检索结果-内蒙古大学图书馆

生物学杂志 2009年第4期26卷 13-16页

作者：黄银久宋宝安金林红胡德禹杨松李宁吴守伟蚌埠医学院生物科学系蚌埠233000 贵州大学精细化工研究开发中心 “绿色农药与生物工程”教育部重点实验室贵阳550025

为了探索抗肿瘤药物体外筛选中磺酰罗丹明B(SRB)法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验结果的相互验证作用,作者以PC-3、BGC-823、Bcap-37细胞系为研究对象,利用SRB法和MTT比色法对供试化合物行体外抑制活性考察,并用SPSS12.0对两种筛选方... 详细信息

为了探索抗肿瘤药物体外筛选中磺酰罗丹明B(SRB)法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验结果的相互验证作用,作者以PC-3、BGC-823、Bcap-37细胞系为研究对象,利用SRB法和MTT比色法对供试化合物行体外抑制活性考察,并用SPSS12.0对两种筛选方法得到的实验结果进行差异性分析。结果表明,SRB法和MTT比色法实验结果相关性好,可以相互验证实验结果的准确性和可靠性。

关键词： MTT比色法 SRB法相关性

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细胞角蛋白18真核表达载体的构建及其对NF-κB信号通路的影响

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安徽医科大学学报 2009年第2期44卷 150-153页

作者：姚景辉王建王晓辉黄晓碧杨晓明汪思应安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京(国家)蛋白质组研究中心北京100850

目的构建人细胞角蛋白18(CK18)真核表达载体,以研究CK18与NF-κB信号通路的关系。方法经PCR扩增CK18基因片段,用pCMV-Myc及pDsRed1-N1载体构建真核重组质粒,瞬时转染HEK293细胞,用Western blot方法检测pCMV-Myc-CK18的表达,在荧光显微... 详细信息

目的构建人细胞角蛋白18(CK18)真核表达载体,以研究CK18与NF-κB信号通路的关系。方法经PCR扩增CK18基因片段,用pCMV-Myc及pDsRed1-N1载体构建真核重组质粒,瞬时转染HEK293细胞,用Western blot方法检测pCMV-Myc-CK18的表达,在荧光显微镜下观察pD-sRed1-N1-CK18的定位情况。用双荧光素酶报告基因系统,检测CK18对NF-κB信号通路的影响。结果构建了人CK18真核表达载体,发现CK18定位于细胞质,并抑制NF-κB的转录活性。结论构建了人CK18真核表达载体,CK18负调控NF-κB信号通路。

关键词： NF-κB 基因表达

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维生素D受体变异对下游靶基因转录调控的研究进展

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中国临床药理学与治疗学 2009年第8期14卷 941-945页

作者：李宝群沈杰周宏灏承德医学院药理教研室皖南医学院弋矶山医院安徽省药物临床评价中心中南大学临床药理研究所

维生素D3是人体必需的一种维生素,属于类固醇激素,在体内的主要活性形式为1,25(OH)2VD3(简称VD3),在体内具有重要的生物学功用,其所有作用的实现都是通过维生素D受体(VDR)来介导的。VDR与VD3结合后,可以调控下游一系列靶基因的转录,发... 详细信息

维生素D3是人体必需的一种维生素,属于类固醇激素,在体内的主要活性形式为1,25(OH)2VD3(简称VD3),在体内具有重要的生物学功用,其所有作用的实现都是通过维生素D受体(VDR)来介导的。VDR与VD3结合后,可以调控下游一系列靶基因的转录,发挥其调节钙磷代谢、调控细胞生长分化等作用;另外VDR还在药物代谢、转运、以及药物疗效中起关键作用。VD3的抗肿瘤机制之一也是当今日益受到重视的化学性保护作用:VD3通过VDR诱导了药物代谢酶CYP450,对内外源性物质尤其是一些前致癌物进行代谢分解继而排出体外的能力加强从而起到抗肿瘤的作用;由此VDR基因变异所产生的蛋白数量或质量的改变也就预示了其在临床上将产生深远影响。

关键词：维生素D3 维生素D受体转录调控基因变异肠道肿瘤

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液体培养基中天然变链素的纯化

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中国微生态学杂志 2009年第10期21卷 926-929页

