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中国人兽共患病学报 2013年第4期29卷 375-379页

作者：王璐张义华孔兰婷王为为张倩罗庆礼沈继龙沙泉安徽医科大学免疫学教研室及过敏与免疫研究中心合肥230032 安徽省病原生物学实验室及安徽省人兽共患病重点实验室合肥230032

目的研究姜黄素(curcumin)对弓形虫PRU虫株(type II基因型)感染的BV-2细胞一氧化氮(NO)的产生及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。方法用弓形虫PRU虫株(5×105)感染BV-2细胞,同时用姜黄素进行... 详细信息

目的研究姜黄素(curcumin)对弓形虫PRU虫株(type II基因型)感染的BV-2细胞一氧化氮(NO)的产生及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。方法用弓形虫PRU虫株(5×105)感染BV-2细胞,同时用姜黄素进行干预,观察细胞形态;MTT检测细胞增殖;用Griess法检测细胞上清中NO的含量;Western blotting检测iNOS蛋白的表达。结果与对照组相比,感染弓形虫的小胶质细胞胞体变圆,突起减少,姜黄素可以减轻这种改变。弓形虫感染的小胶质细胞iNOS的表达增强,NO释放量增加,且随着时间延长逐渐增高,姜黄素能抑制iNOS的表达和NO的产生。结论姜黄素可以抑制弓形虫感染的BV-2细胞iNOS蛋白表达和NO的产生,提示该药对弓形虫脑病具有潜在的治疗价值。

关键词：神经小胶质细胞姜黄素弓形虫一氧化氮

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系统性红斑狼疮患者外周血CD3^＋ CD56^＋自然杀伤样T细胞体外活化特性研究

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安徽医科大学学报 2012年第4期47卷 365-369页

作者：张铭明夏丹唐婷婷王路徐建华沙泉安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科合肥230022 安徽医科大学免疫学教研室及过敏与免疫研究中心合肥230032

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD3+CD56+自然杀伤样T(NKT样)细胞的表达以及体外活化后的增殖能力和生物学特性。方法采用流式细胞仪检测30例SLE患者(疾病活动组20例,稳定组10例)和20例正常对照组外周血CD3+CD56+NKT样细胞的表... 详细信息

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD3+CD56+自然杀伤样T(NKT样)细胞的表达以及体外活化后的增殖能力和生物学特性。方法采用流式细胞仪检测30例SLE患者(疾病活动组20例,稳定组10例)和20例正常对照组外周血CD3+CD56+NKT样细胞的表达及不同体外刺激活化后的增殖能力。通过检测Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素(IL)-4表达水平来判断其在调节炎症免疫反应中的作用。结果 SLE患者外周血CD3+CD56+NKT样细胞的表达明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而SLE疾病活动组与稳定组之间差异无统计学意义。与佛波酯(PMA)和离子霉素的非特异性刺激相比,经抗CD3单克隆抗体和IL-2特异性诱导刺激对CD3+CD56+NKT样细胞的增殖能力更强,Th1型细胞因子IFN-γ表达水平更高,差异有统计学意义(P<0.05),而Th2型细胞因子IL-4在两种刺激条件下几乎均不表达。结论 CD3+CD56+NKT样细胞通过分泌Th1型细胞因子IFN-γ来调节炎症免疫作用,SLE的发病可能与外周血CD3+CD56+NKT样细胞表达数量减少及其免疫功能严重失调有关。

关键词：系统性红斑狼疮自然杀伤样T细胞细胞因子

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实验性矽肺大鼠肺泡灌洗液中巨噬细胞和白介素6的变化及意义

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安徽医药 2012年第7期16卷 894-896页

作者：唐婷婷夏丹王璐秦蓉沙泉安徽医科大学免疫学教研室及过敏与免疫研究中心安徽合肥230032 安徽医科大学病理学教研室安徽合肥230032

目的研究实验性矽肺大鼠在染尘后不同时间肺泡灌洗液(BALF,bronchoalveolar lavage fluid)中巨噬细胞和白介素-6(IL-6)的变化,并探讨其意义。方法将54只健康雄性SD大鼠随机分为模型组27只、对照组27只。模型组以非暴露方式一次性气管内... 详细信息

