检索结果-内蒙古大学图书馆

基于网络药理学、分子对接及实验验证探讨霍山石斛治疗非酒精性脂肪肝的作用机制

中草药 2023年第16期54卷 5244-5256页

作者：邓光辉叶梦娟蔡肖马梦真吕家慧吴静张晓倩邢丽花彭代银王妍妍俞年军安徽中医药大学安徽合肥230012 安徽省中医药科学院中药资源保护与开发研究所安徽合肥230012 省部共建安徽道地性中药材品质提升协同创新中心安徽合肥230012 中药研究与开发安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的基于网络药理学、分子对接及体内实验验证探讨霍山石斛对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的疗效及作用机制。方法利用文献检索霍山石斛活性成分,采用SwissTargetPrediction数据库预测其潜在靶点,采用DisGe... 详细信息

目的基于网络药理学、分子对接及体内实验验证探讨霍山石斛对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的疗效及作用机制。方法利用文献检索霍山石斛活性成分,采用SwissTargetPrediction数据库预测其潜在靶点,采用DisGeNET和GeneCards数据库筛选NAFLD靶点,并将药物靶点和疾病靶点取交集,构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,借助DAVID数据库进行基因本体功能和京都基因与基因组百科全书通路富集分析,构建“活性成分-靶点-疾病-通路”网络,并采用AutoDock等软件对关键活性成分和核心靶点进行分子对接验证。采用高脂高糖饮食诱导NAFLD小鼠模型,设置对照组、模型组、吡格列酮(10 mg/kg)组和霍山石斛低、中、高剂量(200、400、600 mg/kg)组,连续给药8周。检测血清三酰甘油(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)及天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)的含量;ELISA检测肝脏中TC、TG、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;油红O染色和苏木素-伊红(HE)染色检测肝组织病理变化;Western blotting检测肝组织中胰岛素受体(insulin receptor,InsR)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)蛋白表达。结果霍山石斛中筛选出石斛酚、铁皮石斛素A、4,4′-dihydroxy-3,5-dimethoxydihydrostilbene、柚皮素等38个活性成分,与NAFLD共同靶点有155个,作用于胰岛素、AKT1、白蛋白、TNF、IL-6、血管内皮生长因子A、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、IL-1β等19个核心靶点,主要涉及癌症途径、PI3K/Akt通路、晚期糖基化终产物及其受体信号通路、缺氧诱导因子信号通路、TNF信号通路等,分子对接显示前5位核心成分与前5位核心靶点具有较好的接合能力。动物实验结果证实成功构建小鼠NAFLD模型,与模型组比较,霍山石斛组小鼠体质量、肝脏指数以及血清TG、TC、ALT、AST、LDL-C和肝脏TC、TG水平显著降低(P<0.05、0.01),血清HDL-C水平显著升高(P<0.01),改善肝脏脂肪蓄积和变性,肝脏InsR、PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达水平显著增加(P<0.05、0.01),p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论霍山石斛对NAFLD具有保护作用,其机制可能与激活PI3K/Akt通路、改善胰岛素抵抗和减少炎症反应有关。

关键词：霍山石斛非酒精性脂肪肝网络药理学芦丁石斛酚柚皮素 InsR/PI3K/Akt/GSK-3β通路胰岛素抵抗炎症

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杠柳苷元在预防对乙酰氨基酚诱导的药物性肝损伤中的保护作用及机制

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中国药理学通报 2025年第4期41卷 709-717页

作者：王何月胡旺王小妮徐涛周焕蚌埠医科大学研究生院蚌埠医科大学第一附属医院国家临床药物试验中心安徽医科大学药学院

目的探究杠柳苷元(periplogenin, Ppg)预防性干预对由对乙酰氨基酚(acetaminophen, APAP)诱导的药物性肝损伤的保护作用及其分子机制。方法通过体内和体外实验，构建APAP诱导的药物性肝损伤模型，观察肝脾指数的变化，测定血清中AST、... 详细信息