作者：李颂杨柳许晓芳杨佰霞柳雯安徽医科大学口腔医学院安徽合肥230032 安徽医科大学第一附属医院检验科安徽合肥230022

目的从变形链球菌临床株的液体培养基中分离纯化变链素,为进一步从分子水平研究变链素奠定基础。方法通过抑菌活性检测,从变链临床株中选择出抑菌活性较强的菌株。用氯仿抽提法从该菌株的培养液中粗提变链素,经固相萃取和反相高效液相色... 详细信息

目的从变形链球菌临床株的液体培养基中分离纯化变链素,为进一步从分子水平研究变链素奠定基础。方法通过抑菌活性检测,从变链临床株中选择出抑菌活性较强的菌株。用氯仿抽提法从该菌株的培养液中粗提变链素,经固相萃取和反相高效液相色谱(RP-HPLC)对粗提物进行纯化。结果获得变链素活性较强的菌株"1G"。从其200ml液体培养基中粗提出变链素约15μg,经固相萃取柱洗脱,再经过RP-HPLC2次纯化,得到有抑菌活性的成分,此为纯化的变链素。结论变链素分子量小,分离提纯步骤复杂,本实验得到纯化的变链素,为下一步研究变链素的氨基酸序列和基因序列奠定了基础。

关键词：变形链球菌变链素反相高效液相色谱

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阴中求阳法治疗去卵巢骨质疏松大鼠骨组织作用的对比研究

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第33期13卷 6478-6482页

作者：武密山赵素芝武中建白霞郝秀红河北医科大学中医学院河北省石家庄市050091 石家庄市桥东区医院河北省石家庄市050041 石家庄市桥东区妇幼保健站河北省石家庄市050000

背景:祖国医学中"肾主骨"的理论符合现代医学骨代谢调节机制,依此"阴中求阳法"和"阳中求阴法"理论研制的补肾复方在治疗骨质疏松症虽取得较好效果,但是滋补肾阴药与温补肾阳药配伍比例需要进行骨形成机... 详细信息

背景:祖国医学中"肾主骨"的理论符合现代医学骨代谢调节机制,依此"阴中求阳法"和"阳中求阴法"理论研制的补肾复方在治疗骨质疏松症虽取得较好效果,但是滋补肾阴药与温补肾阳药配伍比例需要进行骨形成机制的深入探讨。目的:对比观察依照阴中求阳法组成的补肾方药中滋补肾阴药与温补肾阳药不同配伍比例对卵巢切除所致骨质疏松大鼠的治疗作用,以探讨它们之间的疗效是否存在差异。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/2009-01在河北医科大学中西医结合基础实验室完成。材料:清洁级3个月龄健康雌性SD大鼠(未曾交配)90只,只随机分成9组:正常对照组、假手术组、卵巢切除组、91组、82组、73组、64组、55组、补肾复方组,每组10只。补肾方药由地黄、淫羊藿、山药、丹参、骨碎补、独活等药物组成。方法:正常组和假手术组不造模,其余各组均切除卵巢造成骨质疏松症模型。91组、82组、73组、64组、55组分别按补肾阴药地黄∶补肾阳药淫羊藿为9∶1,8∶2,7∶3,6∶4及5∶5的比例配伍;生药含量均为960g/L,每天灌服7μL/g。补肾复方组按照地黄∶淫羊藿∶淮山药∶丹参∶骨碎补:独活等于8∶4∶4∶3∶3∶3的配伍比例制成的口服剂,生药含量约为1010g/L,每天灌服7μL/g,以上给药,1次/d,连续6d,休息1d后,再连续灌服6d,如此至3个月止;假手术组和正常对照组大鼠灌服等容积的蒸馏水。于卵巢切除1周后给药。主要观察指标:3个月后处死大鼠。普通光镜下观察骨小梁体积百分比、骨小梁吸收表面百分比及骨小梁形成表面百分比。荧光镜下观察活性生成表面百分比、骨小梁矿化率及骨小梁骨生成率。结果:90只大鼠均进入结果分析。切除卵巢3个月后,大鼠胫骨骨小梁体积百分比显著降低,骨小梁吸收表面百分比以及骨小梁形成表面百分比、活性生成表面百分比、骨小梁矿化率、骨小梁骨生成率皆显著增高。给药3个月后,与切除卵巢模型组比较,给大鼠灌服不同配伍比例滋阴药和温阳药组成的补肾方药3个月后,均能使上述指标发生逆转,但程度有所不同,补肾阴药地黄和补肾阳药淫羊藿配伍比例之中以7∶3比例为最明显。结论:根据"阴中求阳法"理论组成的补肾方剂,滋补肾阴药与温补肾阳药不同配伍比例对卵巢切除所致的骨质疏松均有明显的治疗作用,补肾阴药和补肾阳药配伍比例应该是"补阴药"大于"补阳药"疗效更好。