目的研究实验性矽肺大鼠在染尘后不同时间肺泡灌洗液(BALF,bronchoalveolar lavage fluid)中巨噬细胞和白介素-6(IL-6)的变化,并探讨其意义。方法将54只健康雄性SD大鼠随机分为模型组27只、对照组27只。模型组以非暴露方式一次性气管内注入1 ml二氧化硅悬液(40 g.L-1)建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入等量的灭菌生理盐水。分别在染尘后第1、7、14、21、28、35、77、106、126天处死各组大鼠各3只,收集肺泡灌洗液和肺组织,用免疫组化S-P法观察肺组织中NF-κB的表达情况;ELISA法检测BALF中IL-6的含量;并计数有核细胞总数和巨噬细胞百分比。结果模型组大鼠BALF中IL-6的浓度在早期(第1、7、14天)均比对照组高,第7天下降,第14天最高,差异有统计学意义(P<0.05),其后下降到低位,后期有所回升,差异无统计学意义。染尘大鼠有核细胞计数和巨噬细胞百分比计数均比对照组大鼠的高,差异均有统计学意义(P<0.05)。有核细胞计数在第14天增高并在后期(第77、106、126天)直线上升;巨噬细胞百分比计数在第14天和第126天达到峰值。肺组织中NF-κB的表达在第1、7、14天与第77、106、126天时明显增加,有统计学意义(P<0.01),第21、28、35天时,没有显著差异,模型组均高于对照组。结论肺泡巨噬细胞在接触硅尘后变化和分泌炎症因子与矽肺的发生发展有密切关系。

关键词：矽肺巨噬细胞 IL-6

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气道上皮细胞免疫

气道上皮细胞免疫

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第八届全国免疫学学术大会

作者：沙泉安徽医科大学免疫学教研室及过敏与免疫研究中心

气道上皮是缓慢持续新生的有活力的组织,不仅是宿主抵抗外界有害物质和病原体的物理屏障,还在固有免疫中起重要作用,并且通过影响DCs、T细胞及B细胞的功能来调节适应性免疫应答的启动和效应。组成气道上皮的细胞主要有支气管的基底细胞... 详细信息

气道上皮是缓慢持续新生的有活力的组织,不仅是宿主抵抗外界有害物质和病原体的物理屏障,还在固有免疫中起重要作用,并且通过影响DCs、T细胞及B细胞的功能来调节适应性免疫应答的启动和效应。组成气道上皮的细胞主要有支气管的基底细胞、柱状纤毛上皮细胞、杯状细胞、Clara细胞以及肺泡的I型和II型细胞。气道上皮细胞表达许多固有免疫模式识别受体(P R R),包括Toll样受体(TLRs)、NOD样受体(NLR)、 RIG-I样受体( RLR)、C型凝集素、蛋白激酶受体(PK R)和蛋白酶激活受体(PA R)等等,与相应的病原体相关分子模式(PAMP)或损伤相关的分子模式(DAMP)作用后,上皮细胞被激活产生多种分子(如:溶酶体酶等酶类物质;防御素等增加通透性的多肽;MBL等胶原凝集素;PTX-3和CRP等穿透素;SLPI等蛋白酶抑制物;NO等小分子物质;粘液素等结合、中和蛋白等等)消灭或中和入侵的微生物。激活的气道上皮细胞产生Fractalkine(CX3CL1)、CCL20和GM-CSF等细胞因子在募集和维持局部DCs生存中起重要作用。上皮来源的thymic stromal lymphopoietin(TSLP)已被证实可以使DCs激活T细胞并向形成Th2细胞方向发分化。其他由上皮细胞产生并影响DCs对T细胞作用的细胞因子有I型干扰素(IFN-α和IFN-β,诱导向Th1方向偏移)和Ⅲ型干扰素(IFN-λ,IL-28和IL-29,诱导向Treg方向偏移)。上皮细胞不但产生Th1和Th17应答所需的吸引中性粒细胞的趋化性细胞因子,以及Th2应答所需的吸引嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的趋化性细胞因子,它们还产生直接吸引T细胞的趋化性细胞因子,包括Th1趋化性细胞因子CXCL10/IP-10和CXCL9/MIG以及Th2趋化性细胞因子CCL1/I-309、CCL22/MDC和CCL17/TA RC。此外,气道上皮细胞高表达某些B7家族成员,如B7-H1和B7-DC(PD-L1和PD-L),这些分子是T细胞活化、发挥功能、存活和分化的重要调节分子。上皮细胞产生的IL-6和TGF-β是很强的B细胞激活细胞因子;B细胞活化因子(BAFF)/B淋巴细胞刺激物(BLy S)通过与BAFF受体结合促进B细胞存活,并通过另外一个受体TACI介导B细胞抗体类别转换。综上所述,气道上皮细胞是呼吸系统免疫的重要执行者,其生物学作用值得深入研究。

