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中国组织工程研究 2012年第6期16卷 994-997页

作者：朱茜赵云鹤刘雪芹杨武林陆利山西医科大学人体解剖学教研室山西省太原市030001 合肥工业大学生物与食品工程学院安徽省合肥市230009

背景:BrdU是胸腺嘧啶核苷类似物,常用来标记前脑室管膜下区具有增殖潜能的神经前体细胞。目的:建立不同年龄阶段BrdU标记方法,系统分析不同年龄阶段神经前体细胞增殖特点以及变化规律。方法:选取胚胎期小鼠、新生小鼠、成年小鼠和老年... 详细信息

背景:BrdU是胸腺嘧啶核苷类似物,常用来标记前脑室管膜下区具有增殖潜能的神经前体细胞。目的:建立不同年龄阶段BrdU标记方法,系统分析不同年龄阶段神经前体细胞增殖特点以及变化规律。方法:选取胚胎期小鼠、新生小鼠、成年小鼠和老年小鼠各5只,腹腔注射BrdU,观察不同年龄阶段神经前体细胞增殖潜能及不同年龄阶段前脑衰老细胞,探讨微环境对神经前体细胞增殖潜能的影响。结果与结论:胚胎期小鼠、新生小鼠、成年小鼠和老年小鼠前脑室管膜下区BrdU+细胞分别为(897.20±22.38),(262.17±26.26),(76.67±5.63),(43.8±2.61)个,随年龄增加细胞增殖潜能逐渐降低(P<0.05)。成年小鼠和老年小鼠脑室周围有大量β-半乳糖苷酶染色阳性衰老细胞,说明随年龄增加脑内β-半乳糖苷酶染色活性增强,衰老细胞逐渐增多,神经前体细胞生存微环境失衡可能与神经前体细胞增殖潜能下降有关。

关键词：神经前体细胞 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 β-半乳糖苷酶增殖衰老

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钠-葡萄糖协同转运蛋白抑制剂的合成及降血糖活性

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中国药物化学杂志 2011年第1期21卷 57-59页

作者：史永恒赵桂龙刘巍邵华汤立达王玉丽徐为人天津药物研究院天津市新药设计与发现重点实验室天津300193 天津医科大学药学院天津300070 天津药物研究院药代动力学与药效动力学省部共建国家重点实验室天津300193

目的对钠-葡萄糖共转运子2(SGLT2)抑制剂dapagliflozin的两个苯环之间的亚甲基进行甲基化衍生,考察所得衍生物的降血糖活性。方法以5-溴-2-取代苯甲酸为起始物,经付克酰基化、格氏试剂的亲核加成、还原、溴-锂交换、偶合、还原、全乙酰... 详细信息

目的对钠-葡萄糖共转运子2(SGLT2)抑制剂dapagliflozin的两个苯环之间的亚甲基进行甲基化衍生,考察所得衍生物的降血糖活性。方法以5-溴-2-取代苯甲酸为起始物,经付克酰基化、格氏试剂的亲核加成、还原、溴-锂交换、偶合、还原、全乙酰化和脱乙酰化反应合成目标化合物。采用小鼠口服葡萄糖耐量试验测试目标化合物的降血糖活性。结果与结论合成了3个目标化合物,其结构经1H-NMR和ESI-MS谱确证。降血糖活性测试表明,阳性对照和目标化合物的血糖抑制率分别为79%(dapagliflozin)、38%(1a)、32%(1b)和43%(1c),3个目标化合物均具有较强的降血糖活性,但比阳性对照药dapagliflozin弱。

关键词：钠-葡萄糖共转运子2 合成口服葡萄糖耐量试验(OGTT) 降血糖活性

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4-(4-羟基-3-甲氧基苯甲基)姜黄素抗慢性粒细胞白血病的作用与BCR-ABL和HSP90的关系

4-(4-羟基-3-甲氧基苯甲基)姜黄素抗慢性粒细胞白血病的作用与BCR...