关键词：滋补肾阴方药温补肾阳方药卵巢切除术骨质疏松阴中求阳法阴损及阳

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科安乳膏抗癌作用机理的初步研究

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中国科学技术大学学报 2009年第4期39卷 351-356页

作者：赵奇红张颖刘赟周绪天温龙平中国科学技术大学生命科学学院安徽合肥230027 安庆镇痛消瘤研究所安徽安庆246001

为了寻求高效低毒副作用的抗癌药物,对传统中药的剂型加以改进,并且探寻其抗癌机理,以安庆消瘤散传统剂型为基础,运用透皮给药技术,发展成新的剂型——科安乳膏.体外实验结果显示纳米化的药物悬液可以有效地抑制肿瘤细胞生长,诱导凋亡;... 详细信息

为了寻求高效低毒副作用的抗癌药物,对传统中药的剂型加以改进,并且探寻其抗癌机理,以安庆消瘤散传统剂型为基础,运用透皮给药技术,发展成新的剂型——科安乳膏.体外实验结果显示纳米化的药物悬液可以有效地抑制肿瘤细胞生长,诱导凋亡;体内试验显示科安乳膏通过透皮给药可以达到适宜的血药浓度和组织分布,具有很好的阻止肿瘤内血管生成、抑制肿瘤生长的效果.结果表明科安乳膏是一种具有良好抗癌活性的透皮药物.

关键词：科安乳膏抗癌活性皮肤黑色素瘤血管生成透皮给药

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芍药苷对胶原性关节炎大鼠滑膜细胞G蛋白偶联信号的调节作用

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中国药理学通报 2008年第3期24卷 330-335页

作者：张玲玲魏伟汪庆童陈镜宇陈尹吴华勋安徽医科大学临床药理研究所安徽省高校省级抗炎免疫药理学重点实验室安徽省高校抗炎免疫药物工程技术研究中心安徽省高校中药抗炎免疫药理学科技创新团队安徽省中药研究与开发重点实验室安徽合肥230032

目的研究芍药苷（paeoniflofin，Pae）对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis，CIA）大鼠滑膜细胞G蛋白偶联信号转导的调节作用。方法用鸡Ⅱ型胶原诱导胶原性关节炎。在免疫后d 16～23，胶原性关节炎大鼠灌胃给予Pae（25、50... 详细信息

目的研究芍药苷（paeoniflofin，Pae）对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis，CIA）大鼠滑膜细胞G蛋白偶联信号转导的调节作用。方法用鸡Ⅱ型胶原诱导胶原性关节炎。在免疫后d 16～23，胶原性关节炎大鼠灌胃给予Pae（25、50、100mg·kg^-1）。通过足爪肿胀和关节炎指数评价关节炎。采用Western blot技术检测滑膜细胞中抑制性G蛋白（Gi）表达。用放免法检测滑膜细胞中cAMP水平，用激酶发光分析法测定滑膜细胞中蛋白激酶A（PKA）的活性。结果胶原性关节炎大鼠出现明显的继发性炎症反应。滑膜细胞中Gi蛋白表达增加，而cAMP水平和PKA活性明显降低。Pae抑制胶原性关节炎大鼠的炎症应答。在100mg·kg^-1，Pae抑制Gi的表达。在50mg·kg^-1和100mg·kg。剂量，Pae提高cAMP水平和PKA活性。体外研究发现，Pae（2．5、12．5、62．5mg·L^-1）降低滑膜细胞中Gi的表达，而提高降低的cAMP水平和PKA活性。结论胶原性关节炎大鼠滑膜细胞中G蛋白偶联的信号转导与滑膜炎病理机制密切相关；Pae对胶原性关节炎大鼠的抗炎作用是通过调节G蛋白偶联的信号转导实现的。

关键词：芍药苷胶原性关节炎滑膜细胞信号转导 G蛋白

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脊髓水平痛信号调控在急、慢性疼痛中的作用及干预的基础和临床研究

脊髓水平痛信号调控在急、慢性疼痛中的作用及干预的基础和临床研...