关键词：气道上皮细胞固有免疫适应性免疫

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实验性矽肺模型大鼠血清TGF-β1和TNF-α的变化

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蚌埠医学院学报 2012年第4期37卷 386-388页

作者：成红夏丹唐婷婷沙泉安徽医科大学过敏与免疫研究中心及免疫学教研室安徽合肥230032 巢湖职业技术学院生物应用技术系医学检验与药学教研室安徽巢湖238000

目的:研究实验性矽肺大鼠在染尘后不同时期血清转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化。方法:将30只健康雄性SD大鼠随机分为模型组和对照组,模型组20只,对照组10只。模型组以非暴露方式气管内一次性注入1 ml二氧化... 详细信息

目的:研究实验性矽肺大鼠在染尘后不同时期血清转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化。方法:将30只健康雄性SD大鼠随机分为模型组和对照组,模型组20只,对照组10只。模型组以非暴露方式气管内一次性注入1 ml二氧化硅悬液(40 mg/ml)建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入等量的灭菌生理盐水。分别在染尘后第1、7、14、21、28天各处死4只模型组和2只对照组大鼠,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清TGF-β1和TNF-α的蛋白浓度。结果:模型组TGF-β1在染尘后第1、7天均显著低于对照组(P<0.01),而第14～28天均显著高于对照组(P<0.01)。模型组TNF-α在染矽尘后第1～14天均显著高于对照组(P<0.01),而在第21、28天均显著低于对照组(P<0.01)。结论:矽尘可导致血清TGF-β1和TNF-α的变化,TGF-β1的异常表达可能参与了矽肺肺纤维化的发生和发展。

关键词：矽肺矽尘转化生长因子-β1 肿瘤坏死因子-α 大鼠

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系统性红斑狼疮患者血清干扰素诱导蛋白10的表达水平及临床意义

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安徽医科大学学报 2011年第3期46卷 261-264页

作者：张铭明夏丹唐婷婷徐建华沙泉安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科合肥230022 安徽医科大学免疫学教研室及过敏与免疫研究中心合肥230032

目的探讨趋化因子干扰素诱导蛋白10(IP-10)在系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的表达水平及其对SLE的临床诊断价值。方法采用ELISA法检测96例SLE患者以及30例正常对照组血清中IP-10表达水平,比较分析其与SLE病情活动指数(SLEDAI评分)、疾... 详细信息

目的探讨趋化因子干扰素诱导蛋白10(IP-10)在系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的表达水平及其对SLE的临床诊断价值。方法采用ELISA法检测96例SLE患者以及30例正常对照组血清中IP-10表达水平,比较分析其与SLE病情活动指数(SLEDAI评分)、疾病活动性指标抗双链DNA(dS-DNA)抗体、抗C1q抗体、补体C3、C4水平、24 h尿蛋白定量(24 h UPQ)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、红细胞沉降率(ESR)的相关性,以及通过检测Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素-4(IL-4)来判断其在调节炎症免疫反应中的作用。结果总体SLE患者IP-10水平显著高于正常对照组,疾病活动狼疮肾炎(LN)组IP-10水平明显高于疾病活动非肾损伤组和疾病稳定组,差异有统计学意义(P<0.01),而疾病稳定LN组与疾病活动无肾损伤组间IP-10水平差异无统计学意义。在疾病活动期中,IP-10水平与SLEDAI评分、dS-DNA、hs-CRP呈明显正相关(P<0.01),与C3呈负相关(P<0.01),与C4、24 h UPQ、ESR无相关性,而在SLE肾损伤中,无论是活动期还是稳定期IP-10水平均和C1q呈正相关(P<0.05);SLE患者中IFN-γ、IL-4水平均明显高于正常对照组,IP-10与IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值在疾病活动和稳定时均呈正相关(P<0.01),而与IL-4仅在疾病稳定时呈正相关(P<0.01)。结论 IP-10通过介导Th1型炎症免疫反应在SLE中发挥重大作用,其表达水平与SLE疾病活动性密切相关,尤其对狼疮肾炎及狼疮活动的早期监测具有重要意义。

