目的:本研究旨在探讨干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因19(gene-associated with retinoid-interferon-induced mortality19,GRIM-19)对人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP化疗药物敏感度及相关基因表达的影响。方法:采用脂质体法将重组质粒PIRES-...
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目的:本研究旨在探讨干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因19(gene-associated with retinoid-interferon-induced mortality19,GRIM-19)对人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP化疗药物敏感度及相关基因表达的影响。方法:采用脂质体法将重组质粒PIRES-Puro2-GRIM-19-Myc和空载体PIRES-Puro2-Myc分别转染顺铂(cisplatin,DDP)耐药的人肺腺癌细胞株A549/DDP。蛋白免疫印迹法检测亲本A549、耐药A549/DDP、转染GRIM-19基因的A549/DDP及转染空载体的A549/DDP细胞中GRIM-19蛋白的表达。MTT法检测稳定转染GRIM-19基因后A549/DDP细胞对多种化疗药物敏感度的改变。实时荧光定量-PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)法检测GRIM-19、信号转导子与转录激活子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)mRNA在稳定转染GRIM-19基因后A549/DDP细胞中的表达情况。结果:蛋白质印迹法检测结果显示,A549/DDP细胞转染GRIM-19基因后GRIM-19蛋白的表达上调;A549/DDP细胞较亲本A549细胞对DDP的耐药指数为16.86±1.32;A549/DDP细胞转染GRIM-19基因后,较转染空载体组A549/DDP细胞耐药性降低,耐药逆转倍数为3.70±0.91。转染GRIM-19基因后,A549/DDP细胞中STAT3、P-gp和VEGFmRNA表达均下调。结论:GRIM-19能增强DDP耐药细胞A549/DDP对化疗药物的敏感度,这可能与下调STAT3、VEGF和P-gp的表达具有相关性,GRIM-19可能成为逆转A549/DDP细胞耐药性的一条有效途径。
目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)中TMS1(taget of methylation-induced silencing)基因启动子区域的甲基化及TMS1蛋白表达状况,并研究其临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应和免疫组化的方法检测50例肺癌组织和50例对应癌旁组织中T...
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目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)中TMS1(taget of methylation-induced silencing)基因启动子区域的甲基化及TMS1蛋白表达状况,并研究其临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应和免疫组化的方法检测50例肺癌组织和50例对应癌旁组织中TMS1基因启动子区域甲基化的发生率及TMS1蛋白的表达情况。结果50例NSCLC肿瘤组织中有20例检测到了TMS1基因启动子的甲基化,检出率为40%,相应的癌旁正常组织没有检测到其甲基化(P<0.05)。TMS1蛋白在72%(36/50)的肺癌组织中表达下降,相应的癌旁正常组织均完全表达,没有1例表达下降(P<0.05)。TMS1基因甲基化与TMS1蛋白表达之间有着密切的关系(P<0.05)。结论TMS1基因启动子区域的甲基化是NSCLC的一个常见事件,并且与TMS1蛋白表达下降相关,在NSCLC的发生过程中起着重要的作用。
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