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疼痛严重影响患者的生活质量，还可伴发心身疾病如免疫力下降、焦虑、抑郁等。疼痛分为急性和慢性疼痛，根据慢性疼痛产生的机理不同，主要分为神经病理性痛、癌性痛和炎性痛。由于疼痛形成的机制不清，目前一些患者疼痛仍得不到有效的... 详细信息

标准号: gkls117080

疼痛严重影响患者的生活质量，还可伴发心身疾病如免疫力下降、焦虑、抑郁等。疼痛分为急性和慢性疼痛，根据慢性疼痛产生的机理不同，主要分为神经病理性痛、癌性痛和炎性痛。由于疼痛形成的机制不清，目前一些患者疼痛仍得不到有效的控制，生活在痛苦之中。课题组针对临床上常见的急、慢性疼痛，通过临床和实验室的研究，在省市级十余项基金的资助下，就脊髓水平痛信号的调控在急、慢性疼痛中的作用及干预进行了研究。本系列研究内容主要总结如下：一、N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体，尤其是亚单位NR2B相关信号通路 1.早在2000年，我们就发现临床上硬膜外腔使用NMDA受体非特异性拮抗剂氯胺酮对术后疼痛有很好的治疗作用，并且有超前镇痛的作用。最近，我们进一步研究发现：氯胺酮预先静脉内给药可以减轻术后疼痛和瑞芬太尼所致的痛觉过敏。为此我们认为：脊髓水平NMDA受体信号通路在急性疼痛中起重要作用，针对此信号通路进行干预对急性疼痛有很好的治疗作用。利用术后疼痛和瑞芬太尼痛觉过敏动物实验模型，发现瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓水平含NR2B的NMDA受体表达和磷酸化水平增加，抑制NR2B是治疗瑞芬痛敏的有效手段之一。 2.在使用不锈钢棒制作的慢性背根神经节压迫(CCD)动物模型上，我们发现：含有NR2B的NMDA受体信号通路在神经病理性疼痛中起重要作用。在该模型上发现：脊髓水平含NR2B的NMDA受体在神经病理性疼痛的发生和维持中起重要作用。进一步研究显示：抑制脊髓细胞周期素依赖性激酶-5(CDK-5)活性和激活大麻素受体-2(CB2)，在脊髓水平NR2B基因和蛋白表达和蛋白磷酸化降低的同时，痛行为学得到明显缓解。说明神经病理性疼痛的发生过程中，脊髓水平CDK-5-NR2B和CB2-NR2B信号通路起重要作用。 3.我们利用注射式改良CCD动物模型克服了不锈钢棒制作的缺点，更加真实地模拟临床慢性腰腿痛，此模型为国际首创，建模论文发表在麻醉学界影响因子最高的杂志Anesthesiology上(IF 5.124)，在学术界具有较大的影响，编者为此做了编者按。在该模型上我们发现：NMDA受体亚单位NR1与神经病理性疼痛的形成密切相关。 4.在国内我们首次复制出小鼠股骨骨癌痛模型。研究发现：脊髓水平含NR2B的NMDA受体在骨癌痛的发生和维持中起重要作用。进一步研究显示：与CCD所致的神经病理性疼痛类似，在骨癌痛的发生过程中也存在CDK-5-NR2B和CB2-NR2B信号通路。二、糖皮质激素受体以及相关信号通路 2000年以来，本课题组在临床上把醋酸泼尼松龙用于硬膜外镇痛，与吗啡镇痛相比，能够明显控制术后疼痛且无吗啡的并发症。但当时已有的研究成果尚不能解释这种现象。针对临床研究结果，我们在两种大鼠CCD模型上，鞘内使用糖皮质激素，发现能显著减轻神经病理性疼痛，其作用机制与脊髓水平NR2B密切相关。三、神经胶质细胞激活我们在大鼠CCD模型和小鼠骨癌痛模型上发现，脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞激活在神经病理性疼痛和癌痛发生和维持中起重要的作用。该研究成果在我院的临床应用明显减轻了病人的痛苦，减少了阿片类药物的使用量和成瘾性，经济和社会效益明显。课题组已发表论文59篇，其中SCI收录论文7篇，SCI收录论文摘要10篇。多次参加国、内外学术会议交流推广，成果已在南京市第一医院、南医大二附院、徐州市中心医院、安徽省立医院和安徽医科大学附属医院等单位推广应用。