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：许建华余靖刘洋张连茹黄慧卿黄秀旺福建医科大学药学院福建医科大学新药研究所福建省高校天然药物药理学重点实验室

目的研究姜黄素新衍生物4-（4-羟基-3-甲氧基苯甲基）姜黄素（C086）对人慢性粒细胞白血病（CML）细胞抑制作用,比较C086、姜黄素（Cur）以及甲磺酸伊马替尼（STI571）对含野生型bcr/abl的32D细胞（32Dwt）,含bcr/abl不同点突变（Y253F,... 详细信息

目的研究姜黄素新衍生物4-（4-羟基-3-甲氧基苯甲基）姜黄素（C086）对人慢性粒细胞白血病（CML）细胞抑制作用,比较C086、姜黄素（Cur）以及甲磺酸伊马替尼（STI571）对含野生型bcr/abl的32D细胞（32Dwt）,含bcr/abl不同点突变（Y253F,Q252H,T315I）的32D细胞（32DY253F,32D Q252H,32D T315I）的作用,并研究C086抗CML作用与其下调p210激活的信号途径的关系。方法应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察C086对慢性粒细胞白血病K562细胞及Dami、MEG-01等其它白血病细胞以及32Dwt,32DY253F,32D Q252H,32D T315I细胞的增殖抑制作用;不同浓度的C086处理K562细胞24 h后,Annexin V-FITC/PI荧光染色法检测调亡率。观察C086对来源于CML的CD34+细胞克隆形成的影响。用Western blot法检测C086对K562细胞p210bcr/abl蛋白含量、p-STAT1,p-STAT5,p-Erk1/2,PKC,Hsp90,Hsp70的影响。结果 C086对K562等人白血病细胞均有很强的增殖抑制作用,呈量效、时效关系;不同浓度(1,2和4μg·ml)的C086可诱导K562细胞调亡,而且比姜黄素（Cur）敏感;C086可明显下调p210和PKC蛋白含量,这一作用与抑制hsp90有关,对p-STAT1,p-STAT5,p-ERK1/2有明显的抑制作用。Y253F,Q252H,T315I等bcr/abl点突变细胞对STI571可产生显著的耐药,STI571对32DY253F,32D Q252H,32D T315I细胞的耐药性分别是32Dwt细胞的15.0,18.0和169.0倍,而C086对上述bcr/abl点突变细胞的耐药性分别是32Dwt细胞的1.0,1.5和0.9倍,与其母体Cur相似,但IC均比Cur低2.6～3.9倍。结论姜黄素衍生物C086有显著的抗慢性粒细胞白血病活性的作用,其作用与其抑制Hsp90,下调p210蛋白及其激活的信号途径有关。对Y253F,Q252H,T315I等bcr/abl点突变细胞仍然敏感。

关键词：姜黄素衍生物慢性粒细胞白血病 BCR/ABL Hsp90

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STAT3和SOCS3表达对人肝细胞癌恶性演进作用及其机制的研究

STAT3和SOCS3表达对人肝细胞癌恶性演进作用及其机制的研究

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作者：吴文涌安徽医科大学

学位级别：博士

目的:检测人肝细胞癌和癌旁非肿瘤病变组织中STAT3、SOCS3、Ki67和VEGF的表达,并观察STAT3和SOCS3与肝细胞癌临床病理特征和患者预后的关系,探讨STAT3和SOCS3与临床肝细胞癌发生和演进的相关性及其临床意义。方法:构建组织微阵列平台,... 详细信息