目的探究杠柳苷元(periplogenin, Ppg)预防性干预对由对乙酰氨基酚(acetaminophen, APAP)诱导的药物性肝损伤的保护作用及其分子机制。方法通过体内和体外实验，构建APAP诱导的药物性肝损伤模型，观察肝脾指数的变化，测定血清中AST、ALT的水平，采用HE染色观察各组小鼠肝组织的病理变化。利用ELISA、qPCR和Western blot技术分析Ppg对APAP诱导的AML-12细胞中炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β等指标表达的影响，同时检测谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性，通过qPCR、Western blot和免疫荧光实验对NF-κB信号通路的相关指标进行检测。结果体内实验结果显示，Ppg改善了药物性肝损伤肝损伤小鼠的肝脾指数，血清中AST、ALT水平明显下降，减轻了肝组织的病理损伤。体外实验表明，Ppg明显抑制了APAP诱导的AML-12细胞中IL-6、TNF-α和IL-1β的表达，降低了GSH和MDA的水平，提高了SOD的活性。同时，通过PDTC(NF-κB信号通路抑制剂)抑制NF-κB信号通路，减少了炎症因子的表达，明显减少了p65在细胞核中的积累，效果与Ppg高剂量组相仿。结论 Ppg能够减轻由APAP引起的肝损伤，其分子机制可能通过抑制肝细胞中的NF-κB信号通路，从而抑制炎症反应，保护APAP诱导的小鼠肝脏损伤。

关键词：杠柳苷元对乙酰氨基酚药物性肝损伤炎症氧化应激 NF-κB信号通路

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桔梗中PgMCT和PgCMK的克隆及原核表达分析

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中成药 2022年第5期44卷 1600-1605页

作者：刘梦丽余函纹李景徐睿吴君贤彭华胜查良平桂双英安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地北京100700 安徽省中医药科学院药物制剂研究所安徽合肥230012 现代药物制剂安徽省教育厅工程技术研究中心安徽合肥230012 药物制剂技术与应用安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的从桔梗中克隆2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸胱氨酰转移酶(MCT)和4-(5’-焦磷酸胞苷)-2-C-甲基D-赤藓糖醇激酶(CMK)基因的全长cDNA序列,并进行生物信息学及原核表达分析。方法根据桔梗转录组数据,通过RT-PCR方法从桔梗根中克隆得到PgMC... 详细信息

目的从桔梗中克隆2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸胱氨酰转移酶(MCT)和4-(5’-焦磷酸胞苷)-2-C-甲基D-赤藓糖醇激酶(CMK)基因的全长cDNA序列,并进行生物信息学及原核表达分析。方法根据桔梗转录组数据,通过RT-PCR方法从桔梗根中克隆得到PgMCT和PgCMK序列,利用生物信息学软件预测PgMCT和PgCMK蛋白的特征;利用ClustalW和MEGA 6.06软件构建PgMCT和PgCMK的系统进化树;构建原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达。结果PgMCT和PgCMK基因ORF全长为954、1227 bp,分别编码317、408个氨基酸,均为不稳定蛋白。PgMCT和PgCMK蛋白的二级结构中,均为无规卷曲所占比例最高。结构功能域分析PgMCT和PgCMK分别属于糖基转移酶GT-A超家族和IspE超家族,推测这2个蛋白均为非跨膜蛋白。预测PgMCT和PgCMK蛋白均无跨膜结构,为非跨膜蛋白。SDS-PAGE结果显示,PgMCT和PgCMK诱导表达蛋白分别为55、50 kDa,与预期蛋白分子量一致。结论本实验首次从桔梗中克隆出MCT和CMK(命名为PgMCT和PgCMK),为进一步探究桔梗三萜皂苷成分的生物合成奠定了物质基础。

关键词：桔梗 MCT CMK 基因克隆原核表达

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基于细胞的新冠病毒蛋白酶活性报告系统及药物筛选应用

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病毒学报 2025年第1期41卷 211-221页

作者：董豹陈月红冯烨姜涛安徽医科大学基础医学院合肥230032 军事科学院军事医学研究院病原微生物生物安全全国重点实验室北京100071

新型冠状病毒感染(Coronavirus disease 2019,COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的全球暴发性传染病,严重危害人类的生命安全。为了遏制新型冠状病毒感染,研究学者致力于研发抗病毒药物。为快速直接评价抗新冠病毒药物的有效性... 详细信息

新型冠状病毒感染(Coronavirus disease 2019,COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的全球暴发性传染病,严重危害人类的生命安全。为了遏制新型冠状病毒感染,研究学者致力于研发抗病毒药物。为快速直接评价抗新冠病毒药物的有效性,研究构建了多种新冠病毒的新型报告系统。本文综述了基于目前新冠病毒两种蛋白酶(Mpro和PLpro)切割功能的报告系统相关研究进展,及其在抗病毒药物研发中的应用。

