金芳安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的评价siRNA技术诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型的可行性。方法通过化学合成法合成特异性荧光短链ASIC1 a siRNA-FAM,使用Lipofectamine 2000转染试剂盒将ASIC1 a siRNA转染入关节软骨细胞,采用荧光显微镜... 详细信息

目的评价siRNA技术诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型的可行性。方法通过化学合成法合成特异性荧光短链ASIC1 a siRNA-FAM,使用Lipofectamine 2000转染试剂盒将ASIC1 a siRNA转染入关节软骨细胞,采用荧光显微镜,流式细胞术,实时荧光定量PCR(q-RT-PCR)及Western Blot法检测ASIC1a mRNA和蛋白表达抑制的效果。结果 ASIC1a siRNA能顺利转入软骨细胞,q-RT-PCR检测软骨细胞中ASIC1a mRNA的表达量,实验组与对照组差异具有显著性(P<0.01);Western Blot结果显示转染特异性siRNA后ASIC1a蛋白表达受到抑制,最大抑制率为96.4%,远高于对照组(P<0.01)。结论 siRNA介导的佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型是研究酸敏感离子通道对软骨细胞代谢影响的可靠模型。

关键词：佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞 ASIC1a siRNA

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鬼针聚炔苷对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

鬼针聚炔苷对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：刘建军许慧王晓宇林梅英汤文建张群林陈飞虎安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室"中药药理实验室"合肥230032

目的研究鬼针聚炔苷(BPC)对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用.方法腹腔注射0.2％ CCl4橄榄油溶液建立小鼠急性肝损伤模型,以水飞蓟素为阳性对照,鬼针聚炔苷12.5,25和50 mg·kg-1灌胃给药6d,测定各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶...

目的研究鬼针聚炔苷(BPC)对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用.方法腹腔注射0.2％ CCl4橄榄油溶液建立小鼠急性肝损伤模型,以水飞蓟素为阳性对照,鬼针聚炔苷12.5,25和50 mg·kg-1灌胃给药6d,测定各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量;检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量;同时计算肝指数、并对肝组织进行病理组织学检查,免疫组化学法观察NF-κBP65在肝组织中的表达.结果与模型组比较,鬼针聚炔苷能够显著降低血清ALT,AST的含量;提高肝组织中SOD,GSH-Px的水平,降低MDA,NO的含量;能明显改善肝细胞变性和坏死;可以显著减少NF-κBP65的表达.结论 BPC对CCl4所致小鼠急性肝损伤有保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化、抑制NO产生,及抑制NF-κB表达等有关.

关键词：

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MAPK信号转导通路介导黄芪皂苷Ⅱ逆转人肝癌细胞Bel-7402/FU耐药的调控机制

MAPK信号转导通路介导黄芪皂苷Ⅱ逆转人肝癌细胞Bel-7402/FU耐药...

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：黄灿许杜娟夏泉苏勇安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室” 安徽医科大学第一附属医院药剂科

目的探讨黄芪皂苷Ⅱ(ASⅡ)逆转人肝癌细胞Bel-7402/FU耐药与MAPK信号转导通路的关系,为肝癌临床化疗方案的制定及耐药逆转研究提供理论基础。方法采用Western-blot检测ASⅡ作用于耐药细胞Bel-7402/FU后p糖蛋白(PgP)的表达和ERK,JNK,P38... 详细信息

目的探讨黄芪皂苷Ⅱ(ASⅡ)逆转人肝癌细胞Bel-7402/FU耐药与MAPK信号转导通路的关系,为肝癌临床化疗方案的制定及耐药逆转研究提供理论基础。方法采用Western-blot检测ASⅡ作用于耐药细胞Bel-7402/FU后p糖蛋白(PgP)的表达和ERK,JNK,P38的磷酸化情况。ERK/MAPK的抑制剂PD98059,JNK/MAPK的抑制剂SP600125,P38/MAPK的抑制剂SB202190分别作用于Bel-7402/FU后,RT-PCR和免疫组化分别检测mdrl基因和p-gp蛋白的表达情况,流式细胞仪检测RH123在细胞内蓄积和贮留情况。阻断剂处理后再加入5-氟尿嘧啶(5-FU),MTT法进一步检测Bel-7402/FU增值抑制情况。结果经ASⅡ作用后,P-gp蛋白的表达明显减少,ERK,JNK,P38的磷酸化程度明显降低。用MAPK通路阻断剂阻断通路后,mdrl的mRNA表达明显下调,P-gp蛋白的表达也明显减少,同时RH123在细胞内的蓄积和贮留明显增加。结论 ASⅡ能够减少人肝癌耐药细胞Bel-7402/FU中p-gP蛋白的表达,同时降低ERK,JNK,P38的磷酸化程度;阻断MAPK通路的活化能抑制mdrl基因和P-gp蛋白的表达以及P-gp的功能,且使Bel-7402/FU细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性增加。

关键词：人肝癌细胞信号转导通路 Bel-7402/FU 黄芪皂苷Ⅱ

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肝纤维化病程中Kupffer细胞分泌的细胞因子对肝星状细胞活化增殖、凋亡的调控

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中国药理学通报 2010年第1期26卷 9-13页

作者：黄艳黄成李俊安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室国家中医药管理局中医药科研三级实验室"中药药理实验室"安徽合肥230032

肝纤维化是对慢性肝损伤的愈合反应,为一个可逆的过程。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝脏分泌细胞外基质(extra cellular matrixc,ECM)的主要细胞,在肝纤维化的发展机制中占有重要的地位。如何控制HSC的活性并逆转肝纤维化... 详细信息

肝纤维化是对慢性肝损伤的愈合反应,为一个可逆的过程。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝脏分泌细胞外基质(extra cellular matrixc,ECM)的主要细胞,在肝纤维化的发展机制中占有重要的地位。如何控制HSC的活性并逆转肝纤维化的进程是抗肝纤维化研究的重点之一。在肝纤维化病程中,一系列细胞因子通过旁分泌和自分泌方式作用于邻近的HSC,影响其增殖、趋化、代谢及凋亡。鉴于Kupffers细胞为细胞因子的主要来源,其在肝纤维化病程中对HSC细胞的活化增殖、凋亡发挥着重要的调控作用。HSC、Kupffers细胞及细胞因子与肝纤维化的发生发展关系极为密切,阐明其关系,有助于以HSC为靶点的肝纤维化方面的研究,现就其关系综述如下。

关键词：肝星状细胞枯否细胞细胞因子肝纤维化增殖凋亡

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ASICla过表达对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞代谢的影响