目的:检测人肝细胞癌和癌旁非肿瘤病变组织中STAT3、SOCS3、Ki67和VEGF的表达,并观察STAT3和SOCS3与肝细胞癌临床病理特征和患者预后的关系,探讨STAT3和SOCS3与临床肝细胞癌发生和演进的相关性及其临床意义。方法:构建组织微阵列平台,应用免疫组织化学S-P法检测140例肝细胞癌和112例癌旁非肿瘤组织pSTAT3、SOCS3、Ki67和VEGF蛋白的表达,原位分子杂交技术检测STAT3 mRNA的表达。结果: 1. 140例肝细胞癌和112例癌旁非肿瘤组织的微阵列样本中,2例含有过少或不含有肿瘤组织,2例样本在切片、免疫组化或原位杂交染色过程中脱失,成品率为98.4%。 2.肝细胞癌组织中pSTAT3蛋白和STAT3 mRNA表达均较癌旁非肿瘤组织显著增强(均P<0.001),而肝细胞癌SOCS3蛋白表达较癌旁非肿瘤组织明显降低(P<0.001)。 3.肝细胞癌组织pSTAT3蛋白表达与肿瘤大小、临床分期,Ki67增殖指数和VEGF表达均呈显著正相关(均P <0.01),并且其表达与患者总生存期和无病生存期均呈显著负相关(均P<0.05);而SOCS3蛋白表达与肿瘤Ki67增殖指数和VEGF表达均呈显著负相关(均P <0.01),并且与患者总生存期和无病生存期均呈显著正相关(均P<0.05)。 4.相关性分析显示,肝细胞癌组织pSTAT3蛋白表达与STAT3 mRNA表达呈显著正相关(r = 0.726,P < 0.001),而与SOCS3蛋白表达呈显著负相关(r = - 0.606,P < 0.001)。结论: STAT3和SOCS3表达的失调可能与肝细胞癌发生过程有关。pSTAT3表达与肝细胞癌病情演进密切相关,pSTAT3和SOCS3是辅助判断肝细胞癌患者预后的有效标志物。目的:观察瞬时转染特异性siRNA后分别对人肝癌细胞STAT3和SOCS3的表达,探讨STAT3和SOCS3对人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以及分子机制。方法:以人肝癌细胞系HepG2的为研究对象,使用lipo2000分别瞬时转染特异性靶向STAT3 siRNA和SOCS3 siRNA,0、24、48、72小时后用MTS法检测siRNA组和阴性对照组增殖活性;使用“划痕愈合实验”分别0、36、72小时检测不同组别肝癌细胞迁移率;使用“Transwell小室实验”分别24和36小时检测不同组别肝癌细胞迁移和侵袭情况。结果: 1、STAT3的siRNA组与对照组相比细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.01),而SOCS3的siRNA组较对照组的细胞增殖活性显著增加;2、STAT3的siRNA组“划痕愈合”较对照组减慢(P<0.01),而SOCS3的siRNA组“划痕愈合”较对照组加快(P<0.01);3、“Transwell小室”实验显示STAT3的siRNA组肝癌细胞迁移和侵袭力较对照组显著减弱(P<0.01),而SOCS3的siRNA组较对照组迁移和侵袭力显著增强(P<0.01)。 4、STAT3的siRNA组肝癌细胞的MMP-2、MMP-9和c-myc表达较对照组显著下调,而SOCS3的siRNA组肝癌细胞的相关指标表达较对照组显著上调。结论:STAT3和SOCS3在肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的过程中可能发挥了重要作用,这种调控作用可能是通过调控MMP-2、MMP-9和c-myc途径发挥作用。目的:通过体内实验观察JAK/STAT3信号通路阻断剂AG490对肝细胞癌裸鼠移植瘤生长、侵袭和转移等生物学行为的影响,从体内实验的角度探讨阻断STAT3通路对肝细胞癌生长、侵袭转移等的抑制作用,以及对相关重要基因的影响。以期对临床肝细胞癌的治疗提供一定的理论依据。方法:建立人肝癌细胞系HepG2细胞裸鼠异种移植瘤模型并分组。使用AG490、顺铂或生理盐水处理各组裸鼠。用药期间连续测量裸鼠肿瘤体积,检测肿瘤重量并计算抑瘤率。HE染色检测肿瘤局部侵袭和肺脏转移情况。免疫组织化学检测移植瘤组织中pSTAT3、SOCS3、Ki67、c-myc、MMP-2和MMP-9蛋白表达。结果: 1、药物对裸鼠移植瘤体积生长的影响:分别在用药后第1天、第4天、第7天及第10天测量肿瘤长径(a)、短径(b),计算体积,描绘移植瘤生长曲线图。结果可见从用药第7天开始AG490给药组肿瘤体积显著小于对照组(P < 0.001)。 2、药物对裸鼠移植瘤肿瘤细胞局部侵袭和转移的生物学的影响:肉眼观移植瘤呈结节状,肿瘤组织血供丰富,给药组移植瘤境界清楚,无明显周围组织和皮肤浸润,易分离,切面呈鱼肉样。光镜下观察给药组肿瘤细胞较对照组局部侵袭力明显减弱,肺部转移率明显减少。 3、免疫组化结果:给药组移植瘤肿瘤细胞pSTAT3、Ki67、c-myc、MM