关键词：红斑狼疮,系统性趋化因子CXCL10 细胞因子类

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不同冻存保护剂对外周血单个核细胞的影响

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中国输血杂志 2010年第5期23卷 384-386页

作者：王桂喜董磊李春红铜陵市中心血站安徽铜陵244000 安徽医科大学过敏与免疫研究中心及免疫学教研室

目的观察不同冻存保护剂对外周血单个核细胞(PBMC)冻存后生物学特性的影响。方法新鲜血液分离和液氮冻存后1、7、30d,用MTT法检测单个核细胞活性,同时用酶联免疫吸附法(ELISA)检测冻存后其在脂多糖(LPS)和刀豆蛋白(ConA)刺激下分泌γ-... 详细信息

目的观察不同冻存保护剂对外周血单个核细胞(PBMC)冻存后生物学特性的影响。方法新鲜血液分离和液氮冻存后1、7、30d,用MTT法检测单个核细胞活性,同时用酶联免疫吸附法(ELISA)检测冻存后其在脂多糖(LPS)和刀豆蛋白(ConA)刺激下分泌γ-干扰素(IFN-γ),比较DMSO10%+FBS90%、DMSO10%+Dextran-4010%+FBS80%、DMSO10%+HES6%+FBS84%、FBS不同冻存保护剂对PBMC的保护作用。结果不同低温保护剂冻存对PBMC存活率的影响:二甲基亚砜(DMSO)+小牛血清(FBS);DMSO+FBS+右旋糖苷-40(Dextran-40);DMSO+羟已基淀粉(HES)+FBS;FBS分别为65.3±2.5、79.7±1.5、71±2.6、29.7±0.58;30d细胞增殖活性的影响(OD值)分别为0.21±0.19、0.28±0.15、0.23±0.13、0.10±0.17。冻存的PBMC对LPS刺激产生INF-γ的量不同,而对ConA刺激产生INF-γ量的变化不明显。结论 DMSO+FBS+Dextran-40联合使用是一种较理想的外周血单个核细胞低温保护方法 ,并对其生物学特性产生一定影响。

关键词：外周血单个核细胞低温冻存冻存保护剂

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实验性矽肺模型大鼠外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的变化及意义

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环境与职业医学 2010年第8期27卷 480-482页

作者：李春红朱文董西方胡天锡沙泉安徽医科大学过敏与免疫研究中心免疫学教研室安徽合肥230032 上海市疾病预防控制中心上海200336

[目的]研究实验性矽肺大鼠在染尘后病情发展不同阶段外周血CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)的频率,初步探讨Treg细胞在矽肺发生发展中的可能作用。[方法]将40只健康雄性SD大鼠随机分为模型组和对照组,模型组24只... 详细信息

[目的]研究实验性矽肺大鼠在染尘后病情发展不同阶段外周血CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)的频率,初步探讨Treg细胞在矽肺发生发展中的可能作用。[方法]将40只健康雄性SD大鼠随机分为模型组和对照组,模型组24只,对照组16只。模型组以非暴露方式气管内一次性注入1mL石英粉尘悬液(40mg/mL)建立大鼠矽肺模型,对照组大鼠气管内一次性注入等容量的灭菌生理盐水。染尘后第7、14、21及28天分别处死6只模型组和4只对照组大鼠,用流式细胞术检测大鼠外周血CD4+CD25+T细胞及Treg细胞的百分率。[结果]第7天,急性肺泡炎期间,模型组CD4+CD25+T细胞和Treg细胞较正常对照组频率明显降低(P<0.05);第14天,矽性肉芽肿形成期,模型组CD4+CD25+T细胞和Treg细胞数量回升,接近正常水平;第21天,矽性肉芽肿增多期间,模型组CD4+CD25+T细胞和Treg细胞频率较正常对照组略高,但差异不具有统计学意义;第28天矽性肉芽肿增多并大量纤维化期间,模型组CD4+CD25+T细胞和Treg细胞频率明显增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]Treg细胞可能在维持免疫耐受和矽肺的发生发展中发挥重要作用。