关键词：脊髓疼痛信号转导

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细胞色素P450 2D6活性标志物美托洛尔及其代谢产物α-羟基美托洛尔的HPLC法测定

细胞色素P450 2D6活性标志物美托洛尔及其代谢产物α-羟基美托洛...

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第九届全国药物和化学异物代谢学术会议

作者：张鲁明李芹王睿山东省聊城市人民医院药学部天津医科大学基础医学院药理教研室解放军总医院临床药理研究室

目的:建立血浆和尿液中美托洛尔及其代谢产物α-羟基美托洛尔（HM）的反相高效液相色谱分析方法。方法:采用zorbax SB—C色谱柱,0.05 M KH PO（用磷酸调节pH至3.5）-乙腈（80:20,V/V）为流动相,流速1.0 ml·min;荧光检测波长Ex=216 ... 详细信息

目的:建立血浆和尿液中美托洛尔及其代谢产物α-羟基美托洛尔（HM）的反相高效液相色谱分析方法。方法:采用zorbax SB—C色谱柱,0.05 M KH PO（用磷酸调节pH至3.5）-乙腈（80:20,V/V）为流动相,流速1.0 ml·min;荧光检测波长Ex=216 nm,Em=312nm。结果:血浆中美托洛尔的线性范围为10～400 ng·ml,HM的线性范围为5～360 ng·ml,低、中、高三种浓度绝对回收率均大于89%,相对回收率为94%～106%,日内和日间RSD均小于6%。尿液中美托洛尔的线性范围为50～4000 ng·ml,HM的线性范围为25～3600 ng·ml,低、中、高三种浓度绝对回收率均大于77%,相对回收率为94%～100%,日内和日间RSD均小于9%。血浆和尿液的稳定性实验结果差异均在±10%以内。结论:本方法准确可靠、专一性好、操作简便,适用于临床药代动力学及药物基因组学研究。

关键词：美托洛尔 α-羟基美托洛尔 CYP2D6 HPLC

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BCR/ABL融合蛋白对鞘氨醇激酶和1-磷酸鞘氨醇分泌的影响

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安徽医科大学学报 2009年第4期44卷 411-415页

作者：许尹王超吴彬秦宜德安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

目的研究高表达BCR/ABL融合蛋白对人鞘氨醇激酶(SPK)表达、活性及1-磷酸鞘氨醇(S1P)分泌的影响。方法使用pLXSN和pLXSN-bcr/abl的重组逆转录病毒感染HL-60和ECV304细胞并筛选出pLXSN和pLXSN-bcr/abl的细胞。利用RT-PCR鉴定病毒转染。Wes... 详细信息

目的研究高表达BCR/ABL融合蛋白对人鞘氨醇激酶(SPK)表达、活性及1-磷酸鞘氨醇(S1P)分泌的影响。方法使用pLXSN和pLXSN-bcr/abl的重组逆转录病毒感染HL-60和ECV304细胞并筛选出pLXSN和pLXSN-bcr/abl的细胞。利用RT-PCR鉴定病毒转染。WesternBlot检测SPK表达,γ-32P-ATP掺入法检测细胞SPK活性和培养上清的S1P含量。应用同样方法检测不同剂量Gleevec对K562细胞培养上清中S1P的影响。结果RT-PCR结果显示bcr/abl基因转染成功。高表达BCR/ABL融合蛋白的HL-60和ECV304均比转染空载体后的细胞SPK表达、活性和S1P分泌均显著提高。随着Gleevec浓度的增加,K562细胞培养上清中S1P的含量逐渐减少。结论BCR/ABL融合蛋白可提高细胞SPK表达、活性和S1P分泌。

关键词：融合蛋白质类,bcr—abl 重组逆转录病毒人鞘氨醇激酶 1-磷酸鞘氨醇

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