关键词：肝细胞癌原位分子杂交免疫组织化学 STAT3 SOCS3 组织微阵列肝脏肿瘤增殖迁移侵袭 MMP-2 MMP-9 c-myc siRNA 转移 AG490 动物模型

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植物雌激素大豆苷元的药物动力学研究进展

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安徽农业科学 2011年第7期39卷 3796-3797页

作者：彭游钟婵娟九江学院化工学院江西九江332005 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室江西南昌330047

植物雌激素大豆苷元具有抗氧化活性、心血管保护作用、抗癌作用、消炎作用、抗溃疡作用及雌激素等多种药理功能。综述大豆苷元的药物动力学方面的研究进展,为大豆苷元的药剂学研究和发展以大豆苷元为先导物的前药修饰提供科学依据。

关键词：大豆苷元药代动力学生物利用度

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玉屏风药材汤剂HPLC指纹图谱的建立

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安徽医科大学学报 2010年第2期45卷 191-196页

作者：陈伟薇李俊宋珏李飞龙安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级重点实验室合肥230032

目的建立玉屏风药材汤剂的指纹图谱。方法采用高效液相色谱法(HPLC)分析,色谱柱为Hypersil ODS柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,检测波长为220nm,流速为1.0ml/min,进样量为10μl,柱温为30℃。采用中药色谱指纹图谱... 详细信息

目的建立玉屏风药材汤剂的指纹图谱。方法采用高效液相色谱法(HPLC)分析,色谱柱为Hypersil ODS柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,检测波长为220nm,流速为1.0ml/min,进样量为10μl,柱温为30℃。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)进行指纹图谱分析。结果玉屏风药材汤剂主要有8个特征峰。结论该指纹图谱可以作为玉屏风药材汤剂中升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、芒柄花素稳定性的参考。

关键词：中药鉴定/方法

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微透析-液相色谱-化学发光法测定大鼠脑组织中丹参酚类化合物浓度及其药代动力学研究

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中国药理学通报 2010年第9期26卷 1230-1237页

作者：张群林张云静吴亮李俊袁野安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级重点实验室安徽合肥230032

目的基于丹参素(DSS)、原儿茶醛(PAL)和丹酚酸B(SalB)对HAuCl4-luminol-H2O2化学发光的增强作用,建立测定大鼠脑微透析液中3种水溶性酚类化合物浓度的液相色谱-化学发光法(HPLC-CL),探讨该分析法在大鼠脑组织药代动力学研究中的应用。... 详细信息

目的基于丹参素(DSS)、原儿茶醛(PAL)和丹酚酸B(SalB)对HAuCl4-luminol-H2O2化学发光的增强作用,建立测定大鼠脑微透析液中3种水溶性酚类化合物浓度的液相色谱-化学发光法(HPLC-CL),探讨该分析法在大鼠脑组织药代动力学研究中的应用。方法采用微透析体内连续采样技术,6只SD大鼠腹腔注射水合氯醛麻醉后,将微透析脑探针植入左侧皮质,用林格液2.0μl·min-1的流速灌流。尾静脉注射丹参滴注液(DSS2.5mg·kg-1、PAL0.4mg·kg-1、SalB0.4mg·kg-1)并收集脑透析液样品,脑透析液收集时间间隔为15min。用HPLC-CL法测定给药后大鼠脑透析液中的药物浓度,利用DAS软件拟合并计算其药代动力学参数。结果丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的脑透析液浓度分别在1.64～430.40、5.30～528.00和8.00～800.00μg·L-1范围内线性关系良好,其检测限分别为0.33、0.22和2.56μg·L-1。以质控样品计算,在各浓度水平下,日间和日内精密度小于5.2%,符合生物样品分析要求。大鼠单剂量静注丹参滴注液后,丹参素在脑组织中的主要药代动力学参数T12、AUC0-∞、MRT0-∞和k分别为(0.64±0.20)h、(369.39±114.77)ng·h·ml-1、(0.64±0.18)h和1.36±0.27。结论建立的HPLC-CL法具有高选择性和高灵敏度等优点,结合微透析采样技术能够实现脑组织中游离丹参素浓度的动态监测,可用于丹参素的生物样品定量分析及药代动力学研究。其中丹参素的脑组织药代动力学参数为国内外首次报道。