关键词：新冠病毒蛋白酶报告系统抑制剂抗病毒药物

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小叶买麻藤茎化学成分及其黄嘌呤氧化酶抑制活性研究

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中成药 2024年第9期46卷 2994-2999页

作者：陈倩张正宽骆田田曾爱芬徐国波朱勤凤廖尚高贵州医科大学药学院/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550025 教育部民族药与中药开发应用工程研究中心/贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550025

目的研究小叶买麻藤Gnetum parvifolium(Warb.)*** ex Chun茎的化学成分及其黄嘌呤氧化酶抑制活性。方法小叶买麻藤茎95%乙醇提取物采用硅胶、MCI、制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用紫外分光光... 详细信息

目的研究小叶买麻藤Gnetum parvifolium(Warb.)*** ex Chun茎的化学成分及其黄嘌呤氧化酶抑制活性。方法小叶买麻藤茎95%乙醇提取物采用硅胶、MCI、制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用紫外分光光度法测定黄嘌呤氧化酶的抑制活性。结果从中分离得到17个化合物,分别鉴定为异单叶大黄素(1)、白藜芦醇(2)、对羟基苯甲醛(3)、环桉树醇(4)、(E)-1-(3′,5′-dimethoxyphenyl)-2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethene(5)、豆甾-4-烯-3-酮(6)、medioresinol(7)、白杨素(8)、金色酰胺醇酯(9)、(-)-松脂醇(10)、对羟基苯甲酸酯(11)、2-甲氧基对苯二酚(12)、gnetumontain C(13)、丁香脂素(14)、高圣草素(15)、香草醛(16)、β-谷甾醇(17)。化合物1~3、15~16的IC_(50)值分别为(11.4±0.54)、(14.1±1.06)、(320.4±0.75)、(360.6±0.78)、(386.3±0.71)μmol/L。结论化合物3~4为首次从该植物中分离得到,化合物5~13为首次从买麻藤属植物中分离得到。化合物1~3、15~16具有黄嘌呤氧化酶抑制活性。

关键词：小叶买麻藤茎化学成分分离鉴定黄嘌呤氧化酶

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低能离子注入诱变法选育新硫肽类抗生素166A高产菌株

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中国抗生素杂志 2024年第9期49卷 995-1003页

作者：戴剑漉李艳青李欣蒋忠科赫卫清孙承航中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所“天然药物活性物质与功能”国家重点实验室北京100050 中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所国家卫生健康委员会抗生素生物工程重点实验室北京100050 中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所微生物化学研究室和抗感染药物研究北京市重点实验室北京100050 广东医科大学南方海洋科学与工程广东省实验室湛江524023

目的为进一步提高产量,以小单孢菌Micromonospora ***166-MU1为出发菌株,采用低能离子注入技术,研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响,通过突变株抑菌活性变势参数分析,初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效果... 详细信息

目的为进一步提高产量,以小单孢菌Micromonospora ***166-MU1为出发菌株,采用低能离子注入技术,研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响,通过突变株抑菌活性变势参数分析,初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效果,并结合卡那霉素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选,获得高产菌株。方法利用低能N+离子注入技术对出发菌株TMD166-MU1的孢子进行辐照诱变,以卡那霉素耐受性为选择压力,不同诱变条件处理的菌悬液涂布在含有卡那霉素培养基平板上培养后获得单菌落,并以牛津杯固体发酵高通量筛选方法进行高产菌株初筛,之后对高产菌株进行摇瓶复筛,利用高效液相法检测突变株摇瓶发酵的化学效价。结果通过研究30和60 keV能量下不同注入剂量与小单孢菌正突变率的生物学效应关系,确定了在注入能量为30 keV、注入剂量4×10^(13)ions/cm^(2)、卡那霉素抗性筛选浓度为6 mg/L条件下,可获得最高达36.33%的正突变率。复筛效价是出发菌株1.5倍以上的有4株,其中突变株IK-3的166A产量是菌株TMD166-MU1的1.8倍。结论采用低能N+离子注入诱变方式,再结合抗生素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选的集成方法能简单、高效地获得166A高产突变菌株。

关键词：新硫肽类抗生素166A 低能离子注入诱变抗生素抗性筛选高通量筛选高产菌株

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基于UPLC-MS/MS建立同时测定自发性高血压大鼠主动脉血管内皮细胞中杜仲7个活性成分含量的方法