关键词：实验性矽肺 CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞免疫调节

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实验性矽肺大鼠外周血NK及NKT细胞动态变化及意义

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环境与职业医学 2010年第8期27卷 483-486页

作者：董西方朱文桂丽胡天锡沙泉安徽医科大学过敏与免疫研究中心及免疫学教研室安徽合肥230032 安徽医科大学基础医学院综合实验室安徽合肥230032 上海市疾病预防控制中心上海200336

[目的]研究实验性矽肺模型大鼠在染尘后的不同时间点外周血中自然杀伤细胞(NK)及自然杀伤T细胞(NKT)数量的变化,并探讨NK及NKT细胞与矽肺的相关性及临床意义。[方法]将48只健康雄性SD大鼠随机分成模型组和对照组,每组24只。模型组采用... 详细信息

[目的]研究实验性矽肺模型大鼠在染尘后的不同时间点外周血中自然杀伤细胞(NK)及自然杀伤T细胞(NKT)数量的变化,并探讨NK及NKT细胞与矽肺的相关性及临床意义。[方法]将48只健康雄性SD大鼠随机分成模型组和对照组,每组24只。模型组采用非暴露方式气管内一次性染尘(注入40mg/mL二氧化硅悬液1mL)建立大鼠矽肺模型,对照组采用相同方式气管内注入等量灭菌生理盐水。分别于染尘后第1、8、15、23、30、37天时处死模型组和对照组大鼠各4只,采集外周血,用流式细胞术检测大鼠外周血中NK(CD3-/CD161+)及NKT(CD3+/CD161+)细胞的百分率。[结果]模型组外周血NK细胞的水平在试验早期(第1天)开始上升,高于对照组(P<0.05),第23天达到高峰(P<0.01);之后有所下降,但依然高于对照组(P<0.05)。NKT细胞百分率在早期明显下降,后期慢慢回升,但仍低于对照组(P<0.05)。[结论]石英诱发了机体的固有性免疫应答,NK及NKT细胞参与了矽肺变化发展过程。

关键词：矽肺自然杀伤细胞自然杀伤T细胞固有免疫应答变化

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C/EBPβ在矽肺形成中表达的探讨

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临床输血与检验 2009年第1期11卷 15-18页

作者：王桂喜董磊陈自武沙泉安徽医科大学过敏与免疫研究中心免疫学教研室合肥230032 安徽省铜陵市中心血站

目的探讨C/EBPβ(CCAAT-enhancer binding protein-beta)在矽肺形成中的表达及其意义。方法运用免疫组化方法检测C/EBPβ在24只矽肺模型小鼠和16只正常小鼠肺组织中不同阶段的表达,对C/EBPβ阳性细胞进行分析。结果造模10d明显可见C/EB... 详细信息

目的探讨C/EBPβ(CCAAT-enhancer binding protein-beta)在矽肺形成中的表达及其意义。方法运用免疫组化方法检测C/EBPβ在24只矽肺模型小鼠和16只正常小鼠肺组织中不同阶段的表达,对C/EBPβ阳性细胞进行分析。结果造模10d明显可见C/EBPβ的核移位,C/EBPβ在矽肺小鼠肺组织中表达较正常肺脏组织明显增强,差异有统计学意义,且造模1～30d的大鼠和30d后的大鼠中C/EBPβ表达的程度明显不同。结论C/EBPβ在矽肺大鼠肺脏组织内的多种炎性细胞中明显表达,且早期在一定时间范围内随着时间延长,其表达增加,能客观反映免疫或炎症早期进展程度,提示C/EBPβ在早期矽肺结节发生和进展中可能发挥重要作用。

关键词： C/EBPβ 矽肺亮氨酸拉链

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