关键词：丹参素微透析液相色谱-化学发光分析法药代动力学脑原儿茶醛丹酚酸B

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咖啡因对大鼠酒精性肝纤维化的防治作用

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中国药理通讯 2010年第2期27卷 49-50页

作者：代雪飞吕雄文安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室” 合肥230032

目的观察咖啡因（caffeine）对大鼠酒精性肝纤维化的防治作用及其机制。方法采用酒精每天早晚2次灌胃，连续12周，制备大鼠酒精性肝纤维化模型，给药组同时灌服相应浓度的咖啡因。分别于实验的第8周和第12周两个时点处死大鼠，称取肝脏... 详细信息

目的观察咖啡因（caffeine）对大鼠酒精性肝纤维化的防治作用及其机制。方法采用酒精每天早晚2次灌胃，连续12周，制备大鼠酒精性肝纤维化模型，给药组同时灌服相应浓度的咖啡因。分别于实验的第8周和第12周两个时点处死大鼠，称取肝脏湿重，计算肝系数；股动脉采血检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）以及透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、

关键词：酒精性肝纤维化咖啡因大鼠防治肝纤维化模型谷丙转氨酶谷草转氨酶层粘连蛋白

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慢支大鼠肺泡巨噬细胞内MAPK信号传导通路及TAL的作用环节研究

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中国药理通讯 2010年第2期27卷 50-51页

作者：黄艳孟晓明江国林杨雅茹刘娟李俊安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室” 合肥230032

目的：肺泡巨噬细胞在慢支的发病，炎症反应中发挥了重要作用，而MAPK信号传导通路对炎症反应至关重要。本课题旨在前期研究的基础上，以慢支大鼠AM为平台，MAPK信号通路为研究对象，研究慢支大鼠AMMAPK信号传导通路，在此基础上，进一... 详细信息

目的：肺泡巨噬细胞在慢支的发病，炎症反应中发挥了重要作用，而MAPK信号传导通路对炎症反应至关重要。本课题旨在前期研究的基础上，以慢支大鼠AM为平台，MAPK信号通路为研究对象，研究慢支大鼠AMMAPK信号传导通路，在此基础上，进一步探讨枇杷叶三萜酸（TAL）对此通路的作用及环节。

关键词： MAPK信号通路信号传导通路肺泡巨噬细胞慢支大鼠 TAL 细胞内炎症反应

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实验性大鼠肝纤维化逆转过程中血清瘦素动态变化研究

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中国药理通讯 2010年第2期27卷 51-52页

作者：李浩李俊黄成黄艳程娟李政通章圣朋陶辉安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室” 合肥230032

背景与目的：肝纤维化（hepatic fibrosis）是肝脏受损后机体在修复过程中纤维组织在肝组织中过度沉积的一种可递f生病理现象。瘦素（1eptin）是一种功能广泛的蛋白激素，肝组织中瘦素与其长链受体（OB—Rb）结合后，可通过多种途径激... 详细信息

背景与目的：肝纤维化（hepatic fibrosis）是肝脏受损后机体在修复过程中纤维组织在肝组织中过度沉积的一种可递f生病理现象。瘦素（1eptin）是一种功能广泛的蛋白激素，肝组织中瘦素与其长链受体（OB—Rb）结合后，可通过多种途径激活星状细胞，促进肝纤维化发展。体内瘦素的含量与肝纤维化的形成和逆转有着密切的关系。本实验拟探讨瘦素在实验性大鼠肝纤维化自发逆转过程中的动态变化及可能的作用机制。方法：SD大鼠分正常和模型组；

关键词：肝纤维化逆转实验性大鼠血清瘦素动态变化病理现象纤维组织修复过程肝脏受损

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