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中国中药杂志 2023年第13期48卷 3623-3632页

作者：李梦婷胡贺佳金阳陈艺陈思颖李月婷黄勇郑林黄静巩仔鹏贵州医科大学药学院、贵州省药物制剂重点实验室、省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室、民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

该文旨在采用UPLC-MS/MS技术建立同时测定自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)主动脉血管内皮细胞中杜仲7个活性成分京尼平苷酸(genipinic acid,GA)、原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)、新绿原酸(neochlorogenic acid,NCA)、绿原酸(chlorogenic acid,CA)、隐绿原酸(cryptochlorogenic acid,CCA)、松脂醇二葡萄糖苷[(+)-pinoresinol di-O-β-D-glucopyranosid,PDG]、松脂醇单葡萄糖苷[(+)-pinoresinol 4′-O-β-D-glucopyranoside,PG]含量的方法。首先选取合格的SHR模型,采用结扎贴壁法分离、培养原代大鼠主动脉血管内皮细胞(VEC),并进行传代培养,鉴定成功后,以VEC为研究对象,采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(UPLC-MS/MS)建立同时测定VEC中GA、PCA、NCA、CA、CCA、PDG、PG等7个成分含量的方法,包括专属性、线性、基质效应、回收率、准确度、精密度和稳定性等。该文所建方法的最低定量限为0.97~4.95μg·L^(-1),准确度为87.26%~109.6%,提取回收率为89.23%~105.3%,基质效应为85.86%~106.2%,稳定性为86.00%~112.5%,能够满足测量的要求。表明该文建立了快速、准确地同时测定自发性高血压大鼠主动脉血管内皮细胞中杜仲7个活性成分含量的UPLC-MS/MS测定方法,为开展杜仲提取物7个活性成分的细胞药代动力学研究奠定基础。

关键词：杜仲提取物血管内皮细胞京尼平苷酸松脂醇二葡萄糖苷细胞药代动力学

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基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和网络药理学探究茯苓抗乳腺癌作用机制

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天然产物研究与开发 2022年第10期34卷 1764-1773页

作者：孙明杰王妍妍姚亮王雷吕婷婷郝丽君张越陈卫东安徽中医药大学药学院省部共建安徽道地中药材品质提升协同创新中心中药资源保护与开发研究所中药复方安徽省重点实验室中药饮片制造新技术安徽省重点实验室合肥230012 直接口服中药饮片亳州市重点实验室亳州236000

本研究结合UPLC-Q-TOF-MS/MS技术和网络药理学探究茯苓抗乳腺癌的作用机制,并通过细胞实验初步验证。基于UPLC-Q-TOF-MS/MS数据获取茯苓活性成分37个,通过数据库获取成分靶点301个。联合GEO数据库筛选出乳腺癌差异基因725个,进而获得茯... 详细信息

本研究结合UPLC-Q-TOF-MS/MS技术和网络药理学探究茯苓抗乳腺癌的作用机制,并通过细胞实验初步验证。基于UPLC-Q-TOF-MS/MS数据获取茯苓活性成分37个,通过数据库获取成分靶点301个。联合GEO数据库筛选出乳腺癌差异基因725个,进而获得茯苓治疗乳腺癌的潜在作用靶点30个。PPI分析发现茯苓抗乳腺癌主要作用于PPARG、PPARA等靶点。KEGG富集分析发现其发挥作用主要与PPAR信号通路相关。分子对接显示,核心成分与核心靶点对接稳定,且核心成分相应碳链上的羧基、羟基及酯基是靶点结合的主要功能基团。细胞验证实验结果表明,茯苓提取物能明显抑制乳腺癌细胞的增殖与迁移,同时降低细胞中乳酸含量;细胞免疫荧光结果表明PPARG蛋白主要分布在细胞核上,且经茯苓提取物刺激后荧光强度明显增强。综上,初步研究茯苓对乳腺癌的多靶点、多通路治疗作用,其机制可能与调节PPARG等靶点,抑制肿瘤细胞增殖及迁移,影响肿瘤细胞代谢等有关。

关键词：茯苓乳腺癌网络药理学 UPLC-Q-TOF-MS/MS 作用机制

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艳山姜挥发油肺部定量给药用于缓解肺气肿的作用

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中国实验方剂学杂志 2022年第3期28卷 91-97页

作者：蔡梓民彭剑青陈艺潘迪张彦燕陶玲沈祥春龙庆德贵州医科大学贵州省特色天然药物资源高效利用工程中心贵州省高等学校天然药物药理与成药性评价特色重点实验室贵州医科大学-贵阳市联合重点实验室天然药物资源优效利用重点实验室药学院贵阳550025

目的:初步研究艳山姜挥发油(EOFAZ)经肺部定量给药后对猪胰弹性蛋白(PPE)诱导小鼠产生肺气肿的防治作用,并探讨其相关机制。方法:C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,EOFAZ低、高剂量组(2,20 mg·kg^(-1))及地塞米松组(1 mg·kg... 详细信息

目的:初步研究艳山姜挥发油(EOFAZ)经肺部定量给药后对猪胰弹性蛋白(PPE)诱导小鼠产生肺气肿的防治作用,并探讨其相关机制。方法:C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,EOFAZ低、高剂量组(2,20 mg·kg^(-1))及地塞米松组(1 mg·kg^(-1))。采用肺部给药定量雾化器每隔7 d给予PPE诱导小鼠产生肺气肿,共给药4次。在此期间,隔天使用肺部给药定量雾化器定量给予EOFAZ,共给药14次。小鼠肺部经苏木素-伊红(HE)染色用于观察各组形态学变化并测量和计算平均内衬间距(MLI),采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL^(-1)β),白细胞介素-6(IL-6)的含量,通过生化试剂盒测定肺组织中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)的含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核因子E2相关因子2(Nrf2),醌氧化还原酶1(NQO1),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2的表达。结果:肺部形态学观察及MLI检测结果显示,与正常组比较,模型组小鼠肺部出现明显的炎症浸润、肺泡腔扩大和融合的现象,MLI升高(P<0.05);与模型组比较,EOFAZ肺部定量给药后能有效地缓解PPE引起的肺泡腔扩张、肺部炎症细胞浸润及肺组织细胞凋亡等病理变化,MLI也出现下降(P<0.05)。ELISA结果显示,模型组小鼠的炎症水平显著升高(P<0.01),肺部定量给予EOFAZ后血浆中TNF-α,IL^(-1)β和IL-6的含量均下降(P<0.01)。氧化应激结果显示,模型组小鼠的氧化应激水平显著升高(P<0.01),肺部定量给予EOFAZ后提高了肺组织中SOD,CAT的活力(P<0.01)和降低MDA的含量(P<0.01)。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组凋亡蛋白明显升高(P<0.01),抗氧化应激蛋白Nrf2,NQO1表达明显下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,肺部定量给予EOFAZ后凋亡蛋白Bax/Bcl-2的蛋白相对表达量下降(P<0.01),抗氧化应激蛋白Nrf2,NQO1的表达增加(P<0.05)。结论:EOFAZ通过肺部定量给药能够有效降低炎症和氧化应激水平,减少肺组织细胞凋亡,缓解肺气肿的发生和发展,其抗氧化机制与提高Nrf2及其下游NQO1蛋白表达密切相关。

关键词：艳山姜挥发油肺部定量给药肺气肿氧化应激凋亡

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抗菌肽LL-37抗寄生虫活性研究进展

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第1期36卷 98-104页

作者：楼俊超何小芹南京医科大学公共卫生学院江苏南京211166 国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064

由原虫、蠕虫感染导致的寄生虫病在全球范围内广泛流行,尤其是在热带和亚热带地区,对儿童和成人生命健康均造成威胁。抗寄生虫药的长期使用导致寄生虫对药物敏感性下降甚至出现耐药性。研究表明抗菌肽可抑制寄生虫生长发育,具有潜在抗... 详细信息

由原虫、蠕虫感染导致的寄生虫病在全球范围内广泛流行,尤其是在热带和亚热带地区,对儿童和成人生命健康均造成威胁。抗寄生虫药的长期使用导致寄生虫对药物敏感性下降甚至出现耐药性。研究表明抗菌肽可抑制寄生虫生长发育,具有潜在抗寄生虫价值,其中LL-37作为组织蛋白酶抑制素(cathelicidin)家族中唯一的人源抗菌肽被广泛研究。本文综述了LL-37抗寄生虫作用的研究进展,并对其作为抗寄生虫药物的候选资源的应用前景进行了探讨。

关键词：寄生虫人源抗菌肽 LL-37 作用机制

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